针刺对SAMP8小鼠海马GLUT3、MCT2、MCT4表达的影响

目的:观察针刺对SAMP8小鼠学习记忆能力和海马组织能量底物转运蛋白GLUT3、MCT2、MCT4表达的影响,探讨针刺促进学习记忆能力的能量底物转运机制。方法:13只SAMP8小鼠随机分为模型组和针刺组,7只同月龄SAMR1小鼠作为对照。针刺组选择"百会"穴、"涌泉"穴进行针刺,1次/天,5次1疗程,共治疗8个疗程。采用Morris水迷宫对学习记忆能力进行评价,Western Blot检测小鼠海马组织GLUT3、MCT2、MCT4蛋白表达水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠逃避潜伏期显著延长(P<0. 01),穿越平台次数减少(P<0. 05);与模型组相比,针刺组小鼠第1~2天逃避潜伏期改变无统计学差异(P>0. 05),第3、4、5天逃避潜伏期缩短(P<0. 05),穿越平台次数增加(P<0. 05)。与对照组相比,模型组小鼠海马组织GLUT3、MCT2蛋白表达显著下降(P<0. 01),MCT4蛋白表达下降(P<0. 05);与模型组相比,针刺组小鼠海马组织GLUT3、MCT2蛋白表达显著升高(P<0. 01),MCT4蛋白表达变化不具有统计学意义(P>0. 05)。结论:针刺可以提升SAMP8小鼠学习记忆能力,对海马组织能量底物转运蛋白GLUT3、MCT2具有提高作用。

MCT2在福尔马林致痛模型大鼠大脑皮质中的表达变化

目的观察疼痛应激时,大脑第一躯体感觉皮质后肢区(primary somatosensory cortex hindlimb region,S1HL)神经元单羧酸转运蛋2(monocarboxylate transporters 2,MCT2)的表达变化,以探讨MCT2参与疼痛调制的机制。方法应用免疫组织化学(IHC)、Western blot和计算机图像分析法检测福尔马林致痛大鼠模型大脑S1HL内MCT2的表达变化。结果与正常组相比,模型鼠S1HL内MCT2阳性神经元的数量及IOD在1 h时增加,3 d时达高峰,到7 d时有所下降,但仍然高于正常水平(P<0.05)。Western blot结果显示,MCT2蛋白表达变化与MCT2阳性神经元的数量和IOD变化趋势一致。结论在疼痛应激状态下,大脑S1HL神经元MCT2的表达增强,提示MCT2参与了疼痛的产生、传递和调制过程。

针刺对TBI大鼠健侧海马MCT2、MCT4表达的影响

目的观察针刺对TBI大鼠健侧海马组织单羧酸转运蛋白MCT2、MCT4表达的影响。方法选取30只SD大鼠随机分为空白组(10只)、模型组(10只)和治疗组(10只),模型组和治疗组大鼠采取Feeney式自由落体撞击法制备TBI大鼠模型,治疗组在大鼠造模12 h后行针刺治疗,取T会、人中、内关(左侧)、足三里(左侧)穴进行针刺,1次/日,每次20min,治疗10天。模型组和空白组大鼠正常喂养,不予针刺。采用神经功能评价、平衡功能评价、行走功能评价以及肢体回缩力测试对各组大鼠行为学进行评价。Western Blot检测大鼠健侧海马组织MCT2、MCT4蛋白表达水平。结果模型组较空白组在神经、平衡、行走功能方面有明显差异(P<0.01,<0.05);与模型组比较,针刺治疗后大鼠的神经功能评分在术后第10天有明显的差异(P<0.05);与空白组比较,模型组健倒脑纽织中MCT2、MCT4在术后均升高(P<0.01);与模型组相比,针刺组大鼠健侧海马组织MCT2、MCT4表达均下调(P<0.01)。结论针刺可以改善TBI大鼠行为学能力,其作用机理可能与健侧海马组织能量底物转运蛋白MCT2、MCT4含量表达下调有关。

针刺对颅脑损伤大鼠海马单羧酸转运蛋白表达的影响

目的观察针刺对颅脑损伤(TBI)大鼠海马组织单羧酸转运蛋白MCT2、MCT4表达的影响,探讨针刺促TBI大鼠康复的海马能量代谢机制。方法33只SD大鼠随机分为模型组11只,针刺组12只,空白组10只。模型组和治疗组采用Feeney自由落体撞击法制备TBI模型大鼠,造模12 h后治疗组进行针刺干预,选取"人中""百会""内关""足三里"进行针刺,1次/d,共治疗10次。采用神经功能评价、行走功能评价、平衡功能评价以及肢体回缩力测试对各组大鼠进行行为学评价,Western blot和免疫组化方法检测大鼠海马组织MCT2、MCT4蛋白表达。结果与空白组相比,模型组大鼠神经功能显著下降(P<0.01),平衡功能评分显著升高(P<0.01),行走耗时显著延长(P<0.01);针刺治疗后,针刺组大鼠神经功能改善不具有统计学意义(P>0.05),平衡功能和行走功能均得到显著提升(P<0.05,P<0.05)。Western blot检测显示,与空白组相比,模型组大鼠海马组织MCT2、MCT4蛋白表达显著降低(P<0.01),针刺治疗后,MCT2、MCT4蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05);免疫组化检测显示,与空白组相比,模型组大鼠海马组织MCT2、MCT4蛋白表达显著降低(P<0.01),针刺治疗后,针刺组大鼠MCT2蛋白表达显著升高(P<0.05),MCT4蛋白表达升高不具有统计学意义(P>0.05)。结论针刺可以改善TBI大鼠平衡和行走功能,促进其神经功能康复,可能与促进海马组织MCT2、MCT4表达,调控神经元能量转运代谢有关。

一氧化碳中毒致神经元能量代谢障碍探究

目的探讨单羧酸转运蛋白2(MCT2)转运功能对一氧化碳中毒后神经元能量代谢的影响。方法外源性一氧化碳释放分子2(CORM-2)诱导PC12细胞制备体外一氧化碳中毒神经元模型,分为空白对照组、50μM CORM-2组、100μM CORM-2组、200μM CORM-2组和MCT2抑制剂的AR-C155858组。通过倒置相差显微镜观察各组细胞的形态学变化,采用乳酸盐检测试剂盒检测各组PC12细胞内乳酸盐浓度变化,Western blot检测MCT2表达情况。结果一氧化碳中毒后PC12细胞内乳酸盐浓度明显高于未给予一氧化碳的对照组(P<0.05),接近MCT2抑制剂AR-C155858组(P>0.05),一氧化碳中毒后MCT2数量变化不明显(P>0.05)。结论一氧化碳中毒导致乳酸大量堆积,与MCT2转运功能障碍有关但不影响其数量,可能与一氧化碳中毒后MCT2化学结构发生改变有关。

单羧酸转运蛋白2在急性心力衰竭模型大鼠大脑皮质中的表达变化

目的观察急性心力衰竭（acute heart failure,AHF）时,大脑皮质区（cerebral cortex）神经元单羧酸转运蛋白2（monocarboxylate transporters2,MCT2）的表达变化,以探讨MCT2参与大脑缺血缺氧时能量代偿的机制。方法静脉注射1.5%戊巴比妥钠制作AHF大鼠模型;通过记录左室内压峰值（LVSP）和左室内压最大上升速率（＋dp/dt max）变化曲线,以判断模型是否成功;应用免疫组化（IHC）和免疫印迹法（WB）检测AHF模型大鼠大脑皮质区MCT2的表达变化。结果与正常组相比,模型大鼠大脑皮质区MCT2阳性神经元的数量及积分光密度（integral optical density,IOD）在5 min时明显升高,到10 min时有所下降,但仍然高于正常水平,具有统计学意义（P〈0.05）;而假手术组与正常组相比无统计学意义（P〉0.05）。WB结果与IHC变化趋势一致。结论在AHF状态下,大脑皮质神经元MCT2的表达增强,提示MCT2参与了大脑缺血缺氧时进行自我代偿的过程。