跌打通痹膏对兔膝骨关节炎关节软骨MMP-13、Ⅱ型胶原mRNA表达的影响

目的观察跌打通痹膏对兔膝骨性关节炎关节软骨基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、Ⅱ型胶原m RNA(COL-Ⅱm RNA)表达的影响。方法选用65只新西兰兔随机分成正常对照组、假手术组、模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组,每组13只。模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组采用改良Hulth造模法,正常组、假手术组不予处理,模型组、跌打通痹膏组、骨痛贴组分别用胶带、跌打通痹膏、骨痛贴膏贴敷4周,观察治疗后各组实验兔关节软骨改变情况,并检测关节软骨中MMP-13、COL-Ⅱm RNA的表达。结果 (1)组织学关节软骨评分:跌打通痹膏组评分较模型组低(P<0.05)。(2)MMP-13m RNA检测:模型组MMP-13表达较正常对照组显著提高(P<0.01),跌打通痹膏组MMP-13 m RNA表达较模型组降低(P<0.01)。(3)COL-Ⅱm RNA检测:跌打通痹膏组COL-Ⅱ表达较模型组升高(P<0.01)。结论跌打通痹膏能通过降低Ⅱ型胶原降解,抑制MMP-13 m RNA表达,从而有效保护膝骨关节炎模型兔关节软骨,延缓关节软骨退变。

地龙2号对大鼠肝纤维化TGF-β1,MMP-13及TIMP-1 mRNA和蛋白表达的影响

目的:研究蚯蚓提取物地龙2号对实验性肝纤维化大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1),基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)mRNA和蛋白表达的影响.方法:采用四氯化碳皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型.古Wistar大鼠52只随机分成6组:正常组、阴性对照组、模型组、阳性对照组、地龙2号大剂量组和小剂量组;8wk末,用免疫组织化学染色法及RT-PCR检测肝组织中TGF-β1,MMP-13,TIMP-1mRNA和蛋白的表达.结果:地龙2号大、小剂量组肝组织内TGF-β1及TIMP-1mRNA(TGF-β1:0.68±0.16vs0.90±0.29.0.66±0.14vs0.90±0.29,后者P<0.05;TIMP-1:1.01±0.22vs2,48±1.18,1.21±0.38vs2.48±1.18,P<0.01)及蛋白表达均显著低于模型组(TGF-β1:3.14±2.67vs8.22±2.99.3.60±1.90vs8.22±2.99,P<0.01;TIMP-1:3.57±2.23vs7.56±3.40,3.30±2.67vs7.56±3.40,P<0.01),而MMP-13mRNA(1.69±0.75vs0.62±0.21,1.82±0.71vs0.62±0.21,P<0.01)及蛋白表达则明显高于模型组(7.71±1.25vs4.67±2.45,P<0.01,8.50±2.88vs4.67±2.45.P<0.01).结论:地龙2号可下调TGF-β1,TIMP-1mRNA及蛋白的表达,并上调MMP-13mRNA及蛋白的表达,从而抑制或减轻肝纤维化的形成.

不同大小机械牵张力对MC3T3-E1成骨样细胞MMP-13/TIMP-1mRNA表达的影响

目的:研究不同大小的机械牵张力对成骨细胞MMP-13/TIMP-1mRNA表达的影响。方法:通过自制的多通道细胞牵张应力加载系统对小鼠成骨样细胞MC3T3-E1同时施加6%、12%和18%的机械牵张力,作用24h后,用RT-PCR方法检测细胞受力后MMP-13/TIMP-1mRNA表达的变化。结果:细胞受力后,其MMP-13/TIMP-1mRNA表达随牵张力值的增大明显增加。结论:不同大小的机械牵张力可以影响成骨细胞的MMP-13/TIMP-1mRNA表达,进而影响骨改建。

rhBMP-2在诱导C3H10T1/2干细胞成骨中对MMP-13、Collagen-2 mRNA表达的影响

目的研究基质金属蛋白酶13(MMP13)、II型胶原(collagen2)在C3H10T1/2细胞中的相互关系,探讨rhBMP-2在诱导C3H10T1/2成骨的同时对MMP13以及Collagen2 mRNA表达水平的影响。方法取C3H10T1/2细胞加入rhBMP-2诱导成骨细胞的产生,Von Kossa染色观察细胞形态,同时在不同时间段抽取总RNA,利用Real-time PCR检测MMP13、Collagen2的表达情况。结果未加rhBMP-2的细胞中MMP13、Collagen2前10d表达呈负相关;而rhBMP-2处理后的细胞中MMP-13表达水平受抑制,且MMP13和collagen2前14d表达呈明显负相关。结论MMP-13和Collagen-2 mRNA表达水平具明显相关性,rhBMP-2在诱导成骨的同时,具有抑制MMP-13表达的作用。

辛芷鼻敏胶囊对变应性鼻炎大鼠血清IL-13和鼻粘膜STAT6 mRNA及其蛋白含量表达的影响

目的:探讨辛芷鼻敏胶囊对变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)大鼠的血清中白介素13(Interleukin-13,IL-13)和鼻粘膜组织的信号转导和转录激活因子-6(Signaltransducers and activators of transcription-6,STAT6)mRNA及蛋白表达,明确药效机制。方法:40只大鼠随机分为空白对照组、模型组、对照组、实验组,用卵清蛋白建立AR大鼠模型,通过对造模的大鼠灌服辛芷鼻敏胶囊及与同类药物对照,用酶联免疫吸附技术(Enzyme labeled immunosorbent assay,ELISA)定量测定各组大鼠血清IL-13水平,用原位杂交(ISH)、免疫组化方法半定量检测鼻粘膜中STAT6mRNA、STAT6蛋白含量的表达。结果:实验组大鼠血清的IL-13表达水平和鼻粘膜中STAT6mRNA、STAT6蛋白含量的表达比例明显低于模型组及对照组(P<0.05)。结论:辛芷鼻敏胶囊可能降低STAT6mRNA、STAT6蛋白含量表达,抑制大鼠AR发病过程中IL-13的表达水平,进而减少嗜酸性粒细胞浸润而控制症状。

侵袭性牙周炎患者牙龈组织中 MMP-1、MMP-8和 MMP-13蛋白的表达

目的:检测侵袭性牙周炎(AgP)患者牙龈组织中基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-8及MMP-13的表达,探讨三者在AgP发病中的可能作用和意义。方法:采用免疫组化法检测30例AgP患者和20例健康对照牙龈组织中MMP-1、MMP-8及MMP-13蛋白的表达。结果:健康对照牙龈组织中MMP-1、MMP-8及MMP-13均有弱表达;AgP患者牙龈组织中MMP-1和MMP-8蛋白的表达高于健康对照(Z=3.980和2.990,P<0.05)。结论:MMP-1、MMP-8蛋白可能在AgP的发生中起重要作用。

MMP-1、MMP-13在食管鳞癌中的表达及与浸润转移的关系

目的研究食管鳞癌组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、MMP-13蛋白的表达情况及其与浸润转移之间的关系。方法应用免疫组织化学Elivision法检测90例食管鳞癌组织、16例重度不典型增生组织及28例正常食管黏膜组织中MMP-1、MMP-13蛋白的蛋白表达情况。结果在食管鳞癌、不典型增生及正常食管黏膜组织中MMP-1蛋白的阳性表达率分别为81.11%(73/90)、81.25%(3/16)和17.86%(5/28),MMP-13蛋白的阳性表达率分别为82.2%(74/90)、25%(4/16)、21.43%(6/28),三者差异有统计学意义(P<0.05)。MMP-1、MMP-13蛋白表达与临床分期、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05)。MMP-1和MMP-13在食管鳞癌中表达呈正相关(r=0.537,P<0.05)。结论 MMP-1和MMP-13在食管鳞癌的发生、发展、浸润、转移过程中可能发挥重要作用,可能作为食管癌判断预后的重要标记。

非小细胞肺癌中MMP-9和MMP-13的表达及意义

目的分析MMP-9和MMP-13在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及相关性,探讨二者与NSCLC临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测88例NSCLC和18例癌旁正常肺组织中MMP-9、MMP-13的表达。结果 MMP-9与MMP-13在NSCLC中的阳性率均高于癌旁正常肺组织(P<0.05)。MMP-9表达与患者年龄、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05);MMP-13表达与分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。NSCLC中MMP-9与MMP-13的表达呈正相关(P<0.05)。MMP-9和MMP-13阳性组的生存率均低于阴性组,差异有显著性(P<0.05);且肿瘤大小、淋巴结转移和MMP-13阳性表达与NSCLC的预后密切相关(P<0.05)。结论 MMP-9与MMP-13均与NSCLC的侵袭、转移及预后密切相关,MMP-13可能主要通过激活MMP-9途径来参与NSCLC的侵袭、转移。

肺腺癌中MMP-9、MMP-13、HIF-1α表达与临床病理特征、EGFR突变及预后的关系

目的探讨MMP-9、MMP-13、HIF-1α在肺腺癌中的表达,分析其与肺腺癌临床病理特征、EGFR突变及预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测629例肺腺癌组织中MMP-9、MMP-13、HIF-1α的表达,并选取癌旁正常组织、肺炎性假瘤样增生各50例作为对照。采用实时荧光PCR法检测629例肺腺癌EGFR的突变,并对患者进行随访。结果肺腺癌组中MMP-9、MMP-13、HIF-1α的表达均高于对照组(P<0.001)。MMP-9表达与患者淋巴结转移及肿瘤大小有关(P<0.05);MMP-13表达与患者吸烟史、TNM分期、淋巴结转移及肿瘤大小有关(P<0.05);HIF-1α表达与患者吸烟史、淋巴结转移有关(P<0.05);但三者表达均与EGFR突变无关(P>0.05)。经Kaplan-Meier生存分析结果显示:MMP-9、MMP-13和HIF-1α阳性组12、24、36个月的累积生存率均明显低于阴性组;COX多因素生存分析结果显示:EGFR突变、MMP-9、MMP-13、HIF-1α的表达、肿瘤大小、TNM分期均是肺腺癌患者生存状况的独立危险因素(P<0.05)。结论肺腺癌组织中MMP-9、MMP-13、HIF-1α存在过表达,其表达均与患者淋巴结转移有关,但与EGFR突变无关。MMP-9、MMP-13、HIF-1α呈阳性、EGFR无突变患者生存率低,且均为肺腺癌患者生存状况的独立危险因素。

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中IL-4和IL-13mRNA的表达

目的 :探讨Th2型细胞因子在系统性红斑狼疮 (SLE)发病机制中的作用及其意义。方法 :应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测了 34例活动期SLE患者和 30例正常人外周血单个核细胞 (PBMC)中IL 4和IL 1 3mRNA的表达水平。结果 :活动期SLE患者IL 4和IL 1 3的阳性表达率与正常人对照组相比均无明显差异 ( P >0 0 5) ;活动期SLE患者PBMC中IL 4和IL 1 3mRNA的平均表达水平 ( 0 9386± 0 1 6 89,0 8983± 0 1 1 53)均明显高于正常人对照组 ( 0 54 94± 0 1 51 0 ,0 6 0 85±0 0 90 3) ,差异非常显著 (P <0 0 0 1 )。结论 :Th2型细胞因子IL 4和IL 1 3在SLE患者中呈高水平表达 ,这可能与SLE患者外周血T细胞高度活化、功能异常有关。

胆管癌细胞层粘连蛋白受体表达下调对蛋白水解酶MMP-2、MMP-9 mRNA表达的影响

研究层粘连蛋白受体 (lamininreceptor,LNR)反义寡核苷酸硫代修饰片段 (AS OD)对人胆管癌QBC939细胞MMP 2、MMP 9基因表达的调节。应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法分析 12 μmol/L浓度的LNRAS OD在作用 72h后对QBC939细胞MMP 2、MMP 9mRNA表达水平的影响。结果显示 ,LNRAS OD能明显抑制人胆管癌细胞表达MMP 2、MMP 9的作用 ,与正常对照相比 ,其MMP 2、MMP 9mRNA相对丰度分别下降了 33 2 %和 2 3 9% (P <0 0 5 )。研究表明 ,LNRAS OD是胆管癌细胞表达MMP 2和MMP 9基因的调节剂 ,能抑制胆管癌细胞MMP 2、MMP 9基因的表达。

腺相关病毒介导的klotho基因表达对去势大鼠骨Runx2及MMP-13表达的影响

目的探讨腺相关病毒介导的klotho(KL)基因表达对去势骨质疏松大鼠的调控作用。方法 SD雌性大鼠随机分为假手术组(S组)和手术组,外科去势术后12周再随机分为模型组(O组)、17β-雌二醇组(E组)、KL基因组(KO组)和空质粒组(GO组),实验12周后处死。取股骨、胫骨测骨密度;冰冻切片及免疫组化法观察肾KL荧光及KL蛋白表达;RT-PCR和免疫组化法检测骨Runx2、MMP-13 mRNA及蛋白表达;HE染色观察骨组织形态学变化。结果 KO组和E组骨密度高于O组和GO组(P<0.05);KO组大鼠肾有小鼠KL基因特异性表达;与O组相比,KO组Runx2 mRNA表达明显上调,MMP-13 mRNA表达显著下调(P<0.05);免疫组化分析KO组Runx2吸光度值为411±96,显著高于O组的353±50(P<0.05);KO组MMP-13吸光度值为397±84,显著低于O组的656±89(P<0.05)。KO组、E组和S组大鼠骨小梁排列紧密,连接成网,形态结构较完整,明显优于O组和GO组。结论 KL基因表达上调可减缓去势大鼠骨质疏松症的发展及骨组织微结构的破坏,提示KL基因可能在骨质疏松症的发展中扮演重要角色。

温针灸对不同时间点KOA模型兔关节软骨中MMP-1、MMP-13表达的影响

目的:观察温针灸(warming moxibustion)对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)软骨细胞中基质金属蛋白-1、13(matrix metalloproteinase-1、13,MMP-1、MMP-13)表达的影响,明确温针灸治疗KOA的作用机制。方法:选取70只新西兰大耳兔,其中10只作为空白对照组,剩余随机分为模型2周组、模型4周组、模型6周组、温针灸2周组、温针灸4周组、温针灸6周组。采用右后肢伸直位石膏固定制备KOA兔模型,模型2、4、6周组不予处理,温针灸2、4、6周组分别给予温针灸治疗2周,治疗结束后取材。采用免疫组化及RT-PCR检测各组治疗前后关节软骨中MMP-1、MMP-13蛋白及mRNA的表达。结果:与空白对照组比较,模型2周组、模型4周组、模型6周组软骨中MMP-1、MMP-13表达明显升高(P<0.05),且各组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与相应模型组比较,温针灸治疗后,MMP-1、MMP-13的表达降低(P<0.05),且各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:温针灸可降低KOA兔软骨中MMP-1、MMP-13的表达,说明温针灸治疗KOA可能与其抑制MMP-1、MMP-13的表达有关。

光动力疗法对兔耳增生性瘢痕组织中MMP-9,MMP-13和TIMP-1的影响

目的研究ALA-PDT治疗对兔耳增生性瘢痕中基质金属蛋白酶(MMP)-9,MMP-13和金属蛋白酶组织抑制物(TIMP)-1的变化,探讨ALA-PDT治疗对兔耳增生性瘢痕的初步治疗机制。方法将实验动物分为正常组、阴性对照组、高浓度ALA-PDT治疗组、低浓度ALA-PDT治疗组和PDT治疗组,对治疗组分别进行干预治疗,1次/周,共3次,于治疗后1月、2月和3月采集样本,进行Western blot实验。结果治疗组中MMP-9,MMP-13在ALA-PDT治疗后1月、2月和3月的增生性瘢痕表达水平明显高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01);而治疗组中TIMP-1表达水平明显低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01);高浓度治疗组与低浓度治疗组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ALA-PDT治疗对兔耳增生性瘢痕的治疗是有效的,其治疗机制可能是通过逆转MMP-9,MMP-13和TIMP-1之间的失衡状态实现的。

IL-1β和MMP-13在兔骨关节炎模型软骨和滑液中的表达

目的评价兔膝关节内侧半月板损伤制作骨关节炎(OA)模型的方法的可行性,探讨白细胞介素-1β(IL-1β)和金属蛋白酶-13(MMP-13)在兔骨关节炎模型软骨和滑液病变中的作用机制。方法新西兰大白兔40只,随机分为实验组(n=30)和对照组(n=10),于术后2、6、12周观察股骨髁关节软骨的病理变化并进行评分;用免疫组化方法检测关节软骨中IL-1β和MMP-13的表达情况;用酶联免疫吸附法测定关节液中IL-1和MMP-13的含量。结果实验组和对照组在大体和病理观察不同时间点关节软骨评分及HE染色差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学检测结果显示IL-1β在两组中均有表达,实验组和对照组2周时细胞分数差异无统计学意义,6、12周差异有统计学意义(P<0.05)。MMP-13在对照组关节软骨细胞中未见表达,实验组的关节软骨细胞中可见MMP-13蛋白的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。关节滑液中IL-1β表达和在软骨中表达一致。结论采用损伤兔膝关节半月板的方法可建立合理的动物OA模型;IL-1β和MMP-13在OA发病过程中表达水平有明显变化,需要进一步的临床研究来探讨其是否可以作为早期诊断OA的指标之一。

臭氧联合玻璃酸钠对骨性关节炎患者关节液中MMP-13的影响

目的:探讨臭氧联合玻璃酸钠对骨性关节炎患者关节液中基质金属蛋白酶13(matrix metro politanate 13,MMP-13)的影响。方法:90例患者按就诊顺序随机平均分为A组为医用臭氧组,B组为玻璃酸钠组,C组为医用臭氧+玻璃酸钠组。在每次治疗前及治疗结束后1周及6个月行疼痛视觉模拟评分(Visual analogue scale,VAS)及临床疗效评分,检测关节液中MMP-13的含量。结果:A组患者治疗后VAS显著下降(P<0.05),MMP-13含量显升高(P<0.05);B组患者在治疗后VAS和临床疗效评分与治疗前无变化(P>0.05),MMP-13含量降低(P<0.05)。C组患者治疗后VAS降低(P<0.05),MMP-13含量降低(P<0.05)。结论:医用臭氧联合玻璃酸钠可以降低关节液中MMP-13的含量,具有一定程度的关节软骨保护作用,临床治疗效果良好,可以作为治疗膝骨性关节炎的一个方法在临床推广应用。

MMP-2、MMP-9 mRNA在老年黄斑变性脉络膜新生血管膜中的表达

目的研究基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9 mRNA在渗出性老年黄斑变性(AMD)脉络膜新生血管膜(CNVm)中的表达。方法22例AMD病人的CNVm,用原位杂交方法分析MMP-2、MMP-9在CNVm中的表达。结果MMP-2、MMP-9 mRNA在活动期、消退期和静止期CNVm的细胞胞浆、基质中均有表达,但在活动期的表达与消退期、静止期比较明显增强,有显著性差异(P<0.01)。结论MMP-2、MMP-9 mRNA表达的部位、表达量与CNVm病程发展具有相关性。

大鼠非酒精性脂肪性肝炎肝组织MMP-13及TIMP-1表达变化与肝纤维化的关系

目的:观察大鼠非酒精性脂肪肝模型肝组织纤维化形成过程中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达的变化,探讨其在非酒精性脂肪肝纤维化发生发展机制中的意义. 方法:SD大鼠40只,随机分为模型组和对照组,模型组大鼠通过高脂饮食制备高脂血症性脂肪肝模型, 并在20 wk、22 wk分批处死,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)检测肝组织MMP-13mRNA和TIMP-1 mRNA的表达,并与肝脏组织学改变进行对照研究. 结果:模型组肝组织出现明显的脂肪变性及炎症坏死并伴有程度不同的纤维化,部分大鼠出现早期肝硬化.在20 wk肝组织MMP-13mRNA表达,模型组(1.14±0.29)明显高于正常对照组(0.71±0.08),有显著性差异(t=3.71,P<0.01)而TIMP-1mRNA表达,模型组(0.73±0.16)虽高于正常组(0.60±0.03),但差异无显著性.在22 wk MMP-13mRNA模型组(0.84±0.10)表达明显下降,而TIMP-1mRNA模型组(0.75±0.12) 表达则显著高于正常对照组(0.60±0.10),(t=3.13, P<0.01).肝组织HE和Masson染色提示肝脂肪变性和纤维化改变. 结论:非酒精性脂肪肝炎,随着纤维化进程MMP- 1.3mRNA表达由强到弱,TIMP-1mRNA表达逐渐增强,提示其可能参与非酒精性脂肪肝炎纤维化的机制.

温针灸对兔膝关节退变模型血清MMP-1和MMP-13水平的影响

目的观察温针灸治疗兔膝关节退变模型前后血清基质金属蛋白酶1、13(MMP-1,MMP-13)及软骨形态的变化,探讨温针灸治疗膝骨性关节炎的作用机理。方法 30只雄性兔随机分为模型组、温针灸组和西药组,每组10只,采用右后肢伸直位固定制作兔膝关节退变模型。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测造模前、治疗前和治疗后兔血清中MMP-1,MMP-13水平,参考彭太平法观察膝关节组织形态学变化。结果治疗2周后,大体和光镜观察模型组膝关节软骨变薄,出现明显的关节软骨损伤,温针灸组可明显改善关节软骨组织学结构。各组治疗前较造模前血清MMP-1、MMP-13的浓度均显著升高(P<0.05);治疗两周后,与模型组比较,温针灸组MMP-1、MMP-13水平降低(P<0.05),但与西药组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论温针灸能治疗KOA的软骨损伤,可能与降低MMP-1和MMP-13表达有关。

MMP-13、VEGF在三阴性乳腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)在三阴性(ER-、PR-、HER2-)乳腺癌发生、发展过程中的临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测MMP-13、VEGF在60例三阴性乳腺癌、36例HR型乳腺癌(ER+/PR+、HER-2-)、28例HER2型乳腺癌(ER-、PR-、HER2+)和12例乳腺纤维腺瘤中的表达情况,并分析其与临床病理参数的关系。结果三阴性乳腺癌中MMP-13、VEGF的表达显著高于乳腺纤维腺瘤和HR型乳腺癌(P<0.005),而且MMP-13在三阴性乳腺癌中的表达显著高于HER2型乳腺癌(P<0.005);三阴性乳腺癌中MMP-13、VEGF阳性表达与腋窝淋巴结转移、临床分期有关(P<0.05),而与患者年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)。相关分析显示,在三阴性乳腺癌、HR型乳腺癌及HER2型乳腺癌中MMP-13与VEGF的表达均呈正相关(r=0.522,r=0.482,r=0.571;P<0.01)。结论 MMP-13和VEGF与三阴性乳腺癌的发生、发展有着密切关系,可作为评估三阴性乳腺癌浸润和转移的重要生物学指标。