胃肠外营养相关性胆汁淤积症早产儿血MDR3基因mRNA表达

目的研究MDR3基因表达与早产儿胃肠外营养相关性胆汁淤积症(PNAC)发病的相关性。方法将2011年6月至2017年11月收治的行胃肠外营养超过14 d且未合并PNAC的早产儿80例为非PNAC组,患有PNAC的早产儿76例为PNAC组,所有研究对象均分别于生后1、14、30、60、90 d动态观察血清肝胆生化(丙氨酸氨基转移酶、总胆红素、直接胆红素、总胆汁酸和γ-谷氨酰转肽酶)及纤维化指标(透明质酸、层黏连蛋白、Ⅲ型前胶原N端肽、Ⅳ型胶原)变化,以及临床表现;采用实时荧光定量PCR法检测两组MDR3 mRNA水平的相对表达量;分析MDR3 mRNA表达水平与血清肝胆生化指标的相关性。结果 PNAC组早产儿血清肝胆生化及纤维化指标水平在生后14 d上升,至生后30 d达最高峰,生后60 d下降,且PNAC组生后第14、30、60、90天的血清肝胆生化及纤维化指标均高于非PNAC组(P<0.05)。PNAC组早产儿外周血细胞MDR3 mRNA的相对表达水平高于非PNAC组(P<0.05)。PNAC组患儿外周血细胞MDR3 mRNA的相对表达量与血清肝胆生化指标水平(丙氨酸氨基转移酶、总胆红素、直接胆红素、总胆汁酸和γ-谷氨酰转肽酶)均呈负相关(P<0.001)。结论 MDR3 mRNA高表达可能与早产儿PNAC发病有关,但具体机制仍需进一步研究探讨。

妊娠期肝内胆汁淤积症中MDR3基因表达的研究

目的:探讨MDR3基因mRNA的表达与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病的关系。方法:从36例ICP患者和38例正常孕妇外周血标本中抽提总RNA,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增MDR3基因和β-Actin基因,采用凝胶分析软件对RT-PCR产物进行半定量分析,比较两组间差异。结果:MDR3基因mRNA的表达在ICP患者和正常孕妇组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MDR3基因mRNA的表达异常可能与中国皖南地区ICP发生无关或关联很小,中国人ICP的发生可能存在其他的发病机制。

妊娠期肝内胆汁淤积症MDR3基因突变的研究

目的:了解妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者MDR3基因外显子突变的分布,探讨此基因在ICP发病机制中的作用。方法:收集30例ICP孕妇,检测其肝功能、血清总胆汁酸(TBA)、γ-谷胺酰转肽酶(γ-GT)水平,同时用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术分析ICP患者MDR3基因5个外显子的突变情况。结果:4例ICP孕妇血清γ-GT升高。所有ICP患者及60例正常妊娠妇女PCR均扩增出目的片段,但SSCP分析没有发现异常迁移条带。结论:在MDR3基因突变频率较高的5个外显子中,本地区ICP孕妇未发现有突变。MDR3基因突变可能不是本地区ICP患者发病的主要原因。

云南佤族、傣族妊娠期肝内胆汁淤积症患者MDR3基因外显子14和23无突变

目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregancy,ICP)患者MDR3基因外显子14和23突变与ICP的关系。方法从云南临沧地区29例佤族、傣族ICP患者及32例正常孕妇的外周血中提取DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增MDR3基因外显子14和23,再对PCR产物进行DNA测序分析。结果所有ICP患者及对照组外周血DNA经PCR均扩增出目的片段,外显子14和23均未发现有突变。结论云南临沧佤族、傣族ICP的发生可能与MDR3基因外显子14和23突变无关。

Muc-5ac和MDR3在胆囊结石形成中的作用

目的探讨黏蛋白Muc-5ac基因和多重耐药因子3(MDR3)在胆囊结石形成中的作用及其相互关系。方法应用免疫组织化学法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测Muc-5ac和MDR3在36例胆囊结石、20例胆囊炎和12例正常胆囊的胆囊黏膜和肝组织中的表达。结果 Muc-5ac黏蛋白在胆囊结石和胆囊炎的胆囊黏膜中表达的阳性率分别为66.7%(24/36)和40%(8/20),显著高于正常对照组33.3%(4/12)(P<0.01),Muc-5ac黏蛋白表达的阳性率在胆囊结石组又显著高于胆囊炎组(66.7%vs 40%)(P<0.05)。胆囊结石的肝组织中MDR3 mRNA的表达量(1.14±0.31)极显著低于胆囊炎的肝组织(1.89±0.83)和正常肝组织(1.97±0.71)(P<0.01),但MDR3 mRNA的表达量在胆囊炎的肝组织中与正常肝组织之间无显著性差异(1.89±0.83 vs 1.97±0.71)(P>0.05)。胆囊结石的胆囊黏膜中,Muc-5ac蛋白阳性表达者,其肝组织中MDR3 mRNA表达量明显减少,与Muc-5ac蛋白阴性表达组相比,MDR3 mRNA的表达量在两组间差异极显著(0.82±0.17 vs 1.45±0.24)(P<0.01)。结论 Muc-5ac基因参与了胆囊结石形成的过程。在胆囊结石形成的后期阶段,MDR3与Muc-5ac基因相互作用,共同影响胆囊结石的形成。

MDR3基因在妊娠期肝内胆汁淤积症中的研究及思考

妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)病因复杂,目前研究认为遗传因素在其发病机制中起着相当关键的作用。其中MDR3基因与ICP的发病尤为密切。文章从哲学的角度对MDR3基因的发现过程以及未来的发展前景展开了综合分析。

肝细胞癌、肝内胆管细胞癌与肝样癌的鉴别中BSEP和MDR3是一种非常有用的免疫组化标志物

作者分析两种肝细胞特异性转运蛋白：胆汁盐输出蛋白（BSEP）和多药耐药蛋白3（MDR3）在肝细胞癌（n=54）、肝内胆管细胞癌（n=34）、混合性肝细胞和胆管细胞癌（n=23）及起源于肝外器官的肝样癌（rt=27）中免疫组化中的表达情况，并比较它们与精氨酸酶1（ARGl）、HepPar-1在这些肿瘤中的诊断价值。

妊娠期肝内胆汁淤积症患者与新生儿MDR3基因突变分析

目的评价中国人群中多药耐药蛋白3(MDR3)基因在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病机制中的遗传作用。方法对65对患有ICP的产妇与女性新生儿抽取外周血DNA进行聚合酶链反应扩增MDR3的14、15、16号外显子进行突变分析。结果65对ICP患者母女MDR3基因的14、15、16号外显子未发现新的突变。结论MDR3基因的14、15、6号外显子突变可能不是中国人群ICP发病的主要原因,但有待于寻找MDR3其他位点的突变或扩大检测样本数量的进一步研究。

妊娠肝内胆汁淤积症患者MDR3基因突变的研究

目的探讨MDR3基因突变在妊娠肝内胆汁淤积症中的作用机制。方法取2009年1月—2011年12月本院收治的60例妊娠期肝内胆汁淤积症患者作为ICP组,同期住院的无妊娠疾病、并发症的正常孕妇60例作为对照组,检测其生化指标和MDR3基因的突变检测,对结果进行统计学分析。结果 ICP组和对照组的生化检测指标、PCR扩增产物无明显差异;对MDR3基因的9、12、16号外显子进行突变检测,ICP组的MDR3基因的9、12、16号外显子扩增产物无任何异常条带。结论本次研究针对中国人群,对MDR3基因的9、12、16号外显子进行突变检测,未能找出突变位点;主要原因为选择的样本量过小、检测方法的局限性、检测区域的局限性等,需要进一步研究。

MDR3基因错义突变与妊娠肝内胆汁淤积症相关性

目的:探讨MDR3基因外显子14错义突变与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病的关系。方法:运用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对60例ICP患者(ICP组)和60例正常孕妇(对照组)MDR3基因外显子14和sexAⅠ酶切多态性进行分析。结果:ICP组MDR3基因外显子14基因型G/G、G/A、A/A频率分别为83.33%、16.67%、0%,对照组分别为100%、0%、0%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);ICP组等位基因G、A频率分别为91.67%、8.33%,对照组分别为100%、0%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MDR3基因外显子14错义突变可能与妊娠期肝内胆汁淤积症的发病相关。

MDR3基因外显子6和9突变与妊娠期肝内胆汁淤积症的关系

目的:探索妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregancy,ICP)患者MDR3基因外显子6和9突变与ICP发病的关系。方法:从云南省临沧地区各少数民族自治县29例ICP患者及32例正常孕妇及患者家属组的外周血中提取DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增MDR3基因外显子6和9,PCR产物进行DNA测序分析。结果:所有ICP患者及对照组PCR均扩增出目的片段,且外显子6存在多态性位点C158T,外显子9存在突变位点G581A,但两组的基因频率无明显差异。结论:云南省临沧少数民族地区ICP的发生可能与MDR3外显子6和9的突变无关。

MDR3（ABCB4）、BSEP（ABCB11）和FIC1（ATP881）基因在人绒毛和正常妊娠胎盘组织表达的研究

目的检测肝脏胆盐载体FIC1（ATP881）、BSEP（ABCB11）和MDR3（ABCB4）在正常绒毛和胎盘组织中转录水平和蛋白水平的表达情况，探讨肝脏胆盐载体在人类胎盘胆汁酸排泌过程中的作用和功能。方法选择正常妊娠6～12周的孕妇（早孕组）15例和妊娠38～40周的孕妇（晚孕组）20例，采用实时定量逆转录一聚合酶链反应技术（realtimeRT．PCR）检测绒毛和胎盘组织中上3种载体的mRNA，采用免疫组织化学（S-P）法分别检测后两种载体蛋白在上述35例胎盘组织中的表达，并通过免疫印迹技术分析这两种载体在胎盘组织中的含量。结果在所有绒毛和胎盘组织中均检测到3种载体的mRNA。MDR3mRNA在正常绒毛中的表达量较低为（0．15±0．04），正常晚期妊娠胎盘中表达量为（0．58±0．06），两者比较有显著性差异（P〈0．05）。与早孕组相比，FIC1mRNA表达水平明显由（0．65±0．03）下降至（0．23±0．04），差别有非常显著意义（P〈0．01）。而BSEPmRNA表达无改变（0．06±0．01和0．05±0．01）（P〉0．05）。MDR3蛋白、BSEP蛋白在正常绒毛和胎盘组织中均有表达，且两种载体在正常早孕绒毛及晚期妊娠胎盘分布范围基本一致，主要分布在绒毛合体滋养细胞母体面游离缘。MDR3、BSEP蛋白在绒毛和晚期妊娠胎盘中的表达趋势与其mRNA相似，MDR3蛋白Western印迹条带的光密度值为（11357±3618）（早孕组）和（46753±2834）（晚孕组），两组比较有显著性差异（P〈0．05）。BSEP蛋白早孕组Western印迹条带的光密度值为（1296±436），晚孕组为（1798±575），两组比较差异无显著性（P〉0．05）。结论3种肝脏胆盐载体FIC1、MDR3和BSEP在正常绒毛和胎盘组织中均有表达，可能参与了胎盘胆汁酸的排泌功能。妊娠期间MDR3、FIC1和BSEPmRNA和蛋白表达发生变化，可能与胎儿生长发育的需要有关。

茵栀黄注射液基于FXR调控MDR3治疗肝内胆汁淤积的作用机制

目的:通过研究茵栀黄注射液(Yinzhihuang injection,YZH)对人正常肝细胞系HL-7702细胞的法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR),多药耐药相关蛋白3(multidrug resistance associated protein 3,MDR3)基因表达的影响,探讨茵栀黄注射液调控肝脏胆汁酸代谢的作用靶点及机制,为茵栀黄注射液治疗肝内胆汁淤积的临床应用提供实验依据。方法:不同浓度茵栀黄注射液干预HL-7702,采用细胞活性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)探索茵栀黄注射液对HL-7702的活性影响,结合实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法确定茵栀黄注射液的理想干预浓度和时间;用GW4064(FXR激动剂)促进FXR基因的表达,分为茵栀黄注射液组,GW4064组,GW4064+茵栀黄注射液组,正常组,DMSO组;小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默FXR基因,分为siRNA组,siRNA+茵栀黄注射液组,正常组,阴性组。Real-time PCR法、蛋白质免疫印迹(Western blot)法分别检测FXR,MDR3 mRNA及蛋白质的相对表达量,免疫荧光(IF)检测FXR蛋白的表达。结果:研究结果表明茵栀黄注射液对HL-7702的理想干预浓度1.08%,理想干预时间为15.47 h;茵栀黄注射液对HL-7702活性影响呈剂量依赖性;与正常组比较,GW4064组促进FXR,MDR3 mRNA和蛋白的表达(P<0.01);与正常组比较,siRNA组抑制FXR,MDR3 mRNA和蛋白的表达(P<0.01);与GW4064组比较,GW4064组+茵栀黄注射液组促进FXR,MDR3 mRNA和蛋白的表达(P<0.01);与siRNA组比较,siRNA+茵栀黄注射液组促进FXR,MDR3 mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。结论:茵栀黄注射液促进FXR,MDR3 mRNA和蛋白的表达,茵栀黄注射液通过FXR促进MDR3 mRNA和蛋白的表达来调控肝脏胆汁酸的代谢,本实验为其临床应用于治疗肝内胆汁淤积提供实验依据。

ABCB4基因突变及相关疾病

ABCB4（ATP—bindingcassette，sub-familyB，member4）基因编码MDR3蛋白（Class Ⅲ multidrug resistance Pglycoproteins），在正常胆汁形成中有着重要作用。近年来的研究表明，ABCB4基因突变导致的功能异常与一系列疾病有着密切关系。

妊娠肝内胆汁淤积综合征的遗传学研究进展

妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)病因复杂,遗传因素在发病机制中起相当关键作用。将胆汁淤积基因FIC、BSEP以及MDR3等作为ICP侯选基因,综述功能克隆、定位克隆及突变功能研究的进展。

妊娠肝内胆汁淤积症遗传与环境发病机理的研究进展

MDR3基因异常的妇女孕期受体内激素水平和/或环境因素影响,发生妊娠肝内胆汁淤积症;胎盘转运胆汁酸的功能受损,高浓度的胆汁酸在胎儿体内蓄积,胎儿器官功能失调,导致胎儿突然死亡。

逆转录聚合酶链式反应检测胎盘多药赖药基因与胎盘胆汁酸排泌的相关性

目的探讨胎盘多药赖药(MDR3)基因与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)胎盘胆汁酸排泌的相关性。方法收集妊娠晚期ICP患者(ICP组)和正常晚孕妇女(对照组)各30例,分别采集母体静脉血和新生儿脐静脉血及胎盘组织,采用放射免疫分析方法检测母血及脐血中的甘胆酸(CG)含量;采用逆转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)测定两组胎盘组织中多药赖药基因mRNA的相对表达量。结果 (1)ICP组母血、脐血中CG水平均高于对照组(28.86±8.51vs2.70±2.19;19.97±8.80vs5.83±5.06μg/ml),以上差异均有统计学意义(P<0.001);ICP组母血CG含量高于脐血中的含量,两者之间存在正相关(r=0.588);对照组脐血CG含量高于母血中的含量,两者之间无直线关系(r=0.212)。(2)两组胎盘组织中均检测到MDR3基因的mRNA,与对照组相比,ICP组胎盘组织中MDR3基因的mRNA水平下降(3.33±1.03vs6.85±1.26),差异有统计学意义(P<0.001);且MDR3-mRNA相对量与脐血甘胆酸和母血甘胆酸水平呈负相关性(r=-0.627;r=-0.795)。结论 MDR3基因可能参与了胎盘胆汁酸的排泌。