MDCKII/MDCKII-BCRP细胞模型用于治疗胎儿快速性心律失常系列药物的跨胎盘转运机制的研究

研究治疗胎儿快速性心律失常的一系列药物在过表达乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)的马丁达比犬肾上皮细胞系MDCKII-BCRP单层细胞模型中的跨膜转运机制,筛选BCRP底物。利用MDCKII-BCRP和MDCKII单层细胞模型研究索他洛尔(sotalol)、普萘洛尔(propranolol)、普罗帕酮(propafenone)、普鲁卡因胺(procainamide)及氟卡尼(flecainide)的双向转运特性,采用HPLC或化学发光仪测定药物含量,计算其表观渗透系数(Papp)、外排率(RE)和净外排率(Rnet),将Rnet>1.5的药物进行细胞蓄积实验,考察药物浓度和BCRP抑制剂槲皮素对该药细胞内蓄积的影响。所选择的药物中,索他洛尔、普萘洛尔、普罗帕酮和普鲁卡因胺在两种细胞单层顶侧(apical,A)→基底侧(basolateral,B)的转运与B→A的转运之间无显著性差异,Rnet均小于1.5;氟卡尼浓度为20和5μmol·L-1时,Rnet分别为1.6和1.9。细胞蓄积实验证实氟卡尼在MDCKII、MDCKIIBCRP细胞内蓄积具有浓度依赖性,且MDCKII-BCRP细胞内的蓄积量明显低于MDCKII细胞;当同时在MDCKII-BCRP细胞内加入50μmol·L-1槲皮素时,氟卡尼在细胞中的蓄积量显著增加(P<0.05)。结果初步提示,索他洛尔、普萘洛尔、普罗帕酮和普鲁卡因胺可能不是BCRP底物;而氟卡尼可能是BCRP底物,因此母体用该药治疗胎儿快速性心律失常时,母体胎盘滋养层细胞膜上表达的BCRP极有可能会介导其外排,从而显著影响治疗效果。

达泊西汀在MDCKII/MDCKII-BCRP细胞模型上的跨膜转运机制

目的研究达泊西汀在MDCKII/MDCKII-BCRP单层细胞模型中的跨膜转运机制。方法应用MDCKII和MDCKIIBCRP单层细胞模型,在改变转运温度、达泊西汀转运浓度以及是否存在抑制剂的条件下,比较达泊西汀的表观渗透系数（P_（app））、外排率（ER）、净外排率（NER）。结果随着温度下降以及人乳腺癌耐药蛋白（BCRP）抑制剂的加入,达泊西汀的NER值从2. 1分别降到1. 0、1. 1;4～16μmol·L（-1）达泊西汀给药后,其NER值先高于1. 5,后降至1. 5以下。结论达泊西汀是BCRP的底物,应注意达泊西汀与其他BCRP抑制剂共服用可能会产生药物相互作用,增加其不良反应发生的风险。