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蟾酥诱发人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的作用机制研究
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作者 卞泗善 苏庆红 +2 位作者 秦燕 滕加文 赵新芝 《现代中西医结合杂志》 CAS 2024年第5期633-638,共6页
目的探究蟾酥对人骨肉瘤MG-63细胞增殖、凋亡、侵袭、转移的影响及可能作用机制。方法取雄性C57BL/6J小鼠30只,制备空白血清和不同浓度(2.5%和5%)的蟾酥含药血清。取传代培养MG-63细胞,实验分为3组:2.5%蟾酥含药血清组和5%蟾酥含药血清... 目的探究蟾酥对人骨肉瘤MG-63细胞增殖、凋亡、侵袭、转移的影响及可能作用机制。方法取雄性C57BL/6J小鼠30只,制备空白血清和不同浓度(2.5%和5%)的蟾酥含药血清。取传代培养MG-63细胞,实验分为3组:2.5%蟾酥含药血清组和5%蟾酥含药血清组分别加入相应浓度的蟾酥含药血清培养,对照组加入等体积PBS培养。CCK-8法检测MG-63细胞增殖活性,PNPP法检测细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性,茜素红法检测细胞成骨能力,Transwell法检测MG-63细胞侵袭、转移情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率及MG-63细胞中整合素α4(Integrinα4)表达情况。结果不同浓度蟾酥含药血清组各时间点细胞增殖率均明显低于对照组(P均<0.05),且5%蟾酥含药血清组均明显低于同期2.5%蟾酥含药血清组(P均<0.05);不同浓度蟾酥含药血清组细胞凋亡率、ALP活性均明显高于对照组(P均<0.05),且5%蟾酥含药血清组均明显高于2.5%蟾酥含药血清组(P<0.05);茜素红染色显示,不同浓度含药血清组有橘红色结节、边界清楚细胞增多;不同浓度蟾酥含药血清组侵袭性细胞和转移性细胞数量均明显少于对照组(P均<0.05),Integrinα4表达占比均明显低于对照组(P均<0.05),且5%蟾酥含药血清组细胞数量均明显少于2.5%蟾酥含药血清组(P均<0.05),Integrinα4表达占比明显低于2.5%蟾酥含药血清组(P<0.05)。结论蟾酥可以促进MG-63细胞凋亡,抑制细胞增殖、侵袭和转移,改善细胞分化和成骨功能,机制可能与下调Integrinα4表达有关。 展开更多
关键词 蟾酥 骨肉瘤 mg-63细胞 细胞凋亡
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鞣花酸对骨肉瘤MG-63细胞的生物学作用及分子机制
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作者 赵宁 周新卫 +3 位作者 郑荣 梁波 陈劲 范晓敏 《吉林医学》 CAS 2024年第12期2891-2894,共4页
目的:探索天然提取物鞣花酸(EA)对骨肉瘤MG-63细胞增殖及凋亡的生物学作用和分子机制,寻求防治骨肉瘤的新途径。方法:以0μg/ml、15μg/ml、30μg/ml和45μg/ml的EA处理MG-63细胞株,通过细胞增殖实验(MTT法)和流式细胞仪检测分析EA对MG... 目的:探索天然提取物鞣花酸(EA)对骨肉瘤MG-63细胞增殖及凋亡的生物学作用和分子机制,寻求防治骨肉瘤的新途径。方法:以0μg/ml、15μg/ml、30μg/ml和45μg/ml的EA处理MG-63细胞株,通过细胞增殖实验(MTT法)和流式细胞仪检测分析EA对MG-63细胞株增殖、凋亡和细胞周期的影响,采用Western印迹检测技术观察表皮生长因子受体(EGFR),细胞增殖与细胞凋亡因子Bax和Bcl-2表达的蛋白表量变化。结果:实验组随EA浓度增加,其孵育的人骨肉瘤MG-63细胞,早期凋亡率与抑制率逐渐增高,呈现明显浓度依赖性;EA处理后的MG-63细胞阻滞于G0/G1期;EGFR表达量降低,促肿瘤细胞凋亡因子Bax蛋白表达量增加、抑肿瘤细胞凋亡因子Bcl-2蛋白表达量降低。结论:EA能够抑制MG-63细胞株增殖并诱导其凋亡,可能与EGFR、细胞因子Bax及Bcl-2表达量改变相关。 展开更多
关键词 鞣花酸 骨肉瘤mg-63细胞 增殖 凋亡
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Effect of porous titanium coated with IGF-1 and TGF-β_1 loaded gelatin microsphere on function of MG63 cells
3
作者 陈良建 陈畅 +5 位作者 乔雪岩 余琨 谢丽子 曹君 刘蓓蕾 颜阳 《Transactions of Nonferrous Metals Society of China》 SCIE EI CAS CSCD 2015年第9期2974-2985,共12页
Porous titanium with porosity of 60% was prepared by metal injection molding(MIM),and coated with gelatin sustained-release microspheres which were made by improved emulsified cold condensation method.The effects of... Porous titanium with porosity of 60% was prepared by metal injection molding(MIM),and coated with gelatin sustained-release microspheres which were made by improved emulsified cold condensation method.The effects of porous titanium coated with insulin-like growth factor-1(IGF-1) and transforming growth factor-β1(TGF-β1) gelatin microspheres on the function of MG63 cells were evaluated in vitro.The results show that porous titanium coated with gelatin sustained-release microspheres has no cytotoxicity.The IGF-1 and TGF-β1 loading concentrations are positively correlative with the proliferation and differentiation of MG63 after co-culturing with the concentrations of IGF-1 and TGF-β1 gelatin microspheres in the range of 0.1-10 ng/mg and 0.25-2.5 ng/mg,respectively.The MG63 cells exhibit the best proliferation and differentiation with the IGF-1 and TGF-β1 loading concentrations of 10 ng/mg and 2.5 ng/mg,respectively.The joint application of IGF-1 and TGF-β1 group,which promote adhesion,proliferation and differentiation of MG63 cells,is superior to a single application group. 展开更多
关键词 porous titanium gelatin microsphere insulin-like growth factor-1 transforming growth factor-β1 mg63 cell
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Effect of NS398 on inducing apoptosis and down-regulating Bcl-2 protein in human osteosarcoma cell MG-63 line
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作者 Eryou Feng Biao Gao Renyun Xia 《Journal of Nanjing Medical University》 2005年第4期199-202,共4页
Objective: This study investigated the effect of NS398 on anti-proliferation and the mechanism of inducing apoptosis of human osteosarcoma cell MG-63 line in vitro. Methods: Growth suppression was detected by MTT me... Objective: This study investigated the effect of NS398 on anti-proliferation and the mechanism of inducing apoptosis of human osteosarcoma cell MG-63 line in vitro. Methods: Growth suppression was detected by MTT method. Special morphological changes of apoptosis were observed by transmission electron microscopy (TEM) and DNA fragments electrophoresis. The apoptotic rates were quantified by flow cytometry (FCM). And Bcl-2 protein level were detected by Western Blotting assay. Results: Different concentration NS398 inhibited the cell growth. Through TEM and DNA electrophoresis, the special morphological changes were observed after 24, 48 and 72 h treatment with NS398. The apoptotic rates of MG-63 cells treated with NS398 were respectively, significantly higher than that of the control group( P 〈0.01 ). Western blot assay showed that NS398 reduced Bcl-2 protein expression. Conclusion: NS398 suppressed the proliferation of human osteosarcoma cell MG-63 line and induced apoptosis. The mechanism may be associated with down-regulation expression level of bcl-2 protein. 展开更多
关键词 cycloosygenase-2 osteosarcoma mg-63 cell APOPTOSIS
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肉桂酸对人骨肉瘤MG-63细胞增殖和分化的影响 被引量:26
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作者 王国红 郭直岳 +1 位作者 石松林 李祺福 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1262-1266,共5页
目的研究中药有效成分肉桂酸对人骨肉瘤MG-63细胞增殖和分化的影响。方法肉桂酸处理MG-63细胞前后,台盼蓝拒染法进行活细胞计数;流式细胞仪检测细胞周期时相变化;光镜和电镜观察细胞形态和超微结构;VanGieson染色检测细胞Ⅰ型胶原表达;... 目的研究中药有效成分肉桂酸对人骨肉瘤MG-63细胞增殖和分化的影响。方法肉桂酸处理MG-63细胞前后,台盼蓝拒染法进行活细胞计数;流式细胞仪检测细胞周期时相变化;光镜和电镜观察细胞形态和超微结构;VanGieson染色检测细胞Ⅰ型胶原表达;茜素红染色观察钙化骨结节形成;免疫细胞化学检测骨粘素和骨钙蛋白表达。结果肉桂酸明显抑制MG-63细胞增殖,D7抑制率达54.94%±4.69%。周期分析结果显示,肉桂酸处理后G0/G1期细胞比例较对照组明显升高(P<0.01)。光镜和电镜结果显示,肉桂酸处理组MG-63细胞形态和超微结构发生明显改变,呈现相应正常细胞的形态和超微结构特征。肉桂酸促进成骨细胞分化标志物Ⅰ型胶原、骨粘素和骨钙蛋白的表达与钙沉积以及典型骨结节的形成。结论肉桂酸可抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖并诱导其向成骨细胞分化。 展开更多
关键词 肉桂酸 人骨肉瘤mg-63细胞 增殖 分化 骨肉瘤 成骨细胞
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三氧化二砷诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡的实验研究 被引量:20
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作者 肖涛 李康华 +2 位作者 方建珍 王万春 李海声 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第2期111-113,共3页
目的 :探讨三氧化二砷 (As2 O3)诱导骨肉瘤MG 6 3细胞凋亡的作用。方法 :用MTT法、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳等方法观察As2 O3诱导MG 6 3细胞凋亡的作用。结果 :As2 O3可有效地抑制MG 6 3细胞增殖 ,随着药物浓度增高其抑制作用增强 ,且... 目的 :探讨三氧化二砷 (As2 O3)诱导骨肉瘤MG 6 3细胞凋亡的作用。方法 :用MTT法、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳等方法观察As2 O3诱导MG 6 3细胞凋亡的作用。结果 :As2 O3可有效地抑制MG 6 3细胞增殖 ,随着药物浓度增高其抑制作用增强 ,且细胞出现典型的凋亡变化。DNA琼脂糖凝胶电泳出现凋亡特征性梯形条形。透射电镜下可见细胞核仁消失 ,染色质浓缩聚集于核膜下。结论 :As2 O3可诱导骨肉瘤细胞凋亡 。 展开更多
关键词 三氧化二砷 诱导 骨肉瘤 mg-63细胞 实验 细胞凋亡
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人参皂苷Rg1组合诱导人成骨肉瘤MG-63细胞分化过程中Prohibitin的表达与定位变化 被引量:8
7
作者 石松林 李祺福 +3 位作者 刘庆榕 许东辉 唐剑 梁盈 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期180-187,共8页
选择性抽提经人参皂苷Rg1组合(RCT)诱导处理前后的人成骨肉瘤MG-63细胞核基质,对prohibitin在核基质中的存在、分布及其与相关基因产物在RCT处理前后MG-63细胞中的共定位关系进行观察研究.蛋白质组学分析结果显示,prohibitin存在于人成... 选择性抽提经人参皂苷Rg1组合(RCT)诱导处理前后的人成骨肉瘤MG-63细胞核基质,对prohibitin在核基质中的存在、分布及其与相关基因产物在RCT处理前后MG-63细胞中的共定位关系进行观察研究.蛋白质组学分析结果显示,prohibitin存在于人成骨肉瘤MG-63细胞核基质蛋白组分中,并在RCT处理后细胞核基质中表达下调;蛋白质印迹杂交确证了prohibitin在MG-63细胞核基质中的存在及其在RCT处理后下调变化;免疫荧光显微镜观察进一步证实prohibitin定位在核基质上,经RCT处理后出现分布位置与表达水平变化;激光共聚焦显微镜观察可见prohibitin与c-Fos、c-Myc、p53和Rb基因产物均存在共定位关系,并在RCT处理后共定位分布区域出现变化.本研究证实了prohibitin是一种新发现的核基质蛋白,其在核基质上的定位与表达在RCT诱导分化前后发生显著变化,并与相关癌基因、抑癌基因产物存在共定位关系.实验表明RCT处理引起的prohibitin的变化与人成骨肉瘤MG-63细胞的诱导分化与调控具有密切关系,为深入揭示RCT等中药有效成分诱导肿瘤细胞分化的机理提供了重要科学依据和深入探索的新方向. 展开更多
关键词 PROHIBITIN 核基质 人成骨肉瘤mg-63细胞 细胞分化 人参皂苷RG1
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丹参酮IIA对人成骨肉瘤MG-63细胞形态结构和终末分化指标的影响 被引量:8
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作者 石松林 王国红 +3 位作者 马宗源 史建陆 林昌健 李祺福 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第5期801-804,813,共5页
目的:观察中药有效成分丹参酮IIA(Tan IIA)对人成骨肉瘤MG-63细胞形态与超微结构和相关终末分化指标的影响,以鉴定其对肿瘤细胞终末分化的诱导作用。方法:0.5μg/mL丹参酮IIA处理MG-63细胞,光镜、电镜观察和免疫细胞化学检测系统研究MG... 目的:观察中药有效成分丹参酮IIA(Tan IIA)对人成骨肉瘤MG-63细胞形态与超微结构和相关终末分化指标的影响,以鉴定其对肿瘤细胞终末分化的诱导作用。方法:0.5μg/mL丹参酮IIA处理MG-63细胞,光镜、电镜观察和免疫细胞化学检测系统研究MG-63细胞处理前后细胞形态、超微结构变化和成骨细胞相关终末分化蛋白的表达变化。结果:光镜与电镜观察结果显示经Tan IIA处理细胞产生了核质比例减小、异染色质减少、常染色质增多、细胞器丰富发达、细胞表面微绒毛减少等显著变化;免疫细胞化学检测显示处理后MG-63细胞Ⅰ型胶原蛋白、骨粘素和骨钙蛋白的表达呈阳性,并观察到钙化糖原颗粒增多和典型骨结节的形成。结论:丹参酮IIA能显著改变MG-63细胞形态与超微结构恶性特征,并促进与成骨细胞相关的终末分化指标的表达变化,从而对人成骨肉瘤细胞的终末分化具有明显的诱导作用。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 诱导分化 人成骨肉瘤mg-63细胞 细胞形态与超微结构 终末分化指标
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HMBA诱导人成骨肉瘤MG-63细胞分化过程中hnRNP A2/B1的表达与定位 被引量:6
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作者 赵春红 李祺福 +3 位作者 陈兰英 唐剑 宋建晔 谢忠 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第7期677-684,共8页
背景与目的:核基质蛋白的差异表达与细胞癌变和增殖分化调控关系密切。本研究观察了hnRNP A2/B1在诱导分化处理前后人成骨肉瘤MG-63细胞核基质中的存在和分布,及其与Actin、Prohibitin的共定位关系。方法:选择性抽提经环六亚甲基双乙酰... 背景与目的:核基质蛋白的差异表达与细胞癌变和增殖分化调控关系密切。本研究观察了hnRNP A2/B1在诱导分化处理前后人成骨肉瘤MG-63细胞核基质中的存在和分布,及其与Actin、Prohibitin的共定位关系。方法:选择性抽提经环六亚甲基双乙酰胺(hexamethylene bisacetamide,HMBA)诱导处理前后的MG-63细胞核基质,并运用双向电泳、质谱分析、蛋白质印记杂交、免疫荧光、激光共聚焦等技术检测hnRNP A2/B1在核基质中的表达与定位变化,及其与相关蛋白的共定位关系。结果:双向电泳及蛋白质印迹杂交结果证实了hnRNP A2/B1存在于MG-63细胞核基质蛋白组分中,并在HMBA处理后细胞核基质中表达下调;免疫荧光显微镜观察显示hnRNP A2/B1定位在核基质上,经HMBA处理后hnRNP A2/B1表达减弱。激光共聚焦显微镜观察结果显示,hnRNP A2/B1与细胞核基质蛋白组分Actin、细胞增殖相关调控因子Prohibitin具有共定位关系,但在诱导处理后细胞内的共定位关系减弱。结论:hnRNP A2/B1在MG-63细胞诱导分化过程中的表达分布,及其与Actin、Prohibitin的共定位关系的改变对MG-63细胞分化具有重要影响,值得进一步探索和研究。 展开更多
关键词 HNRNP A2/B1 核基质 成骨肉瘤 mg-63细胞 细胞分化
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mTOR抑制剂FIM-A对人骨肉瘤细胞株MG-63的抑制作用及其机制 被引量:4
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作者 罗鸿斌 刘蔚楠 +6 位作者 林建华 程元荣 张俐 黄捷 吴朝阳 林金銮 蓝文彬 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期419-424,共6页
目的:观察新型哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalia target of rapamycin,mTOR)抑制剂含磷西罗莫司衍生物FIM-A对人骨肉瘤MG-63细胞增殖及凋亡的影响。方法:不同浓度(1×10-9~1×10-5mol/L)FIM-A处理MG-63细胞后,采用CCK-8法检测M... 目的:观察新型哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalia target of rapamycin,mTOR)抑制剂含磷西罗莫司衍生物FIM-A对人骨肉瘤MG-63细胞增殖及凋亡的影响。方法:不同浓度(1×10-9~1×10-5mol/L)FIM-A处理MG-63细胞后,采用CCK-8法检测MG-63细胞的增殖,流式细胞术检测MG-63细胞周期和凋亡情况,ELISA法检测血管内皮细胞生长因子(vascu-lar endothelial cell growth factor,VEGF)和低氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的分泌量,RT-PCR和Western blot-ting分别检测FIM-A对MG-63细胞中mTOR、p70核糖体S6激酶(p70S6 kinase protein,p70s6k)及4E结合蛋白1(4E-bindingprotein 1,4E-BP1)mRNA和蛋白表达的影响。结果:与人成骨hF-OB1.19细胞相比,人骨肉瘤MG-63细胞中mTOR、p70s6k及4E-BP1 mRNA的表达水平明显升高(P<0.05)。FIM-A可有效抑制MG-63细胞的增殖(P<0.05),且呈剂量依赖性(r=0.940,P<0.01)。1×10-6mol/L FIM-A处理24 h后与对照组相比,G0/G1期MG-63细胞比例明显增加[(56.4±3.2)%vs(43.4±6.9)%,P<0.05],而MG-63细胞的凋亡率没有明显改变。不同浓度FIM-A作用24 h后,MG-63细胞中HIF-1α和VEGF表达均明显低于对照组(P<0.05),且具有剂量依赖性(HIF-1α,r=-0.988,P<0.01;VEGF,r=-0.998,P<0.01)。同时,FIM-A对MG-63细胞中mTOR(r=-0.919,P<0.01)、p70s6k(r=-0.843,P<0.01)及4EBP1(r=-0.818,P<0.01)蛋白的磷酸化也具有浓度依赖性抑制作用。结论:FIM-A能抑制人骨肉瘤MG-63细胞的增殖,并阻滞细胞周期于G0/G1期,其机制可能与影响mTOR信号通路蛋白磷酸化有关。 展开更多
关键词 MTOR抑制剂 FIM-A 骨肉瘤 mg-63细胞 MTOR
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ING4及IL-24双基因共表达腺病毒载体对MG-63人骨肉瘤细胞体外抑癌增效作用研究 被引量:8
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作者 王家融 韩亚丽 +2 位作者 缪竞诚 盛伟华 杨吉成 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2013年第3期294-298,共5页
目的用人肿瘤生长抑制因子(mING4)及人白介素24(IL-24)基因构建腺病毒双基因共表达载体(Ad-ING4-IL-24),并设Ad-ING4和Ad-IL-24单基因对照,研究双基因共表达载体对MG-63人骨肉瘤细胞体外抑癌增效作用.方法首先将已构建成功的Ad-ING4-IL-... 目的用人肿瘤生长抑制因子(mING4)及人白介素24(IL-24)基因构建腺病毒双基因共表达载体(Ad-ING4-IL-24),并设Ad-ING4和Ad-IL-24单基因对照,研究双基因共表达载体对MG-63人骨肉瘤细胞体外抑癌增效作用.方法首先将已构建成功的Ad-ING4-IL-24,Ad-ING4及Ad-IL-24腺病毒感染QBI-293A细胞,经多轮扩增后获得高滴度的病毒子,测病毒效价后分别以100 MOI剂量感染MG-63细胞,用荧光显微镜、RT-PCR法检测ING-4及IL-24在MG-63细胞中的转录和表达;MTT法检测ING-4及IL-24基因表达对MG-63细胞的生长抑制效应;半定量RT-PCR法检测ING4及IL-24基因表达对MG-63细胞中的Bcl-2,Bax,Caspase3,p21,CD34等相关基因表达的影响.结果获得了高滴度的重组腺病毒Ad-ING4-IL-24,Ad-ING4,Ad-IL-24和Ad-GFP;治疗后MG-63细胞中ING-4及IL-24双基因表达对MG-63细胞增殖有明显抑制作用,ING-4及IL-24基因表达可通过上调细胞中Bax,Caspase3,p21和下调Bcl-2,CD34基因表达诱导细胞凋亡.在病毒子剂量为100 MOI时,Ad-ING4-IL-24对MG-63人骨肉瘤细胞抑制作用比对Ad-ING4和Ad-IL-24抑制效果更为显著.结论腺病毒介导的ING4或/和IL-24基因可明显抑制MG-63人骨肉瘤细胞的生长,且Ad-ING4-IL-24双基因比Ad-ING4和Ad-IL-24单基因的抑制效果更为显著,该现象可能是通过改变Bcl-2,Bax,Caspase3,p21,CD34基因表达水平来发挥抗肿瘤作用的. 展开更多
关键词 ING4基因 IL-24基因 腺病毒载体 mg-63人骨肉瘤细胞 肿瘤抑制
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PEEK-HA生物复合材料对MG-63细胞的作用 被引量:5
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作者 倪卓 王应 +4 位作者 王双 刘士德 张建华 刘学 任英华 《深圳大学学报(理工版)》 EI CAS 北大核心 2014年第3期258-265,共8页
体外培养成骨MG-63细胞,通过倒置荧光显微镜和四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法,研究聚醚醚酮-磺化聚醚醚酮-羟基磷灰石(polyetheretherketone-sulfnated polyetheretherketone-hydroxyapatite,PEEKSPEEK-HA)复合材料对细胞形态和增殖的... 体外培养成骨MG-63细胞,通过倒置荧光显微镜和四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法,研究聚醚醚酮-磺化聚醚醚酮-羟基磷灰石(polyetheretherketone-sulfnated polyetheretherketone-hydroxyapatite,PEEKSPEEK-HA)复合材料对细胞形态和增殖的影响.在PEEK-SPEEK-HA复合材料质量浓度为4 mg/mL时,复合材料对MG-63细胞增殖作用最强,随浸提液质量浓度增大,材料对细胞增殖作用下降.材料质量浓度为4 mg/mL时,HA质量分数为20%的PEEK-SPEEK-HA复合材料对细胞的增殖作用较强.PEEK-HA和PEEK-SPEEK-HA复合材料的毒性评级为1级,无细胞毒性.SPEEK和HA能够改善复合材料对成骨MG-63细胞的黏附作用,HA含量对细胞黏附作用的影响更显著.扫描电镜结果表明MG-63细胞在PEEK-SPEEKHA材料上生长形态为三角形或长梭形,有伪足,伸展状态良好,细胞可以在材料缝隙处生长,表明成骨细胞能够在该材料表面黏附、伸展和生长.将SPEEK引入PEEK-HA复合材料能抑制细胞凋亡. 展开更多
关键词 生物材料学 复合材料 骨替代材料 聚醚醚酮-磺化聚醚醚酮-羟基磷灰石复合材料 成骨mg-63细胞 黏附率 细胞增殖 细胞凋亡
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人成骨肉瘤MG-63细胞分化特性及分化过程中的基因表达 被引量:8
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作者 罗湘杭 廖二元 +1 位作者 周后德 伍贤平 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第2期107-110,共4页
观察人成骨肉瘤MG 6 3细胞分化特性及分化过程中的基因表达。在细胞培养的不同时间 ,用α 磷酸奈酚法测定碱性磷酸酶 (ALP)活性 ;放射免疫法测定骨钙素 (BGP)含量 ;半定量逆转录聚合酶链反应测I型胶原、基质金属蛋白酶 (MMP) 1和基质... 观察人成骨肉瘤MG 6 3细胞分化特性及分化过程中的基因表达。在细胞培养的不同时间 ,用α 磷酸奈酚法测定碱性磷酸酶 (ALP)活性 ;放射免疫法测定骨钙素 (BGP)含量 ;半定量逆转录聚合酶链反应测I型胶原、基质金属蛋白酶 (MMP) 1和基质金属蛋白酶抑制因子 (TIMP) 1基因mRNA表达 ;VanGieSon氏苦味酸酸性复红染色法染色细胞I型胶原。结果表明MG 6 3细胞接种培养第 7d后I型胶原基因表达较高。MMP 1表达量随时间推移逐渐增加 ,至第 2 4d达到高峰。第 1~ 9dTIMP 1表达量逐渐增加 ,其后基本恒定。ALP活性第 0~ 12d逐渐增高 ,至第 12d达最高 ,其后逐渐下降。第 18d后 ,细胞有许多大小不等的结节形成 ,I型胶原结节染色较无结节处深。MG 6 3细胞具有成骨细胞表型特征。MG 6 3细胞生长分为细胞增殖、骨基质成熟、骨基质矿化阶段 ,且I型胶原 ,MMP 1,TIMP 1基因表达及ALP活性呈时间特异性。 展开更多
关键词 mg-63细胞 细胞分化 骨肿瘤 基因表达 人成骨肉瘤
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胰岛素和IGF-1对成骨样细胞MG63 Ⅰ型胶原基因表达的影响 被引量:9
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作者 马艳芬 李万根 陈澍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2006年第5期466-469,共4页
目的应用胰岛素(INSU)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)干预体外培养的人成骨样细胞MG63,并以17-雌二醇(E2)做阳性对照。观察药物干预对MG63细胞Ⅰ型胶原(COL1)表达的影响。方法用DMEM培养基培养MG63细胞,并以INSU、IGF-1、E2进行干预。抽... 目的应用胰岛素(INSU)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)干预体外培养的人成骨样细胞MG63,并以17-雌二醇(E2)做阳性对照。观察药物干预对MG63细胞Ⅰ型胶原(COL1)表达的影响。方法用DMEM培养基培养MG63细胞,并以INSU、IGF-1、E2进行干预。抽提各样本总RNA后,行逆转录并对COL1的cDNA进行荧光扩增和定量。结果各药物组内基因拷贝数(COPYS)均有统计学差异(P<0·05),各组药效呈浓度依赖性增加趋势。在本实验所选的药物浓度范围内,INSU、IGF-1、E2各药物组的最高药效浓度均为本实验所用的最高药物浓度,分别为2×10-7mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L。3组间有统计学差异(P<0·05),INSU和IGF-1组COPYS增长率明显大于E2组,INSU和IGF-1组比较无统计学差异。结论INSU、IGF-1和E2一样,均有显著促进MG63分化的作用。 展开更多
关键词 胰岛素 IGF-1 mg 63细胞 分化
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As_2O_3联合FP99诱导骨肉瘤细胞MG-63凋亡的初步研究 被引量:3
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作者 肖涛 李康华 +2 位作者 方建珍 王万春 李桂源 《科技导报》 CAS CSCD 2006年第4期48-50,共3页
采用噻唑蓝(MTT)法发现FP99能够协同三氧化二砷(As2O3)抑制人骨肉瘤细胞MG-63的生长,并采用流式细胞计数进一步证实FP99加强As2O3对MG-63细胞凋亡的诱导作用;进而检测了Caspase-3的活性,发现As2O3联合FP99作用MG-63细胞后,Caspase-3的... 采用噻唑蓝(MTT)法发现FP99能够协同三氧化二砷(As2O3)抑制人骨肉瘤细胞MG-63的生长,并采用流式细胞计数进一步证实FP99加强As2O3对MG-63细胞凋亡的诱导作用;进而检测了Caspase-3的活性,发现As2O3联合FP99作用MG-63细胞后,Caspase-3的活性显著提高,提示我们As2O3联合FP99增加MG-63细胞的凋亡率的机制可能是通过提高Caspase-3激酶活性,从而促进了整个凋亡通路的激活,最终导致细胞凋亡的增加。 展开更多
关键词 FP99 AS2O3 mg-63细胞 凋亡 Caspase-3
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人参皂甙Rg1对人成骨肉瘤MG-63细胞形态结构和终末分化指标的影响 被引量:3
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作者 石松林 李祺福 +3 位作者 王国红 马宗源 史建陆 林昌健 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期392-398,共7页
为了研究人参皂甙Rg1对人成骨肉瘤MG-63细胞(以下简称"MG-63细胞")形态与超微结构及终末分化指标的影响,鉴定其对MG-63细胞的诱导分化作用,以50μg/mL人参皂甙Rg1处理MG-63细胞,光学显微镜与电子显微镜观察MG-63细胞形态、超... 为了研究人参皂甙Rg1对人成骨肉瘤MG-63细胞(以下简称"MG-63细胞")形态与超微结构及终末分化指标的影响,鉴定其对MG-63细胞的诱导分化作用,以50μg/mL人参皂甙Rg1处理MG-63细胞,光学显微镜与电子显微镜观察MG-63细胞形态、超微结构变化,免疫细胞化学方法检测成骨细胞相关终末分化蛋白的表达变化,并同步以HMBA处理MG-63细胞作为阳性对照.光学显微镜与电子显微镜观察结果显示细胞形态与超微结构产生了细胞形态规则、大小一致、细胞铺展体积增大,核质比例减小、核内核仁数目减少、细胞器丰富发达等与正常细胞相似的恢复性变化.观察到MG-63细胞终末分化指标I型胶原、骨粘素、骨钙蛋白的阳性表达及钙化糖原颗粒的增多与典型骨节结的形成,其变化结果与HMBA处理细胞类似.本研究证实人参皂甙Rg1能显著改变MG-63细胞形态与超微结构恶性特征,并增强成骨细胞相关的终末分化指标的表达,从而对MG-63细胞的终末分化具有一定的诱导作用. 展开更多
关键词 人参皂甙RG1 诱导分化 人成骨肉瘤mg-63细胞 细胞形态 细胞超微结构 细胞终末分化
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流体剪切应力对模拟微重力下MG-63细胞骨架系统的影响 被引量:3
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作者 杜挺媛 张舒 +1 位作者 曹新生 王冰 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期235-238,共4页
目的观察水平回转模拟微重力(modeled microgravity,MMG)后人骨肉瘤MG-63细胞受流体剪切应力(flow shear stress,FSS)作用后细胞骨架的改变,探讨模拟微重力情况下骨质丢失的细胞学机制。方法 MG-63成骨细胞采用回转器水平回转培养48 h... 目的观察水平回转模拟微重力(modeled microgravity,MMG)后人骨肉瘤MG-63细胞受流体剪切应力(flow shear stress,FSS)作用后细胞骨架的改变,探讨模拟微重力情况下骨质丢失的细胞学机制。方法 MG-63成骨细胞采用回转器水平回转培养48 h模拟微重力效应,同时设静止培养为对照组。之后,细胞随机分为两组,一组利用流室系统实施FSS,FSS设为1.5 Pa,作用时间60 min,另一组无FSS作用。细胞经过免疫荧光染色后,激光共聚焦显微镜观察细胞骨架系统的变化。结果 FSS作用后,MG-63细胞微丝和微管的形态和分布均发生变化,微丝可见多束状排列,荧光强度增强,出现粗的应力纤维;微管可见其极性中心移向细胞质外缘,细胞外层荧光量加重,有少量束状结构出现。MMG后,MG-63细胞的细胞骨架发生解聚和重排,微丝向核周集聚;微管发生断裂,变短,弯曲等变化。MMG后,再给予FSS刺激,微丝未能形成应力纤维,仅见微丝、微管在应力方向有拉长。结论 1.5 Pa,60 min流体剪切应力未能在回转模拟微重力后成骨细胞内诱导形成应力纤维。 展开更多
关键词 模拟微重力 回转器 流体剪切应力 mg-63细胞 细胞骨架
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噻莱昔布(celecoxib)对人骨肉瘤细胞MG-63增殖与凋亡的影响 被引量:3
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作者 冯尔宥 夏仁云 +2 位作者 张怡元 盛健 林焱斌 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期853-855,共3页
目的:研究环氧化酶2(cyclooxygenase2,COX2)抑制剂celecoxib对人骨肉瘤细胞MG63抑制增殖及诱导凋亡的作用。方法:MTT比色观察celecoxib的细胞毒性作用及其浓度依赖性;Hoechst33258荧光染色、透射电子显微镜和TUNEL观察细胞凋亡的形态学... 目的:研究环氧化酶2(cyclooxygenase2,COX2)抑制剂celecoxib对人骨肉瘤细胞MG63抑制增殖及诱导凋亡的作用。方法:MTT比色观察celecoxib的细胞毒性作用及其浓度依赖性;Hoechst33258荧光染色、透射电子显微镜和TUNEL观察细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率及其时间依赖性。结果:celecoxib分别以10、20、40、80μmol/L作用后,细胞生长受到不同程度抑制;荧光显微镜、电镜和TUNEL观察到细胞胞浆浓缩、核凝聚、核碎裂和凋亡小体形成。流式细胞仪显示celecoxib40μmol/L作用24、48、72h后,细胞凋亡率分别与对照组比较有非常显著性差异(P<0.01)。结论:celecoxib能抑制人MG63细胞增殖,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 环氧化酶2 骨肉瘤mg-63细胞 凋亡
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骨形成蛋白-2转染MG-63细胞增加其对壳聚糖膜的粘附 被引量:4
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作者 范丽 卢岩 +2 位作者 林慧平 姚航平 林军 《材料科学与工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期911-915,897,共6页
为了观察壳聚糖膜对转染载有骨形成蛋白基因(bone morphogenetic protein,BMPDNA)的成骨样细胞(MG 63)粘附及增殖的影响,本研究构建重组BMP-2质粒并转染入MG 63,分别经酶切、PCR、Western、免疫组化鉴定;制备壳聚糖膜(chitosan,CS),然... 为了观察壳聚糖膜对转染载有骨形成蛋白基因(bone morphogenetic protein,BMPDNA)的成骨样细胞(MG 63)粘附及增殖的影响,本研究构建重组BMP-2质粒并转染入MG 63,分别经酶切、PCR、Western、免疫组化鉴定;制备壳聚糖膜(chitosan,CS),然后将转染细胞与该材料分别培养1、3、5天,扫描电镜观察细胞在材料表面的粘附形态;24、48、72、96小时后MTS检测细胞的增殖情况。结果发现转染了BMP-2 DNA MG63在壳聚糖膜材料上形态生长良好,有利于细胞的粘附行为;96小时后与未转染细胞组相比无明显差异。结果表明虽然体外转染BMP-2的MG63的增殖没有明显促进作用,但有利于细胞与材料间的粘附。结论:BMP-2转染成骨细胞增加细胞壳聚糖膜间的粘附,这将有助于了解壳聚糖细胞复合材料临床骨再生的应用前景。 展开更多
关键词 骨形成蛋白 壳聚糖 成骨样细胞
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人参皂甙Rg1组合对人成骨肉瘤MG-63细胞分化过程中核基质构型与蛋白质组成的影响 被引量:2
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作者 石松林 李祺福 +2 位作者 郑燕彬 唐剑 陈平 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期670-676,共7页
目的研究中药有效成分人参皂甙Rg1、肉桂酸CINN及丹参酮TanⅡA的组合(简称RCT),诱导人成骨肉瘤MG-63细胞分化过程中,细胞核基质构型与蛋白质组成的变化。方法应用流式细胞仪检测细胞周期变化,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线,... 目的研究中药有效成分人参皂甙Rg1、肉桂酸CINN及丹参酮TanⅡA的组合(简称RCT),诱导人成骨肉瘤MG-63细胞分化过程中,细胞核基质构型与蛋白质组成的变化。方法应用流式细胞仪检测细胞周期变化,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线,以选择性抽提整装光镜与电镜技术及蛋白质组学技术分析观察处理前后MG-63细胞核基质构型与蛋白质组成的变化。结果生长曲线显示,RCT处理后MG-63细胞的增殖受到明显抑制,增殖抑制率在第7天达到72.37%,细胞周期出现明显的G0/G1期阻滞。MG-63细胞核基质为典型的肿瘤细胞恶性表型,在RCT处理后发生了向正常细胞转变的恢复性变化。RCT处理后的细胞中多种核基质功能蛋白的表达发生了变化。结论RCT能显著抑制体外培养MG-63细胞的增殖活动,将细胞周期阻滞于G0/G1期,诱导核基质构型发生了显著的恢复性变化,并改变核基质蛋白的组成,对MG-63细胞具有显著的分化诱导作用。 展开更多
关键词 人成骨肉瘤mg-63细胞 分化 核基质 人参皂甙RG1 电镜 蛋白质组学
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