蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡的影响

目的:研究蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡通路的影响,为天然药物蛴螬的开发提供实验和理论依据。方法:应用MTT法检测蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株的抗增殖作用及细胞毒活性;通过倒置显微镜、HE染色、吖碇橙(AO)/溴化乙啶(EB)荧光染色方法观察肿瘤细胞的形态学改变;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化;应用免疫细胞化学技术(S-P法)检测用药前后凋亡通路中Bcl-2、Fas、caspase-9、caspase-3的表达改变,探讨蛴螬提取物对凋亡通路的影响。结果:(1)用MTT法检测结果表明,蛴螬提取物在体外对MCF-7人乳腺癌细胞株有明显的抑制增殖作用,实验组与对照组相比其生长抑制率有显著差异(P<0.01),而且这种抑制作用呈现浓度和时间的依赖性;(2)倒置显微镜观察表明,实验组可见胞核固缩、碎裂、凋亡小体形成等凋亡形态学变化;(3)HE染色表明实验组胞核浓缩呈蓝黑色、胞浆呈淡红色、核染色质浓缩、呈碎块状,有凋亡小体形成;(4)经AO/EB荧光染色观察结果表明,实验组出现凋亡细胞;(5)流式细胞仪结果表明实验组凋亡率明显增加,呈时间依赖性;(6)免疫细胞化学染色结果表明,实验组Bcl-2表达下调,Fas、caspase-3、caspase-9表达均上调,与对照组比差异显著(P<0.01)。结论:①蛴螬提取物在体外显著抑制MCF-7人乳腺癌细胞株增殖;②蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡通路的影响机制可能是通过下调Bcl-2,上调Fas、caspase-3、caspase-9的蛋白表达而起作用,是经由细胞凋亡的线粒体途径和死亡受体途径来完成凋亡的启动和执行。

大黄素阻抑人乳腺癌MCF-7细胞增殖和细胞周期进程

目的:探讨大黄素抗人乳腺癌MCF-7细胞增殖及其相关机制。方法:采用MTT法检测大黄素对MCF-7细胞的增殖抑制作用;流式细胞术分析周期分布和凋亡情况;原子力显微镜(AFM)观察细胞膜表面超微结构的变化。结果:大黄素呈剂量依赖性地抑制MCF-7细胞的增殖;大黄素能使MCF-7细胞阻滞在G0/G1期;Annexin V/PI双染法结果表明,大黄素对MCF-7细胞没有明显的促凋亡作用。AFM观察细胞膜超微结构,结果显示对照组细胞核区饱满,膜表面平坦光滑;大黄素作用48 h可致细胞核区坍塌萎缩,细胞表面颗粒密集,膜表面的平均粗糙度(Ra)和均方粗糙度(Rq)与对照组相比均有显著增加(P<0.05)。结论:大黄素通过阻断MCF-7细胞的细胞周期进程及影响细胞膜超微结构而发挥抗肿瘤作用。

DMSO诱导MCF-7细胞凋亡的研究

目的研究二甲基亚砜(DMSO)对MCF-7细胞凋亡的诱导作用。方法用不同浓度DMSO处理体外培养的MCF-7细胞,应用倒置光显微镜观察细胞形态学变化,用MTT比色法检测细胞存活率;Hoechst33258/PI荧光染色,用荧光显微镜分析凋亡细胞比率;琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯状条带。结果在倒置光学显微镜下观察1%DMSO处理细胞12h后细胞形态发生变化。约有50%以上的细胞变圆,细胞内有多泡小体形成。随DMSO浓度增加和作用时间的延长,细胞存活率明显下降,经MTT检测其IC_(50)值为1%;荧光显微镜下可见60%以上细胞核染色质凝集,核碎裂等凋亡细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳呈现梯状条带(DNA ladder)。结论适当浓度的DMSO能够抑制乳腺癌细胞增殖并诱导其凋亡。

5-氟尿嘧啶对乳腺癌MCF7细胞中干细胞相关基因Oct4、Bmi-1表达的影响

背景:国内外研究证明乳腺癌干细胞可能是起始乳腺癌生长及辅助治疗后复发和远处转移的根源。目的:观察5-氟尿嘧啶对人乳腺癌MCF7细胞Oct4、Bmi-1表达的影响。方法:应用0.1mg/L5-氟尿嘧啶处理MCF7,RT-PCR检测处理前G0及处理后6代细胞G1～G6中Oct4、Bmi-1 mRNA的表达,免疫细胞化学检测处理前G0、G1～G5中Oct4的表达。结果与结论:5-氟尿嘧啶处理后,Oct4、Bmi-1 mRNA表达水平在G3和G5均较处理前明显增高,OCT4蛋白表达呈现出降低-升高-更高-降低-升高的趋势。提示MCF7中可能存在肿瘤干细胞样细胞;5-氟尿嘧啶可能诱导MCF7中肿瘤干细胞样细胞的数量或比例增加。

双酚A和敌匹硫磷对MCF-7细胞增殖的影响及其联合作用研究

背景与目的:研究双酚A(BPA)和敌匹硫磷单独和联合作用对MCF-7细胞增殖的影响。材料与方法:设BPA、敌匹硫磷1.0×10-12～1.0×10-5mol/L的不同浓度组(组间10倍浓度差),分别作用雌激素敏感型与不敏感型MCF-7细胞,观察其对细胞增殖的影响,及分别加入雌激素受体抑制剂ICI182780后,对细胞增殖影响的变化。实验并设立溶剂对照组。BPA和敌匹硫磷在1.0×10-8、5.0×10-9和2.5×10-9mol/L浓度时,两者联合作用MCF-7细胞,采用2×2析因设计分析对其增殖的影响。结果:BPA和敌匹硫磷在1.0×10-8mol/L时促增殖效应均达到最大,相对增殖率分别为2.473和2.167,与溶剂对照组比较差异均具有统计学意义(P<0.05);加入ICI182780后,二者对MCF-7的促增殖作用均减弱;二者在各浓度组对雌激素不敏感型MCF-7细胞均无明显促增殖效应;BPA和敌匹硫磷在1.0×10-8、5.0×10-9和2.5×10-9mol/L各浓度组均表现出明显拮抗作用。结论:BPA和敌匹硫磷具有明显的拟雌激素活性,并且通过雌激素受体途径对细胞发挥促增殖效应,二者的联合作用为拮抗作用。

聚束微波加热逆转MCF-7/ADM细胞对阿霉素耐药性的实验研究

目的耐药性是化疗失败的主要原因之一,克服耐药性的方法之一是使用逆转剂。目前尚无一理想的、可应用于临床的阿霉素(ADM)耐药逆转剂。本研究探讨聚束微波加热对ADM耐药性的逆转作用及其机制。方法体外利用人乳腺癌细胞株MCF-7的ADM耐药模型MCF-7/ADM,采用MTT法检测聚束微波加热对MCF-7/ADM细胞耐药性的逆转作用。用Real-Time PCR测定细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白(Multidrug resistance relatedprotein,MRP)的表达水平。高效液相色谱法(HPLC)测定细胞内ADM浓度。结果MCF-7/ADM细胞对ADM的耐药指数为45.5。经聚束微波加热后,ADM对MCF-7/ADM的半数抑制浓度(IC_(50))由(60.56±2.38)ug/ml下降至(22.86±2.76)ug/ml,逆转倍数为2.64倍。Real-Time PCR检测结果显示,MCF-7/ADM细胞的MRP与P-gp mRNA表达水平均明显高于MCF-7细胞,经聚束微波加热后,MCF-7/ADM细胞胞内的MRP与P-gp mRNA表达水平均明显下降。HPLC法测定细胞内ADM含量的结果显示,经聚束微波加热处理后,MCF-7/ADM细胞内ADM的含量明显增加。结论聚束微波加热能逆转MCF-7/ADM对ADM的耐药性,聚束微波加热逆转ADM耐药性的机制可能是减少MCF-7/ADM细胞内MRP与P-gp mRNA的表达水平,从而增加了MCF-7/ADM细胞内ADM的蓄积。

5-氮杂脱氧胞苷对MCF7细胞中MEG3基因表达及细胞增殖活性的影响

背景与目的:MEG3(maternal expressed gene3)基因是一类印记基因,其转录缺失可能诱导多种肿瘤的发生发展。本研究通过检测乳腺癌MCF7细胞中MEG3基因mRNA的转录情况及细胞增殖活性,以探讨DNA甲基化抑制剂5-氮杂脱氧胞苷对MEG3基因转录的诱导作用及其对细胞增殖活性的影响。方法:以浓度为5μmol/L的5-氮杂脱氧胞苷分别作用MCF7细胞0、2、4和6d后,用RT-PCR及Northern blot技术检测MEG3基因mRNA的转录水平;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性的变化。结果:与未处理组相比,5-氮杂脱氧胞苷分别作用2、4和6d后,MCF7细胞中MEG3基因mRNA表达显著增强,并呈现时间依赖性(P<0.01);MTT检测结果显示MCF7细胞的增殖活性受到抑制。与未处理组相比,药物作用2、4和6d的细胞增殖抑制率分别为(23.16±3.93)%、(49.39±2.38)%和(64.73±2.24)%,差异有显著性(P<0.01)。结论:MEG3基因可能具有抑制MCF7细胞生长的作用,其基因转录下调与DNA甲基化有关,可能参与了乳腺癌的发病机制。

miR-134-5p靶向MRPL58调控乳腺癌细胞MCF7的凋亡研究

目的:探讨miR-134-5p靶向MRPL58调控乳腺癌细胞MCF7凋亡的潜在分子机制。方法:通过高通量测序检测正常乳腺上皮细胞MCF10A与乳腺癌细胞MCF7中的差异miRNA。在乳腺癌细胞MCF7中过表达差异倍数大于7的miRNA,检测其凋亡水平。通过miRDB在线分析miRNA潜在的靶标基因。通过过表达或敲低miRNA和荧光素酶报告实验确定miRNA的靶标基因。结果:正常乳腺上皮细胞MCF10A与乳腺癌细胞MCF7的总miRNA高通量测序结果发现,MCF10A细胞中miRNA比乳腺癌细胞MCF7表达量大于7倍的有30种。过表达上述miRNA后,miR-134-5p增强了乳腺癌细胞MCF7的凋亡水平(P<0.05)。敲低miR-134-5p后,乳腺癌细胞MCF7的凋亡水平下降(P<0.05)。miR-134-5p在癌旁组织中的表达水平高于乳腺癌组织(P<0.05)。过表达miR-134-5p后,KIAA0040,ZMAT5,RAB27A,TESMIN,MRPL58,ZFPM2,NUP98的表达水平下降(P<0.05)。敲低上述基因后,敲低MRPL58时乳腺癌细胞MCF7的凋亡水平上升(P<0.05)。过表达MRPL58后,乳腺癌细胞MCF7的凋亡水平下降。敲低miR-134-5p后,MRPL58的表达水平上升。过表达miR-134-5p后,MRPL58的表达水平下降。同时,miR-134-5p靶向MRPL58的3端非编码区(P<0.05)。同时敲低miR-134-5p和MRPL58后,乳腺癌细胞MCF7的凋亡水平没有显著改变(P>0.05)。同时过表达miR-134-5p和MRPL58后,乳腺癌细胞MCF7的凋亡水平没有显著改变(P>0.05)。结论:miR-134-5p通过靶向MRPL58 mRNA的3端非编码区以降低MRPL58的翻译水平,最终促进了乳腺癌细胞MCF7的凋亡。

MCF7细胞中肿瘤干细胞的增殖特征

背景:肿瘤干细胞学说认为,肿瘤干细胞是肿瘤不断增殖的根源,并与肿瘤的浸润转移、耐药现象密切相关。目的:在单细胞水平研究体外传代培养的MCF7细胞中肿瘤干细胞含量变化规律,认识肿瘤干细胞在体外培养环境下的增殖特点。方法:利用单细胞分离种植-成瘤性克隆方法对传代培养后不同时间点MCF7细胞中肿瘤干细胞的比例连续检测,流式细胞仪同步检测相应细胞样本中CD44+CD24-/low亚群的含量变化。结果与结论:传代后培养的MCF7细胞在不同时间点其肿瘤干细胞比例及CD44+/CD24-/low亚群比例均呈现有规律的变化。但CD44+/CD24-/low亚群变化更为显著(36.84%到81.95%),而肿瘤干细胞含量仅在小范围波动(38.54%～47.39%)。结果提示传代培养的MCF7细胞中,肿瘤干细胞具有通过调节自身增殖来保持其比例相对稳定的特点;CD44+/CD24-/low亚群并不代表或者富集MCF7细胞株中的肿瘤干细胞亚群。

氯喹对MCF7细胞增殖的抑制作用及其机制

目的:探讨氯喹对乳腺癌细胞MCF7的生长抑制作用及其可能机制。方法:取对数生长期的MCF7细胞,用不同浓度氯喹(0、10、20、30、40μmol/L)作用于MCF7细胞不同时间(0 h、24 h、48 h和72 h),通过MTT法检测细胞增殖情况。使用显微镜观察不同浓度氯喹作用MCF7细胞72 h后细胞形态变化。利用Western blot方法检测不同浓度氯喹作用MCF7细胞24 h后细胞内β-catenin蛋白和Cyclin D1蛋白变化情况。结果:与对照组比较,氯喹在一定浓度范围内对MCF7细胞有明显的抑制作用(P<0.05),细胞增殖活性随着剂量和时间增加而逐渐下降。显微镜下观察到氯喹处理MCF7细胞后,细胞数目减少而细胞碎片增加。Western blot结果显示氯喹处理MCF7细胞后,细胞内β-catenin和Cyclin D1蛋白表达出现下调(P<0.05)。结论:氯喹对MCF7细胞增殖具有抑制作用,其机制可能与下调Wnt/β-catenin信号通路有关。

多柔比星诱导乳腺癌细胞PARP-1活性上调依赖于Kif4A蛋白低表达

背景与目的:化疗作为乳腺癌术后治疗的重要手段,由其引发的耐药现象备受关注,而耐药的出现与DNA损伤修复异常增强密切相关。驱动蛋白家族成员4A(kinesin family member 4A,Kif4A)和聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP-1]是重要的DNA损伤修复分子。本研究探讨Kif4A在多柔比星诱导乳腺癌细胞PARP-1活性上调中的作用及意义。方法:蛋白质印迹法检测多柔比星处理后乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞Kif4A蛋白表达及PARP-1活性的变化;并检测高表达Kif4A蛋白后,乳腺癌细胞PARP-1蛋白表达及其活性变化;流式细胞技术检测多柔比星联合PARP-1抑制剂3-氨基苯酰胺(3-Aminobenzamide,3-ABA)干预后乳腺癌细胞的凋亡情况。结果:多柔比星能上调PARP-1活性并诱导乳腺癌细胞Kif4A蛋白低表达,两者都呈浓度和时间依赖性;高表达Kif4A后,PARP-1活性被明显抑制,细胞凋亡数增加,而多柔比星能部分逆转由Kif4A高表达而引起的PARP-1活性抑制。多柔比星和3-ABA都诱导乳腺癌细胞凋亡,联合使用能增加细胞凋亡,与单独使用比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结果还显示,多柔比星、PARP-1抑制剂3-ABA及高表达的Kif4A诱导的MDA-MB-231细胞凋亡数高于MCF-7细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:多柔比星诱导乳腺癌细胞PARP-1活性上调依赖于细胞Kif4A蛋白低表达,Kif4A有望成为逆转多柔比星耐药的新靶点。

miR-145-5p的过表达对乳腺癌细胞凋亡作用的研究

目的探讨miR-145-5p靶向调控激活转录因子1(ATF1)对人乳腺癌MCF7细胞凋亡的影响。方法运用TargetScan在线分析miR-145-5p与ATF1的相关性;将ATF1的3’UTR构建进PMIR-RB-REPORT质粒,利用荧光素酶报告实验检测miR-145-5p是否靶向调控ATF1;用HiPerFect Transfection Reagent转染miR-145-5p模拟物或miR-145-5p抑制物进乳腺癌MCF7细胞,通过Western blot检测ATF1的表达量和乳腺癌MCF7细胞凋亡标志蛋白表达情况。通过MTT实验和Annexin-V染色分别检测MCF7的增值水平和凋亡水平。结果 miR-145-5p靶向ATF1的3’UTR的193-200区域;过表达miR-145-5p时,ATF1和BCL-2的表达量明显减少,而细胞凋亡相关蛋白P21和BAX则显著增加(P<0.05),同时CASPASE9/CLEAVED-CAS9比值显著下降(P<0.05),MCF7细胞增殖水平降低、凋亡水平上升(P<0.05);敲低miR-145-5p后,ATF1和BCL-2的表达量显著增加(P<0.05),而细胞凋亡相关蛋白P21以及BAX的表达量明显减少(P<0.05),同时CASPASE9/CLEAVED-CAS9的比值明显增加(P<0.05),MCF7细胞增殖水平增加、凋亡水平下降(P<0.05)。结论 miR-145-5p可能靶向调控ATF1促进乳腺癌细胞MCF7凋亡。

miR-1468-3p靶向JAK2调控乳腺癌细胞的凋亡

目的探讨miR-1468-3p分子通过Janus激酶2(JAK2)蛋白调控乳腺癌细胞的凋亡。方法运用TargetScan在线分析miR-1468-3p与JAK2的相关性;将JAK2的3′UTR构建进PmirGLO质粒,利用luciferase assay检测miR-1468-3p是否靶向调控JAK2;用脂质体梯度转染miR-1468-3P mimics或miR-1468-3P inhibitor转入乳腺癌MCF7细胞,通过Western blot检测JAK2的表达量和乳腺癌MCF7细胞凋亡标志蛋白表达情况。结果通过TargetScan分析,miR-1468-3p在3个区域与JAK2具有较高匹配度;通过luciferase assay发现,miR-1468-3p靶向JAK2的3′UTR;梯度转染miR-1468-3P mimics时,JAK2的表达量梯度下降,细胞凋亡标志蛋白cleaved-caspase3/caspase3、cleaved-caspase9/caspase9、BAX表达量上升,Bcl-2表达量下降(P<0.05);而用梯度转染miR-1468-3P inhibitor进乳腺癌MCF7细胞时,JAK2的表达量梯度上升,cleaved-caspase3/caspase3、cleaved-caspase9/caspase9和BAX表达量下降,Bcl-2表达量上升(P<0.05)。结论 miR-1468-3p能通过降低JAK2的表达来促进乳腺癌MCF7细胞的凋亡。

5-氮杂-2'-脱氧胞苷酸对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及Runt相关转录因子3基因表达的影响

目的探讨5-氮杂-2'-脱氧胞苷酸(5-aza-2'-deoxycitydine,5-Aza-CdR)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及对人类Runt相关转录因子3(Runt-related transcription factor3,RUNX3)基因表达的影响。方法以0.4、1.6、6.4、25.6、102.4μmol/L的5-Aza-CdR分别处理MCF-7细胞,以同体积培养液处理MCF-7细胞作为对照组。MTT法测定不同浓度、不同时间对MCF-7细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR和Western blot法分别检测RUNX3基因mRNA和蛋白的表达,计量资料采用方差分析SNK检验。结果 5-Aza-CdR可抑制MCF-7细胞的生长,其抑制率与药物浓度、作用时间呈依赖关系;5-Aza-CdR作用48h后,流式细胞仪检测0.4～102.4μmol/L5-Aza-CdR实验组细胞凋亡率分别为15.33%、25.35%、27.95%、32.39%、39.27%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05,0.4μmol/L组除外);RT-PCR和Western-blot检测可见RUNX3 mRNA及RUNX3蛋白表达均增加。结论 5-Aza-CdR诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡,可能与5-Aza-CdR去甲基化,促进RUNX3基因及蛋白表达有关。

靶向Bmi-1基因的siRNA脂质复合物的制备及体外对乳腺癌MCF-7的抑制作用

目的:制备装载靶向Bmi-1基因的siRNA脂质复合物(PILP)并考察其体外对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用、转染效率及对Bmi-1 mRNA表达的影响。方法:以磷脂、胆固醇、DSPE-PEG2000和DSPEPEG2000-maleimide为类脂成分,逆向蒸发法制备载siRNA的肿瘤靶向脂质复合物。激光纳米粒度仪测定脂质复合物的粒径和电位,凝胶电泳测定其对siRNA的包封率,MTT法检测脂质复合物对MCF-7细胞体外增殖的抑制,荧光显微镜观察脂质复合物中siRNA被MCF-7细胞摄取的情况,流式细胞仪检测转染效率,RTPCR法检测其对MCF-7细胞中Bmi-1 mRNA表达的影响。结果:制备的载siRNA的肿瘤靶向脂质复合物粒径为(122.7±1.7)nm、电位为(-22.74±0.96)m V,对siRNA的包封率高;能显著抑制MCF-7细胞的体外增殖(P<0.05),作用72 h抑制率为(55.36±3.5)%;其装载的siRNA能被MCF-7细胞有效摄取,转染效率为97.07%;能有效沉默MCF-7细胞中Bmi-1 mRNA,沉默效率为69.5%。结论:采用该方法可制备包封率较高的肿瘤靶向脂质复合物,其介导的siRNA能有效抑制乳腺癌MCF-7细胞的体外增殖、转染效率高、能有效沉默MCF-7细胞中Bmi-1 mRNA。

林芝松口蘑抗肿瘤组分的筛选

为筛选林芝松口蘑(Tricholoma matsutake)子实体中具抗肿瘤作用的组分,采用MTT法测定林芝松口蘑乙醇提取物的不同有机溶剂萃取分部对乳腺癌细胞(MCF-7)、胃癌细胞(SGC-7901)和肺癌细胞(A549)的体外抑制率。结果表明:林芝松口蘑乙醇提取物的抑癌活性物质主要集中在氯仿分部,100μg/mL作用48h,对MCF-7和SGC-7901的抑制率分别达到了64%和55%;乙醇提取物的各萃取分部对A549抑制效果较差,在实验浓度范围内抑制率均未超过25%。

去胰岛素的乳腺癌干细胞培养及雌激素诱导的作用

目的：探讨去除胰岛素的乳腺癌干细胞悬浮培养方法以及雌激素诱导的作用。方法：通过使用去除胰岛素的悬浮培养方法获得乳腺癌细胞系MCF7的肿瘤球细胞，并通过形态学观察、CD24-CD44＋表达细胞的检测、醛脱氢酶1（ALDHl）蛋白的表达以及细胞多向分化能力对该干细胞模型的可靠性进行鉴定。给予10。。mo]／L17β-雌二醇（E2B）对该干细胞模型处理7d，观察上述相关指标的变化。结果：去除胰岛素的悬浮培养方法获得的瘤细胞球呈葡萄状，由30～60个细胞组成。细胞球显示细胞角蛋白18和CD10蛋白均表达阳性，CD44＋CD24细胞的含量及ALDHl蛋白表达量均较贴壁细胞明显增高（P〈0．05）。使用10^-10moL／LE，B处理MCF7肿瘤球细胞7d，肿瘤球细胞数及体积增大。使用10^-10mol／LE：p处理MCF7肿瘤球细胞24h，CD44’CD24一细胞数量及ALDHl蛋白表达量较未处理组明显升高（P〈0．05）。结论：去除胰岛素的悬浮培养方法可有效建立乳腺癌干细胞体外研究模型，并可用于E：p对乳腺癌干细胞生长调控的研究。

本期专题：肿瘤与肿瘤干细胞

1 5-氟尿嘧啶对乳腺癌MCF7细胞中干细胞相关基因0ct4、Bmi-1表达的影响燕丽（郑州大学基础医学院，河南省郑州市450052）推荐理由：实验将Oct4和Bmi一1作为间接反应乳腺癌干细胞样细胞数量的标志，检测人乳腺癌细胞系MCF7中0ct4和Bmi-1基因的表达及5一氟尿嘧啶作用下表达水平的变化规律，结果显示MCF7中可能存在肿瘤千细胞样细胞；5-氟尿嘧啶可能诱导MCF7中肿瘤干细胞样细胞的数量或比例增加。但究竟是化疗药物作为一种刺激因素引起了干细胞的自我更新，还是化疗药物使肿瘤细胞群中的非干祖细胞逆向分化为干细胞样细胞仍有待于进一步研究证实。见2012年10期1822—1826页。

酚红对无血清悬浮培养条件下肿瘤干细胞微球形成的影响

目的研究酚红对无血清悬浮培养条件下肿瘤干细胞微球形成的影响。方法将人胶质瘤细胞U251、人乳腺癌细胞MCF-7、人肝癌细胞SMMC-7721、人宫颈癌细胞Hela等细胞分为酚红组和无酚红组,分别悬浮培养于添加了生长因子的DMEM-F12培养基中,观察5 d后肿瘤干细胞微球的形成情况,并计算微球的形成率。结果 U215无酚红组细胞的微球形成率为3.38%,明显高于酚红组的(2.73%);MCF-7、SMMC-7721、Hela无酚红组细胞的微球形成率分别为6.81%、7.75%、7.18%,酚红组的细胞均无微球形成。结论无血清悬浮培养肿瘤干细胞应采用无酚红培养基。