IRF6通过激活MMP-12转录促进肺腺癌转移的实验研究

目的探讨干扰素调节因子6(interferon regulatory factor 6,IRF6)对肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)细胞转移的影响及可能调控机制。方法从GEPIA和Ualcan在线数据库获取IRF6在LUAD组织和正常肺组织中的表达情况。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测IRF6和基质金属蛋白酶12(matrix metallopeptidase 12,MMP-12)在LUAD细胞和正常人支气管上皮细胞中的表达情况。分别采用sh-NC和sh-IRF6质粒转染LUAD细胞,Transwell小室实验检测两组细胞的迁移能力。采用染色质免疫共沉淀(ChIP)实验检测MMP-12启动子富集情况;采用荧光素酶报告基因实验验证IRF6和MMP-12的靶向关系。结果在线数据库分析结果显示,LUAD组织中IRF6表达显著高于正常组织。与正常细胞(BEAS-2B)比较,A549和Calu3细胞中IRF6表达显著升高(5.82±0.92,7.11±1.31,P<0.01)。与sh-NC组比较,sh-IRF6转染组A549和Calu3细胞的迁移数减少(52±9.23和63±11.38 vs.21±4.24和33±6.11),差异有统计学意义(P<0.01);sh-IRF6转染组A549和Calu3细胞的MMP-12表达降低为0.31±0.06和0.45±0.11,差异有统计学意义(P<0.01)。ChIP实验结果表明,相对于阴性对照Anti-IgG组,在Anti-IRF6组A549和Calu3细胞的MMP-12启动子富集度升高了(31.24±5.78)倍和(26.27±4.11)倍,差异有统计学意义(P<0.01)。荧光素酶报告基因实验显示,干扰IRF6后,A549和Calu3细胞的野生型MMP-12转录活性显著降低为0.28±0.04和0.38±0.06(P<0.01)。干扰IRF6的A549和Calu3细胞中过表达MMP-12使细胞迁移数由25±4.21和36±7.28增加为48±8.89和60±11.17(P<0.01)。结论IRF6在LUAD细胞中高表达,敲低IRF6表达能够显著抑制LUAD细胞转移。

sICAM-1、CRP、MMP-12与结肠癌伴糖尿病围术期血糖及术后感染预测

目的探讨可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、C反应蛋白(CRP)、基质金属蛋白酶-12(MMP-12)表达情况与结肠癌合并糖尿病患者围术期血糖水平的关系及术后感染的预测价值。方法分析徐州医科大学附属宿迁医院2020年1月至2021年6月纳入的98例结肠癌合并糖尿病患者,以是否发生术后感染为依据,分为感染组(n=40)及未感染组(n=58)。观察两组的一般资料,比较术前、术后7 d两组的sICAM-1、CRP、MMP-12、血糖水平,并运用Logistic回归分析术后发生感染的影响因素,通过受试者工作特征曲线(ROC)评估血糖控制情况与sICAM-1、CRP、MMP-12水平对术后发生感染的预测价值。结果两组间围手术期血糖控制情况与sICAM-1、CRP、MMP-12水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);术后7 d感染组的sICAM-1、CRP、MMP-12、血糖水平高于未感染组,差异有统计学意义(t=36.466、8.491、8.103、2.045,P均<0.05);通过多因素Logistic回归分析结果显示围手术期血糖控制不佳与sICAM-1≥211.0μg/L、CRP<0.8 mg/L或者>8.0 mg/L、MMP-12<80.0 mg/L或者>140.0 mg/L水平是影响术后发生感染的独立危险因素,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线结果显示,血糖控制情况与sICAM-1、CRP、MMP-12水平四者联合检测诊断价值优于各项单独检测。结论sICAM-1、CRP、MMP-12水平升高可促使结肠癌合并糖尿病患者围术期血糖水平增加,且血糖控制情况与sICAM-1、CRP、MMP-12水平是影响术后发生感染的危险因素,并且血糖控制情况与sICAM-1、CRP、MMP-12水平四者联合检测对术后发生感染的诊断、预测价值较高。

桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中MMP-12、Smad-2mRNA、Smad-3、TIMP-1 mRNA表达的实验研究

目的:研究桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中基质金属蛋白酶-12(MMP-12)、Smad-2、Smad-3及金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)mRNA含量的影响。方法:将60只小鼠分为6组,每组10只,空白对照组、模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药低、中、高剂量组,对模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药低、中、高剂量组制备光老化模型,空白对照组正常饲养。空白对照组和模型对照组给生理盐水,高、中、低剂量组给相应剂量药液,阳性对照组(VE组)给予维生素E滴剂,于造模前30 min灌胃。造模完成后,采用RT-PCR法检测皮肤组织中MMP-12、Smad-2、Smad-3、TIMP-1 mRNA的含量。结果:空白对照组皮肤组织中MMP-12mRNA的表达处于低水平;与空白对照组比较,模型对照组的MMP-12 mRNA表达水平显著上调,Smad-2 mRNA、Smad-3 mRNA和TIMP-1 mRNA表达水平显著下调(P<0.01);与模型对照组比较,中药高、中、低剂量组MMP-12 mRNA表达水平均出现不同程度的下调(P<0.01),Smad-2 mRNA表达水平显著上调(P<0.01),中药中高剂量组Smad-3 mRNA表达水平显著上调(P<0.05),而中药低剂量组差异不具有统计学意义,中药各剂量组TIMP-1 mRNA表达水平显著上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:桃红四物汤在皮肤光老化过程中具有保护作用。

桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12、Smad-2蛋白表达水平影响的实验研究

目的:研究桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12、Smad-2蛋白表达水平的影响。方法:将30只小鼠随机分到6个组中,分别为中药高、中、低剂量组、阳性对照组(VE组)、模型对照组、和空白对照组。模型对照组、VE组和中药低、中、高剂量组小鼠造皮肤光老化模型,空白对照组小鼠正常饲养。在造模前30 min,给各组小鼠灌胃,空白对照组和模型对照组给生理盐水,高、中、低剂量组给相应剂量药液,VE组给予维生素E滴剂。造模完成后,采用Western blot方法检测小鼠组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12、Smad-2蛋白表达水平含量。结果:与空白对照组比较,模型对照组小鼠皮肤组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12蛋白含量的表达水平显著上升,差异具有统计学意义(P<0.01),Smad-2蛋白表达水平显著下降(P<0.01);与模型对照组相比,中药低、中、高剂量组小鼠皮肤组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12蛋白含量的表达水平显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01),Smad-2蛋白表达水平显著上升,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:桃红四物汤对皮肤光老化具有一定的保护作用。

非小细胞肺癌组织中MMP-12的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中MMP-12的表达及临床意义。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测12例Ⅰ期和26例Ⅱ、Ⅲ期非小细胞肺癌及癌旁组织中MMP-12 mRNA的表达;Western blot检测部分标本中MMP-12蛋白表达。结合临床病理资料,比较MMP-12 mRNA表达与非小细胞肺癌临床病理特征的关系。结果MMP-12 mRNA在38例癌旁组织中无表达,在12例Ⅰ期和26例Ⅱ、Ⅲ期癌组织中呈不同程度的表达,半定量均值分别为(0.551±0.140)和(1.082±0.424),其差异有统计学意义(P=0.001);MMP-12蛋白在癌旁组织中无表达,而在Ⅰ期癌组织中低表达,在Ⅱ、Ⅲ期癌组织中高表达。结论MMP-12在非小细胞肺癌组织中高表达,并与淋巴结的转移存在显著相关性,表明MMP-12基因转录水平异常在非小细胞肺癌的发生、发展中起了重要作用。

MMP-12基因多态性与食管癌、贲门癌发病风险的关联

目的本研究旨在探讨基质金属蛋白酶-12（MMP-12）基因启动子区转录起始点上游82bp处A／G单核苷酸多态性（SNP）与河北省食管癌、责门癌高发区一磁县、涉县食管鳞状细胞癌（ESCC）和贲门腺癌（GCA）遗传易感性的关系。方法采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测316名ESCC患者、243名GCA患者和609名健康对照的MMP-12 A-82G SNP的基因型。结果MMP-12 SNP的基因型及等位基因频率在两患者组与健康对照组之间，其总体分布差异无统计学意义（P〉0．05）。根据吸烟状况分层分析发现，吸烟组中GCA患者组与对照组A／A、A／G基因型频率分剐是89．8％、10．2％和95．0％、5．0％，GCA患者组A／G基因型频率虽明显高于对照组，但两组相比差异无统计学意义（χ^2=3．43，P=0．06），与A／A基因型相比，携带A/G基因型有增加吸烟个体GCA发病风险的趋势（OR=2．13，95％C=0.0．94～4．83）。结论MMP-12基因A-82G SNP可能与河北省磁县和涉县人群的食管癌、贲门癌发病风险无关；但携带A／O基因型可能是吸烟人群GCA发病的危险因素。

肺癌患者胸水CD40、MMP-12水平的检测及临床意义

目的探讨肺癌患者胸水中CD40、MMP-12水平的测定及临床意义。方法选取60例胸水患者,其中30例为肺癌伴恶性胸腔积液,30例为良性胸腔积液。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组患者胸水CD40、MMP-12水平。结果肺癌患者胸水CD40、MMP-12水平均明显高于良性胸水(P<0.05);不同病理类型肺癌患者胸水CD40、MMP-12含量(P>0.05)无显著差异;联合检测胸水CD40、MMP-12水平诊断效能较好。结论肺癌患者胸水CD40、MMP-12含量高于良性胸水,对良恶性胸水患者具有鉴别诊断意义。

硫化氢对糖尿病大鼠心脏MMP-2与MMP-12的影响

目的探讨气体信号分子硫化氢(H2S)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠基质金属蛋白酶(MMP)-2及MMP-12的影响。方法SD大鼠随机分为对照组、糖尿病大鼠组(STZ组)、H2S干预糖尿病大鼠组(STZ+H2S组)及H2S干预正常大鼠组(H2S组)。腹腔注射STZ40 mg/kg建立糖尿病模型;糖尿病模型建立后,STZ组与H2S组每天腹腔注射浓度为100μmol/kg的硫氢化钠溶液(H2S供体);8 w后处死大鼠,Western印迹检测各组大鼠心脏MMP-2和MMP-12蛋白的表达。结果糖尿病大鼠心脏MMP-2与MMP-12表达水平明显减低(P<0.01,P<0.05),H2S可以明显上调糖尿病大鼠心脏MMP-2与MMP-12的表达(P<0.01);结论 H2S可通过上调MMP-2及MMP-12的表达,改善心肌纤维化。

MMP-12在类风湿关节炎中和骨性关节炎中的研究

目的 基质金属蛋白酶 (matrixmetalloproteinase ,MMPs)是分解细胞外基质的重要因子。人类金属弹性蛋白酶(humanmetallolastase ,MMP - 12 )是MMPs的一种。现已证实由巨噬细胞分泌MMP - 12的异常表达与许多疾病有关 ,如类风湿性关节炎 (rheumatoidarthritis,RA)、骨性关节炎 (osteoarthritis,OA)等。试验的目的是研究RA和OA病变中MMP - 12在滑膜组织中的表达。方法 滑膜组织取自临床确诊的 2 2例RA及 2 9例OA患者 (均为膝或髋关节置换手术患者 ) ,用免疫组织化学方法进行分析。结果 免疫组化染色显示 ,表达MMP - 12的细胞主要为滑膜层细胞 ,且大部分为炎性巨噬细胞。结论 来源于巨噬细胞的MMP - 12在RA病变发展 ,如关节破坏过程中起重要作用 ,抑制MMP -

MMP-12与TIMP-1在神经胶质瘤侵袭中的作用与意义

通过选用不同神经胶质瘤与正常脑组织样本,采用免疫组化SP法对MMP-12与TIMP-1的蛋白表达水平进行分析,MMP-12蛋白表达水平与TIMP-1的蛋白表达水平为负相关的关系,二者的平衡失调关系与神经胶质瘤侵袭之间存在密切的关系,通过二者的协作作用,对进一步研究神经胶质瘤侵袭的作用机理有一定的理论价值。

结直肠癌中CXCR5、CXCL13、MMP-12和MMP-13的表达及意义

目的观察结直肠癌组织中趋化因子CXCR5及其配体CXCL13以及MMP-12、MMP-13的表达,探讨其与临床病理特征、预后的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测236例结直肠癌及其切缘正常肠黏膜组织以及62例结直肠腺瘤组织中CXCR5、CXCL13、MMP-12和MMP-13蛋白表达。结果 (1)CXCR5、CXCL13、MMP-12、MMP-13在结直肠癌组织中的表达率为43.6%、41.5%、83.5%和80.5%均高于在切缘正常肠黏膜组织中的表达率(4.2%、5.5%、11.9%和13.1%)及在结直肠腺瘤组织中的表达率(24.2%、17.7%、69.4%和64.5%)(P均<0.05)。(2)CXCR5、CXCL13、MMP-12、MMP-13蛋白表达与淋巴结转移、远处转移、肿瘤分期及复发呈正相关(P<0.05)。CXCL13蛋白表达与组织分化程度呈正相关(P<0.05)。(3)CXCR5与CXCL13蛋白表达呈正相关(P<0.05)。CXCR5、CXCL13蛋白表达分别与MMP-12和MMP-13呈正相关(P<0.05)。结论 CXCR5、CXCL13、MMP-12、MMP-13的表达促进结直肠癌的发生、发展以及转移、复发,可作为预测结直肠癌转移和复发的有价值指标。

非小细胞肺癌中VEGF-C,VEGF-D及MMP-12的表达

目的对非小细胞肺癌（NSCLC）组织中血管内皮细胞生长因子c（VEGF-C）、VEGF-D及基质金属蛋白酶-12（MMP．12）的表达进行检测，探讨这3个因子与NSCLC纵隔淋巴结转移的相关性。方法采集60例NSCLC组织和癌旁组织，应用免疫组织化学方法检测其VEGF-C，vEGF-D及MMP-12的表达，并分析其与临床病理因素之间的相关性。结果VEGF-C，VEGF-D及MMP．12蛋白在NSCLC组织中呈高表达（96．7％、93．3％及91．7％），显著高于癌旁组织（P〈0．01）。VEGF-C，VEGF-D及MMP-12蛋白的表达在有淋巴结转移的病例显著高于没有转移的病例（X^2=13．237，X^2=6．960，0=9．870；P=0．000，P=0．008，P=0．002）。VEGF-C，VEGF-D及MMP-12蛋白表达与性别、年龄、分化程度以及组织学类型无关（X。=0．472；P=0．244），但与病理TNM分期（PTNM）有关（P=0．01）。在有纵隔淋巴结转移的组织中，VEGF．C，VEGF-D与MMP-12蛋白表达均呈正相关（r=0．850，P=0．000；r=0．787，P=0．000；r=0．914，P=0．000）。结论VEGF-C，VEGF-D及MMP-12蛋白在有纵隔淋巴结转移NSCLC的高表达与其淋巴结转移密切相关，VEGF-C，VEGF-D及MMP-12蛋白有成为NSCLC治疗中新靶位点的潜在可能。

结肠腺癌组织MMP-11、MMP-12和VEGF-D表达及意义

结肠腺癌是肠黏膜上皮呈腺样分化的一种恶性上皮性肿瘤,病变发生与遗传及饮食等因素有关[1]。腺癌常伴有淋巴道转移,一般预后较差,与病变形成时的浸润及播散有关[2]。近年研究认为,肿瘤细胞播散时可以产生转移相关蛋白[3]。MMPs家族是与转移相关的蛋白,能对细胞外基质成分形成降解,破坏肿瘤转移的屏障,肿瘤细胞易于离开原灶,形成播散。基质金属蛋白酶-11(MMP-11)和基质金属蛋白酶-12(MMP-12)是近年发现的与转移密切相关的蛋白,二者可能与脉管生成相关[4]。

口腔鳞癌中EIF3e和MMP-12的表达意义

目的:检测口腔鳞癌组织中真核翻译起始因子(EIF3e)和基质金属蛋白酶-12(MMP-12)的表达,分析其临床价值。方法:选择83例口腔鳞癌作为观察组,39例正常口腔鳞状上皮组织作为对照组。应用免疫组织化学法检测EIF3e和MMP-12蛋白的表达。结果:与对照组比较,观察组中EIF3e和MMP-12的表达明显增高。观察组中EIF3e和MMP-12的表达在不同淋巴结转移和脉管累犯中相比差异具有统计学意义,EIF3e的表达在不同Ki67指数和肿瘤最大径中相比差异具有统计学意义,MMP-12的表达在不同间质炎症细胞浸润程度中相比差异具有统计学意义(P <0. 05)。观察组中EIF3e和MMP-12的表达呈正相关性。相关分析显示二者的表达与预后相关。结论:EIF3e和MMP-12在口腔鳞癌中表达升高,二者具有正相关性,可以促进病变的形成和进展。二者联合检测对判断预后有一定价值.

胃腺癌组织中MMP-11、MMP-12和VEGF- D的表达及临床意义

目的:检测胃腺癌组织中基质金属蛋白酶-11(MMP-11)、基质金属蛋白酶-12(MMP-12)和血管内皮生长因子-D(VEGF-D)的表达,分析相关性。方法:以130例胃腺癌术后肿瘤组织作为研究组,选择距肿物边缘大于3 cm的35例非肿瘤性胃黏膜组织作为对照组,均留取新鲜标本,应用流式细胞术检测两组中MMP-11、MMP-12和VEGF-D的表达。结果:研究组中MMP-11、MMP-12和VEGF-D的表达明显高于对照组,研究组中MMP-11、MMP-12和VEGF-D的表达与脉管浸润、Lauren分型、淋巴结转移相关,MMP-11、MMP-12的表达与肿瘤细胞的增殖指数相关。研究组中MMP-11和VEGF-D、MMP-12和VEGF-D的表达具有正相关性。生存分析显示三者高表达患者的预后差。结论:MMP-11、MMP-12和VEGF-D在胃腺癌中的表达上调,且具有正相关性,三者对病变的形成和进展意义明显,联合检测三者可能对判断预后有一定价值。

EGF对A431细胞中MMP-12表达的调节

基质金属蛋白酶(MMPs)和表皮生长因子(EGF)与肿瘤的发生和转移有密切关系,为了研究EGF对MMP-12的调节机制,我们用不同浓度的EGF处理人表皮癌细胞(A431细胞)后,观察MMP-12的表达变化。结果显示使用不同浓度EGF处理A431细胞后,MMP-12的mRNA和蛋白水平均有所升高。因此,在A431细胞中,EGF通过上调MMP-12的表达可能会促进肿瘤的侵袭和转移。

研究发现MMP-12抗病毒的作用机制

英国哥伦比亚大学的研究人员发现了人体免疫系统中一种复杂的连锁反应,并利用该发现开发出治疗病毒感染的新方法。研究的相关结果发表在2014年5月的《Nature Medicine》上。

胃腺癌组织eIF3a和MMP-12表达的研究

目的检测胃腺癌组织真核翻译起始因子3a(eIF3a)和基质金属蛋白酶-12(MMP-12)表达,分析其临床价值。方法选择83例胃腺癌患者作为观察1组,留取临床资料及术后组织,在83例中选择39例距肿物边缘>5cm正常胃黏膜组织作为对照1组,术后留取组织石蜡包埋。在上述病例中分别选择12例胃腺癌新鲜组织作为观察2组,12例新鲜正常胃黏膜组织作为对照2组。应用免疫组化法检测观察1组和对照1组eIF3a和MMP-12蛋白表达阳性率,应用Western Bolt法检测观察2组和对照2组eIF3a和MMP-12表达量。结果免疫组化法显示,观察1组和对照1组eIF3a和MMP-12表达阳性率差异有统计学意义(eIF3a:49.40%比7.70%,P<0.05;MMP-12:42.17%比5.13%,P<0.05)。观察1组e IF3a和MMP-12表达与淋巴结转移和脉管累犯相关(P<0.05),eIF3a表达与Ki67指数和肿瘤最大径相关(P<0.05),MMP-12表达与间质炎细胞浸润程度相关(P<0.05)。观察1组e IF3a和MMP-12表达具有正相关性(r=0.46,P=0.0409),观察1组二者的表达与生存时间相关(P<0.05)。Western Bolt法显示,观察2组和对照2组eIF3a和MMP-12表达量差异有统计学意义[eIF3a:(1.21±0.21)比(0.91±0.15),P<0.05;MMP-12:(1.03±0.27)比(0.59±0.16),P<0.05]。结论胃腺癌组织eIF3a和MMP-12蛋白表达上调,且二者具有正相关性,可能共同促进病变的形成和进展。

MMP-12和TIMP-1在大鼠COPD模型肺组织表达及糖皮质激素对其表达的影响

目的观察基质金属蛋白酶及其抑制因子在大鼠COPD模型肺组织中的表达以及糖皮质激素对其的影响。方法Wistar大鼠24只随机分为对照组、模型组和布地奈德组。气道内注入LPS结合烟熏的方法建立COPD模型,以支气管肺泡灌洗液内白细胞分类计数和HE切片来评价COPD大鼠模型炎症和肺气肿程度。免疫组化方法检测MMP-12、TIMP-1的表达情况。结果模型组大鼠肺组织内MMP-12、TIMP-1表达及MMP-12/TIMP-1值均明显高于健康对照组(P均<0.05)。布地奈德组与模型组之间MMP-12、TIMP-1表达及其比值均无明显差异(P均>0.05)。结论大鼠COPD模型肺组织中MMP-12及TIMP-1表达升高,并且呈现出蛋白酶优势的状态,而糖皮质激素不能调节MMP-12及TIMP-1的表达。

清气化痰汤联合穴位贴敷治疗AECOPD痰热壅肺证的疗效及对血清MMP-2、MMP-9、MMP-12的影响

目的:探讨清气化痰汤联合穴位贴敷治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)痰热壅肺证的疗效及对血清基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、MMP-12的影响。方法:选取武汉市中医医院2020年8月~2022年8月期间收治的116例AECOPD痰热壅肺证患者,按照随机数表法分成对照组(n=58,西医常规治疗联合穴位贴敷治疗)和实验组(n=58,对照组基础上联合清气化痰汤治疗)。对比两组中医证候积分、慢性阻塞性肺疾病评估测试问卷(CAT)评分、炎症因子指标[白细胞介素(IL)-6、IL-8、降钙素原(PCT)]、肺功能指标[第一秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)、FEV_(1)/FVC]、血清MMP-2、MMP-9、MMP-12水平。结果:两组治疗后发热、咳嗽或喘息气急、大便干结、口渴喜冷饮、痰多色黄或白黏、CAT评分下降,且实验组低于对照组(P<0.05)。两组治疗后FEV_(1)、FVC、FEV_(1)/FVC升高,且实验组高于对照组(P<0.05)。两组治疗后IL-6、IL-8、PCT下降,且实验组低于对照组(P<0.05)。两组治疗后血清MMP-2、MMP-9、MMP-12下降,且实验组低于对照组(P<0.05)。结论:清气化痰汤联合穴位贴敷治疗AECOPD痰热壅肺证,可改善患者的肺功能,降低炎症因子和血清MMP-2、MMP-9、MMP-12水平,进一步改善患者的临床症状。