葡萄MAPKK基因家族的识别与分析

丝裂原活化蛋白激酶(MAPKK)是编码丝氨酸/苏氨酸特异的蛋白激酶,MAPKK基因家族对植物生长发育细胞周期调控和生物与非生物胁迫响应重要作用。已在一些物种中对这个基因家族进行了识别与分析,并对其如何参与胁迫条件下信号传导进行了探讨。在这项研究中,共识别出了葡萄基因组中5条MAPKK基因,并将其基因分别定位在第9、11、11、14和17条染色体上。对5条MAPKK基因序列内含子、外显子等结构信息进行了初步的比较分析。结果表明,它们可能存在功能上的分化。系统发生分析表明,葡萄和拟南芥的MAPKK基因亲缘关系近于其和水稻之间的亲缘关系;结合拟南芥MAPKK基因分组信息,将XP_002273313.1、XP_002280877.1、XP_002283491.1归为A组,而将XP_002274862.1和XP_002283080.1分别归位B组和D组。本研究结果为进行后续葡萄MAPKK基因和葡萄果实膨大相关方面的研究提供了有价值的参考。

平榛MAPKK基因克隆及在非生物胁迫下的表达分析

通过研究外界刺激信号对平榛中促分裂原活化蛋白酶途径的影响,探索该途径中MAPKK类基因对各种非生物胁迫的响应机制。根据平榛花芽转录本高通量测序的结果,采用RACE-PCR方法克隆到一个平榛MAPKK基因,全长1 065bp,推断其编码354个氨基酸,命名为Ch MAPKK2。序列分析表明,该基因含有MAPKK类型基因典型的磷酸一致化序列SLADIDS。构建的系统发育树结果表明,它与葡萄Vv MAPKK2以及苹果Md MAPKK的亲缘关系较近,相似性分别为81.69%和78.53%。采用qRTPCR,以ACTIN为内参对Ch MAPKK2基因在自然条件下花芽部位的表达模式进行分析,结果表明:在自然条件下从11月份到次年4月份Ch MAPKK2的表达量呈现先上升后下降的趋势;对平榛根蘖苗进行4℃、干旱及盐胁迫处理,发现Ch MAPKK2基因均受上述3种非生物胁迫的诱导而上调表达;Ch MAPKK2在不同器官中的表达具有组织表达特异性,雌花芽中表达量最高,其次是树皮,雄花序中表达量最低。上述研究结果表明Ch MAPKK2基因在平榛适应非生物胁迫的过程中发挥着重要作用。

高粱MAPKK基因与盐胁迫关系的研究

MAPKK基因是植物抗逆性研究的热点基因.采用荧光定量PCR的方法进行MAPKK基因表达量的测定.结果表明:高粱有12个MAPKK基因,其中SbMKK1、SbMKK3和SbMKK8的基因表达量与盐胁迫的关系最大.最后讨论了高粱MAPKK基因可能的功能.

拟穴青蟹丝裂原活化蛋白激酶激酶(MAPKK)基因的克隆与表达分析

采用qRT-PCR、RACE等方法,获得了拟穴青蟹丝裂原活化蛋白激酶激酶(MAPKK)基因cDNA全长序列。该基因全长1 558 bp,开放阅读框长度为1 224 bp,编码407个氨基酸残基。同源分析显示,该基因编码的蛋白与昆虫的相似性高达70%,推测MAPKK基因在节肢动物具有较高的保守性。经荧光定量PCR检测,MAPKK基因在拟穴青蟹多个组织中有表达,且在脑神经节和卵巢中表达量较高。在拟穴青蟹卵巢发育过程中,MAPKK基因在卵巢发育期(Ⅲ期)表达量最高,发育期为卵母细胞快速生长期,推测MAPKK具有促进卵母细胞快速生长的作用。