MAGEA1和MAGEA3基因在胃癌中的表达及应用

目的:对近年来胃癌组织中黑色素瘤抗原基因A1(MAGEA1)和黑色素瘤抗原基因A3(MAGEA3)表达及应用的研究进行综述。方法:参阅新近公开发表的中外文献进行阐述MAGEA1和MAGEA3在胃癌组织中的表达及应用。结果:MAGEA1和MAGEA3基因仅在胃癌组织中表达,在癌旁正常组织中不表达。结论:①MAGEA1和MAGEA3在胃癌组织中有较高的表达。②作为特异性肿瘤标记物有助于肿瘤的早期诊断和微小转移灶的检测。③作为靶抗原用于肿瘤的免疫治疗。

MAGEA1通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进恶性黑色素瘤的转移

背景恶性黑色素瘤是源自黑色素细胞的恶性肿瘤,恶性程度高。其中转移性黑色素瘤患者的5年生存率不足10%,且发病率逐渐增加。黑色素瘤相关抗原家族A1(melanoma associated antigen family A1,MAGEA1)是MAGE-A基因亚家族的成员,在多种恶性肿瘤中均有表达,但其在恶性黑色素瘤中的表达和作用机制尚不明确。目的探讨MAGEA1促进恶性黑色素瘤转移的信号通路,并进行验证。方法通过黑色素瘤细胞系A375与A2058的RNA-Seq数据分析,确定MAGEA1正向调控Wnt/β-catenin信号通路,利用TOP/FOP、免疫荧光染色研究通路活性,利用Western blot和qRT-PCR分别在蛋白水平与转录水平验证通路基因的表达情况。结果MAGEA1通过c-Jun激活Wnt/β-catenin信号通路,促进黑色素瘤细胞上皮-间充质转化,提高黑色素瘤细胞的侵袭与迁移能力。结论MAGEA1作为一种与恶性肿瘤转移相关的基因,在恶性黑色素瘤中可通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进细胞的转移。

睾丸肿瘤抗原MAGEA1及MAGEA3在小鼠头颈部鳞癌及癌旁组织中的表达

目的:探讨MAGEA1及MAGEA3蛋白在头颈部鳞癌的发生过程中的表达以及在头颈部鳞癌及癌旁组织中的表达情况,了解其与头颈部鳞癌发生的相关性,并为鳞癌手术安全切缘的范围提供理论依据。方法:利用诱癌剂4-硝基喹啉-1-氧化物饮水法建立头颈部鳞癌小鼠模型,用免疫组化法检测MAGEA1、MAGEA3蛋白的在各组中的表达,包括头颈部鳞癌形成过程中的不同阶段、41例头颈部鳞癌中心区、癌旁<5mm区、>5mm区及正常黏膜组织。结果:与正常黏膜组织相比,头颈部鳞癌MAGEA1及MAGEA3的表达差异有统计学意义(P<0.001),并且其不同阶段的上皮异常增生程度与MAGEA1及MAGEA3的表达程度分别呈正相关(rs=0.55,P<0.001;rs=0.49,P<0.001)。癌中心区、癌旁<5mm区、>5mm区比较,MAGEA1、MAGEA3、MAGEA1和MAGEA3、MAGEA1或MAGEA3表达阳性率逐渐减小,并有显著性差异(P<0.001),>5mm区基本正常。结论:MAGEA1及MAGEA3蛋白在头颈部鳞癌中有较高的表达率,并与头颈部鳞癌的发生、发展中有一定的相关性,可以作为判断头颈部鳞癌发展生物学特性的参考指标。鳞癌手术切除范围以距肿瘤边缘5mm以上作为安全切缘的标准较为适宜。

黑色素瘤相关抗原MAGEA1的定位及其相互作用蛋白质的鉴定

黑色素瘤相关抗原家族A1蛋白(melanoma associated antigen family A1,MAGEA1)在生殖细胞和多种组织学来源的肿瘤中有表达,但其作用机制尚不清楚。本研究通过构建带Flag和GFP标签的MAGEA1真核表达重组质粒,将其转染至HeLa、HEK293T细胞内。利用Western印迹、免疫细胞荧光法、免疫共沉淀、细胞核蛋白质与细胞质蛋白质分离和线粒体提取等技术,检测其在细胞内的表达与定位以及与其他蛋白质的相互作用情况。免疫细胞化学和蛋白质印迹结果显示,过表达的MAGEA1主要定位于细胞质,并部分与线粒体共定位。通过免疫共沉淀验证了MAGEA1与TRIM31、SNW1、HDAC1之间存在相互作用,并且发现MAGEA1可能主要与位于细胞质中的HDAC1相互作用。以上研究表明,MAGEA1可能参与不同的细胞内调节途径,部分与线粒体共定位;与TRIM31、SNW1、HDAC1相互作用,且可能主要与位于细胞质中的HDAC1蛋白相互作用,推测其可能参与到蛋白质泛素化和Notch信号通路。本研究的结果为后续深入研究MAGEA1的作用机制奠定了实验基础。

喉鳞癌组织MAGEA1和MAGEA3蛋白表达及其生物学意义的研究

目的:检测黑色素瘤抗原基因MAGEA1和MAGEA3在喉鳞癌组织中的表达,探讨其作为喉癌免疫治疗靶标的可行性及其与喉癌生物学行为的关系。方法:采用免疫组化PV9000两步法检测69例喉鳞癌原发灶及其常规病理报告为阳性的121枚颈淋巴结中MAGEA1和MAGEA3的表达,同时采用蛋白质印迹法检测其在喉癌标本的癌中心区(TC),癌周0.5和1.0 cm及9例喉正常黏膜组织中的表达,并结合临床病理资料进行分析。结果:69例喉鳞癌组织中,MAGEA1蛋白的阳性表达率为58.0%(40/69),MAGEA3蛋白的阳性表达率为29.0%(20/69)。两种蛋白在癌中心区,癌周0.5和1.0 cm区中的表达逐渐下降(P<0.05),9例喉正常黏膜组织中无表达。MAGEA1和MAGEA3表达与肿瘤的T分期无关(P>0.05),MAGEA1蛋白的表达与病理分级相关(P<0.05),伴淋巴结转移的患者MAGEA3的表达率高于未转移者(P<0.05),颈转移淋巴结中两种蛋白的表达均下调。结论:MAGEA1和MAGEA3在喉鳞癌组织中特异高表达,可能以某种方式参与了喉癌的发生、发展,是进行喉癌免疫治疗的理想靶分子之一。

PLT、D-D、自身抗体SOX2、MAGEA1、PCNA水平与小细胞肺癌患者预后的关系研究

目的:探究血小板计数(PLT)、D-二聚体(D-D)、自身抗体SOX2、MAGEA1、抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)水平与小细胞肺癌(SCLC)患者预后的关系。方法:回顾性分析2017年1月至2018年1月86例疑似SCLC患者的临床资料,根据随访1年内是否发生病情进展、死亡将其分为良好预后组31例与不良预后组55例,比较2组PLT、D-D、SOX2、MAGEA1、PCNA水平,采用logistic回归分析模型分析PLT、D-D、SOX2、MAGEA1、PCNA水平与SCLC患者预后情况的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估上述指标对SCLC患者预后情况的预测效能,采用Kaplan-Meier生存曲线对2组患者2年内生存情况进行分析比较。结果:不良预后组PLT、D-D、SOX2、MAGEA1、PCNA水平均显著高于良好预后组(P<0.05);logistic回归分析显示,PLT、D-D、SOX2、MAGEA1、PCNA水平与SCLC患者的预后具有显著相关性(P<0.05);ROC曲线分析发现,上述指标预测SCLC患者预后情况的曲线下面积分别为0.810、0.834、0.731、0.849、0.777,截断值分别为287.02×10^(9)/L、2.34mg/L、31.61U/mL、13.52U/mL、42.93%,预测效能良好(P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线分析显示,不良预后组平均生存期为18.50个月,显著短于良好预后组的21.35个月(P<0.05)。结论:PLT、D-D、SOX2、MAGEA1、PCNA水平与SCLC患者的预后具有相关性,可用于评估SCLC患者预后生存情况。

Erbin、MAGEA1与食管鳞状细胞癌临床特征及预后相关性

目的探究ErbB2相互作用蛋白(Erbin)、黑素瘤抗原编码基因A1蛋白(MAGEA1)与食管鳞状细胞癌(ESCC)临床特征、预后的相关性。方法选取盱眙县人民医院2015年1月-2017年1月138例ESCC患者作为研究对象,将手术切除的癌组织作为研究组,癌旁非肿瘤组织作为对照组。比较两组Erbin、MAGEA1阳性表达率,采用Spearman相关性分析探究Erbin、MAGEA1与ESCC患者临床特征的相关性。随访3年,统计ESCC患者3年生存率,采用卡普兰-迈耶(KM)曲线比较不同Erbin、MAGEA1表达患者3年生存率,探究Erbin、MAGEA1与ESCC患者3年生存率的关系。结果研究组Erbin、MAGEA1阳性表达率(55.80%、71.74%)高于对照组(3.62%、5.80%),差异有统计学意义(χ2=89.841、126.393,P<0.05)。Erbin与ESCC患者临床分期、淋巴结转移显著相关(χ2=32.458、18.102,P<0.05)。MAGEA1与ESCC患者临床特征无相关性(P>0.05)。ESCC患者3年生存率为53.38%;Erbin、MAGEA1阳性表达患者3年生存率低于阴性表达患者(χ2=36.326,24.413,P<0.05);Erbin、MAGEA1与ESCC患者3年生存率存在负相关关系(P<0.05)。结论 ESCC患者癌组织中Erbin、MAGEA1阳性表达率明显升高,均与ESCC患者3年生存率呈负相关,尤其是Erbin有助于评估患者临床分期、淋巴结转移情况,可为临床治疗ESCC提供指导性参考。

7种肿瘤自身抗体联合检测在肺结节中的诊断价值

目的:探究7种肿瘤自身抗体联合检测在肺结节中的诊断价值。方法:选取2021年8月~2022年7月在莆田市第一医院因咳嗽、胸闷、咯血等症状或因体格检查行多排螺旋CT提示肺结节,同时对肺内病灶行肺叶切除术+纵隔淋巴结清扫术手术切除行组织病理确诊的患者80例为研究对象,在手术前抽取患者血清检测7种肿瘤自身抗体(P53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGEA1及CAGE)表达,同时根据病理结果将患者分为良性肺结节组与恶性肺结节组,进一步对其在肺结节诊断中的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、诊断符合率进行评估。结果:恶性肺结节患者5种肿瘤自身抗体(P53、SOX2、GAGE7、GBU4-5及CAGE)表达显著高于良性肺结节患者,差异有统计学意义(P<0.05)。在良、恶性肺结节患者中7种肿瘤自身抗体的阳性率显著高于4项肿瘤标志物(CEA、CYFRA21-1、NSE、SCCA4)阳性率,差异有统计学意义(P<0.05)。7种肿瘤自身抗体联合检测在肺结节诊断中的敏感度为50.33%,特异度为97.55%,阳性预测值91.24%,阴性预测值56.23%,诊断符合率51.26%。结论:血清7种肿瘤自身抗体联合检测在肺癌早期诊断具有较高特异度和敏感度,未来可利用不同的肺癌自身抗体谱以及检测技术,不断寻求最优诊断方法,将会有效提高肺癌早诊水平。

膀胱癌肿瘤/睾丸抗原相关基因的表达

目的:检测多种肿瘤/睾丸抗原相关基因在膀胱癌中的表达状况.方法:用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法对33例膀胱癌患者癌组织和癌旁正常膀胱组织进行MAGEA1,SSX2,NYESO1,MAGEC1,MAGEE1和HAGE的mRNA表达检测.随机抽取每种CTA基因的3例阳性RTPCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定.结果:33例膀胱癌标本中MAGEA1,SSX2,NY-ESO-1,MAGEC1,MAGEE1和HAGE的表达频率分别为21.2%(7/33),39.4%(13/33),69.7%(23/33),42.4%(14/33),36.4%(12/33)和24.2%(8/33).正常膀胱组织中6种CTA基本无表达.肿瘤组织中6种基因至少有1种表达的频率是75.8%(25/33),两种或两种以上同时表达几率是69.7%(23/33).测序结果表明RTPCR产物确为CTA目的基因序列.结论:CTA在膀胱癌主动免疫治疗中是一种合适的、有前景的攻击靶点.同时,多种CTA的联合表达为多效价CTA疫苗在膀胱癌免疫治疗中的应用提供了理论基础.

应用多重RT-PCR技术检测食管癌患者外周血多种肿瘤基因标志物的研究

目的:建立多重RT-PCR同步检测技术,联合检测黑色素瘤抗原MAGEA3基因、人类斯钙素hsTC1基因、上皮细胞角质蛋白CK20、CK19基因及癌胚抗原CEA基因mRNA在食管癌患者外周血中的表达。方法:在分析MAGEA3、hSTC1、CK20、CK19、CEA和β-actin六种基因mRNA全长序列资料的基础上,自行设计并筛选出6对引物及6条寡核苷酸探针,利用多重RT-PCR技术并结合基因芯片对样本进行检测。结果:全部样品均可检出β-actin,55例食管癌患者外周静脉血中MAGEA3、hSTC1、CK20、CK19和CEA的阳性表达率分别为25.45%、47.27%、49.09%、34.55%和52.73%;多重RT-PCR技术同时检测MAGEA3、hSTC1、CK20、CK19和CEA基因,如果至少表达其中一种即可作为阳性表达者,其阳性表达率可达72.73%。而10例食管癌组织中均为阳性,28例正常健康捐献者的外周血中有2例CEA表达阳性,27例非肿瘤病人的外周血中有3例CK20阳性,3例CK19阳性,3例CEA阳性。测序结果证实RT-PCR产物确为MAGEA3、hSTC1、CK20、CK19和CEA基因。结论:联合检测MAGEA3、hSTC1、CK20、CK19和CEA可以增加外周血循环癌细胞检测的敏感性,本研究建立的多重RT-PCR技术可以做为一种快速、灵敏的检测手段。