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基于mcrA克隆文库和PCR-DGGE技术对牛粪为原料的农村户用沼气池产甲烷古菌的多样性研究 被引量:9
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作者 王庆 阮志勇 +5 位作者 高立洪 王彦伟 吴进 胡国全 宋金龙 赵斌 《中国沼气》 北大核心 2012年第3期3-7,13,共6页
基于mcrA克隆文库和PCR-DGGE技术分析,对农村户用沼气池中产甲烷古菌微生物的群落结构进行了分析。经mcrA克隆文库分析,结果表明,沼气池中产甲烷古菌以产甲烷囊菌属(Methanoculleus)和小甲烷粒菌属(Methanocorpusculum parvum)为主,其... 基于mcrA克隆文库和PCR-DGGE技术分析,对农村户用沼气池中产甲烷古菌微生物的群落结构进行了分析。经mcrA克隆文库分析,结果表明,沼气池中产甲烷古菌以产甲烷囊菌属(Methanoculleus)和小甲烷粒菌属(Methanocorpusculum parvum)为主,其他类群包括产甲烷菌属(Methanogenium),马氏甲烷八叠球菌属(Methanosarci-na mazei),甲烷盘菌属(Methanoplanus),甲烷杆菌属(Methanobacteriales)和甲烷鬃菌属(Methanosaeta)。经PCR-DGGE分析,沼气池中的古菌主要以产甲烷囊菌属(Methanoculleus)和甲烷粒菌属(Methanocorpusculum)为主,其他类群包括产甲烷菌属(Methanogenium),甲烷盘菌属(Methanoplanus)和甲烷鬃菌属(Methanosaeta)。 展开更多
关键词 农村户用沼气池 产甲烷菌结构 变形梯度凝胶电泳(DGGE) mcra基因克隆文库
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RFLP Analysis of Methanogens mcrA Gene in Rumen of Cashmere Goat 被引量:4
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作者 李长青 金海 +2 位作者 郭雪峰 李华伟 栗原光规 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2008年第3期49-52,55,共5页
[Objective] The aim of this study is to understand the population composition of methanogens in rumen fluid of grazing Inner Mongolian cashmere goat. [Method] Total DNAs of various bacteria in rumen fluid were isolate... [Objective] The aim of this study is to understand the population composition of methanogens in rumen fluid of grazing Inner Mongolian cashmere goat. [Method] Total DNAs of various bacteria in rumen fluid were isolated for PCR amplification using the specifically designed primers based on conservative mcrA sequence of methanogens; then mcrA specific clone library was accordingly established. The restriction fragment length polymorphism(RFLP) of the library was further analyzed by digestion of restriction enzyme Taq I. [Result] One hundred and five randomly selected specific colonies were classified into six RFLP types, among which the dominant type accounts for 38%, and other types account for 27%, 18%, 5.5% and 4.5%, respectively. [Conclusion] There are at least six different methanogens in rumen fluid of grazing Inner Mongolian cashmere goat. 展开更多
关键词 Casmere GOAT mcra CLONE library RUMEN fluid RFLP
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内蒙古白绒山羊不同放牧期瘤胃甲烷菌mcrA基因的RFLP分析 被引量:7
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作者 郭雪峰 李华伟 +4 位作者 李长青 金海 卢德勋 永西修 栗原光规 《山西师范大学学报(自然科学版)》 2008年第3期68-72,共5页
分析不同放牧期内蒙古绒山羊瘤胃中甲烷细菌的种群组成.选取甲烷菌m crA基因的特异性引物序列,对瘤胃液中提取的细菌总DNA进行PCR扩增,建立甲烷细菌特异性的m crA基因文库.用限制性内切酶TapⅠ对该文库特异性片段进行限制性内切片段长... 分析不同放牧期内蒙古绒山羊瘤胃中甲烷细菌的种群组成.选取甲烷菌m crA基因的特异性引物序列,对瘤胃液中提取的细菌总DNA进行PCR扩增,建立甲烷细菌特异性的m crA基因文库.用限制性内切酶TapⅠ对该文库特异性片段进行限制性内切片段长度多态性分析(RFLP).结果表明牧草生长幼嫩期、旺盛期和枯草期随机挑选的特异性克隆片段分别为115、105和112,分成6个RFLP类型,每期的不同类型占了所有分析克隆子的比例分别为36%、28%、20%、3.5%、3.5%和9%;38%、27%、18%、7%、5.5%和4.5%;35%、24%、18%、6.5%、3%和13.5%. 展开更多
关键词 甲烷菌 mcra基因文库 RFLP 内蒙古白绒山羊
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根管感染中产甲烷古细菌基于mcrA序列的系统发育分析 被引量:1
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作者 韦艳霞 郑纪伟 +1 位作者 杨锋 刘佃滨 《口腔生物医学》 2014年第4期181-184,共4页
目的:分析根管感染中产甲烷古细菌的多样性,建立基于功能基因--甲基辅酶M还原酶(methyl coenzyme M reductase,MCR)基因α亚基(mcr A)的系统发育树。方法:利用一对特异性引物选择性扩增感染根管中产甲烷古细菌的mcr A片段,在此基础上建... 目的:分析根管感染中产甲烷古细菌的多样性,建立基于功能基因--甲基辅酶M还原酶(methyl coenzyme M reductase,MCR)基因α亚基(mcr A)的系统发育树。方法:利用一对特异性引物选择性扩增感染根管中产甲烷古细菌的mcr A片段,在此基础上建立mcr A克隆文库。通过蓝白斑筛选的方法,筛选出阳性重组克隆子,进一步通过基因测序获得重组克隆子中的插入片段mcr A序列。利用Clustalx和Mega 4软件包分析mcr A序列,对其进行同源性比较和系统发育学分析。结果:4例根管样本的其中1例检出了产甲烷古细菌;构建了基于mcr A序列的系统发育树。随机选出的8个mcr A克隆片段高度同源,均为类口腔甲烷短杆菌序列型。结论:本例根管感染中产甲烷古细菌的多样性局限于类口腔甲烷短杆菌序列型。 展开更多
关键词 根管感染 产甲烷古细菌 mcra 基因 系统发育
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基于MCRA和OM-LSA的语音增强算法 被引量:1
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作者 邸晓伟 王哲 《中国无线电》 2021年第5期70-73,共4页
本文介绍了一种结合最小值控制的递归平均(MCRA)噪声谱估计和最优改进对数幅度谱估计(OM-LSA)的语音增强算法。MCRA对于噪声的估计是无偏的,对输入信噪比和加性噪声具有鲁棒性,计算效率高,并且能够快速跟踪噪声谱。而OM-LSA既可保留语... 本文介绍了一种结合最小值控制的递归平均(MCRA)噪声谱估计和最优改进对数幅度谱估计(OM-LSA)的语音增强算法。MCRA对于噪声的估计是无偏的,对输入信噪比和加性噪声具有鲁棒性,计算效率高,并且能够快速跟踪噪声谱。而OM-LSA既可保留语音周期成分,又可避免音乐噪声残留,两个算法相结合可以实现最优滤波,取得较好的噪声抑制效果。 展开更多
关键词 语音增强 谱估计 最小值控制的递归平均(mcra) 最优改进对数幅度谱估计(OM-LSA)
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垄作灌溉和减施氮肥对稻田CH_(4)排放、土壤有机酸含量和酶编码基因表达量的影响 被引量:1
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作者 李熠凡 李伏生 +1 位作者 罗维钢 黄挺 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期42-51,共10页
【目的】研究不同垄面宽度的垄作灌溉和不同时期减施氮肥对稻田甲烷(CH4)排放、土壤有机酸含量以及CH4形成和转化相关酶编码基因(产CH4古菌中甲基辅酶M还原酶编码基因mcrA和CH4氧化菌中CH4单加氧酶编码基因sMMO)表达量的影响,揭示土壤... 【目的】研究不同垄面宽度的垄作灌溉和不同时期减施氮肥对稻田甲烷(CH4)排放、土壤有机酸含量以及CH4形成和转化相关酶编码基因(产CH4古菌中甲基辅酶M还原酶编码基因mcrA和CH4氧化菌中CH4单加氧酶编码基因sMMO)表达量的影响,揭示土壤有机酸以及mcrA和sMMO表达量对稻田CH4通量的影响。【方法】开展3种灌溉模式(淹水灌溉,垄宽分别为80、100 cm的垄作灌溉)和3种施氮处理(常规施氮:135 kg·hm^(−2),其中苗肥47.25 kg·hm^(−2)、分蘖肥54.00 kg·hm^(−2)和穗肥33.75 kg·hm^(−2);返青期减氮:110 kg·hm^(−2),其中苗肥22.25 kg·hm^(−2)、分蘖肥54.00 kg·hm^(−2)和穗肥33.75 kg·hm^(−2);孕穗期减氮:110 kg·hm^(−2),其中苗肥47.25 kg hm^(−2)、分蘖肥54.00 kg hm^(−2)和穗肥8.75 kg hm^(−2))的田间试验,测定生育期内稻田CH4通量、土壤有机酸含量以及mcrA和sMMO表达量,分析稻田CH4通量、土壤有机酸含量以及mcrA和sMMO表达量之间的相互关系。【结果】相同施氮处理下,垄作灌溉稻田CH4排放量较淹水灌溉显著降低,相同灌水模式下,返青期减氮稻田CH4排放量较常规施氮显著降低。垄宽为80 cm的垄作灌溉+常规施氮处理在施肥后10 d土壤总有机酸含量较施肥前高71.7%,淹水灌溉和常规施氮处理高28.8%。返青期减氮下,垄宽为80 cm的垄作灌溉土壤mcrA表达量整体低于淹水灌溉,sMMO表达量除移栽后25 d外均高于淹水灌溉。稻田CH4通量与土壤mcrA表达量和总有机酸含量显著相关(P<0.01),相关系数分别为0.644和−0.348,土壤总有机酸含量与mcrA、sMMO表达量显著相关(P<0.05),相关系数分别为−0.240和0.197。【结论】垄宽80 cm垄作灌溉+返青期减氮处理降低了稻田CH4通量,土壤总有机酸含量和mcrA表达量显著影响稻田CH4通量,sMMO表达量可能间接影响稻田CH4通量。 展开更多
关键词 垄作灌溉 减氮施肥 有机酸 CH_(4)排放 mcra表达量 sMMO表达量
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鸟岛湿地土壤产甲烷菌群落对不同降水梯度的响应
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作者 王霞 陈克龙 +4 位作者 杜岩功 章妮 车子涵 暴涵 王恒生 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期284-296,共13页
产甲烷菌在湿地CH4排放过程中发挥着重要作用,降水格局的改变已经并将持续影响湿地生态系统的结构与功能,进而对湿地CH4排放过程产生影响。本研究以青海湖鸟岛湖滨湿地为研究对象,设置5个降水梯度处理,并利用mcrA扩增子测序技术对土壤... 产甲烷菌在湿地CH4排放过程中发挥着重要作用,降水格局的改变已经并将持续影响湿地生态系统的结构与功能,进而对湿地CH4排放过程产生影响。本研究以青海湖鸟岛湖滨湿地为研究对象,设置5个降水梯度处理,并利用mcrA扩增子测序技术对土壤产甲烷菌进行检测,探究鸟岛土壤产甲烷菌群落特征对不同降水梯度的响应。结果表明,鸟岛土壤产甲烷菌群落的优势菌目为甲烷微菌目(Methanomicrobiales)、甲烷八叠球菌目(Methanosarcinales)和甲烷杆菌目(Methanobacteriales)。FAPROTAX功能预测显示土壤中氢营养型产甲烷菌占优势,由此推测H_(2)/CO_(2)还原为鸟岛土壤CH_(4)产生的主要途径。LEfSe分析表明,5个降水梯度共存在31个差异菌群,以增雨50%处理下差异菌群数量最多,从目水平到种水平共有10个差异菌群。整体而言,鸟岛土壤产甲烷菌的群落多样性较为稳定,而群落结构对降水变化的响应较为敏感,部分菌群的相对丰度发生了显著变化(P <0.05)。研究结果可为预测降水变化对鸟岛湿地土壤碳循环的影响提供一定的参考依据。 展开更多
关键词 高寒湿地 碳循环 气候变化 产甲烷菌 微生物群落 mcra 青藏高原
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基于mcrA基因的厌氧颗粒污泥产甲烷菌群分析 被引量:3
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作者 刘春 李亮 +2 位作者 马俊科 吴根 杨景亮 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第4期1114-1119,共6页
基于mcrA基因对阿维菌素废水处理工业化UASB厌氧颗粒污泥中产甲烷菌群进行分析,并与基于16S rRNA基因的产甲烷菌群分析结果进行比较.结果表明,基于2种目标基因PCR产物的DGGE图谱存在差异,但根据图谱计算所得产甲烷菌群Shannon多样性指数... 基于mcrA基因对阿维菌素废水处理工业化UASB厌氧颗粒污泥中产甲烷菌群进行分析,并与基于16S rRNA基因的产甲烷菌群分析结果进行比较.结果表明,基于2种目标基因PCR产物的DGGE图谱存在差异,但根据图谱计算所得产甲烷菌群Shannon多样性指数、Margalef丰富度指数和Berger-Parker优势度指数没有差异,表明基于2种目标基因的产甲烷菌群多样性分析基本一致.基于不同目标基因的优势产甲烷菌群系统发育种属的分析结果大体相似,产甲烷杆菌目和产甲烷八叠球菌目是厌氧颗粒污泥样品中的优势产甲烷种群;同时,分析结果的差异表明2种目标基因的检测特异性不完全相同.基于2种目标基因的产甲烷菌群FISH杂交区域具有很高的一致性,但杂交区域面积有所差异.基于mcrA基因FISH检测的产甲烷菌群平均相对丰度为24.25%±6.47%,低于基于16S rRNA基因FISH检测结果(33.42%±2.34%).以上结果表明,基于mcrA基因与基于16S rRNA基因的的产甲污泥菌群分析结果具有较高的相似度,mcrA基因可以作为16S rRNA基因的替代目标基因. 展开更多
关键词 mcra基因 厌氧颗粒污泥 产甲烷菌群 PCR-DGGE FISH
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基于mcrA基因分析污泥干化芦苇床中产甲烷菌的多样性 被引量:4
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作者 王世全 崔玉波 +2 位作者 朴永哲 李爱民 王栋 《环境工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期3312-3316,共5页
基于mcr A基因探讨污泥干化芦苇床稳定污泥过程中的产甲烷菌多样性,利用PCR-DGGE技术分析不同时期、不同干化床污泥中产甲烷菌群落变化。DGGE图谱聚类分析发现,同一时期不同干化床污泥中产甲烷菌群落相似度较高;而同一干化床、不同时期... 基于mcr A基因探讨污泥干化芦苇床稳定污泥过程中的产甲烷菌多样性,利用PCR-DGGE技术分析不同时期、不同干化床污泥中产甲烷菌群落变化。DGGE图谱聚类分析发现,同一时期不同干化床污泥中产甲烷菌群落相似度较高;而同一干化床、不同时期污泥中的产甲烷菌群落有显著的差异。结果表明,污泥干化芦苇床中产甲烷菌的优势种属主要随芦苇生长时期和污泥稳定化时间的延长而改变。基于序列和系统发育树分析,干化床污泥样品中主要的产甲烷优势菌属是甲烷杆菌属(Methanobacterium),甲烷微菌属(Methanomicrobium),表明有通气结构的芦苇床更能有效抑制产甲烷菌的生长,进而有利于减少甲烷的排放。 展开更多
关键词 产甲烷菌 污泥干化芦苇床 DGGE mcra 多样性
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基于mcrA基因的沁水盆地煤层气田产甲烷菌群与途径分析 被引量:11
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作者 杨秀清 吴瑞薇 +1 位作者 韩作颖 王保玉 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期795-806,共12页
【目的】分析沁水盆地煤层气田不同煤层气井产出水样中产甲烷菌群和生物成因气的生成途径。【方法】以甲基辅酶M还原酶基因(mcr A)作为目标基因,采用454焦磷酸高通量测序方法,同时比对NCBI功能基因文库中的mcr A序列,分析不同煤层气井... 【目的】分析沁水盆地煤层气田不同煤层气井产出水样中产甲烷菌群和生物成因气的生成途径。【方法】以甲基辅酶M还原酶基因(mcr A)作为目标基因,采用454焦磷酸高通量测序方法,同时比对NCBI功能基因文库中的mcr A序列,分析不同煤层气井产出水中的产甲烷菌群。【结果】高通量测序表明,5个出水样产甲烷菌群OTUs(Operational taxonomic units)数为64–157个,共有的为22个,各占样品总数14%-34%;样品共检测到4种已知菌属,即甲烷杆菌属(Methanobacterium)、甲烷微菌属(Methanomicrobium)、甲烷叶菌属(Methanolobus)和甲烷螺菌属(Methanospirillum),优势菌属均为Methanobacterium。系统发育分析表明,未明确地位的菌属主要与Methanobacterium、Methanomicrobium、产甲烷球菌属(Methanococcus)和甲烷囊菌属(Methanoculleus)有较近的亲缘关系。5个样品中菌属所占比例不同,检测到的菌属类别大致相同。所有检测样品生物成因煤层气(Coalbed methane,CBM)的生成途径主要为氢营养型产甲烷途径。【结论】沁水盆地不同煤层气田产甲烷菌群菌种差异比较大,但生物成因气生成途径基本相似,与地理位置和煤藏条件没有相关性。 展开更多
关键词 沁水盆地 煤层气(CBM) mcra基因 高通量测序 氢营养型
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崇明东滩湿地CH_(4)与N_(2)O双消减的耦合过程研究
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作者 陈汉 饶旭东 +2 位作者 滕钊军 张耀鸿 贾仲君 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2604-2613,共10页
N_(2)O还原驱动的CH_(4)厌氧氧化作用(AOM)是湿地系统温室气体双减排的一种新途径,而基于滨海围垦开发的稻田利用方式对该途径的影响效应尚不清楚。本研究选取长江入海口崇明东滩湿地的自然滩涂(光滩湿地和芦苇湿地)和围垦稻田(围垦种稻... N_(2)O还原驱动的CH_(4)厌氧氧化作用(AOM)是湿地系统温室气体双减排的一种新途径,而基于滨海围垦开发的稻田利用方式对该途径的影响效应尚不清楚。本研究选取长江入海口崇明东滩湿地的自然滩涂(光滩湿地和芦苇湿地)和围垦稻田(围垦种稻19 a和86 a)为研究对象,设置3个试验处理(^(13)CH_(4),^(13)CH_(4)+N_(2)O,N_(2)O)进行室内厌氧培养。采用稳定性同位素标记结合定量PCR等手段,分析不同湿地土壤的N_(2)O型CH_(4)厌氧氧化速率及其固碳潜力,研究其相关功能基因的数量特征。结果发现,围垦稻田土壤中N_(2)O驱动的AOM速率为6.10^(7).51 ng·g^(-1)·d^(-1),显著高于自然滩涂湿地。供试土壤N_(2)O驱动CH_(4)厌氧氧化的^(13)C-SOC固碳量为18.1~49.4 nmol·g^(-1),表明该过程具有较强的固碳潜力。^(13)CH_(4)+N_(2)O添加条件下,供试土壤中硝酸盐型和硫酸盐型CH_(4)厌氧氧化古菌的mcr A功能基因丰度分别为(1.08~2.29)×10^(7) copies·g^(-1)和(2.55~14.30)×10^(7)copies·g^(-1),比只添加^(13)CH_(4)处理分别高出25.8%~64.1%和41.0%~50.1%;相反,亚硝酸盐型CH_(4)厌氧氧化细菌的pmo A功能基因丰度则无明显变化。相关性分析发现N_(2)O驱动的AOM速率与nos ZⅡ基因和硝酸盐型mcr A基因均呈显著正相关,表明nos ZⅡ型N_(2)O还原微生物和硝酸盐型CH_(4)厌氧氧化古菌可能共同参与了N_(2)O驱动的CH_(4)厌氧氧化过程,而硫酸盐型CH_(4)厌氧氧化古菌则在自然滩涂湿地中发挥着重要作用。研究表明,围垦植稻在一定程度上促进了N_(2)O驱动的CH_(4)厌氧氧化作用。 展开更多
关键词 滨海湿地 CH_(4)厌氧氧化 N_(2)O还原 耦合反应 mcra基因 nosZⅡ基因
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模拟增温对青海湖高寒湿地产甲烷菌群落特征的影响
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作者 章妮 陈克龙 +1 位作者 祁闻 崔博亮 《生态科学》 CSCD 2023年第4期163-170,共8页
高寒湿地生态系统作为重要的甲烷排放源,对全球气候变暖有着较大的贡献率。湿地的产甲烷菌群落在温室气体排放中扮演着重要角色,探究高寒湿地产甲烷菌群落结构及多样性对温度升高的响应十分重要。以青海湖高寒湿地为研究对象,采用高通... 高寒湿地生态系统作为重要的甲烷排放源,对全球气候变暖有着较大的贡献率。湿地的产甲烷菌群落在温室气体排放中扮演着重要角色,探究高寒湿地产甲烷菌群落结构及多样性对温度升高的响应十分重要。以青海湖高寒湿地为研究对象,采用高通量测序方法开展研究。基于97%的序列相似度聚类,10个土壤样品的总OTU数量为602个,对照与增温处理样品的特有OTU数分别为30和43。与对照相比,增温处理并未显著改变高寒湿地产甲烷菌群落的多样性指数及目水平优势菌群(P>0.05)。高寒湿地产甲烷菌均为广古菌门,目水平以甲烷微菌目(Methanomicrobiales,67.35%)、八叠球菌目(Methanosarcinales,14.14%)、甲烷杆菌目(Methanobacteriales,10.21%)为优势菌群。Lefse分析表明,增温后Methanomassiliicoccus相对丰度显著降低、Candidatus Methanogranum相对丰度显著升高。整体而言,青海湖高寒湿地产甲烷菌群落组成及多样性较为稳定,温度升高对产甲烷菌群落影响较小,Methanomassiliicoccus和Candidatus Methanogranum对温度变化较为敏感。 展开更多
关键词 模拟增温 青海湖 高寒湿地 产甲烷菌 mcra
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大洋表层沉积物中甲烷代谢古菌群落的组成及分布特征
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作者 刘皓 许秋彤 +1 位作者 王春生 荆红梅 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期80-88,共9页
海洋沉积物中的甲烷代谢微生物是甲烷循环的关键参与者,其代谢过程对大气甲烷浓度及全球气候变化具有显著影响,研究其在全球大洋沉积物中的组成及分布特征是探究微生物介导甲烷循环的基础。采用焦磷酸454高通量测序测定甲烷代谢保守功... 海洋沉积物中的甲烷代谢微生物是甲烷循环的关键参与者,其代谢过程对大气甲烷浓度及全球气候变化具有显著影响,研究其在全球大洋沉积物中的组成及分布特征是探究微生物介导甲烷循环的基础。采用焦磷酸454高通量测序测定甲烷代谢保守功能基因mcrA(Methyl coenzyme–M reductase A)分析全球大洋沉积物中甲烷代谢微生物群落的组成和多样性;结合荧光实时定量PCR技术检测了古菌和甲烷代谢古菌的丰度分布特征。与其他海洋生境对比,大洋沉积物中甲烷代谢古菌群落结构单一,大西洋和印度洋的α多样性指数显著高于太平洋(p<0.05)。在大洋沉积物样品中鉴定到3个目的甲烷代谢古菌,即甲烷杆菌目(Methanobacteriales)、甲烷八叠球菌目(Methanosarcinales)和甲烷微菌目(Methanomicrobiales),其中甲烷微菌目占绝对优势,并主要由一簇未知类群(暂名Oceanic Sediments Dominant group,OSD group)组成。大洋沉积物的古菌16S rRNA基因丰度(湿重,下同)平均为8.81×10^(6) copies/g,大西洋的低于印度洋和太平洋;马里亚纳海沟基因丰度低于南海北部,且随着采样深度增加而呈降低趋势。大洋沉积物的mcrA基因丰度为1.38×10^(3)~8.25×10^(4) copies/g。基因丰度大西洋最高,太平洋次之,印度洋最低;马里亚纳海沟略高于南海。本研究发现,相较于冷泉、热液、近海河口等海洋生境,大洋沉积物中甲烷代谢古菌丰度低且群落结构单一,不同海区样品间具有极高的相似性;同时发现OSD group是全球大洋沉积物样品的绝对优势类群,其与已知类群序列亲缘关系均较远,分类进化地位尚不明晰,值得进一步研究。 展开更多
关键词 大洋表层沉积物 甲烷代谢古菌 mcra基因 高通量测序 实时定量PCR
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湿地松和马尾松人工林土壤甲烷代谢微生物群落的结构特征 被引量:8
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作者 王芸 郑华 +4 位作者 陈法霖 曾静 陈圣宾 Jizhong Zhou , 欧阳志云 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期2458-2465,共8页
土壤甲烷代谢微生物影响甲烷的产生和氧化,然而关于林型对土壤中甲烷代谢微生物群落结构影响的研究较少。采用基因芯片GeoChip 3.0研究了湿地松人工林和马尾松人工林土壤甲烷代谢微生物群落结构特征。结果如下,(1)两种林型的甲烷代谢微... 土壤甲烷代谢微生物影响甲烷的产生和氧化,然而关于林型对土壤中甲烷代谢微生物群落结构影响的研究较少。采用基因芯片GeoChip 3.0研究了湿地松人工林和马尾松人工林土壤甲烷代谢微生物群落结构特征。结果如下,(1)两种林型的甲烷代谢微生物群落结构存在极显著差异(P=0.008),林型能解释其34.9%的变异;(2)产甲烷菌(包含甲基辅酶M还原α亚基基因mcrA的微生物)的优势菌群发生了变化,湿地松人工林的的优势菌为Methanocorpusculum labreanum Z,马尾松人工林的优势菌群除Methanocorpusculum labreanum Z外,还包括产甲烷古菌和Methanosarcina mazei Gol;(3)甲烷营养菌(包含甲烷单加氧酶基因pmoA基因的微生物)的优势菌为Ⅱ型,有3种不可培养细菌只在湿地松人工林检测到,在马尾松人工林中未检测到;(4)mcrA基因丰度或同源基因数量与土壤容重正相关,与土壤粘粒含量呈显著负相关;pmoA基因信号强度或多样性指数与土壤全碳含量、全磷含量和速效氮含量显著正相关。总之,相比本地种马尾松人工林,引进种湿地松人工林的土壤甲烷代谢微生物群落结构发生了显著变化。 展开更多
关键词 功能基因芯片(GeoChip 3.0) mcra基因 pmoA基因 湿地松人工林 马尾松人工林
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应用RFLP和DGGE技术对沼气池中产甲烷菌多样性的研究 被引量:10
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作者 徐彦胜 阮志勇 +1 位作者 刘小飞 胡国全 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第4期1319-1324,共6页
利用PCR-RFLP和PCR-DGGE技术对处于正常运行阶段的4口农村户用沼气池进行研究,考查其中产甲烷菌的种群结构并对其进行系统发育分析。特异性地扩增产甲烷菌mcrA片段和16S rDNA序列分别进行RFLP分析和DGGE分析。对RFLP得到的每一个独特的O... 利用PCR-RFLP和PCR-DGGE技术对处于正常运行阶段的4口农村户用沼气池进行研究,考查其中产甲烷菌的种群结构并对其进行系统发育分析。特异性地扩增产甲烷菌mcrA片段和16S rDNA序列分别进行RFLP分析和DGGE分析。对RFLP得到的每一个独特的OTU(operational taxonomic units)和DGGE中的优势条带进行测序及序列分析。结果表明,不同发酵原料的沼气池中产甲烷菌的优势类群存在差异性,但又有一定的相似性。同时研究结果显示,2种不同实验方法得出的结论有着某些一致性。 展开更多
关键词 产甲烷菌 群落多态性 mcra克隆文库 RFLP DGGE
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人工湿地植物种类及多样性对甲烷释放及功能基因丰度的影响 被引量:5
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作者 孙红英 辛全伟 +5 位作者 林兴生 罗海凌 林辉 严少娟 刘文莉 兰思仁 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第22期8565-8574,共10页
为了研究人工湿地处理中碳/氮水平的废水时植物种类及多样性对系统甲烷释放及功能基因丰度的影响,我们构建了实验尺度的人工湿地微宇宙实验系统。选取千屈菜(Lythrum salicaria L.)和海寿花(Pontederia cordata L.)2种人工湿地常用、景... 为了研究人工湿地处理中碳/氮水平的废水时植物种类及多样性对系统甲烷释放及功能基因丰度的影响,我们构建了实验尺度的人工湿地微宇宙实验系统。选取千屈菜(Lythrum salicaria L.)和海寿花(Pontederia cordata L.)2种人工湿地常用、景观效果好的植物,在系统中配置了单种处理和两物种混种处理。结果表明:千屈菜与海寿花混种系统的甲烷释放强度(8.78 mg CH4 m-2 d-1)高于两物种单种系统的平均值(6.97 mg CH4 m-2 d-1)(P<0.001),同甲烷释放一样,混种系统的mcrA基因绝对丰度(977541.6 copies/g dw soil)也高于两物种单种系统的平均值(585146.8 copies/g dw soil),但混种系统的pmoA基因绝对丰度(326956.6 copies/g dw soil)低于两物种单种系统的平均值(1043616.0 copies/g dw soil)(P<0.001)。此外,混种系统的微生物量、植物生物量高于两物种单种系统的平均值(P<0.01),但出水铵态氮浓度低于两物种单种系统的平均值(P<0.05),出水总有机碳浓度和硝态氮浓度在单混种系统间无显著差异(P>0.05)。千屈菜单种系统和海寿花单种系统间的甲烷释放强度、pmoA基因绝对丰度、微生物量、植物生物量和出水铵态氮浓度存在显著差异(P<0.05),但mcrA基因绝对丰度、出水总有机碳和硝态氮浓度无显著差异(P>0.05)。为了达到人工湿地的高净化效率,需要将千屈菜与海寿花混合种植,但混合种植强化甲烷释放。通过植物种类和丰富度对各指标变异的解释度(ω2)分析发现,植物种类对甲烷释放、pmoA基因绝对丰度、出水铵态氮的影响大于植物丰富度,但对mcrA基因绝对丰度的影响小于植物丰富度。 展开更多
关键词 mcra基因 pmoA基因 生态系统功能 生物多样性 温室气体
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深海热液喷口金属硫化物中甲烷菌的多样性研究 被引量:2
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作者 王淑芳 陈月 钱媛媛 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期31-38,共8页
对两个来自太平洋洋脊胡安·德富卡的两个热液烟囱的金属硫化物4136.2和4148-B1进行甲烷菌甲基辅酶M还原酶的编码基因mcrA的序列扩增,构建克隆文库并进行分子进化分析。结果表明在这个甲烷富集的热液喷口周围含有丰富的甲烷产生... 对两个来自太平洋洋脊胡安·德富卡的两个热液烟囱的金属硫化物4136.2和4148-B1进行甲烷菌甲基辅酶M还原酶的编码基因mcrA的序列扩增,构建克隆文库并进行分子进化分析。结果表明在这个甲烷富集的热液喷口周围含有丰富的甲烷产生菌,没有任何甲烷氧化菌存在。两个硫化物样品的甲烷产生菌种类完全不同。在4136—2硫化物中的甲烷产生茵郝与热液口的高温环境有关系,主要属于甲烷球菌目的甲烷暖球菌(Methanocaldococcus),少部分属于甲烷火茵目甲烷嗜高热菌属的坎氏甲烷嗜高热菌(Methanopyruskandleri)。与这两个属的可分离菌株的氨基酸同源性为89%-97%,核苷酸同源性高达92%~100%。4148-B1硫化物中发现的一类疑似甲基辅酶M还原酶的编码序列,它们与已知的甲烷菌mcrA序列核苷酸同源性为69%~72%,氨基酸同源性仅为43%~47%。这可能是由于4148.B1来自于正在喷发的超高温热液喷口相关。由于与已发表的甲烷菌克隆子或菌株同源性较低,有可能是热液口特有的以前未发现的甲烷茵。 展开更多
关键词 胡安·德富卡 金属硫化物 甲烷产生菌 mcra
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不同饲养条件下内蒙古绒山羊瘤胃甲烷菌组成的研究 被引量:4
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作者 李长青 金海 栗原光规 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第5期228-233,共6页
为了解天然放牧和舍饲条件下内蒙古绒山羊瘤胃中甲烷菌的种群组成。选取甲烷菌mcrA基因的特异性引物序列,利用PCR技术对从瘤胃液中抽提的细菌总DNA进行扩增,并建立了甲烷菌特异性的mcrA基因文库。用限制性内切酶Taq I对该文库特异性片... 为了解天然放牧和舍饲条件下内蒙古绒山羊瘤胃中甲烷菌的种群组成。选取甲烷菌mcrA基因的特异性引物序列,利用PCR技术对从瘤胃液中抽提的细菌总DNA进行扩增,并建立了甲烷菌特异性的mcrA基因文库。用限制性内切酶Taq I对该文库特异性片段进行了限制性酶切片断长度多态性分析(Restriction fragment lengthpolymor-phism,RFLP)。放牧和舍饲内蒙古绒山羊瘤胃中甲烷菌的mcrA基因片段被分成6个不同的RFLP类型,并由此建立了DNA指纹图谱;系统发育树分析表明,其属于甲烷杆菌目和甲烷微菌目,且绒山羊瘤胃中的甲烷菌大部分属于甲烷短杆菌。放牧绒山羊瘤胃内甲烷菌种类比舍饲绒山羊更加丰富,6种甲烷菌所占比例均较高,而舍饲绒山羊只有两种优势菌比例较高,其他几种所占比例极低。 展开更多
关键词 甲烷菌 mcra基因 瘤胃液 绒山羊
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Ni_3Al基合金IC6的NiCrAlY(Si)包覆型涂层研究 被引量:1
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作者 韩雅芳 纪燕玲 廖鸿 《材料工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第5期3-6,共4页
研究了磁控溅射 Ni Cr Al Y( Si)包覆型涂层对 Ni3Al基合金 IC6的抗氧化性能及力学性能的影响 ,同时也研究了该涂层的微观组织及其稳定性。结果表明 ,研制的 Ni Cr Al Y( Si)物理沉积包覆型涂层是适合于 IC6合金及其使用条件的防护涂层。
关键词 IC6合金 mcra1Y涂层 磁控溅射 包覆型涂层
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给排水安装工程用低塑性聚氯乙烯管材制备研究 被引量:2
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作者 王飞腾 《合成材料老化与应用》 2021年第6期69-71,共3页
基于经济、安全、技术视角,给排水安装工程领域逐步扩大了聚氯乙烯管材的应用,然而聚氯乙烯管材自身的热稳定性与韧性并不好,需进行改性造粒处理,才可投入实践应用。因此,为进一步优化聚氯乙烯管材性能,针对给排水系统,基于增添增强剂M... 基于经济、安全、技术视角,给排水安装工程领域逐步扩大了聚氯乙烯管材的应用,然而聚氯乙烯管材自身的热稳定性与韧性并不好,需进行改性造粒处理,才可投入实践应用。因此,为进一步优化聚氯乙烯管材性能,针对给排水系统,基于增添增强剂MCRA制备了低塑性聚氯乙烯管材UPVC,并对其物理性能、表观性能、流变性能进行了测试分析。结果表明,增强剂MCRA/聚氯乙烯管材UPVC的相容性与分散性良好,衔接界面未出现组织缺陷,断口位置表现为韧性断裂,添加增强剂可优化聚氯乙烯管材增韧补强效果,并且材料表观性能呈现出协同效应。 展开更多
关键词 给排水系统 安装工程 聚氯乙烯管材 mcra 活性钙
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