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MLVA技术用于福建105株结核分枝杆菌基因分型的初步研究 被引量:16
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作者 蒋毅 张丽水 +5 位作者 赵秀芹 黄明翔 刘志广 王琳 董海燕 万康林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期1-4,共4页
目的探讨MLVA技术在福建省结核分枝杆菌基因分型中的应用。方法选取12个分型效果较好的VNTR基因位点。应用聚合酶链反应(PCR)和琼脂糖凝胶电泳,建立检测结核分枝杆菌DNA指纹多态性的方法,分析结核分枝杆菌DNA多态性。结果共对105株结核... 目的探讨MLVA技术在福建省结核分枝杆菌基因分型中的应用。方法选取12个分型效果较好的VNTR基因位点。应用聚合酶链反应(PCR)和琼脂糖凝胶电泳,建立检测结核分枝杆菌DNA指纹多态性的方法,分析结核分枝杆菌DNA多态性。结果共对105株结核分枝杆菌的12个VNTR位点进行了检测,根据这些菌株的指纹多态性特征,共分为4个基因型(I型I、I型I、II型I、V型),其中Ⅰ型所占比例最大,为66.7%(70/105),Ⅱ型占20%(21/105),Ⅲ型占9.5%(10/105),Ⅳ型占3.8%(4/105)。结论结果提示福建省结核分枝杆菌的传播是以Ⅰ型菌株为主,应加强此型菌株流行的监控。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 mlva技术 基因分型
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布鲁氏菌分离株MLVA分子分型鉴定 被引量:4
2
作者 马晓菁 叶锋 +6 位作者 姚刚 易新萍 刘帅 谷文喜 吐尔洪.努尔 马俊杰 钟旗 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期722-727,共6页
目的对牛奶、羊奶以及羊流产胎儿中分离布鲁氏菌进行分型鉴定。方法采集新疆4个地区牛奶20份,羊奶20份,羊流产胎儿10份,分离培养后,运用VirB8-PCR和布鲁氏菌分子分型PCR(AMOS-PCR)方法对分离株进行布鲁氏菌属、种的鉴定,同时采用MLVA方... 目的对牛奶、羊奶以及羊流产胎儿中分离布鲁氏菌进行分型鉴定。方法采集新疆4个地区牛奶20份,羊奶20份,羊流产胎儿10份,分离培养后,运用VirB8-PCR和布鲁氏菌分子分型PCR(AMOS-PCR)方法对分离株进行布鲁氏菌属、种的鉴定,同时采用MLVA方法对分离株进一步鉴定,并将测定结果与http://mlva.u-psud.fr/数据库提供的布鲁氏菌数据进行比较,结合软件BioNumerics 6.6进行聚类分析。结果 6株分离株均为羊种3型布鲁氏菌,与辽宁省分离羊种3型布鲁氏菌在聚类分析中关系较近。结论 MLVA作为布鲁氏菌基因分型鉴定的一种快速、可靠的方法,为今后布鲁氏菌传染源的追溯及防控措施的制定提供依据。 展开更多
关键词 mlva 牛乳 布鲁氏菌 鉴定
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福建省2008-2017年人间布鲁氏菌病流行特征及分离株MLVA分型研究 被引量:21
3
作者 韩腾伟 林代华 +4 位作者 刘菁 刘维俊 肖方震 陈志平 邓艳琴 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期382-388,共7页
目的探讨福建省人间布鲁氏菌病流行特征,并对其分离株进行分子分型,为制定预防控制策略提供依据。方法收集中国疾病预防控制信息系统中2008-2017年福建省布鲁氏菌病报告数据,进行流行特征分析;采用传统生物学鉴定和BCSP31-PCR、AMOS-PCR... 目的探讨福建省人间布鲁氏菌病流行特征,并对其分离株进行分子分型,为制定预防控制策略提供依据。方法收集中国疾病预防控制信息系统中2008-2017年福建省布鲁氏菌病报告数据,进行流行特征分析;采用传统生物学鉴定和BCSP31-PCR、AMOS-PCR、MLVA-16进行布鲁氏菌分离株分子鉴定和分型,并进行聚类分析。结果福建省2008-2017年布鲁氏菌病发病呈逐年上升趋势,年均发病率0.11/10万;疫情波及福建省80%的县区,呈高度散发态势;发病高峰为4-8月;40~64岁发病数占62.7%,60~64岁组发病率最高(0.27/10万);男女比为2.50∶1,农牧民占50.7%。40株布鲁氏菌分离株分子检测结果与传统分型基本相符,为2个种(羊种和猪种)和2个生物型(羊3型和猪3型),其中羊种布鲁氏菌占绝大多数(87.5%);MLVA-16分型将其分为羊种和猪种2个种群,35株羊种菌分为28种基因型,5株猪种菌分为4种基因型,其中26种基因型为单分离株,6种基因型为共享基因型(共14株,35.0%)。同国内147株布鲁氏菌进行聚类分析显示,福建省菌株与广东和内蒙古地区存在4种共享基因型,均为羊种菌,其他部分菌株与外省菌株存在着较近的遗传距离,主要集中在panel 2B上,仅存在1~3个位点的差异。结论福建省布鲁氏菌病流行强度逐年增高,建议相关部门加强传染源的管控、对疫情高发地区的重点人群采取必要防控措施,控制其发生与流行。福建省布鲁氏菌MLVA-16分型显示高度基因多态性,提示MLVA-16可用于遗传多样性分析和分子流行病学溯源调查,可以提高布鲁氏菌病监测能力。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 流行特征 多位点可变数目串联重复序列分析(mlva-16) 福建省
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MLVA方法在军团菌分子分型中的应用评价 被引量:2
4
作者 朱兵清 任红宇 +2 位作者 周海健 关红 邵祝军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期256-260,283,共6页
目的探讨MLVA方法在军团菌分型中的可应用性。方法选用文献报道的9个军团菌VNTR位点,对我国环境水中分离的81株Lp1型军团菌菌株和2株参考菌株进行分子分型研究,并与PFGE和SBT分型结果进行了比较。结果 81株分离菌株9个VNTR位点的等位基... 目的探讨MLVA方法在军团菌分型中的可应用性。方法选用文献报道的9个军团菌VNTR位点,对我国环境水中分离的81株Lp1型军团菌菌株和2株参考菌株进行分子分型研究,并与PFGE和SBT分型结果进行了比较。结果 81株分离菌株9个VNTR位点的等位基因型别数分别为6,3,4,2,3,3,2,4和7,其中部分菌株的某些位点无扩增产物或产物为非目的片断。7个位点PCR产物具有重复单元;Lpms3位点PCR产物无重复单元;Lpms31位点部分菌株PCR产物有重复单元,另一些菌株无重复单元。对于具有重复单元的序列,不同菌株间以及同一菌株内各重复单元的序列变异均较大,3个位点存在不完整的重复单元。根据8个位点的PCR产物电泳结果,81株Lp1型分离菌株分为19个MLVA型。通过PFGE和SBT方法,81株Lp1型分离菌株分别分为46种PFGE带型和21种ST型。结论 MLVA方法的分型能力不及PFGE方法,而与SBT方法分型能力相当。但是,MLVA方法操作简单、成本低廉,而且可对培养阴性的标本进行分型,因此,该方法适合在基层推广应用。 展开更多
关键词 军团菌 嗜肺军团菌 分子分型 mlva
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2012-2015年贵州省炭疽芽胞杆菌分离鉴定及MLVA分型分析 被引量:4
5
作者 马青 喻欢 +5 位作者 刘英 王铭 姚光海 唐光鹏 王定明 李世军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期624-628,共5页
目的了解菌株的分子流行病学特征,为贵州省炭疽疫情的预防控制提供科学依据。方法对2012-2015年贵州省间不同地区的409份标本(外环境388份、患者19份和牲畜2份)进行炭疽芽胞杆菌分离培养,采用革兰染色镜检、青霉素抑制试验和噬菌体裂解... 目的了解菌株的分子流行病学特征,为贵州省炭疽疫情的预防控制提供科学依据。方法对2012-2015年贵州省间不同地区的409份标本(外环境388份、患者19份和牲畜2份)进行炭疽芽胞杆菌分离培养,采用革兰染色镜检、青霉素抑制试验和噬菌体裂解试验对可疑炭疽菌落进行鉴定,分析菌株检出情况。运用MLVA-15技术对炭疽芽胞杆菌分离株进行基因分型获得各VNTR位点的扩增长度并计算重复单元的重复数目。结合各VNTR位点重复数目,利用NTsys 2.10e软件对不同地区菌株进行聚类分析。结果从409份标本中分离出34株炭疽芽胞杆菌,检出率为8.31%。其中341份土壤检出33株,检出率为9.68%;17份患者皮肤病灶渗出液检出1株,检出率为5.88%。2015年分离出炭疽杆菌的阳性率最高,占48.72%(19/39)。MLVA-15分析显示,34株菌株被分为3个MLVA型;聚类分析显示,34株菌株被分为A和B两簇,其中A簇又被进一步分为A1和A2分支。来自相同地区或年份的多数菌株聚类关系相对较近。结论 2012-2015年贵州省间各种疑似炭疽送检标本中,土壤的检出阳性率最高,贵州省炭疽芽胞杆菌菌株具有MLVA型别多样性,型别分布和聚类关系具有明显的地域性。 展开更多
关键词 炭疽 炭疽芽胞杆菌 mlva-15 贵州
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福氏志贺菌PFGE和MLVA分子分型方法的应用与评价 被引量:2
6
作者 杨劲松 陈爱平 +3 位作者 陈建辉 罗朝晨 林杰 郑恩惠 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期245-249,253,共6页
目的比较和评价脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)和多位点可变数目串联重复序列分析技术(MLVA)在福建地区福氏志贺菌研究中的应用。方法运用PFGE和MLVA技术对43株分离自福建地区的福氏志贺菌进行分子分型,结合流行病学资料分析比较分型效果。结... 目的比较和评价脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)和多位点可变数目串联重复序列分析技术(MLVA)在福建地区福氏志贺菌研究中的应用。方法运用PFGE和MLVA技术对43株分离自福建地区的福氏志贺菌进行分子分型,结合流行病学资料分析比较分型效果。结果 43株福氏志贺菌经PFGE分型后相似度在61.70%~100%之间,按照100%的相似水平可分为36个PFGE型,没有优势PFGE型别,分辨系数为0.992 2,存在4个优势簇(G1~G4);福氏志贺菌经MLVA分型后,按照100%的相似水平可分为41个MLVA型别,遗传关联度介于6.207%~100%之间,没有优势MLVA型别,分辨系数为0.997 8,得到5个优势基因群(Cluster1~5)。在最小生成树上,部分F4c与Fx亲缘关系较近,并都由F2a和F1a分支而来,表现出一定的遗传关系。结论两种分型方法的分辨率基本一致,PFGE分型结果与流行病学背景资料及血清型别基本吻合,MLVA在分析菌株种群进化关系上更具优势。 展开更多
关键词 福氏志贺菌 PFGE mlva 遗传进化
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大理地区合并HIV双重感染者结核分枝杆菌MLVA法基因分型研究 被引量:2
7
作者 聂恒 王旭东 吴利先 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期923-926,共4页
目的探讨MLVA基因分型法在云南大理地区合并HIV双重感染者结核分枝杆菌基因分型中的运用,初步研究其基因型特征。方法选取大理地区61株合并HIV双重感染者结核分枝杆菌临床分离株,采用聚合酶链反应(PCR)分别对VNTR位点进行检测分析,应用B... 目的探讨MLVA基因分型法在云南大理地区合并HIV双重感染者结核分枝杆菌基因分型中的运用,初步研究其基因型特征。方法选取大理地区61株合并HIV双重感染者结核分枝杆菌临床分离株,采用聚合酶链反应(PCR)分别对VNTR位点进行检测分析,应用BioNumerics(6.6)软件进行聚类分析。结果共对61株合并HIV双重感染者的结核分枝杆菌的15个VNTR位点进行检测,呈现出明显的基因多态性。各个位点的分辨能力不同,其中MIRU26(0.839)最高,MIRU4(0.341)最低。经聚类分析,61株双重感染结核分枝杆菌菌株可分为5个基因群,61个基因型,以Ⅰ型占比例最大占51.6%(32/61);H37Rv减毒株在Ⅱ型。结论大理地区合并HIV双重感染者结核分枝杆菌VNTR基因存在明显多态性,主要流行菌群为北京家族基因型。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 基因分型 双重感染 HIV mlva
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MLVA分型在布鲁氏菌临床分离株中的应用探索 被引量:1
8
作者 吕燕宁 陈丽娟 +3 位作者 李仁清 孙玉兰 陈艳伟 王全意 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期514-519,共6页
目的探讨MLVA分型对于鉴别布鲁氏菌病复发与重复感染的意义。方法对初次发病与二次发病的布病患者进行血培养,分离菌株,对分离菌株做布鲁氏菌种属鉴定与MLVA-16分型鉴定,分析两次发病分离到的菌株的分型结果及各位点的差异。结果收集到... 目的探讨MLVA分型对于鉴别布鲁氏菌病复发与重复感染的意义。方法对初次发病与二次发病的布病患者进行血培养,分离菌株,对分离菌株做布鲁氏菌种属鉴定与MLVA-16分型鉴定,分析两次发病分离到的菌株的分型结果及各位点的差异。结果收集到4例二次发病的布病患者的血培养物,分离得到8株布鲁氏菌,经MLVA-16分型鉴定为7个基因型,1例两次发病时间间隔较短的患者的2株分离株的MLVA-16分型一致,没有差别,提示为复发。而另外3例两次发病时间间隔较长的患者的6株分离菌株,其MLVA-16分型的基因型不同,分别各有一个位点的差异,提示为重复感染。结论MLVA分型对于布鲁氏菌病的复发与重复感染具有一定的鉴别意义。 展开更多
关键词 布鲁菌氏病 复发 重复感染 mlva
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MLVA方法对奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的分型研究及效果评价 被引量:1
9
作者 高健 刘修权 +2 位作者 王志 苏敬良 韩博 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期538-543,共6页
奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的分型对预防菌株在牛体之间传播、了解菌株地域性分布特点及针对性疫苗的研制均有重要的意义。本研究旨在将多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)法应用于国内乳房炎金葡菌的分型研究,以进行分子流行病学调... 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的分型对预防菌株在牛体之间传播、了解菌株地域性分布特点及针对性疫苗的研制均有重要的意义。本研究旨在将多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)法应用于国内乳房炎金葡菌的分型研究,以进行分子流行病学调查。同时,将其与16-23SrRNA基因间区分析法(RS-PCR)的分型结果比较,以评价MLVA法对乳房炎金葡菌的分型效果。作者建立MLVA方法(多重PCR体系)对27株乳房炎金葡菌进行分型,同时应用RS-PCR法进行分型。结果2种方法均可将8个地区17个牛场分离到的27株菌全部分型,分型率为100%。MLVA法将菌株分为19个型,不同牛场来源的金葡菌均属于不同型,相同牛场来源的菌株除上海和北京某牛场外均属于相同型;此方法的分型力为0.969。RS-PCR法将菌株分为10个型,其中Ⅰ、Ⅱ和Ⅴ型菌株均来源于不同地区,分型力为0.829。结果显示,MLVA分型法具有快速、操作方便和分型能力强等特点,可应用于乳房炎金葡菌的分子流行病学研究。同时,研究表明,我国不同牛场的乳房炎金葡菌具有型特异性,该结果与少数优势型金黄色葡萄球菌引起绝大多数乳房炎的报道相反。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 金黄色葡萄球菌 mlva 分型
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河北省鼠疫菌MLVA基因分型 被引量:1
10
作者 周松 杜国义 +8 位作者 李伟 刘广 王宇萌 刘晓伟 王海峰 田亚汀 陈永明 刘合智 史献明 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2020年第5期465-468,共4页
目的研究河北省鼠疫菌株多位点可变数串联重复序列(multiple-locus variable-number tandem-repeat analysis,MLVA)分型特征,分析其流行病学意义。方法采用MLVA(14+12)分型策略设计引物。利用聚合酶链式反应(PCR)、毛细管电泳方法和Bio ... 目的研究河北省鼠疫菌株多位点可变数串联重复序列(multiple-locus variable-number tandem-repeat analysis,MLVA)分型特征,分析其流行病学意义。方法采用MLVA(14+12)分型策略设计引物。利用聚合酶链式反应(PCR)、毛细管电泳方法和Bio Numerics软件,对河北分离的鼠疫菌进行聚类分析。结果在选取的鼠疫菌26个可变数串联重复序列(variable number of tandem repeats,VNTR)位点中,8个VNTR位点对河北省鼠疫菌具有遗传多态性分析意义。河北省鼠疫疫源地分离到的128株鼠疫菌可分为2个群,15个基因型。结论通过MLVA分析显示河北鼠疫菌株具有多态性,基因遗传变异相对稳定,对于未来鼠疫疫情暴发溯源和鼠疫菌种群的研究具有指导意义。 展开更多
关键词 鼠疫菌 基因分型 mlva
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Molecular Typing of Brucella Suis Collected from 1960s to 2010s in China by MLVA and PFGE 被引量:13
11
作者 LI Zhen Jun CUI Bu Yun +9 位作者 CHEN Hai CHEN Jing Diao ZHAO Hong Yan PIAO Dong Ri JIANG Hai ZHANG Li TANG Xu KE Chang Wen YAO zhen TIAN Guo Zhong 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2013年第6期504-508,共5页
Brucellosis is a bacterial anthropozoonosis usually caused by Brucella abortus, Brucella melitensis, Brucella suis and Brucella canis. Brucella suis, the causative agent of swine brucellosis, is classified into five b... Brucellosis is a bacterial anthropozoonosis usually caused by Brucella abortus, Brucella melitensis, Brucella suis and Brucella canis. Brucella suis, the causative agent of swine brucellosis, is classified into five biovars and preferentially infects different animal hostsIll. In China, brucellosis is a national notifiable communicable disease both in animals and in human. In 2009, 35 816 brucellosis cases were reported. The annual incidence was 2.7 per 100 000 population. 展开更多
关键词 mlva Molecular Typing of Brucella Suis Collected from 1960s to 2010s in China by mlva and PFGE 2010
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吉林省鼠伤寒沙门菌MLVA分型流行特征分析
12
作者 王岙 赵薇 +4 位作者 李可维 郭丰 石奔 杨修军 孙景昱 《中国实验诊断学》 2021年第5期737-740,共4页
目的探讨吉林省鼠伤寒沙门菌多位点可变数目串联重复序列(MLVA)分型的流行特征,为食源性腹泻感染的预防控制提供依据。方法根据国际Pulse Net公布的鼠伤寒沙门菌MLVA分型方法对吉林省2014-2016年间食源性感染腹泻病例分离的71株鼠伤寒... 目的探讨吉林省鼠伤寒沙门菌多位点可变数目串联重复序列(MLVA)分型的流行特征,为食源性腹泻感染的预防控制提供依据。方法根据国际Pulse Net公布的鼠伤寒沙门菌MLVA分型方法对吉林省2014-2016年间食源性感染腹泻病例分离的71株鼠伤寒沙门菌进行流行特征分析。结果71株菌中46株分离自男性,25株分离自女性;以0-8岁儿童居多(59.2%);夏季为流行高峰期。聚类分析显示,71株菌被分为5大基因群(A-E群)37个基因型,B基因群(78.9%)为吉林省近年主要的流行菌群。吉林省6个地区(长春、吉林、延边、白城、辽源、通化)主要流行B群,通化市亦流行E群,辽源市亦流行A群,通化市、吉林市、辽源市的基因型分布稍多于其他地区。结论吉林省流行的鼠伤寒沙门菌存在着显著的遗传多态性,且同一克隆菌株在相同地区内流行,亦在不同地区间交叉流行。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 mlva 基因分型 吉林省
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MLVA技术在沙门菌分型和分子流行病学研究中的应用
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作者 陈春霞 阚飙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期929-932,共4页
沙门菌属是属于肠杆菌科的一类生化特性、抗原结构和DNA同源性等相关的革兰阴性菌,广泛存在于自然界,能引起多种动物感染。人源感染主要是通过污染食物从而引起的食物中毒。目前沙门菌感染是全球范围内最常见的食源性疾病之一[1]。
关键词 沙门菌属 分子流行病学 mlva 应用 分型 DNA同源性 动物感染 食物中毒
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MLVA-16 对新疆分离布鲁氏菌80/23株的鉴定与分析 被引量:6
14
作者 任晓莉 王慧 +3 位作者 陈创夫 王远志 张亚丽 Philippe Le Flèche 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2013年第3期313-317,共5页
为了对新疆布鲁氏菌分离株80/23株进行分型鉴定,本实验采用MLVA-16检测方法和常规生物学鉴定方法对布鲁氏80/23株进行研究,将测定结果与http://mlva.upsud.fr/MLVA net提供的530株布鲁氏菌数据库比较分析,应用UPGMA进行遗传进化树分析,... 为了对新疆布鲁氏菌分离株80/23株进行分型鉴定,本实验采用MLVA-16检测方法和常规生物学鉴定方法对布鲁氏80/23株进行研究,将测定结果与http://mlva.upsud.fr/MLVA net提供的530株布鲁氏菌数据库比较分析,应用UPGMA进行遗传进化树分析,并构建系统进化树。结果显示,常规分型方法鉴定为羊种3型,MLVA方法鉴定该菌株与德国分离株Bruce0261菌株的亲缘关系最近,属为东地中海3型,羊种1型,两种分型方法种属结果一致。结论:MLVA-16与常规生物学鉴定方法相比,具有更高的精确性,对布鲁氏菌生物型和株间差异有很高的鉴别力。并能为布病疫情流行株的溯源进化关系提供依据。 展开更多
关键词 布鲁氏菌株80 23 细菌鉴定 mlva
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布鲁氏菌MLVA-15分型方法的建立 被引量:1
15
作者 王勋 米吉提.莫合他尔汗 +7 位作者 孙明军 狄栋栋 许芳 贾舒安 颜成旭 李金平 范伟兴 曾巧英 《中国兽药杂志》 2018年第8期12-18,共7页
为提高对我国布鲁氏菌流行菌株的鉴别分型能力,利用布鲁氏菌可变数目串联重复序列(VNTR)的多态性,建立了新的布鲁氏菌分型方法——MLVA-15。与传统的布鲁氏菌MLVA-16和BruMLSA21分型方法相比,新的MLVA-15分型方法对我国羊种布鲁氏菌流... 为提高对我国布鲁氏菌流行菌株的鉴别分型能力,利用布鲁氏菌可变数目串联重复序列(VNTR)的多态性,建立了新的布鲁氏菌分型方法——MLVA-15。与传统的布鲁氏菌MLVA-16和BruMLSA21分型方法相比,新的MLVA-15分型方法对我国羊种布鲁氏菌流行菌株的区分能力有着显著的提高,能够满足布病流行病学调查中对病原追溯的需求。尝试利用不同VNTR位点组合来提高对布鲁氏菌的鉴别能力,为单一种型布鲁氏菌流行区域的布病病原学调查提供了新思路。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 VNTR mlva BruMLSA
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Spoligotyping和MLVA用于71株浙江省结核分枝杆菌临床分离株基因分型的初步研究 被引量:9
16
作者 王晓萌 吕冰 +8 位作者 柳正卫 刘洁 何海波 蒋毅 张媛媛 董海燕 刘志广 赵秀芹 万康林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1090-1094,共5页
目的初步探讨寡核苷酸分型(Spoligotyping)和多位点数目可变串联重复序列分析(MLVA)用于浙江省结核分枝杆菌临床分离菌株的分型,以初步了解浙江省结核分枝杆菌的基因型特征。方法随机选取浙江省结核分枝杆菌临床分离菌株,常规培养,收集... 目的初步探讨寡核苷酸分型(Spoligotyping)和多位点数目可变串联重复序列分析(MLVA)用于浙江省结核分枝杆菌临床分离菌株的分型,以初步了解浙江省结核分枝杆菌的基因型特征。方法随机选取浙江省结核分枝杆菌临床分离菌株,常规培养,收集菌体,提取基因组DNA。采用聚合酶链反应(PCR)扩增整个DR区进行Spoligotyping分型,同时分别扩增15个VNTR位点进行MLVA分型。聚类分析采用BioNumerics软件。统计学分析采用卡方检验。结果对70株菌进行了基因分型,Spoligotyping结果显示,可分为2个基因群,即北京家族(Beijingfamily)和非北京家族(Non-Beijingfamily),分别占70和30,49株北京家族菌株中,89.8为典型北京家族;MLVA结果显示,可分4个基因群,分别为Ⅰ群占8.5,含5个基因型,Ⅱ群占18.3,含13个基因型,Ⅲ群占70.4,含38个基因型,Ⅳ群占2.8,含2个基因型。两种方法对菌株的基因分型结果非常吻合,Spoligotyping分型为北京家族的菌株均分布在MLVAⅢ型中,非北京家族菌株的基因多态性,分属于MLVAⅠ、Ⅱ和Ⅳ型。MLVA将70株菌分为58个基因型(含53个独特基因型),而Spoligotyping只分为18种基因型(含12个独特基因型)。结合对临床一线4种药物的耐药检测结果分析,两种方法的分型结果均显示北京家族菌株中表现为全敏感者71.4(35/49),表现为耐药者为28.6(14/49);而非北京家族菌株中表现为全敏感者为66.7,表现为耐药者为33.3,经卡方检验,两者间的差异无统计学意义(χ2=0.158,P>0.05)。结论初步证实浙江省结核分枝杆菌存在明显的基因多态性,主要流行型为北京家族。北京家族与耐药无明显相关性。MLVA株水平鉴定能力明显高于Spoligotyping,尤其是在鉴别北京家族菌株上具有明显的优势。 展开更多
关键词 结核病 结核分枝杆菌 间隔区寡核苷酸分型 多位点数目可变串联重复序列分析 北京家族 耐药
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江苏省67株结核分支杆菌MLVA分型分析 被引量:4
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作者 吕华坤 刘志广 +8 位作者 许卫国 刘敬华 章体慧 董海燕 陈永弟 阳波 王蓓 朱涛 万康林 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第9期755-757,共3页
目的初步探讨江苏省结核分支杆菌的数目可变串联重复序列(VNTR)的分布特征。方法采用多位点串联重复序列(MLVA)分型方法,对从江苏省病人分离的结核分支杆菌的VNTR进行PCR扩增,2%琼脂糖凝胶电泳,通过BioNumerics3.0软件分析其VNTR的多态... 目的初步探讨江苏省结核分支杆菌的数目可变串联重复序列(VNTR)的分布特征。方法采用多位点串联重复序列(MLVA)分型方法,对从江苏省病人分离的结核分支杆菌的VNTR进行PCR扩增,2%琼脂糖凝胶电泳,通过BioNumerics3.0软件分析其VNTR的多态性和聚类分析。结果共选取了15个VNTR位点,对67株结核分支杆菌进行了检测分析,结果显示明显的基因多态性,可分8个基因型(Ⅰ~Ⅶ型),其中较多的一型菌株占32.6%,其他型别菌株数量较接近,没有特别明显的优势型别。结论江苏省结核分支杆菌具有明显的多态性,MLVA分型技术具有稳定、简单、可重复的优点,可用于结核分支杆菌的流行病学调查。 展开更多
关键词 结核分支杆菌 可变数量串联重复序列 多位点重复串联序列
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陕西省鼠疫耶尔森菌MLVA分型研究
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作者 聂守民 罗波艳 +5 位作者 孙养信 范锁平 常文辉 王宇萌 孙杰 安翠红 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期878-884,共7页
目的掌握陕西省鼠疫耶尔森菌分离株的MLVA基因分型特征,阐明不同疫情年份菌株间的遗传进化关系,为今后陕西省鼠疫的监测防治工作提供科学依据。方法采用MLVA(14+12)方法,对分离自陕西省鼠疫疫源地的66株鼠疫耶尔森菌进行基因分型,利用Bi... 目的掌握陕西省鼠疫耶尔森菌分离株的MLVA基因分型特征,阐明不同疫情年份菌株间的遗传进化关系,为今后陕西省鼠疫的监测防治工作提供科学依据。方法采用MLVA(14+12)方法,对分离自陕西省鼠疫疫源地的66株鼠疫耶尔森菌进行基因分型,利用BioNumerics(Version7.6)软件对分型结果进行聚类分析。结果66株鼠疫耶尔森菌分为A、B、C群,根据分离时间聚集成为相应群,A群包含42株菌,其中39株菌分离自2000-2001年,B群包含16株菌,其中15株分离自2006年,C群含8株菌,其中6株分离自1987-1988年。基因型分为19种,8个基因型为多菌株基因型,其他型为单菌株基因型。结论陕西省鼠疫菌MLVA基因型具有多态性,不同疫情年份菌株主导的基因型不同,MLVA分型能够很好区分陕西省不同年代鼠疫菌株,可用于鼠疫菌株的溯源分析。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 mlva 陕西省
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Mycoplasma pneumoniae Macrolide Resistance and MLVA Typing in Children in Beijing,China,in 2016:Is It Relevant? 被引量:9
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作者 DOU Hai Wei TIAN Xiu Jun +8 位作者 XIN De Li WEI Ran ZHOU Wei WANG Hong QIN Xuan Guang SHAO Jun Yan XU Bao Ping GE Li Xia SHI Da Wei 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2020年第12期916-924,共9页
Objective The aim of this study is to investigate the macrolide resistance rate and molecular type with multiple-locus variable-number tandem-repeat analysis(MLVA)of Mycoplasma pneumoniae of Beijing in 2016 in pediatr... Objective The aim of this study is to investigate the macrolide resistance rate and molecular type with multiple-locus variable-number tandem-repeat analysis(MLVA)of Mycoplasma pneumoniae of Beijing in 2016 in pediatric patients.Methods Real-time quantitative polymerase chain reaction(PCR)was used to identify M.pneumoniae,and MLVA was performed.The domain V of the 23 S rRNA was sequenced to detect macrolide-resistant point mutations.We also investigated the activities of antibiotics against M.pneumoniae isolates in vitro.Results The PCR detection rate of M.pneumoniae in children in Beijing was 40%,and the macrolide resistance rate was 66%.The A2063 G mutation in the 23 S rRNA V region is the dominant mutation(137/146,93.84%),whereas the A2064 G mutation is rare(9/146,6.16%).Seventy-three samples were typed successfully by MLVA typing,including 86.3%(63/73)were MLVA type 4-5-7-2,and 13.7%(10/73)were MLVA type 3-5-6-2.No other types were found.No strains were resistant to levofloxacin or tetracycline.Conclusion In 2016,a specific decrease in the macrolide resistance rate occurred in Beijing.The detection rate and macrolide resistance rate of outpatients are lower than those of inpatients.The A2063 G mutants M.pneumoniae have high levels of resistance to erythromycin and azithromycin.The primary MLVA type is 4-5-7-2,followed by 3-5-6-2.No other MLVA types were detected.No strains resistant to tetracycline or levofloxacin were found in vitro. 展开更多
关键词 CULTURE Macrolide resistance mlva type Mycoplasma pneumoniae
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基于全自动毛细管电泳技术建立的单核细胞增生李斯特氏菌MLVA分型方法 被引量:1
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作者 李秀娟 崔玲玲 +2 位作者 赵冬 潘琢 高伟利 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期839-844,共6页
目的建立针对食品来源的单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)分离株的多位点串联重复序列分型(Multiple-Locus Variable number tandem repeat Analysis,MLVA)方法,为暴发确认和溯源检测提供实验室支持。方法对2005—201... 目的建立针对食品来源的单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)分离株的多位点串联重复序列分型(Multiple-Locus Variable number tandem repeat Analysis,MLVA)方法,为暴发确认和溯源检测提供实验室支持。方法对2005—2014年间分离自食品的91株Lm进行14个可变数目串联重复序列(Variable Number of Tandem Repeats,VNTR)位点的检测,评估最优检测位点组合并分析检测结果。结果通过采用软件分析,由LMV1、LMV2、LMV7、Lm10、Lm11、Lm23、LM-TR6、TR3和Lm15等9个VNTR位点组成的位点组合为最优MLVA检测位点,可以将91株Lm分离株分为70个型别,分型能力达到0.987 1。结论本研究建立的基于全自动毛细管电泳的由9个检测位点组成的Lm的MLVA分型方法,具有操作简便、快速、结果客观、操作标准化、易于在不同实验室间比较的优势,可作为一线检测方法用于李斯特菌病的暴发确认和溯源检测。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特氏菌 多位点串联重复序列分型 毛细管电泳
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