期刊文献+
共找到43篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
M2型丙酮酸激酶、自噬相关基因2B蛋白与乳腺浸润性导管癌分子亚型的关系
1
作者 石代伟 姚宝忠 李良 《中国临床医生杂志》 2023年第5期541-544,共4页
目的探究M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)、自噬相关基因2B(autophagy related gene 2B,ATG2B)蛋白与乳腺浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)分子亚型及临床病理特征的关系。方法选择2018年9月至2019年12月合肥市第... 目的探究M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)、自噬相关基因2B(autophagy related gene 2B,ATG2B)蛋白与乳腺浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)分子亚型及临床病理特征的关系。方法选择2018年9月至2019年12月合肥市第二人民医院收治的IDC患者63例为研究对象,采用免疫组织化学法检测患者癌组织及癌旁组织PKM2、ATG2B表达,分析癌组织PKM2、ATG2B表达与临床病理特征及分子亚型的关系;所有患者均随访3年,根据其生存情况分为死亡组及生存组,分析癌组织PKM2、ATG2B表达、临床病理特征及分子亚型对患者预后的影响。结果IDC癌组织PKM2蛋白阳性表达率高于癌旁组织,ATG2B蛋白阳性表达率低于癌旁组织(P<0.05);不同月经状态、肿瘤直径、临床分期、分化程度及不同淋巴结转移、脉管侵犯情况IDC患者的PKM2阳性表达率对比差异有显著性,不同临床分期、分化程度及不同淋巴结转移、脉管侵犯情况IDC患者的ATG2B阳性表达率比较,差异有显著性(P<0.05);Luminal A型IDC患者癌组织PKM2蛋白阳性表达率高于三阴型,ATG2B蛋白阳性表达率低于三阴型(P<0.05);死亡组中临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、分化程度为低分化、存在淋巴结转移、脉管侵犯的人数比例及PKM2蛋白阳性表达率高于生存组,ATG2B蛋白阳性表达率低于生存组(P<0.05);临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、分化程度为低分化、存在淋巴结转移、脉管侵犯的人数比例及PKM2蛋白阳性是影响IDC患者预后的危险因素(P<0.05)。结论IDC癌组织PKM2蛋白阳性表达与临床病理特征及分子亚型有关,且PKM2蛋白阳性是影响IDC患者预后的危险因素。 展开更多
关键词 乳腺浸润性导管癌 分子亚型 自噬相关基因2B m2型丙酮酸激酶
下载PDF
禽流感病毒M2基因在原核系统中表达及其抗原性分析 被引量:5
2
作者 李永清 杨敬 +1 位作者 韦莉 杨汉春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期739-743,共5页
Avian influenza virus (AIV) is a highly variable pathogen. The M2 gene of AIV is a transmembrane protein. It has highly conservative antigenic epitopes and is a potential antigen for cross-protection. In this study, t... Avian influenza virus (AIV) is a highly variable pathogen. The M2 gene of AIV is a transmembrane protein. It has highly conservative antigenic epitopes and is a potential antigen for cross-protection. In this study, the recombinants containing the full-length M2 and the transmembrane segment deleted M2 were constructed respectively. When measuring the expression of the two constructs, we found that the full-length M2 failed to express in the prokaryotic expression system, whereas transmembrane segment deleted M2 was highly expressed as fusion protein in a soluble form. The fusion protein reacted with SPF chicken serum specific for AIV A/goose / Guangdong /1996(H5N1). The protein was purified by GST purification system and the purified protein was used to prepare anti-M2 serum in mice. Immunofluorescence test demonstrated the binding of the antiserum with AIV (H5N1) infected MDCK cells. The results suggest that the recombinant transmembrane segment deleted M2 could provide good antigenicity. 展开更多
关键词 禽流感病毒 抗原性 原核系统 表达 基因 氨基酸序列 保护性免疫 跨膜蛋白 结构蛋白 表面抗原 CTL 抗体
下载PDF
表达禽流感病毒M2基因的重组马立克氏病病毒的构建 被引量:5
3
作者 李永清 杨敬 +3 位作者 罗长保 周雪媚 张莉 章振华 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期24-30,共7页
将禽流感病毒M2基因克隆于真核表达质粒pIRES-EGFP中,使其位于pCMV启动子的调控下,并与绿色荧光蛋白基因(EGFP)串联后,将上述串联基因插入到含MDV CVI988的非必需区US基因的重组质粒pUS2中,构建带标记的重组质粒,然后将此重组质粒转染... 将禽流感病毒M2基因克隆于真核表达质粒pIRES-EGFP中,使其位于pCMV启动子的调控下,并与绿色荧光蛋白基因(EGFP)串联后,将上述串联基因插入到含MDV CVI988的非必需区US基因的重组质粒pUS2中,构建带标记的重组质粒,然后将此重组质粒转染感染了MDVCVI988的鸡胚成纤维细胞,利用同源重组的方法,筛选了表达禽流感病毒M2基因的重组病毒MDV1。经PCR、dot blotting,Western blotting等实验的结果表明,禽流感病毒M2基因的确插入到MDV1(CVI988)基因组中并获得表达。重组MDV1免疫1日龄SPF鸡21天后,用ELISA可检测到M2蛋白的特异性抗体。接种了重组病毒rMDV的鸡体内针对H9N2疫苗血凝素的抗体滴度(p<0.05)明显提高,以禽流感病毒AIVA/Chicken/Guangdong/00(H9N2)攻毒后进行病毒重分离试验的结果发现,重组病毒能有效地降低病毒的排出量(p<0.01),说明该重组病毒可以用于防制禽流感的免疫。 展开更多
关键词 禽流感病毒 m2基因 马立克氏病病毒 以基因重组
下载PDF
基于肠道特异性丙酮酸激酶M2基因敲除小鼠研究布拉氏酵母菌治疗溃疡性结肠炎的作用及机制 被引量:6
4
作者 步楠 范彦秋 赵春红 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第12期1628-1633,共6页
目的基于肠道特异性丙酮酸激酶M2(PKM2)基因敲除小鼠研究布拉氏酵母菌治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用及机制.方法选择野生型C57BL/6J小鼠并随机分为PKM2-WT组、PKM2-WT+UC组、PKM2-WT+UC+布拉氏酵母菌组,选择肠道特异性... 目的基于肠道特异性丙酮酸激酶M2(PKM2)基因敲除小鼠研究布拉氏酵母菌治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用及机制.方法选择野生型C57BL/6J小鼠并随机分为PKM2-WT组、PKM2-WT+UC组、PKM2-WT+UC+布拉氏酵母菌组,选择肠道特异性PKM2基因敲除小鼠并随机分为PKM2-KO组、PKM2-KO+UC组、PKM2-KO+UC+布拉氏酵母菌组,采用葡聚糖硫酸钠(dextran so-dium sulfate,DSS)诱导UC模型,给予布拉氏酵母菌灌胃干预.比较各组间疾病活动指数(disease activi-ty index,DAI)、肠黏膜组织病理评分、血清中二胺氧化酶及D-乳酸含量、肠黏膜中炎症因子及紧密连接蛋白表达量的差异.结果PKM2-WT+UC组的DAI指数、肠黏膜组织病理评分、血清中二胺氧化酶及D-乳酸含量、肠黏膜中TNF-α及IL-1β含量均高于PKM2-WT组,肠黏膜中PKM2、ZO-1、Occludin、Claudin-1的表达量低于PKM2-WT组;PKM2-WT+UC+布拉氏酵母菌组的DAI指数、肠黏膜组织病理评分、血清中二胺氧化酶及D-乳酸含量、肠黏膜中TNF-α及IL-1β含量均低于PKM2-WT+UC组,肠黏膜中PKM2、ZO-1、Occludin、Claudin-1的表达量高于PKM2-WT+UC组;PKM2-KO+UC+布拉氏酵母菌组肠黏膜中PKM2不表达,DAI指数、肠黏膜组织病理评分、血清中二胺氧化酶及D-乳酸含量、肠黏膜中TNF-α及IL-1β含量均高于PKM2-WT+UC+布拉氏酵母菌组,肠黏膜中ZO-1、Occludin、Claudin-1的表达量PKM2-WT+UC+布拉氏酵母菌组.结论布拉氏酵母菌治疗DSS诱导UC小鼠能够改善肠黏膜病理改变、减轻炎症反应及黏膜屏障损伤,且这一作用与增加PKM2的表达有关. 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 布拉氏酵母菌 丙酮酸激酶m2 基因敲除
下载PDF
靶向呼吸道合胞病毒M2基因pshRNA载体质粒的构建及意义 被引量:2
5
作者 崔玉霞 王萍玲 +1 位作者 周娟 杨锡强 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第1期1-4,54,共5页
目的:构建针对呼吸道合胞病毒(RSV)M2基因m RNA的短发卡结构状RNA(shRNA)重组载体质粒,为利用RNA干扰技术抗RSV感染的深入研究奠定基础;方法:按shRNA设计原则,选择RSV-M 2基因作为靶基因,设计19bp长的能产生短发卡结构的两段DNA反向重... 目的:构建针对呼吸道合胞病毒(RSV)M2基因m RNA的短发卡结构状RNA(shRNA)重组载体质粒,为利用RNA干扰技术抗RSV感染的深入研究奠定基础;方法:按shRNA设计原则,选择RSV-M 2基因作为靶基因,设计19bp长的能产生短发卡结构的两段DNA反向重复序列,中间以9bp序列间隔,经退火形成互补双链,克隆至转录载体pgenesil-1上,重组质粒经酶切和测序鉴定,然后将构建成功的重组质粒转染H EP2细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光细胞发生率以评估转染效率。结果:将设计合成的DNA片段成功克隆至载体上,经酶切及序列鉴定为目的序列,并且荧光显微镜下观察细胞有较多的绿色荧光蛋白表达。结论:成功构建了针对RSV M 2基因m RNA的shRNA重组载体质粒,可利用重组质粒进一步研究其对RSV感染的抑制,从而为抑制RSV感染寻找新的基因治疗手段。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 m2基因 短发卡结构状RNA 重组质粒
下载PDF
甲型流感病毒M2基因真核表达载体的构建及序列分析 被引量:1
6
作者 杨靖 张卫东 +3 位作者 李明远 曹康 蒋忠华 李虹 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期157-159,117,共4页
目的构建含有甲型流感病毒M2基因的真核表达载体并分析插入的M2基因序列。方法从接种人流感病毒株A/PR/8/34(H1N1)的鸡胚尿囊液中提取病毒RNA,用特异引物进行RT-PCR,扩增M2基因。通过分子克隆技术将所扩增片段克隆入真核表达质粒载体pcD... 目的构建含有甲型流感病毒M2基因的真核表达载体并分析插入的M2基因序列。方法从接种人流感病毒株A/PR/8/34(H1N1)的鸡胚尿囊液中提取病毒RNA,用特异引物进行RT-PCR,扩增M2基因。通过分子克隆技术将所扩增片段克隆入真核表达质粒载体pcDNA3.1(+)。经双酶切、PCR鉴定后挑选阳性克隆测序鉴定并对插入的M2基因序列进行分析。结果经双酶切、PCR及测序鉴定证实M2基因的真核表达载体构建成功。序列分析有4个氨基酸出现变异,提交Genbank进行Blast比对显示同源性97%(Genbank/NCBI AY768951)。结论M2四聚体蛋白具有H+通道功能,能够协助病毒与宿主细胞膜融合后释放RNP复合体,还能稳定HA蛋白的结构。M2蛋白的高度保守性和具有交叉保护能力特性使之成为新型的通用流感疫苗的突破口。该结果将为甲型流感病毒基因工程疫苗,通用疫苗和核酸疫苗的研究打下基础。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 m2基因 真核表达载体
下载PDF
人呼吸道合胞病毒M2-1基因原核表达质粒的构建与表达 被引量:3
7
作者 辛庆红 李继成 +1 位作者 陈杭薇 尤兰华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期827-829,共3页
目的 构建人呼吸道合胞病毒 (hRSV)M2 1基因原核表达质粒载体 ,使其于原核细胞中表达。方法 利用Hep 2细胞培养hRSV ,提取感染细胞总RNA ,通过RT PCR扩增M2 1基因片段。目的片段与质粒pGEX 2T经EcoRI、XhoI双酶切后 ,连接、转化 ,... 目的 构建人呼吸道合胞病毒 (hRSV)M2 1基因原核表达质粒载体 ,使其于原核细胞中表达。方法 利用Hep 2细胞培养hRSV ,提取感染细胞总RNA ,通过RT PCR扩增M2 1基因片段。目的片段与质粒pGEX 2T经EcoRI、XhoI双酶切后 ,连接、转化 ,筛选出阳性克隆。阳性克隆菌经诱导剂诱导后 ,表达M2 1融合蛋白。结果 成功地构建了M2 1基因原核表达质粒载体 ,实现了其于原核中的表达。结论 建立了hRSV基因M2 1原核表达载体 ,为进一步研究hRSV奠定基础。 展开更多
关键词 人呼吸合道胞病毒 质粒 表达 逆转录聚合酶链反应 原核细胞
下载PDF
甲3型流感病毒M2基因在痘苗病毒天坛株中的表达 被引量:10
8
作者 王文玲 黄保英 +3 位作者 邓瑶 王秀平 谭文杰 阮力 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期377-383,共7页
为获得表达甲3型流感病毒(H3N2)M2蛋白的重组天坛株痘苗病毒RVJ1175M2,使用PCR方法扩增流感病毒全长M2基因,将其克隆到天坛株痘苗病毒同源重组质粒pJSC1175中,获得重组质粒pJSC1175M2,通过与痘苗病毒载体同源重组,构建了含流感病毒M2基... 为获得表达甲3型流感病毒(H3N2)M2蛋白的重组天坛株痘苗病毒RVJ1175M2,使用PCR方法扩增流感病毒全长M2基因,将其克隆到天坛株痘苗病毒同源重组质粒pJSC1175中,获得重组质粒pJSC1175M2,通过与痘苗病毒载体同源重组,构建了含流感病毒M2基因的重组痘苗病毒株RVJ1175M2。PCR检测结果证明,流感病毒(H3N2)M2蛋白基因准确插入到天坛株痘苗病毒TK区;Western blot、免疫荧光和流式细胞计数表明重组病毒RVJ1175M2可以有效地表达M2蛋白,表达的M2蛋白有两条带,分别为15kD和13kD,与相关文献报道一致;M2蛋白可有效分布在感染细胞的细胞膜上。这些结果表明重组痘苗病毒株RVJ1175M2可以有效地表达流感病毒M2蛋白,为使用表达M2蛋白的不同类型疫苗进行广谱流感疫苗效果的比较研究奠定了基础。 展开更多
关键词 流感病毒A3型 m2蛋白 重组痘苗病毒 基因表达
下载PDF
流感病毒M2基因变异与盐酸金刚烷胺耐药性的关系 被引量:1
9
作者 李艳华 王秀荣 +3 位作者 田国彬 陈化兰 于康震 佟恒敏 《中国兽药杂志》 2005年第3期32-34,共3页
盐酸金刚烷胺是治疗流感的常用药物,但流感病毒极易产生耐药性并发生变异。本文仅就使用盐酸金刚烷胺后流感病毒M2基因的变异情况作一综述。
关键词 流感病毒 耐药性 基因变异 治疗 常用药物 关系 并发 盐酸金刚烷胺 发生 使用
下载PDF
用转染m2胆碱受体基因的CHO细胞观察知母皂甙元的作用 被引量:3
10
作者 施菊 胡雅儿 +1 位作者 易宁育 夏宗勤 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2000年第6期503-505,共3页
目的观察知母甾体皂甙元 (sarsasapogenin ,SAR)对M2 受体亚型的调节作用。 方法采用转染了m2胆碱受体基因的CHO细胞为模型 ,以非选择性的3H -QNB作单点放射配基结合分析。 结果CHOm2细胞受体密度在培养 48h达顶峰 ,以后呈进行性下降... 目的观察知母甾体皂甙元 (sarsasapogenin ,SAR)对M2 受体亚型的调节作用。 方法采用转染了m2胆碱受体基因的CHO细胞为模型 ,以非选择性的3H -QNB作单点放射配基结合分析。 结果CHOm2细胞受体密度在培养 48h达顶峰 ,以后呈进行性下降。SAR对下降的CHOm2细胞M2 受体密度有明显的上调作用 ,这一作用有一定浓度依赖性。 结论SAR对下降的M2 受体密度具有上调作用。 展开更多
关键词 m2受体亚型 CHOm2细胞 知母皂甙元 放射配基分析
下载PDF
通过生物信息学分析鉴定糖尿病视网膜病变的关键生物标志物和免疫浸润
11
作者 王珍 廖敏 +1 位作者 覃方鳞 郝亚荣 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1925-1932,共8页
目的:通过生物信息学方法为糖尿病视网膜病变中的相关机制提供理论依据。方法:通过GEO数据库筛选出增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)数据集GSE60439和GSE94019。使用R语言提取GSE60439数据集中的表达数据进行t检验,筛选出差异基因,筛选条件... 目的:通过生物信息学方法为糖尿病视网膜病变中的相关机制提供理论依据。方法:通过GEO数据库筛选出增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)数据集GSE60439和GSE94019。使用R语言提取GSE60439数据集中的表达数据进行t检验,筛选出差异基因,筛选条件为P<0.05和|log2FC|≥1;采用WGCNA选择GSE94019数据集中与PDR相关的重要模块;对差异基因及重要模块中的基因取交集得到关键基因。对关键基因进行GO及KEGG富集分析;构建PPI网络鉴定出高风险关键蛋白。最后,使用CIBERSORTx分析免疫细胞在PDR中的浸润,采用Pearson相关性检验分析免疫细胞与关键基因的相关性。结果:最终筛选出3个核心基因,即Col1a1、Col1a2、Col3a1,其表达与M2巨噬细胞呈正相关,且核心基因富集于AGEs-RAGE信号通路。结论:正反馈可能存在于M2巨噬细胞、AGEs-RAGE信号通路及胶原基因(Col1a1、Col1a2、Col3a1)之间,即使没有高糖的刺激,这种恶性循环仍可能持续损害视网膜组织。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 纤维血管膜 AGEs-RAGE信号通路 m2巨噬细胞 胶原基因
下载PDF
早期胃癌胃微血管形态变化及Bcl-2和M2-丙酮酸激酶的表达特点研究 被引量:7
12
作者 凌霄华 庄丽维 +2 位作者 胡成乙 洪钰 于欣 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第30期3389-3391,共3页
目的探讨早期胃癌胃微血管形态变化以及Bcl-2、M2-丙酮酸激酶(M2-PK)的表达特点。方法选取240例因上腹部不适、腹痛、腹胀、反酸等消化不良症状在我院消化外科进行住院治疗的患者,首先行放大胃镜观察胃微血管变化状况,然后根据胃小凹状... 目的探讨早期胃癌胃微血管形态变化以及Bcl-2、M2-丙酮酸激酶(M2-PK)的表达特点。方法选取240例因上腹部不适、腹痛、腹胀、反酸等消化不良症状在我院消化外科进行住院治疗的患者,首先行放大胃镜观察胃微血管变化状况,然后根据胃小凹状况分为A、B、C、D、E型。分别检测不同胃小凹分型标本的Bcl-2和M2-PK阳性率。结果浅表性胃炎主要见于A型(65.8%)、B型(59.6%)和C型(22.0%)小凹类型;萎缩性胃炎主要见于C型(38.0%)和D型(50.0%);肠上皮化生主要见于C型(34.0%)、D型(39.3%)和E型(34.7%);不典型增生多见于D型(7.1%)和E型(32.7%);胃癌仅见于E型(16.3%)。不同类型的微血管形态,其Bcl-2及M2-PK阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.01)。E型小凹的标本中Bcl-2及M2-PK阳性率(65.3%与67.4%)均显著高于A(7.9%与10.5%)、B(8.5%与10.6%)、C(14.0%与16.0%)、D型(23.2%与26.8%),差异有统计学意义(P<0.01);D型小凹的标本中Bcl-2及M2-PK阳性率均显著高于B型,差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论癌前病变及早期胃癌主要发生在D、E型小凹类型;微血管形态可以作为早期胃癌的诊断指标,放大胃镜可以作为早期胃癌诊断的一种临床筛选方法。 展开更多
关键词 胃肿瘤 胃黏膜 微血管形态 放大内镜 基因 BCL-2 m2-丙酮酸激酶
下载PDF
甲型流感病毒M2基因真核表达载体的构建及初步表达
13
作者 杨靖 张卫东 +3 位作者 曹康 蒋中华 李虹 李明远 《郧阳医学院学报》 CAS 2006年第1期6-9,F0003,共5页
目的:构建含有甲型流感病毒M2基因的真核表达载体。体外转染真核细胞株HEK293细胞并检测目的蛋白的表达。方法:从接种人流感病毒株A/PR/8/34(H1N1)的鸡胚尿囊液中提取病毒RNA,用特异引物进行RT-PCR,扩增M2基因。通过分子克隆技术将所扩... 目的:构建含有甲型流感病毒M2基因的真核表达载体。体外转染真核细胞株HEK293细胞并检测目的蛋白的表达。方法:从接种人流感病毒株A/PR/8/34(H1N1)的鸡胚尿囊液中提取病毒RNA,用特异引物进行RT-PCR,扩增M2基因。通过分子克隆技术将所扩增片段插入真核表达质粒载体pcDNA3.1(+)。经酶切及PCR鉴定后用PolyFect脂质体将其转染到HEK293细胞中,通过免疫荧光技术鉴定其表达。结果:经双酶切、PCR及测序鉴定证实M2基因的真核表达载体构建成功。免疫荧光技术证实流感病毒M2基因的表达。结论:甲型流感病毒M2蛋白是一种具有高保守性,可形成离子通道并影响流感病毒表面蛋白血凝素(HA)天然构象的形成,被认为是具有交叉免疫保护性的结构蛋白。甲型流感病毒M2基因真核表达质粒的构建及成功表达将为甲型流感病毒基因工程疫苗,通用疫苗和核酸疫苗的研究打下基础。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 m2基因 真核表达载体 免疫荧光技术
下载PDF
从基尼系数看M2与GDP的合理比例
14
作者 王言炉 《长春金融高等专科学校学报》 2014年第3期18-21,共4页
基尼系数和GDP/M2都可以看作是衡量收入分配的指标。通过一元线性回归分析,可以建立两者之间的关系函数,并能从中看出,要维持基尼系数的值在国际标准内,GDP/M2也应该保持在一定区间,为此,需要维持权力系统的内部制衡。
关键词 GDP/m2 基尼系数 合理比例
下载PDF
鸡补体C3d与禽流感病毒M2融合蛋白的原核表达与反应原性分析 被引量:2
15
作者 赵玉斐 章振华 +3 位作者 李永清 任慧英 吴翠娟 于博 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期131-134,共4页
为表达禽流感病毒M2蛋白与单拷贝及双拷贝鸡补体C3d的融合蛋白,本实验分别将单拷贝和双拷贝的鸡补体因子C3d基因同禽流感病毒M2基因5'端连接,再将串联基因定向克隆到pET-32a表达载体中进行诱导表达,表达产物用SDS-PAGE和western blo... 为表达禽流感病毒M2蛋白与单拷贝及双拷贝鸡补体C3d的融合蛋白,本实验分别将单拷贝和双拷贝的鸡补体因子C3d基因同禽流感病毒M2基因5'端连接,再将串联基因定向克隆到pET-32a表达载体中进行诱导表达,表达产物用SDS-PAGE和western blot分析。结果表明,表达的2个融合蛋白大小分别约为64ku和97ku,以包涵体形式存在。Western blot分析结果显示,2种重组蛋白可被M2多克隆抗体识别,表明2种重组蛋白具有反应抗原性,为研制以鸡补体C3d为分子佐剂的禽流感新型疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 C3D m2基因 原核表达 免疫印迹
下载PDF
人肝细胞癌中OY-TES-1和PKM2的表达及调控关系初探 被引量:1
16
作者 徐涛 刘畅 +7 位作者 李晓莹 陈芳 葛盈盈 薛春红 李鑫 张庆梅 谢小薰 罗彬 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第3期479-485,共7页
目的:探讨癌-睾丸抗原OY-TES-1和丙酮酸激酶M2型(PKM2)在人肝细胞癌(HCC)中的表达,并分析OY-TES-1对PKM2表达的影响。方法:利用LinkedOmics数据库筛选OY-TES-1表达正相关基因集;使用DAVID数据库对OY-TES-1进行功能富集分析,了解HCC中OY-... 目的:探讨癌-睾丸抗原OY-TES-1和丙酮酸激酶M2型(PKM2)在人肝细胞癌(HCC)中的表达,并分析OY-TES-1对PKM2表达的影响。方法:利用LinkedOmics数据库筛选OY-TES-1表达正相关基因集;使用DAVID数据库对OY-TES-1进行功能富集分析,了解HCC中OY-TES-1潜在的生物学功能,寻找功能相关基因;通过GEPIA数据库分析和实时荧光定量PCR(qPCR)实验检测,探讨OY-TES-1和功能相关基因在HCC中的表达及临床意义;干扰HCC细胞株中OY-TES-1的表达,qPCR和Western blotting检测OY-TES-1功能相关基因的表达变化。结果:LinkedOmics数据库筛选获得1001个与OY-TES-1表达正相关的基因集;功能富集结果显示,OY-TES-1可能通过PKM2参与HCC细胞多糖合成、脂代谢、碳水化合物代谢等信号通路。GEPIA数据库分析显示,HCC组织中OY-TES-1和PKM2的表达显著高于正常肝组织,两者表达呈正相关关系(r=0.3;P<0.001);qRT-PCR证实OY-TES-1(癌组织:0.58±0.95 vs.癌旁组织:0.36±0.61,P<0.05)和PKM2(癌组织:0.14±0.17 vs.癌旁组织:0.08±0.14,P<0.05)在HCC组织中均为高表达,两者的表达呈正相关关系(r=0.482,P<0.001);尚未发现OY-TES-1和PKM2的表达与HCC患者临床参数相关。在HepG2和BEL-7404细胞株中干扰OY-TES-1表达,PKM2的mRNA和蛋白表达随之明显下调。结论:OY-TES-1和PKM2均高表达于HCC,且两者具有较强的表达相关性;HCC中OY-TES-1能够影响PKM2的表达。 展开更多
关键词 肝细胞癌 OY-TES-1基因 丙酮酸激酶m2型基因
下载PDF
M2型巨噬细胞调控增生性瘢痕形成的权重基因共表达网络分析 被引量:2
17
作者 王紫 孙婷也 +4 位作者 陶筱婷 王昕 庄美婷 李海洲 李青峰 《组织工程与重建外科杂志》 2019年第3期146-151,共6页
目的探讨M2型巨噬细胞和Th2细胞因子在增生性瘢痕形成过程中发挥作用的具体机制。方法运用权重基因共表达网络分析(WGCNA)对小鼠增生性瘢痕全基因组表达数据GSE26390进行处理,获得与M2型巨噬细胞、Th2细胞因子以及纤维化高度相关的共表... 目的探讨M2型巨噬细胞和Th2细胞因子在增生性瘢痕形成过程中发挥作用的具体机制。方法运用权重基因共表达网络分析(WGCNA)对小鼠增生性瘢痕全基因组表达数据GSE26390进行处理,获得与M2型巨噬细胞、Th2细胞因子以及纤维化高度相关的共表达基因模块和其中起到关键作用的靶基因。结果确定以下8个基因为M2型巨噬细胞、Th2型细胞因子参与增生性瘢痕形成的核心调控基因:CLEC4A、CYBA、LOXL2、Hcvn1、NCKAP1L、PRRX2、LGALS9、CMTM3。结论以上8个基因涉及巨噬细胞和T细胞参与免疫应答的调节、细胞外基质形成、组织修复等过程,是临床预防和治疗增生性瘢痕的潜在新靶点。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 m2型巨噬细胞 TH2型细胞因子 权重基因共表达网络分析
下载PDF
MicroRNA-136靶向CD163抑制CD68^+CD163^+M2型巨噬细胞极化的作用研究 被引量:4
18
作者 韩晨阳 杨毅 +2 位作者 李文燕 王瑾 郭丽 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2019年第1期1-8,共8页
目的:研究微小RNA(miR-136)通过靶向CD163抑制CD68^+M0巨噬细胞向CD68^+CD163^+M2巨噬细胞极化的作用机制。方法:采用流式细胞术检测20例肝细胞肝癌患者肿瘤组织及癌旁组织中CD68^+CD163^+M2巨噬细胞的比例,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检... 目的:研究微小RNA(miR-136)通过靶向CD163抑制CD68^+M0巨噬细胞向CD68^+CD163^+M2巨噬细胞极化的作用机制。方法:采用流式细胞术检测20例肝细胞肝癌患者肿瘤组织及癌旁组织中CD68^+CD163^+M2巨噬细胞的比例,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肿瘤及癌旁组织中miR-136的水平。分离人脾脏中CD68^+M0巨噬细胞,将细胞分为对照组(Control),miRNA模拟物组(miRNA mimic)和miRNA抑制物组(miRNA inhibitor)。IL-4和IL-13 10ng/m L诱导巨噬细胞M2型极化。采用流式细胞术检测CD68^+CD163^+M2巨噬细胞比例,Western blot检测细胞中CD163、TNF-α、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的表达以及M2巨噬细胞标志物精氨酸酶(Arg1)的表达,机制研究中检测JAK/STAT信号中蛋白酪氨酸激酶1(JAK1)、信号转导子与转录激活子1 (STAT1)和STAT6的水平,PI3K/AKT信号中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)的表达。荧光素酶报告基因法确定miR-136与CD163的靶向关系。结果:肝癌组织中M2型巨噬细胞比例显著高于癌旁组织,而miR-136的表达显著低于癌旁组织,两者表达具有负相关。荧光素酶报告基因结果显示CD163是miR-136的靶基因。miRNA mimic组中CD68^+CD163^+M2巨噬细胞比例显著低于miRNA inhibitor组,与Control组比较无统计学差异。机制检测中发现miRNA mimic中JAK1、STAT6、PI3K、AKT1低表达,说明miR-136可以间接抑制JAK1-STAT6以及PI3K-AKT1的表达,抑制M2巨噬细胞极化。结论:miR-136可以靶向CD163抑制M2型巨噬细胞极化,其作用机制与JAK1-STAT6以及PI3K-AKT1抑制有关,这是M2巨噬细胞在肝癌免疫中的调节机制之一。 展开更多
关键词 微小RNA-136 CD163 m2型巨噬细胞 荧光素酶报告基因
下载PDF
Tumor pyruvate kinase M2:A promising molecular target of gastrointestinal cancer 被引量:2
19
作者 Chen Guo Guan Li +4 位作者 Jianing Hou Xingming Deng Sheng Ao Zhuofei Li Guoqing Lyu 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2018年第6期669-676,共8页
Gastrointestinal(GI) cancer is one of the most common causes of cancer-related deaths worldwide.Tumor markers are valuable in detecting post-surgical recurrence or in monitoring response to chemotherapy.Pyruvate kinas... Gastrointestinal(GI) cancer is one of the most common causes of cancer-related deaths worldwide.Tumor markers are valuable in detecting post-surgical recurrence or in monitoring response to chemotherapy.Pyruvate kinase isoform M2(PKM2),a glycolytic enzyme catalyzing conversion of phosphoenolpyruvate(PEP) to pyruvate,confers a growth advantage to the tumor cells and enables them to adapt to the tumor microenvironment.In this review,we have summarized current research on the expression and regulation of PKM2 in tumor cells,and its potential role in GI carcinogenesis and progression.Furthermore,we have also discussed the potential of PKM2 as a diagnostic and screening marker,and a therapeutic target in GI cancer. 展开更多
关键词 PKm2(pyruvate kinase m2) metabolic reprogramming gene transcription gastrointestinal cancer therapy targets
下载PDF
成人急性非淋巴细胞白血病M2型患者AML1/ETO融合基因mRNA表达及其临床意义 被引量:2
20
作者 刘斌 王光平 《临床和实验医学杂志》 2010年第16期1206-1207,1209,共3页
目的分析成人急性非淋巴细胞性白血病M2型患者AML1/ETO(AE)融合基因的表达,并探讨其与临床表现,疗效的关系以及在预后判断中的意义。方法采用巢式逆转录聚合酶链反应技术分析成人急性非淋巴细胞性白血M2患者AE融合基因mRNA表达,并比较... 目的分析成人急性非淋巴细胞性白血病M2型患者AML1/ETO(AE)融合基因的表达,并探讨其与临床表现,疗效的关系以及在预后判断中的意义。方法采用巢式逆转录聚合酶链反应技术分析成人急性非淋巴细胞性白血M2患者AE融合基因mRNA表达,并比较其与临床表现、治疗缓解率的关系。通过随访,评价其在预后判断中的意义。结果在23例成人急性非淋巴细胞性白血M2患者中,12例可检测到AE融合基因mRNA表达,为所检测患者的52.2%(12/23),其中,11例为M2a,1例为M2b。与AE融合基因mRNA表达阴性患者比较,AE融合基因mRNA表达阳性患者年纪较轻,外周血白细胞计数较低,临床上易出现发热,出血。经治疗后,AE融合基因mRNA表达阳性患者缓解率为75.0%,而AE融合基因mRNA表达阴性患者缓解率为36.4%。经8个月随访发现,1例AE融合基因mRNA表达阴性患者在缓解后第4个月复发并出现脑内转移而死亡,另1例在缓解后第7个月复发。而AE融合基因mRNA表达阳性患者在8个月的随访中无一例复发。结论在成人急性非淋巴细胞性白血病M2患者中50%以上表达AE融合基因mRNA,AE融合基因mRNA表达阳性患者更易出现发热,出血倾向,但治疗效果较好,预后良好。 展开更多
关键词 白血病 急性非淋巴细胞 m2 AML1/ETO 融合基因
下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部