MGBA抗原特异性CD8^+CTL细胞与CIK细胞杀瘤活性的对比研究

目的比较乳腺珠蛋白A(MGBA)抗原特异性CD8^+CTL细胞与CIK细胞对乳腺癌细胞的杀伤效果。方法从健康志愿者外周血中提纯单个核细胞,体外分离、诱导培养成树突状细胞(DC)、CTL和CIK细胞,用免疫磁珠法从CTL细胞中分选CD8^+CTL细胞;用表达乳腺珠蛋白的重组腺病毒(Ad-MGBA)转染DC细胞后,经刺激制备MGBA抗原特异性CD8+CTL与CIK细胞,用流式细胞术检测两种杀伤细胞对乳腺癌细胞的杀伤效果。结果 CD8^+CTL和CIK对表达MGBA抗原的乳腺癌MDA-MB-415细胞杀伤率分别是63.07%和48.35%(P <0.05);对不表达MGBA抗原的乳腺癌MDA-MB-231细胞的杀伤率是14.62%和29.29%(P<0.05)。结论抗原特异性CD8+CTL对表达该抗原的乳腺癌杀伤效果高于CIK细胞,而对不表达该抗原的乳腺癌细胞的杀伤效果低于CIK细胞。

MGBA负载脐带血DC诱导特异性CTL对乳腺癌细胞的杀伤作用

目的:观察乳腺珠蛋白(mammaglobin A,MGBA)负载脐带血来源树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导产生的细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)对乳腺癌细胞的体外杀伤效果。方法:采集健康剖宫产女性志愿者的脐带血,分离脐带血单个核细胞并诱导DC生成,用MGBA致敏DC与自体淋巴细胞共培养诱导CTL。采用流式细胞术测定DC的表型(CD83、CD86、HLADR)变化,ELISA法测定IL-10、IL-12分泌水平,CCK-8法测定CTL对乳腺癌细胞的杀伤活性。结果:成功培养出形态典型、功能成熟的DC,MGBA负载DC诱导的MGBA特异性CTL对乳腺癌细胞MDA-MB-415产生显著的杀伤效果(P<0.05);加入HLA-I抗体可显著减弱杀伤效果,加入HLA-II抗体细胞毒活性无显著变化,加入HLA-I抗体或HLA-II抗体对正常乳腺细胞的杀伤性均无影响。结论:MGBA能明显加强脐带血DC诱导的CTL对乳腺癌细胞的杀伤活性,该杀伤活性具有MHC限制性。

Rg3通过PI3K/Akt调控MGBA表达促进乳腺癌细胞凋亡的研究

目的研究人参皂甙Rg3是否是通过PI3K/Akt信号通路来抑制MGBA的表达,进而促进乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡。方法实验分组:40 nmol/L IGF-1组、100 ng/m L Rg3组、IGF-1+Rg3组和空白对照组。Western-blot检测人参皂苷Rg3对乳腺癌MDA-MB-231细胞内p-Akt及MGBA蛋白表达的影响。MTT法检测作用48 h后人参皂苷Rg3对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制程度;流式细胞术检测作用48 h后人参皂苷Rg3对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响。结果 Trans well检测结果显示:Rg3可以抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞中MGBA的表达,但当增强p-Akt的表达时Rg3的这种抑制作用被明显降低;MTT法检测结果显示:与空白对照组比较,IGF-1组和IGF-1+Rg3组明显促进细胞增殖,而Rg3组明显抑制细胞增殖;流式细胞术检测结果显示:与空白对照组比较,IGF-1组和IGF-1+Rg3组细胞凋亡率明显降低,而Rg3组细胞凋亡率明显增强。结论人参皂甙Rg3干扰乳腺癌细胞内MGBA的表达来促进乳腺癌细胞凋亡的作用是通过影响PI3K/Akt信号通路活性来得以实现的。

基于微生物-肠-脑轴探索神经递质在脑恶性肿瘤中的研究进展

微生物-肠-脑轴(microbiota-gut-brain axis,MGBA)是由神经、内分泌和免疫系统相互作用而构成的复杂网络,为揭示肠道菌群如何影响脑恶性肿瘤的生物学特性提供了关键的理论框架。然而,目前多数研究倾向于探索菌群通过免疫系统对脑肿瘤的影响,而忽视了MGBA组成的多元性。本文重新审视了MGBA理论,重点关注肠道菌群对脑内神经递质(如多巴胺、5-羟色胺和谷氨酸等)的影响,并深入分析上述神经递质调控肿瘤细胞生长和侵袭的机制。旨在深化对肠道菌群与脑恶性肿瘤间关系的理解,并为未来相关领域的基础及临床研究提供新的思路与方向。

人参皂苷Rg3通过人乳腺珠蛋白A促进乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及其可能的机制

目的:研究人参皂苷Rg3通过促进乳腺癌MDA-MB-231细胞人乳腺珠蛋白A(mammaglobin-A,MGBA)的表达从而抑制细胞增殖的作用机制。方法:MTT法和流式细胞术检测5、10、15μg/ml Rg3对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响,Western blotting检测对乳腺癌细胞内MGBA表达的影响;Rg3和siRNA-MGBA单独或联合处理MDA-MB-231细胞,MTT法和流式细胞术检测其对细胞增殖和凋亡的影响,Western blotting检测其对细胞MGBA表达的影响,敏感硫电极法检测其对乳腺癌MDAMB-231细胞H2S分泌的影响。结果:作用细胞48 h后,与对照组相比,5、10、15μg/ml Rg3组MDA-MB-231细胞增殖抑制率明显增高[(18.78±0.82)%、(33.25±1.17)%、(35.11±0.94)%vs(9.72±0.91)%,均P<0.05],Rg3可促进MDA-MB-231细胞的凋亡(P<0.05),也明显增强MDA-MB-231细胞内MGBA蛋白的表达(P<0.05)。与对照组相比,Rg3组MDA-MB-231细胞增殖抑制率明显升高[(30.12±1.01)%vs(10.66±0.59)%,P<0.05],Rg3+siRNA-MGBA组和siRNA-MGBA组MDA-MB-231细胞增殖抑制率明显降低[(6.61±0.63)%、(7.02±0.46)%vs(10.66±0.59)%,均P<0.05];Rg3组MGBA和胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)的表达和H2S的分泌明显增强,而Rg3+siRNA-MGBA组、siRNA-MGBA组明显抑制(均P<0.05)。结论:Rg3可以明显抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖,并促进凋亡,其作用机制可能是通过增强MGBA蛋白的表达并激活H2S/CSE系统得以实现的。