组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589对多发性骨髓瘤细胞MM1R的抑制作用

本研究探讨新一代组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589单药或者联合蛋白酶体抑制剂硼替佐米,对多发性骨髓瘤(MM)细胞的抗瘤效应。采用MTT法检测LBH589(10、20、50 nmol/L)及50 nmol/L分别联合硼替佐米(10、20 nmol/L)作用于人多发性骨髓瘤MM1R细胞24,48 h后的细胞增殖抑制作用;采用流式细胞术检测LBH589对MM1R细胞周期和细胞凋亡的影响;采用Western blot分析LBH589(10、20、50 nmol/L)作用MM1R细胞24 h后组蛋白H4乙酰化的程度。结果表明,LBH589单药及与硼替佐米联合均能够抑制MM1R细胞增殖,并与药物浓度和作用时间呈正相关。MM1R细胞经药物作用48 h后,G0/G1期细胞逐渐增多,G2/M期及S期细胞逐渐减少,细胞阻滞在G0/G1期,同时可见MM1R细胞的凋亡率增加,作用呈浓度依赖性,且LBH589与硼替佐米联合作用均较单药作用更加明显(均P<0.001);Western blot分析显示,不同浓度LBH589作用MM1R细胞24 h后组蛋白H4乙酰化的程度上调,呈浓度依赖性。结论:LBH589能够抑制MM1R细胞增殖,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,且与硼替佐米联合对骨髓瘤细胞有协同作用。

热轧2032mm线R1轧机压下同步装置基于设备升级的全新改造

2022年柳钢热轧厂2032mm生产线双粗轧机连轧项目运行以来,R1粗轧机压下同步装置暴露出较多的设备缺陷,产生较多的设备故障,影响生产线的稳定运行。R1压下同步装置故障频发的问题能否解决,关系着双粗轧机连轧项目能否顺利实施。本文对柳钢热轧厂2032mm生产线R1粗轧机压下同步装置存在的问题及暴露出的设计缺陷进行深入分析,并针对这些设计缺陷提出行之有效的优化改造方案。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡及其逆转耐药的机制研究

目的探讨新一代组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589单药或联合蛋白酶体抑制剂硼替佐米对多发性骨髓瘤（MM）细胞增殖的影响及其机制。方法以MM细胞系U266细胞及地塞米松耐药细胞系MM1R细胞为对象，不同浓度LBH589或LBH589与硼替佐米联合作用上述细胞后，采用MTF法检测对细胞增殖的抑制作用，流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率的变化，Westernblot分析组蛋白H4乙酰化程度及聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）、Bcl—X蛋白表达水平的变化；实时荧光定量PCR分析caspase-3、APAF-1以及TOSO基因表达水平的变化。结果不同浓度LBH589（0、10、20、50nmol／L）单药及其50nmol／LLBH589与硼替佐米（10、20nmol／L）联合均能够抑制U266和MM1R细胞增殖，呈剂量和时间依赖性，且LBH589与硼替佐米联合组抑制作用均较单药组明显（P值均〈0．05）；MM1R细胞G0／G1期比例分别为36．60％、46．50％、51．40％、57．10％、75．48％、79．73％，凋亡率分别为5．27％、31．41％、39．78％、44．07％、73．60％、83．27％，作用呈剂量依赖性，且LBH589与硼替佐米联合组作用均较两者单药组明显（P值均〈0．05）；MM1R细胞组蛋白H4乙酰化程度和PARP蛋白表达水平逐渐上调，而Bcl-X蛋白表达水平则逐渐下调，变化呈剂量依赖性（P值均〈0．05）；MMlR细胞caspase-3、APAF-1基因表达水平逐渐上调，而TOSO基因表达水平则逐渐下调，变化呈剂量和时间依赖性（P值均〈0．05）。结论LBH589能够抑制MM细胞增殖，阻滞细胞周期，诱导细胞凋亡，对耐药细胞具有抗耐药作用，同时与硼替佐米联合应用对MM细胞有协同作用，其作用机制及逆转耐药机制涉及多个基因的表达变化。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589逆转多发性骨髓瘤细胞耐药机制的体外研究

目的探讨新一代组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589作用于多发性骨髓瘤（MM）耐药细胞产生的相关基因表达变化，分析其逆转MM细胞耐药的机制。方法采用Westernblot法分析LBH589单药（0、20、50nmol／L）及50nmol／LLBH589联合5Ixmol／L地塞米松作用MM1R细胞24h后组蛋白H4乙酰化的表达程度及bcl-X基因的表达变化。采用实时荧光定量PCR分析LBH589（0、20、50nmol／L）及50nmol／LLBH589联合5μmol／L地塞米松分别作用MM1R细胞24、48h后TOSO基因的表达变化。结果Westernblot分析显示不同浓度LBH589单药及联合地塞米松作用MM1R细胞24h后随着药物浓度的升高，组蛋白H4乙酰化的程度逐渐上调[（0．205±0．008）％、（0．346±0．009）％，（0．580±0．053）％、（0．986±0．012）％，F=992．957，P=0．032】；bcl—X基因的表达则逐渐下调[（1．210±0．160）％、（0．930±0．036）％、（0．730±0．017）％、（0．488±0．029）％，F=56．432，P=0．0281，变化呈剂量依赖性，且联合组的作用效果强于单药组（均P〈0．05）。实时荧光定量PCR分析显示不同浓度LBH589单药及联合地塞米松作用MM1R细胞24、48h后随着药物浓度的增加和时问的延长，TOSO基因的表达逐渐下调[24h：（1．00±0．00）％、（0．55±0．01）％、（0．47±0．01）％、（0．38±0．01）％，F=1006．344，P=0．040；48h：（1．00±0．00）％、（0．39±0．04）％、（0．05±0．01）％、（0．03±0．00）％，F=2383．977，P=0．0451，变化呈剂量-时间依赖I生，且联合组的作用效果强于单药组（均P〈0．05）。结论组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589通过影响bel—x及TOSO基因的表达，恢复MM1R对地塞米松的敏感性，促进组蛋白乙酰化，诱导细胞凋亡，达到治疗肿瘤的目的。