CDC6和MCM6的表达与宫颈癌的相关性

目的探讨宫颈癌组织中细胞分裂周期蛋白6(CDC6)和微小染色体维持蛋白6(MCM6)蛋白及mRNA的表达水平与宫颈癌临床病理特征的关系。方法收集2018年10月—2020年11月就诊于华北理工大学附属医院妇科的94例患者的宫颈组织标本,其中44例经病理学确诊的宫颈癌组织作为宫颈癌组,50例因子宫肌瘤行全子宫切除术患者的正常宫颈组织作为对照组。采用免疫组织化学法(IHC)检测两组宫颈组织中CDC6、MCM6蛋白的表达情况;采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测两组宫颈组织中CDC6、MCM6 mRNA的表达量。结果宫颈癌组中CDC6、MCM6蛋白的阳性表达率明显高于对照组(P<0.01)。在宫颈癌组织中CDC6、MCM6蛋白的阳性表达率与宫颈癌患者的淋巴结转移、临床分期和HPV16/18型感染相关(P<0.05),与是否绝经、肿块大小、宫旁浸润、分化程度、组织类型无关(P>0.05)。CDC6、MCM6 mRNA在宫颈癌组中的表达量高于对照组(P<0.05);当CDC6或MCM6 mRNA的表达量增加时,发生宫颈癌的风险增加(OR:2.591,95%CI:1.126~5.962;OR:4.239,95%CI:1.780~10.095)。在MCM6蛋白阳性表达的宫颈癌组织中,CDC6蛋白的阳性表达率更高(P<0.05)。结论CDC6、MCM6蛋白和mRNA的表达与宫颈癌的发生发展有一定的关系,两者可作为宫颈癌的生物学指标。

RNA结合蛋白CSTF2通过调控MCM6促进HCC细胞的增殖和迁移

目的 探讨CSTF2在肝细胞癌(HCC)中的临床价值及其在HCC细胞中的功能和分子机制。方法 收集HCC公共数据,分析CSTF2的mRNA表达在癌组织和癌周组织中的差异。免疫组化分析CSTF2的蛋白表达在癌组织和癌周组织中的差异。分析CSTF2的表达水平与患者临床特征及预后的关系。相关性分析寻找与CSTF2存在显著相关性的基因。体外培养HCC细胞并采用体外转染过表达或siRNA的方式分别上调或下调细胞中的CSTF2及MCM6。CCK-8试验分析各组细胞的增殖情况,划痕实验分析各组细胞的转移情况。qRT-PCR和Western blot技术分析各组细胞的CSTF2及MCM6表达水平。结果 CSTF2在9个HCC的微芯片及2个HCC的RNA测序公共数据中,CSTF2均在癌组织中呈现显著上调。CSTF2的高表达预示着较低的总体生存率和无病生存率。CSTF2表达与HCC患者的肿瘤尺寸、AFP水平、TNM分期及血管侵袭等密切相关。肝癌组织中MCM6的mRNA表达与CSTF2水平呈正相关。过表达CSTF2可以促进HCC细胞的增殖和转移,同时过表达CSTF2可以上调MCM6的水平。抑制MCM6的水平可以部分消除CSTF2的促癌作用。结论 CSTF2可能通过调控MCM6在HCC中发挥促癌作用。CSTF2和MCM6可能成为HCC的潜在分子靶点。

MCM6在颅咽管瘤中的表达及其与预后的关系

目的检测颅咽管瘤组织中微染色体维持蛋白6(M CM 6)的表达,并观察其与肿瘤复发的关系。方法采用前瞻性队列研究方案,免疫组化(SP法)测定颅咽管瘤亚型釉质上皮型、鳞形乳大型、复发组、非复发组、原发组及复发组的M CM 6的表达情况。结果32例釉质上皮型组14例患者复发,31例鳞形乳头瘤型组6例患者复发。釉质上皮型组与鳞形乳头瘤型组间复发率和M CM 6蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.01);肿瘤复发组与非复发组间M CM 6蛋白表达差异有统计学意义(P<0.01);而原发组与复发组间M CM 6蛋白表达差异无统计学意义。结论颅咽管瘤病理亚型、M CM 6蛋白的表达与肿瘤预后和复发有关,可能预测肿瘤复发危险性。

MCM6促进食管癌细胞增殖进而导致预后不良

食管癌是一种常见的致死率高的恶性肿瘤.为确定食管癌发生的潜在机制,在生物信息学分析的基础上筛选关键基因.染色体维持6复合体(Chromosome maintenance 6 complex,MCM6)在多种恶性肿瘤中上调,但是,它在食管癌中的作用仍然不清楚.利用GEPIA数据库,研究MCM6基因在正常食管组织和癌性食管组织中的表达变化.结果表明,食管癌中MCM6基因有明显的高表达水平.利用免疫组化方法检测MCM6蛋白在正常食管组织及恶性肿瘤组织中的表达,发现食管癌中MCM6蛋白有明显的高表达水平.用卡方检验分析临床病理特征与蛋白表达的关系,发现本院78例患者MCM6表达与食管癌肿瘤大小有显著相关性.通过集落形成试验,确定MCM6能促进食管癌细胞的增殖.肿瘤生长试验证实了MCM6在小鼠食管癌进展中的促进作用.通过数据库和免疫组化检测MCM6与PCNA的相关性,发现MCM6与PNCA基因和蛋白呈正相关,进而推测MCM6可能通过影响PNCA的表达促进食管癌的增殖.综上所述,MCM6可能成为治疗食管癌的新靶点.

稳定表达Mcm6-GFP细胞株的建立

采用RT-PCR的方法扩增人Mcm6基因,克隆入真核表达载体pEGFP-N3,成功构建了pEGFP-Mcm6真核表达质粒,酶切及DNA测序证实了构建质粒序列的正确性。脂质体介导转染Hela细胞后,荧光显微镜可检测到绿色荧光信号,通过G418筛选最终获得了稳定表达的细胞株,Western blot验证了稳定表达细胞株中Mcm6-GFP融合蛋白的表达。本实验成功建立了稳定表达Mcm6-GFP融合蛋白的细胞株,为动态观察Mcm6细胞定位的变化,进一步研究抗肿瘤药物的作用机制提供了有效的分子工具。

肌层浸润性膀胱癌组织KMT2D、MCM6与临床病理特征和预后的关系

目的:探讨肌层浸润性膀胱癌(MIBC)组织赖氨酸甲基转移酶2D(KMT2D)、微小染色体维持蛋白6(MCM6)与临床病理特征和预后的关系。方法:选择2017年5月至2019年10月长治医学院附属和平医院行手术治疗的MIBC患者96例,应用逆转录-实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测癌组织及癌旁正常组织KMT2D信使核糖核酸(m RNA)、MCM6 m RNA表达,分析KMT2D m RNA、MCM6 m RNA表达与MIBC患者临床病理特征的关系,应用Pearson相关分析法分析MIBC患者癌组织KMT2D m RNA及MCM6 m RNA表达的相关性。随访3年,比较死亡MIBC患者与存活MIBC患者癌组织KMT2D m RNA、MCM6 m RNA表达,并应用Kaplan-Meier生存曲线分析不同KMT2D m RNA、MCM6 m RNA表达分组MIBC患者预后情况。结果:MIBC癌组织中KMT2D m RNA表达水平显著低于癌旁组织,MCM6 m RNA表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05)。MIBC患者癌组织中KMT2D m RNA、MCM6 m RNA表达与侵犯输尿管、淋巴结转移、TNM分期显著相关(P<0.05),且两者表达呈负相关(P<0.05)。至随访截止,MIBC患者死亡45例,死亡组患者癌组织中KMT2D m RNA表达水平显著低于存活组、MCM6 m RNA表达水平显著高于存活组(P<0.05)。生存曲线结果显示KMT2D m RNA高表达组3年生存率显著高于KMT2D m RNA低表达组;MCM6 m RNA低表达组3年生存率显著高于MCM6 m RNA高表达组(P<0.05)。结论:MIBC癌组织中KMT2D低表达、MCM6高表达,与MIBC侵犯输尿管、淋巴结转移、TNM分期及患者预后不良有关。

MCM6在膀胱癌中的表达及其与预后相关性研究

目的检测微小染色体维持蛋白6(MCM6)在膀胱癌组织中的表达情况,初步探究MCM6与膀胱癌的临床预后关系。探讨MCM6作为膀胱癌潜在的生物标志物的可能性。方法通过生物信息学的方法分析MCM6在膀胱癌组织及癌旁正常组织中的mRNA水平,并分析其表达与膀胱癌患者的生存率间的关系。回顾性分析83例接受手术治疗的膀胱癌患者的临床病理资料。采用免疫组化法检测膀胱癌组织和癌旁正常组织中的MCM6蛋白表达水平,分析其与膀胱癌患者临床病理特征的关系。结果生物信息学分析结果显示,MCM6的mRNA在膀胱癌组织中显著高表达,并与患者总生存率(P=0.036)和无病生存率(P=0.01)显著相关。免疫组化结果表明,MCM6在膀胱癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织。MCM6在膀胱癌组织中的高表达与肿瘤分期相关(P=0.025),而与年龄、性别、肿瘤分级无关(均P>0.05)。结论膀胱癌组织中MCM6呈显著高表达并提示不良预后,且其表达水平与膀胱癌患者肿瘤分期有关。MCM6可能作为膀胱癌的一个新的潜在生物标志物。

MCM6/PCNA在胃癌中的表达及相关性分析

为了探究MCM6和PCNA表达量与胃癌的发生发展之间的关系,并进一步探讨MCM6/PCNA作为胃癌标志物的可能性,采用GEPIA数据库分析对比MCM6和PCNA在胃癌细胞中的表达,并对收集到的胃癌标本进行免疫组织化学染色,观察染色结果.随后利用shRNA敲低胃癌细胞系MGC-803和AGS中MCM6,分别利用MTT、克隆形成以及Western Blot分析MCM6与肿瘤细胞增殖的关系,再采用小鼠肿瘤体内生长实验分析MCM6对体内肿瘤生长的作用.最后通过数据分析得出研究结果,即MCM6和PCNA对胃癌的影响.结果表明:GEPIA数据库的数据显示MCM6和PCNA在胃癌中的表达量显著上调,且MCM6与PCNA的表达显著正相关(R=0.65;P<0.01).进行免疫组织化学染色分析MCM6与胃癌之间的关系,发现MCM6与胃癌的肿瘤大小明显相关(P=0.010),且MCM6低表达的胃癌患者的PCNA表达量也相应下调.MTT实验和克隆形成实验表明MCM6的表达抑制会显著降低胃癌细胞的增殖,而体内实验可表明MCM6表达下调可抑制胃癌细胞的体内增殖.上述结果说明MCM6/PCNA的表达量与胃癌的发生具有明确的关联性,MCM6/PCNA可能是胃癌诊疗的一个新的方向和特异性靶点.

微小染色体维持蛋白6(MCM6)在结肠癌组织中的表达及其与增殖细胞核抗原(PCNA)的相关性

目的分析结肠癌组织中微小染色体维持蛋白6(MCM6)的表达水平,MCM6的表达水平与结肠癌患者临床病理特征的相关性,以及MCM6与PCNA表达的相关性。方法基于人类蛋白质图谱(HPA)数据库分析MCM6在不同肿瘤组织中的表达水平。基于癌症基因组图集(TCGA)数据库及免疫组化实验分析MCM6和PCNA在结肠癌组织中的表达水平与相关性。分析MCM6表达水平与结肠癌患者临床特征的相关性。基于TCGA数据库及基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库分析在结肠癌中MCM6与PCNA表达的相关性。结果生物信息学分析和免疫组化结果证实MCM6在结肠癌组织中高表达,其表达水平与患者的肿瘤分期相关(P=0.01)。在结肠癌中,MCM6与PCNA的表达具有相关性,且有统计学意义(P<0.05)。结论MCM6在结肠癌组织中高表达并与患者临床特征相关,提示其可作为结肠癌潜在的标记物。

微型染色体维持蛋白6在黑色素瘤中的表达及其与预后的关系

目的 探讨微型染色体维持蛋白6(MCM6)在皮肤黑色素瘤(SKCM)中的表达及其与预后的关系。方法 通过分析TCGA和GTEx数据库,比较MCM6在SKCM和正常皮肤组织中的表达差异;采用受试者工作特征曲线(ROC)、Cox回归分析和Kaplan-Meier (K-M)分析评估MCM6在SKCM中的临床意义及与预后之间的关系;通过LinkedOmics数据库、蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络、GO/KEGG富集及免疫细胞浸润分析对与MCM6共表达的基因进行功能富集分析。结果 MCM6在SKCM中的表达水平明显高于正常皮肤组织(P<0.05),且MCM6的高表达与SKCM的不良预后密切相关。GO功能注释分析显示,与MCM6共表达基因主要参与细胞器分裂、DNA复制、细胞周期检查点等生物学过程。KEGG分析显示,这些基因在细胞周期、细胞衰老、p53信号途径及对药物的耐药性形成等信号传导过程中发挥着重要作用。免疫细胞浸润分析显示,MCM6表达水平与Th2细胞、辅助性T细胞的浸润水平呈正相关;与浆细胞样树突细胞、Th17细胞、自然杀伤细胞及细胞毒性T细胞的浸润水平呈负相关。结论 MCM6在SKCM的发生发展过程中发挥着重要作用,并且与SKCM的预后密切相关,可成为SKCM诊断和预后评估的潜在标志物。

微小染色体维持蛋白6在肾透明细胞癌早期诊断及预后判断中的意义

目的:探讨微小染色体维持蛋白6(MCM6)在肾透明细胞癌(ccRCC)早期诊断及预后判断中的意义。方法:应用TCGA数据库中533例ccRCC患者的RNA测序(RNAseq)数据,从RNA水平初步分析MCM6的mRNA表达与ccRCC早期诊断及预后的关系。应用免疫组化(IHC)实验方法从蛋白质层面分析MCM6蛋白在373例ccRCC患者的表达与ccRCC早期诊断与预后的关系。结果:分析TCGA数据库发现,ccRCC患者的MCM6高表达与肿瘤进展和生存率低均有关(P<0.001)。对373例ccRCC组织的免疫组化分析表明MCM6蛋白在ccRCC的癌旁正常组织中几乎不表达,而在ccRCC的肿瘤细胞中明显表达。Kaplan-Meier生存分析显示MCM6蛋白是ccRCC患者生存的不利因素,高表达MCM6的ccRCC患者预后差(P<0.001)。Cox回归分析结果显示,MCM6是ccRCC的独立预测因子(P<0.001)。MCM6受试者工作特征曲线下面积(AUC)值为0.604(P=0.001)。结论:MCM6是ccRCC患者生存的不利因素,MCM6是一种潜在的ccRCC早期诊断及判断预后的新型标志物。

颅咽管瘤移植瘤中微血管密度及微染色体维持蛋白6的研究

目的建立颅咽管瘤(CP)动物模型,检测移植瘤的微循环结构和瘤细胞分裂、增殖能力。方法收集人脑颅咽管瘤组织,异种异位移植到BALB/C裸小鼠皮下,建立移植瘤。采用免疫组化法以cytokeratin(CK)鉴定肿瘤表型,CD34标记血管内皮细胞。微染色体维持蛋白6(MCM6)检测瘤细胞增殖活性。结果成功建立了10只动物模型。移植瘤组织自身形成微血管,瘤细胞保持了分裂、增殖活性。微血管密度(MVD)、MCM6二者呈正相关(r=0.410,P<0.05)。釉质上皮型(AE)与鳞形乳头瘤型(SP)移植瘤MVD、MCM6比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论采用异种异位移植方法可在裸小鼠皮下初步建立人脑颅咽管瘤动物模型。移植瘤细胞可建立新的微循环结构,具备一定的分裂、增殖能力和血管形成活性。