重组人MBD4蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及活性分析

为获得重组人MBD4蛋白,将编码MBD4的开放式阅读框(ORF)插入原核表达载体pGEX-6P1GST基因下游的多克隆位点(MCS).将获得的表达质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)菌株扩大培养并用IPTG诱导融合蛋白的表达.用谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B亲和介质从菌体裂解液中纯化了GST-MBD4融合蛋白.经过Prescisionprotease专一性裂解成功去除了融合蛋白上的GST标签.通过MonoQ阴离子交换层析获得了纯度达94%以上的MBD4蛋白,该蛋白具有甲基化DNA结合和糖苷酶生物活性.

MBD4蛋白在子宫内膜腺癌中的表达及临床意义

目的探讨MBD4蛋白在子宫内膜腺癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测45例正常子宫内膜和60例子宫内膜腺癌中MBD4蛋白的表达,并分析其与临床分期和病理分级的关系。结果 MBD4蛋白在正常子宫内膜和子宫内膜腺癌中的阳性表达率分别为60%及25%,呈降低趋势,差异具有统计学意义(P<0.05)。MBD4蛋白的表达与子宫内膜腺癌的临床分期、病理分级、子宫肌层浸润深度、淋巴转移无相关性。结论 MBD4蛋白的缺失在子宫内膜腺癌发病及治疗中有一定作用。