低剂量螺旋CT结合血浆DAPK、MGMT甲基化检测在肺癌早期筛查诊断中的应用价值

目的探讨低剂量螺旋CT结合血浆死亡相关蛋白激酶(DAPK)、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)甲基化检测在肺癌早期筛查诊断中的应用价值。方法选取2022年6月至2022年12月宿迁市第一人民医院收治的92例疑似肺癌患者,以病理诊断为金标准,均行低剂量螺旋CT检查,并采用甲基化特异性PCR法检测患者血浆中DAPK、MGMT基因启动子区甲基化状态,分析低剂量螺旋CT结合血浆DAPK、MGMT甲基化检测在肺癌早期筛查诊断中的价值。结果92例疑似肺癌患者,病理检查结果显示,共有54例阳性患者,包括35例鳞癌,17例腺癌和2例小细胞癌,38例阴性患者中,包括19例肺结核,12例肺炎,6例肺脓肿和1例间质性肺病;低剂量螺旋CT检查诊断出肺癌54例,其中,47例阳性与病理诊断一致,31例阴性与病理诊断一致,经Kappa一致性检验,Kappa=0.686,P<0.05,2种诊断方法的一致性一般;血浆DAPK、MGMT甲基化检测诊断出肺癌55例,其中,44例阳性与病理诊断一致,27例阴性与病理诊断一致,经Kappa一致性检验,Kappa=0.474,P<0.05,2种诊断方法的一致性一般;低剂量螺旋CT结合血浆DAPK、MGMT甲基化检测诊断出肺癌53例,其中,50例阳性与病理诊断一致,35例阴性与病理诊断一致,经Kappa一致性检验,Kappa=0.844,P<0.05,2种诊断方法的一致性较好;低剂量螺旋CT结合血浆DAPK、MGMT甲基化检测以及联合诊断的灵敏度分别为87.04%,81.48%和92.59%,特异度分别为81.58%,71.05%和92.11%,约登指数分别为0.686,0.525和0.847,联合诊断的价值更高。结论低剂量螺旋CT结合血浆DAPK、MGMT甲基化检测诊断用于肺癌诊断与病理诊断一致性较高,用于肺癌患者早期筛查诊断具有重要参考价值。

MGMT基因启动子区甲基化测序分析与前列腺癌研究

目的研究前列腺癌组织中MGMT基因启动子区CpG甲基化表型情况,分析其与前列腺癌之间的关系,探讨前列腺癌早期筛选和诊断的方法。方法应用亚硫酸盐修饰后测序法检测30例前列腺癌组织及20例前列腺增生组织中MGMT基因启动子区CpG甲基化表型情况。结果基因测序结果显示MGMT基因在前列腺癌及前列腺增生组织中CpG位点甲基化率分别为22.9%、10.6%,两者甲基化率比较,P<0.05。结论前列腺癌组织中MGMT基因启动子区甲基化程度显著增高,应用BSP检测相关基因甲基化状态,有可能成为筛选和诊断前列腺癌的重要方法;MGMT基因启动子区甲基化率在不同前列腺癌的危险因素分期中差异无统计学意义。

DNA修复基因MGMT启动子区过甲基化与食管鳞状细胞癌

目的:O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)可以转移DNA加合物O6-甲基鸟嘌呤中的甲基,从而修复DNA损伤,许多肿瘤中发现MGMT基因启动子过甲基化导致该基因失活,我们研究了MGMT基因启动子甲基化状态与食管癌的关系。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应及测序方法分析食管癌、癌旁组织和正常食管上皮中MGMT启动子甲基化状态。结果:在检测的119例食管癌组织中,46例(38.7%)有MGMT基因启动子过甲基化;相应癌旁组织22例中也有5例(22.7%)出现MGMT基因甲基化,而21例正常食管上皮均无此种改变。结论:MGMT基因启动子过甲基化是食管癌中常见的分子事件,可能发生在癌变过程的早期阶段。

痰标本FHIT、P16、MGMT、RASSF1A、APC基因甲基化在肺癌诊断中的作用

目的探讨肺癌患者痰标本中FH IT、P16、MGMT、RASSF1A和APC等抑癌基因启动子异常甲基化及其联合检测在肺癌筛查及早期诊断中的价值。方法采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法,检测47例肺癌组织及对应的痰标本FHIT、P16,MGMT、RASSF1A和APC基因启动子区甲基化状态。24例肺良性疾病患者痰标本作为对照。结果 47例肺癌组织标本中FHIT、P16、MGMT、RASSF1A、APC基因启动子区甲基化检出率分别为40.4%(19/47)、53.2%(25/47)、36.2%(17/47)、21.3%(10/47)和38.3%(18/47);对照的痰标本中五者甲基化检出率分别为38.3%(18/47)、48.9%(23/47)、36.2%(17/47)、17.0%(8/47)和29.8%(14/47),两组甲基化检出率存在着一致性[P>0.05;κ(0.8～1.0)]。24例肺良性病变痰标本中未检测到任何异常甲基化,与肺癌组比较差异有统计学意义(P<0.05)。五项指标联合检测可明显提高肺癌检测的灵敏度(80.9%)和特异度(100.0%)。FHIT和P16基因痰标本甲基化检出率与患者吸烟指数有相关性(P<0.05)。结论痰标本中多个肺癌相关基因甲基化联合检测有望成为肺癌筛查、早期诊断简便有效的指标。

NSCLC患者血浆p16和MGMT基因甲基化检测及临床意义

目的:检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血血浆中p16基因、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)基因启动子的甲基化状态,探讨p16、MGMT基因启动子的异常甲基化在NSCLC筛查及早期诊断中的意义。方法:利用巢式甲基化特异性聚合酶链反应法检测NSCLC患者外周血血浆p16、MGMT基因启动子的甲基化状态。结果:65例NSCLC血浆样品中分别发现19例(29.23%)p16基因启动子异常甲基化和16例(24.62%)MGMT基因启动子异常甲基化,45例正常对照血浆组未检测到p16、MGMT基因启动子的异常甲基化(P<0.05),血浆中两基因甲基化检出率与NSCLC的分型及临床分期无明显相关性(P>0.05)。结论:利用巢式甲基化特异性PCR法检测外周血血浆中p16、MGMT基因启动子的甲基化,可为NSCLC的筛查、早期诊断及预后判断提供有价值的信息。

氡对铀矿工MGMT基因甲基化及超氧化物歧化酶活力的影响

目的探讨氡及其子体对职业人群致肺癌的早期生物效应标志物。方法91名氡职业暴露工人按氡子体累积暴露剂量分为高[〉120WLM（工作水平月）]、中（60-120WLM）、低（30-59WLM）和最低（2-29WLM）4个剂量组,用聚合酶链反应-甲基化特异性（MSP）检测4组人群痰细胞中的6-氧-甲基嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）基因的异常甲基化状态,用黄嘌呤氧化酶法测定血浆超氧化物歧化酶（SOD）活力。结果随着氡子体累积暴露剂量增加,MGMT基因甲基化率呈上升趋势（0.00%-28.00%）,且差异有统计学意义（P〈0.01）;在最低、低、中和高剂量职业氡暴露人群外周血中,SOD活力分别为（116.5±12.3）、（89.6±8.3）、（63.6±8.9）和（40.9±7.6）kU/L,组间差异有统计学意义（P〈0.05）,SOD活力呈逐渐下降趋势,线性回归方程y=138.78-16.32x（r=-0.96,P〈0.05）。结论MGMT基因甲基化和SOD活力与氡子体累积暴露剂量有关。

结直肠癌患者粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化状态观察

目的观察结直肠癌(CRC)患者粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化状态。方法 CRC患者50例(肿瘤组)、结直肠良性病变者50例(良性组)、健康体检者50例(正常组),采用甲基化特异度PCR的方法检测各组粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化检出率,并分析其与CRC临床病理参数的关系。根据肠镜病理诊断结果进行验证,比较粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A单独及联合检测诊断CRC的敏感度和特异度。结果肿瘤组、良性组、正常组粪便p16INK4a基因甲基化检出率分别为74%、28%、14%,MGMT基因甲基化检出率分别为56%、24%、12%,RASSF1A基因甲基化检出率分别为72%、20%、10%,肿瘤组分别与正常组、良性组比较,P均<0.05。p16INK4a基因甲基化状态与CRC分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关,MGMT基因甲基化状态与CRC淋巴结转移相关,RASSF1A基因甲基化状态与CRC分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关,P均<0.05。三者联合检测诊断CRC的敏感度为95.8%,特异度为83.4%,ROC曲线下面积为0.816(95%CI 0.739%~0.894%)。结论 CRC患者粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化检出率明显高于结直肠良性病变者及健康体检者,联合检测上述指标有助于CRC患者的早期诊断及其生物学行为的判断。

MGMT基因甲基化状态在结直肠锯齿状病变中的表达及意义

目的 观察锯齿状病变组织中MGMT基因甲基化状态和MGMT蛋白表达,探讨临床病理意义和在癌变通路中的作用,同时探讨MGMT基因在不同年龄层段甲基化状况.方法 应用Taqman探针qPCR （MethyLight）方法检测北京军区总医院2007～2013年的225例锯齿状病变[包括96例增生性息肉（HP）、61例广基（无蒂）锯齿状腺瘤/息肉（SSA/P）和68例传统型锯齿状腺瘤（TSA）]、54例管状腺瘤（TA）、69例结直肠癌（CRC）和42例正常结直肠黏膜组织中MGMT基因CpG岛甲基化状态,并通过测序法验证扩增的目的片段甲基化状态,同时应用免疫组化方法检测其中116例锯齿状病变（包括52例HP、41例SSA/P、23例TSA）、20例TA、24例CRC和24例正常结直肠黏膜组织中MGMT蛋白的表达情况.结果MGMT基因启动子甲基化状态和MGMT蛋白异常阳性程度在锯齿状病变和对照组中差异均有统计学意义（P＜0.05）,且两者之间呈负相关;MGMT基因启动子甲基化频率在不同年龄层段相关性比较中两者呈正相关,但差异无统计学意义（P＞0.05）.结论组织中MGMT基因甲基化可能诱导其蛋白表达下调的主要原因,在结直肠“增生性息肉-锯齿状腺瘤-癌”的锯齿状癌变通路中起重要作用.

脑脊液MGMT启动子甲基化在胶质瘤诊断中的应用

目的比较胶质瘤患者脑脊液与外周血中MGMT(O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶)启动子甲基化在胶质瘤初期诊断中的敏感度和特异性。方法收集283例胶质瘤患者肿瘤组织及其对应的术前外周血和脑脊液,10例颅脑外伤患者挫伤的脑组织及其对应的术前外周血、脑脊液。MGMT启动子甲基化状态通过甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR, MSP)确定,比较脑肿瘤组织,外周血和脑脊液中MGMT启动子甲基化率。结果不同级别胶质瘤组织MGMT启动子甲基化阳性率分别为68.13%(WHOⅡ)、65.69%(WHOⅢ)以及67.78%(WHOⅣ),三者之间差异无统计学意义(P>0.05)。胶质瘤瘤体组织、对应的外周血和脑脊液启动子甲基化率为分别为67.14%、44.87%和66.08%,阴性对照组中检测结果均为0。MGMT启动子甲基化阳性瘤体组织,对应的脑脊液中MGMT启动子甲基化敏感度为79.66%(141/177),较对应的外周血58.82%(110/187)高(P<0.05)。结论术前患者肿瘤组织、脑脊液和外周血中MGMT启动子甲基化率与肿瘤级别无关。与外周血相比,脑脊液中的MGMT启动子甲基化特异性和敏感度更高。

5'-氮杂-2'-脱氧胞苷对结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中MGMT基因甲基化状态、mRNA表达及蛋白表达的影响

目的探讨甲基化酶抑制剂5'-氮杂-2'-脱氧胞苷(5'-Aza-CdR)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞株HT-29和LoVo中MGMT基因甲基化水平、mRNA及蛋白表达的影响。方法用0.5、1.0、1.5μmol/L浓度的5'-Aza-CdR处理CRC细胞株HT-29和LoVo。应用MethyLight方法、实时荧光定量PCR方法及蛋白印迹试验(Westernblot)检测药物处理前后HT-29和LoVo细胞中MGMT基因的甲基化状态、mRNA和蛋白表达情况。结果 MethyLight检测HT-29和LoVo细胞中MGMT蛋白在药物作用后异常甲基化得到逆转。实时荧光定量PCR检测5'-Aza-CdR浓度为0.5、1.0、1.5μmol/L组HT-29细胞株和LoVo细胞株MGMT基因mRNA表达水平均较对照组上调,Western blot检测5'-Aza-CdR浓度为0.5、1.0、1.5μmol/L组MGMT蛋白表达水平均较对照组上调,且均具有药物剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)。结论 CRC细胞株HT-29和LoVo中MGMT基因启动子甲基化可能是导致该基因表达下调甚至失活的主要原因。5'-Aza-CdR能够逆转CRC细胞株HT-29和LoVo中MGMT基因的甲基化状态,并能恢复mRNA及蛋白重新表达。

p16、MGMT甲基化在肺癌早期断诊中意义

目的通过联合检测血清DNA中p16、MGMT基因的异常甲基化以及血清细胞角蛋白19血清片段21-1(CYFRA21-1)的含量,以探讨联合检测在肺癌早期诊断中的临床意义。方法分离提取72例肺癌患者的外周血血清DNA,采用巢式甲基化特异性PCR方法检测p16、MGMT基因的甲基化状态,同时应用放射免疫法测定血清cYFRA21-1的含量,并以20例肺部良性疾病患者(BLD)和25例健康体检者作对照,分析两者联合应用的诊断价值。结果在52例肺癌患者血清中检测到p16基因的甲基化,阳性率为72.2%;47例肺癌患者血清中检测到MGMT基因的甲基化,阳性率为65.3%,而CYFRA21-1的阳性率为63.8%;平行联合检测时敏感性增至92.4%。BLD组p16、MGMT基因甲基化与CYFRA21-1阳性率分别为10.0%,5.0%和20.0%;健康对照者血清中p16、MGMT基因均无异常甲基化。结论联合检测血清p16、MGMT基因甲基化与CYFRA21-1含量可提高肺癌诊断的敏感性和特异性,对于肺癌的早期诊断具有重要意义。

脑胶质瘤MGMT表达与血清和脑脊液MGMT基因启动子甲基化的相关性

目的探讨胶质瘤患者血清、脑脊液中O-6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O-6-methylguananine-DNA methyltransferase,MGMT)基因启动子甲基化状态与肿瘤组织MGMT蛋白表达水平的相关性。方法对76例胶质瘤患者分别采用免疫组化和甲基化特异性聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法分别检测肿瘤组织中MGMT蛋白表达水平及血清、脑脊液中MGMT基因启动子的甲基化状态。分析血清、脑脊液中MGMT基因启动子甲基化与肿瘤组织MGMT蛋白表达水平以及肿瘤临床病理特征的关系。结果胶质瘤患者血清、脑脊液中MGMT基因启动子甲基化阳性的检出率分别为64. 5%(49/76)和73. 7%(56/76)(P=0. 219)。MGMT基因启动子甲基化状态与胶质瘤肿瘤分期及病理类型无显著相关性。脑脊液MGMT基因启动子甲基化状态与胶质瘤组织MGMT蛋白表达水平呈显著负相关(P <0. 001)。结论胶质瘤患者脑脊液MGMT基因启动子甲基化状态与肿瘤组织MGMT蛋白表达密切相关,有望成为判断脑胶质瘤患者预后和预测肿瘤化疗耐药性的标志分子。

粪便中MGMT,p16^(INK4A)及ECAD基因启动子甲基化检测在结直肠癌诊断中的价值

目的探讨粪便中p16INK4A、ECAD及MGMT基因启动子甲基化在结直肠癌诊断中的应用价值。方法选择我院老年病科2014年2月至2015年11月收治的65岁以上老年健康者50例(对照组)、结直肠镜检查证实良性结直肠疾病者41例(良性肠病组)和结直肠癌患者46例(肠癌组)为研究对象。采用表观遗传学方法应用甲基化特异PCR对上述患者粪便中p16INK4A、MGMT和ECAD基因启动子DNA甲基化进行检测,判断上述标本中各基因启动子的甲基化水平。根据p16INK4A、MGMT和ECAD基因启动子DNA甲基化水平,评价其作为诊断结直肠癌的敏感性和特异性。结果对照组、良性肠病组和肠癌组p16INK4A基因启动子DNA甲基化率分别为14.0%、24.4%和71.7%;MGM基因甲基化率分别为16.0%、14.6%和54.3%;ECAD基因甲基化率分别为12.0%、19.5%和65.2%。上述基因启动子甲基化率在肠癌组明显高于对照组和良性肠病组,差异均有统计学意义(P<0.05);p16INK4A、MGMT和ECAD诊断肠癌的敏感性分别为0.72、0.54和0.65,特异性分别为0.76、0.75和0.80。结论 p16INK4A、MGMT和ECAD基因启动子甲基化发生率在肠癌患者粪便中显著增高,可作为肠癌诊断的分子标志物。

放化同期治疗对局部晚期非小细胞肺癌血浆MGMT的影响及意义

目的:比较放化同期治疗和放化序贯治疗对局部晚期非小细胞肺癌血浆中MGMT的影响。方法:2010年1月至2012年12月,64例经病理确诊的Ⅱb至Ⅲb期非小细胞肺癌患者,随机分成放化同期治疗(A组)和放化序贯治疗(B组)两组。A组采用三维适形放疗及同期每周TC方案化疗后序贯TC方案化疗2个周期。B组先接受三维适形放疗后序贯TC方案化疗4个周期。在放射治疗前、放疗开始一个月和治疗后(两组均完成四个周期化疗后)采用巢式甲基化特异性PCR方法检测MGMT基因的甲基化状态。比较两组MGMT基因甲基化阳性率的动态变化情况。结果:A、B两组缓解率分别为90.6%和68.8%;A组近期治疗有效率明显优于B组(P=0.0296)。A组和B组的中位疾病进展时间为8.8个月(3-22个月)和7.3个月(2.8-21个月)(P=0.4635)。A、B两组1年生存率分别为74.1%、72.4%;2年生存率为46.8%、45.2%(P>0.05)。在放射治疗前,A组和B组的MGMT基因甲基化阳性率分别为31.3%(10/32)和34.4%(11/32),无显著性差异(P=0.7901);放疗开始1个月甲基化阳性率分别为15.6%(5/32)和37.5%(12/32),有显著性差异(P=0.0476);治疗后甲基化阳性率分别为9.4%(3/32)和21.9%(7/32),无显著性差异(P=0.1685)。治疗前后,A组MGMT基因甲基化阳性率显著下降(P=0.0296);B组有下降趋势但无显著差异。结论:放化同期治疗较序贯治疗能够有效降低局部晚期肺癌血浆中MGMT基因异常甲基化,提示同期化疗能够抑制肿瘤放疗过程中放疗诱发的肿瘤再修复。

结、直肠癌中MGMT基因多位点甲基化的定量分析

目的探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-m ethylguan ine-DNA m ethyltransferase,MGMT)基因不同位点的甲基化与结、直肠癌发生、进展的关系。方法应用DNA微阵列技术对20例结、直肠癌标本及癌旁组织进行MGMT基因启动子区5种高甲基化模式的定量检测分析。结果20例样本中有17例无论是肿瘤组织还是癌旁组织其各位点均有不同程度的甲基化,且肿瘤组织启动子区各CpG位点甲基化水平均高于其对应的癌旁组织(P<0.05),其中CpG13-15、20-23位点甲基化水平明显增高。MGMT基因各CpG位点的甲基化水平在不同的病理分级和肿瘤淋巴结转移中差异无显著性(均P>0.05)。结论结、直肠癌中存在高频MGMT基因启动子高甲基化,且其甲基化模式不止一种。MGMT基因表型遗传性失活可能在结、直肠肿瘤发生过程中起重要作用。MGMT基因启动子的异常甲基化与肿瘤发展水平并无直接相关性。

弥漫大B细胞淋巴瘤患者血浆MGMT基因甲基化与化疗疗效关系

目的检测弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者外周血血浆中O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylgua-nine-DNA methyltransferase,MGMT)基因的甲基化状态,探讨MGMT基因甲基化与含烷化剂方案治疗DLBCL疗效的关系。方法利用巢式甲基化特异性聚合酶链反应法检测CHOP方案治疗前后DLBCL患者外周血血浆MGMT基因的甲基化状态。结果 30例DLBCL患者血浆MGMT基因甲基化率为63.3%(19/30),血浆MGMT基因甲基化者化疗有效率为100.0%(19/19),非甲基化者化疗有效率为72.7%(8/11),两组化疗有效率差异有统计学意义(P=0.041)。血浆MGMT基因甲基化者化疗后耐药发生率为10.5%(2/19),非甲基化者耐药发生率为54.5%(6/11),两组化疗耐药率差异有统计学意义(P=0.028)。结论外周血血浆中MGMT基因甲基化可能是预示DLBCL使用含烷化剂方案化疗疗效和耐药的指标。

5-氮杂-2′-脱氧胞苷对肺癌SPC-A-1细胞p16、MGMT基因甲基化及其表达的影响

目的观察5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对体外培养的肺癌SPC-A-1细胞p16、MGMT基因启动子区DNA甲基化状态及其表达的影响,探讨肺癌细胞p16、MGMT基因失活的机制及去甲基化制剂对p16、MGMT基因表达的调控。方法 5-Aza-CdR处理体外培养的肺癌SPC-A-1细胞,甲基化特异性PCR(MSP)法检测用药前后细胞p16、MGMT基因的甲基化状态,RT-PCR法检测用药前后细胞p16、MGMT mRNA。结果加入5-Aza-CdR前,SPC-A-1细胞p16、MGMTmRNA表达缺失,其启动子区域表现为DNA甲基化。加入5-Aza-CdR后,SPC-A-1细胞中p16、MGMT基因呈现DNA去甲基化,而且表达缺失的p16、MGMT mRNA重新表达。结论启动子区高甲基化是肺癌细胞p16、MGMT基因失活的主要原因之一,去甲基化制剂5-Aza-CdR能逆转p16、MGMT基因甲基化状态,从而调控p16、MGMT基因表达。

原发性与继发性胶质母细胞瘤中MGMT与突变型P53蛋白表达的差异及其生物学意义

背景与目的:探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanina-DNA methyltransferase,MGMT)与突变型P53蛋白在原发性与继发性胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)中表达的差异性及其生物学意义。材料与方法:应用免疫组织化学法检测39例GBM(原发性组13例和继发性组26例)中MGMT与突变型P53蛋白的表达,比较两者在原发性与继发性GBM中的表达差异;分析MGMT与突变型P53蛋白表达的相关性及其与预后的关系。结果:原发性和继发性GBM间突变型P53蛋白的阳性表达率和表达强度差异均有统计学意义(P均<0.01)。继发性GBM中MGMT的阳性表达强度降低而突变型P53蛋白的表达强度明显增强(P<0.01),两者表达呈负相关(r=-0.602,P<0.01)。原发性GBM中MGMT的表达与突变型P53蛋白的表达无关(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示:原发性GBM和MGMT高表达患者的生存时间缩短(Log-rank检验,P<0.05或P<0.01)。Cox多因素相关分析表明GBM的分型和MGMT的阳性表达是影响患者生存期的独立预后因素(分别为P<0.05和P<0.01)。结论:P53基因突变是继发性GBM的发生过程中的高发事件,突变型P53蛋白的表达强度增强与MGMT表达减弱有关。而原发性GBM中MGMT的表达与突变型P53蛋白的表达无关。提示原发性和继发性GBM在发生、发展的过程中有着不同的分子遗传学途径。GBM的分型、MGMT的阳性表达是影响GBM患者生存期的独立预后因素。

5-氮杂-2′-脱氧胞苷诱导胃癌细胞系中p16和MGMT基因去甲基化并激活其表达

目的观察5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-dC)对体外培养的胃癌细胞MGC-803中p16和MGMT基因启动子区DNA甲基化状态及表达的影响,探讨胃癌细胞p16和MGMT基因失活的机制及去甲基化制剂对p16和MGMT基因表达的调控。方法5-Aza-dC处理体外培养的胃癌细胞MGC-803后,甲基化特异性PCR(MSP)法检测用药前后细胞中p16和MGMT基因的甲基化状态,RT-PCR法检测用药前后细胞中p16和MGMTmRNA表达的变化。结果胃癌细胞系MGC-803中p16和MGMTmRNA表达缺失,其启动子区域表现为DNA甲基化。5-Aza-dC不但能使MGC-803细胞中p16和MGMT基因发生DNA去甲基化,而且能使表达缺失的p16和MGMTmRNA重新表达。结论启动子区高甲基化是胃癌细胞p16和MGMT基因失活的主要原因之一,去甲基化制剂-5-Aza-dC能逆转p16和MGMT基因甲基化状态,从而调控p16和MGMT基因表达。

急性白血病患者p53和MGMT基因突变检测

目的 :研究 p5 3和MGMT基因突变在急性白血病发病中的意义以及 p5 3基因突变与MGMT基因突变的关系。方法 :应用聚合酶链反应 单链构象多态性 (PCR SSCP )技术 ,对 36例急性非淋巴细胞白血病 (AN LL) ,2 6例急性淋巴细胞白血病 (ALL)和 2 3例健康对照组骨髓细胞的 p5 3和MGMT基因突变进行了分析。 结果 :p5 3基因突变率在ANLL中为 16 .7%、ALL中为 19.2 % ,MGMT基因突变率在ANLL中为 13.9%、ALL中为15 .4 % ;6 2例急性白血病中有 4例为 p5 3和MGMT 2个基因同时发生突变 ;正常对照组均未发生p5 3和MGMT基因突变。结论 :p5 3和MGMT基因突变在急性白血病发生与发展中起到一定作用 ,急性白血病中 p5