生殖支原体MG 427原核表达载体的构建和鉴定

目的构建生殖支原体MG 427基因原核表达载体并进行鉴定。方法以生殖支原体标准株G 37 DNA为模板进行PCR扩增mg 427基因,克隆入原核表达载体p GEX-6 p-1。定点诱导该基因中第289-291位核苷酸TGA密码子突变成TGG,构建p GEX-6 p-1/MG 427的原核表达载体。结果成功扩增出大约426 bp的基因片段,定点诱导突变后,经酶切及测序鉴定证明mg 427中的TGA被成功突变为TGG,与目的基因相符。结论成功构建生殖支原体渗透压诱导蛋白MG 427原核表达载体p GEX-6 p-1/MG 427。