促血管和血管拟态生成因子VEGFA、MMP-14在肺腺癌中的表达及临床意义

目的探讨经典血管内皮生长因子A(VEGFA)和促血管拟态生成因子基质金属蛋白酶14(MMP-14)在肺腺癌中表达及临床意义。方法采用TCGA和UALCAN数据库分析肺腺癌MMP-14和VEGFA基因及蛋白表达水平及其与生存预后的相关性。收集69例肺腺癌患者及20例健康受试者(对照组)血清,分别采用ELISA和化学发光法检测MMP-14和VEGFA含量,分析二者与肿瘤临床病理学特征相关性及对肺腺癌的预测、诊断价值。结果肺腺癌组织和血清中MMP-14和VEGFA水平均高于对照组。肺腺癌早期组、晚期组和对照组血清VEGFA和MMP-14表达水平差异均有统计学意义(P<0.001)。MMP-14在T3/T4期高于T1/T2分期(P=0.045),N2/N3期高于N0/N1期(P=0.035),胸膜转移组高于未转移组(P=0.034)。VEGFA在M1期高于M0期(P=0.025)。VEGFA水平升高为肺腺癌的危险因素(P=0.002)。MMP-14、VEGFA和癌胚抗原(CEA)单项诊断肺腺癌的曲线下面积(AUC)分别为0.793、0.849、0.851,三项联合检测AUC为0.952。MMP-14、VEGFA低表达组的总生存期(OS)和疾病特异生存期(DSS)均长于MMP-14、VEGFA高表达组。结论MMP-14和VEGFA在肺腺癌中高表达,分别与肺腺癌的生长、侵袭和转移有关,并对生存预后判断有一定意义。

乳腺良恶性病变PTTG、VEGF-C和MMP-14表达及临床病理意义

目的研究乳腺浸润性导管癌、乳腺良性病变组织中垂体瘤转化基因(PTTG),基质金属蛋白酶-14(MMP-14)和血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的表达水平,探讨其临床病理意义。方法 40例乳腺浸润性导管癌、20例乳腺良性病变手术切除标本常规石蜡包埋切片,PTTG、MMP-14和VEGF-C染色方法为免疫组化SP法。结果乳腺浸润性导管癌PTTG、VEGF-C和MMP-14表达阳性率(75.0%、85.0%和77.5%)明显高于乳腺良性病变(20.0%、30.0%和25.0%,P<0.01),有淋巴结转移病例PTTG、VEGF-C和MMP-14表达阳性率明显高于无淋巴结转移病例(P<0.01),而在不同年龄、肿瘤大小、分化程度组间差别无统计学意义(P>0.05)。乳腺浸润性导管癌中PTTG与VEGF-C和MMP-14表达呈高度一致性(r=0.586,0.657,P<0.01),VEGF-C与MMP-14表达亦呈高度一致性(r=0.649,P<0.01)。结论 PTTG、VEGF-C和MMP-14的表达可能是反映乳腺浸润性导管癌发生、发展、生物学行为及预后的重要生物学指标,三者有望成为乳腺癌抗淋巴管治疗的新靶点。

胃癌中Ezrin、MMP-14的表达及相关性

目的观察Ezrin、MMP-14蛋白在胃癌中的表达,探讨它们与胃癌侵袭、转移的关系。方法应用免疫组化方法检测10例正常胃组织、40例异型增生的胃黏膜组织和198例胃癌组织中Ezrin、MMP-14蛋白的表达。结果 Ezrin、MMP-14在正常胃组织、异型增生胃黏膜组织和胃癌组织中的表达均依次增高。Ezrin和MMP-14在正常胃组织、异型增生胃黏膜组织和胃癌组织中的阳性率分别为10%、27.5%、76.3%和10%、32.5%、81.3%,差异均有显著性(P<0.05)。Ezrin、MMP-14在分化程度低、侵及浆膜层以及有淋巴结转移的胃癌中表达均明显高于分化程度高、未侵及浆膜层以及无淋巴结转移胃癌组织(P<0.01)。Ezrin在食管胃连接部的表达高于胃部胃癌,差异无统计学意义(P=0.05)。Ezrin与MMP-14在胃癌中表达呈正相关性(P<0.05)。结论 Ezrin和MMP-14在胃癌中均高表达,且Ezrin和MMP-14的表达呈正相关关系,二者可能起协同作用,共同参与胃癌的侵袭和转移。

RNAi下调MMP-14表达对类风湿关节炎滑膜细胞炎症因子分泌的影响

目的探究能否通过RNA干扰(RNAi)沉默膜型基质蛋白酶-14(MMP-14)从而抑制类风湿关节炎患者的成纤维滑膜细胞(RA-FLS)炎症因子的分泌。方法体外化学合成MMP-14序列特异性双链siRNA,与脂质体混合后转染RA-FLS,实验分为3组,MMP-14-siRNA组转染MMP-14特异性siRNA的RA-FLS,No target组转染MMP-14非特异性siRNA的RA-FLS,Control组为未经处理的RA-FLS。用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)检测相关基因转录水平,蛋白质免疫印迹法(western blot)检测MMP-14蛋白水平,Human IL-1βimmunoassay检测试剂盒检测细胞炎症因子IL-1β分泌。结果 QRT-PCR结果显示,MMP-14-siRNA组细胞中MMP-14基因表达0.290±0.026,明显比No target组和Control组低(P<0.001),而No target组细胞的MMP-14基因表达0.984±0.016与Control组比较差异无统计学意义(P>0.05)。RNAi抑制MMP-14基因转录后,MMP-14-siRNA组细胞MMP-14蛋白表达水平明显低于Control组和No target组。QRT-PCR结果显示MMP-14-siRNA组的炎症因子TNF、IL-1β基因转录水平明显降低,分别为Control组的73%和52%,而COX-2的表达差异无统计学意义(P>0.05)。Human IL-1βimmunoassay检测试剂盒检测结果进一步验证了MMP-14-siRNA组细胞向胞外释放的IL-1β显著减少,约为Control组的50%,而No target组与Control组差异无统计学意义(P>0.05)。结论使用RNA干扰技术可有效抑制RA-FLS炎症因子分泌,提示RNAi技术沉默MMP-14有可能缓解RA滑膜炎症。

MMP-14、VEGF、E-cadherin与子宫颈癌生物学行为的相关性研究

目的探讨正常子宫颈组织和子宫颈癌组织中MMP-14、VEGF和E-cadherin蛋白表达,并研究其与子宫颈癌生物学行为及临床特征的关系。方法应用免疫组化SP法检测10例正常子宫颈和40例子宫颈癌中MMP-14、VEGF、E-cadherin的表达。结果与正常子宫颈组织相比,子宫颈癌组织中MMP-14、VEGF蛋白的表达增高,而E-cadherin蛋白的表达降低,差异均有极显著性意义(均P<0.01);伴盆腔淋巴结转移组MMP-14、VEGF的表达较无淋巴结转移组明显增高,而伴盆腔淋巴结转移组E-cadherin的表达较无淋巴结转移组明显降低(均P<0.01),VEGF在深肌层浸润组的表达高于浅肌层浸润组,而E-cadherin的表达在深肌层浸润组低于浅肌层浸润组(均P<0.05);MMP-14、VEGF、E-cadherin异常表达与子宫颈癌的病理学类型及患者年龄无关(均P>0.05)。结论子宫颈癌组织存在MMP-14、VEGF、E-cadherin的异常表达;MMP-14、VEGF、E-cadherin的表达与子宫颈癌的淋巴结转移和肌层浸润密切相关;检测其在癌组织中的表达水平有助于预测子宫颈癌的浸润和转移。

RECK及MMP-14在肝细胞肝癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨RECK及MMP-14与肝细胞肝癌(HCC)的侵袭转移以及预后的关系。方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测61例HCC患者癌组织、癌旁肝组织以及18例正常肝组织中RECK及MMP-14的mR-NA表达情况;并分析RECK及MMP-14的mRNA的表达与相关临床参数的关系。结果:RECKmRNA在HCC组织中的表达水平显著低于在癌旁肝组织和正常肝组织中的表达水平(P<0.01),而在癌旁肝组织和正常肝组织中的表达水平差异无显著性(P>0.05);MMP-14mRNA在肝癌组织的表达水平显著高于在癌旁肝组织中的表达水平(P<0.01),在癌旁肝组织中的表达水平显著高于在正常肝组织中的表达水平(P<0.01)。RECKmRNA和MMP-14mRNA在HCC组织中的表达呈负相关(P=0.027),而两者在癌旁肝组织及正常肝组织中的表达无相关性。RECKmRNA在HCC组织中的表达水平与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移及术后复发等明显相关,而与肿瘤直径、肿瘤个数、血清AFP水平、肿瘤分化程度以及癌旁有无肝硬化等无明显关系。MMP-14mRNA在HCC组织中的表达水平与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移、术后复发、肿瘤直径大小明显相关,而与肿瘤数目、血清AFP水平、肿瘤分化程度以及癌旁有无肝硬化等无明显关系。结论:本研究提示RECK及MMP-14的mRNA表达与HCC的浸润转移有关,RECK及MMP-14可能在肝细胞肝癌的发生、发展中起重要作用,有可能作为预测肝癌复发、转移的参考指标。

MMP-14、MMP-2、TIMP-2在胃癌组织中表达及意义

目的:探讨基质金属蛋白酶(Metalloproteinase,MMP)-14、-2、基质金属蛋白酶组织抑制因子(Tissue inhibitor ofmetalloproteinase,TIMP)-2在胃癌、癌旁组织及胃溃疡中的表达情况及相互关系。方法:用免疫组织化学方法(SP法)检测30例胃癌手术病人及20例胃镜活检胃溃疡病人中MMP-14、MMP-2、TIMP-2的表达。结果:(1)胃癌组织中,TIMP-2、MMP-2及MMP-14表达阳性率分别为43.3%、76.7%、53.3%,胃癌癌旁组织中分别为56.7%、46.7%和40%,胃溃疡组织中分别为70%、45%和30%。(2)在胃癌中,TIMP-2的阳性表达与癌旁组织及胃溃疡组织比较有统计学差异(P<0.01),MMP-2阳性表达与溃疡组织之间比较有统计学差异(P<0.05)。(3)在癌组织中,MMP-2、MMP-14和TIMP-2表达均与浆膜是否受侵、淋巴结有无转移和TNM临床分期密切相关(P<0.05)。(4)双变量相关分析,在胃癌组织中,MMP-14和MMP-2阳性表达呈正相关(rs=0.447,P>0.05),而TIMP-2阳性表达与前两者均呈显著负相关(rs=-1.0,P<0.01)。结论:(1)MMP-1在胃癌中高表达。(2)MMP-14和MMP-2阳性表达呈正相关,是胃癌的侵袭转移性因素之一。(3)MMP-14表达上调的同时激活了更多的MMP-2,增加了胃癌向周围组织侵袭转移的能力。

Galectin-3和MMP-14对膀胱尿路上皮癌血管生成作用的研究

目的观察膀胱尿路上皮癌中Galectin-3、MMP-14和CD34标记的血管密度(MVD)的表达情况,探讨其表达的临床价值,以期为临床工作提供理论支持。方法本实验应用免疫组织化学方法,检测80例膀胱尿路上皮癌和50例正常膀胱黏膜中Galectin-3、MMP-14和CD34的表达,观察不同临床特征表达的差别,探讨Galectin-3、MMP-14对血管生成的影响。结果 Galectin-3、MMP-14在膀胱尿路上皮癌中表达的阳性率明显高于正常膀胱黏膜组织,CD34阳性的MVD明显高于正常膀胱组织,其表达与膀胱尿路上皮癌的肿瘤体积、有无浸润、分级及淋巴结转移密切相关。膀胱尿路上皮癌中Galectin-3和MMP-14、Galectin-3和MVD、MMP-14和MVD的均呈正相关。生存分析显示Galectin-3、MMP-14和MVD表达与患者的预后密切相关。结论 Galectin-3和MMP-14不仅可以促进膀胱癌的发生发展,还可以促肿瘤中的血管生成,Galectin-3、MMP-14和CD34可能具有通路作用,术后联合检测Galectin-3、MMP-14和CD34的表达可能对判断膀胱尿路上皮癌的预后有一定价值。

宫颈癌组织中CD146和MMP-14表达的意义及相关性分析

目的探讨CD146标记的微血管密度(MVD)和基质金属蛋白酶(MMP-14)在宫颈鳞癌组织中的表达及与其临床病理因素的相关性。方法应用免疫组织化学染色(SP法),检测CD146和MMP-14在82例宫颈鳞癌、48例宫颈上皮内瘤变(CIN)及24例慢性宫颈炎组织中的表达,并对CD146标记的MVD进行图像分析计数。结果宫颈鳞癌组中MMP-14表达及CD146标记的MVD值明显高于CIN组及慢性宫颈炎组(P<0.01)。CD146标记的MVD值及MMP-14表达与肿瘤组织学类型、浸润深度、FIGO分期及淋巴结转移呈正相关(P<0.01),而与患者年龄无关(P>0.05)。CD146表达与MMP-14表达呈正相关(P<0.01)。结论 CD146和MMP-14是宫颈鳞癌发生、浸润及转移的促进因子,CD146表达与宫颈鳞癌组织中MMP-14的异常表达密切相关。

MMP-2、MMP-14在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-14（MMP-14）在乳腺良性病变、乳腺癌中的表达及其与肿瘤大小、分化程度、腋窝淋巴结转移的关系.方法 应用免疫组织化学PV二步法检测68例乳腺癌组织和24例乳腺良性病变组织中MMP-2和MMP-14蛋白表达情况,并分析其与临床病理参数的关系.结果 MMP-2和MMP-14在乳腺癌中阳性表达率分别为55.9%（38/68）、58.8%（40/68）,在乳腺良性病变中的阳性表达率分别为25.0%（6/24）、16.7%（4/24）,差异均有统计学意义（P＜0.05）;MMP-2和MMP-14的表达与肿瘤大小和腋窝淋巴结转移呈正相关.结论 MMP-2 和MMP-14的表达与肿瘤大小、乳腺癌淋巴结转移有关,可作为评估乳腺癌浸润和转移的生物学指标.

RECK、MMP-14及C—fos的表达与喉癌的相关性

目的：探讨RECK、MMP-14及c—fos的表达与喉癌的相关性。方法：应用流式细胞术检测41例喉癌组织、28例癌旁组织及15例喉部正常黏膜组织中RECK、MMP-14及C—fos的表达与喉癌的相关性。结果：喉癌组织中RECK蛋白的表达量低于癌旁组织（p〈0．05）和正常黏膜组织（P〈0．05）；而喉癌组织中MMP-14蛋白、c—fos蛋白的表达量高于癌旁组织和正常黏膜组织（P均〈0．05）；RECK蛋白、MMP-14蛋白在喉癌组织中的表达与在淋巴结转移、临床分期、病理分级密切相关（P均〈0．05）。c—fos蛋白与临床病理参数无关。喉癌组织中RECK与MMP-14的表达呈负相关（r=-0．63 P〈0．01），而RECK与c—fos及MMP-14与c—fos的表达无明显相关性。结论：在喉癌组织中RECK蛋白低表达以及MMP-14、c—fos蛋白高表达可能与喉癌的发生有关。RECK蛋白和MMP-14蛋白相互作用可能影响喉癌的侵袭和转移。

MMP-14、MMP-2在喉癌中的表达及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-14（MMP-14）在喉癌中的表达及意义。方法应用流式细胞术检测40例喉癌组织、28例癌旁组织及15例喉部正常粘膜组织中MMP-2、MMP-14的表达。结果MMP-14、MMP-2蛋白在喉癌组织中的表达量均高于正常粘膜组织（P〈0．05）。在喉癌组织中，MMP-14、MMP-2蛋白与淋巴结是否转移、临床分期及病理组织学分级密切相关（P〈0．05）。结论在喉癌组织中MMP-14、MMP-2蛋白高表达可能与喉癌的发生有关。联合监测喉癌中MMP-2和MMP-14的表达对肿瘤的诊断、预后判断、疗效观察起重要作用。

T淋巴细胞亚群、VEGF、MMP-14检测对肝癌射频消融术后残癌临床评估的价值

目的 检测原发性肝癌(HCC)患者采用射频消融术(RFA)后,组织内T淋巴细胞亚群、血管内皮生长因子(VEGF)、金属蛋白酶-14(MMP-14)水平,分析以上指标对残癌的临床评估价值.方法 选取2017年11月至2018年10月间在本院行RFA手术的HCC患者60例作为观察组,均经肝穿刺病理活检确诊,收集观察组RFA术后32例非残癌组织(观察A组)及28例残癌组织(观察B组);收集同期在本院行单纯手术切除的40例HCC组织标本作为对照组.采用流式细胞仪检测两组患者外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD4+/CD8+细胞;采用免疫组化法检测VEGF及MMP-14阳性表达.结果 治疗后,对照组和观察组外周血CD4+及CD4+/CD8+水平均显著低于治疗前,而CD8+则显著高于治疗前(P<0.01);治疗后1个月,观察A组CD3+水平为(73.7±17.1)%、CD4+为(41.2±10.5)%、CD8+为(21.3±5.6)%、CD4+/CD8+为(2.0±0.6),均明显优于对照组及观察B组,组间差异均有统计学意义(P<0.05).治疗后,观察B组VEGF蛋白阳性人数为24例(85.7%)、MMP-14蛋白阳性人数为22例(78.6%),均显著高于对照组及观察A组,组间差异均有统计学意义(P<0.05).结论 RFA术后,HCC无残癌组织的T淋巴细胞亚群有明显升高,而残癌组织中VEGF及MMP-14蛋白水平较高,临床可以通过检测T淋巴细胞亚群、VEGF及MMP-14水平判断HCC是否存在残留病灶.

老年心肌梗死患者血清MMP-3、MMP-14和hs-CRP表达的价值

近年来研究显示冠心病进展时血清和内环境中细胞因子会随着动脉粥样硬化程度的变化而变化,而关注最多的是超敏C反应蛋白（hs-CRP）,并作为重要指标在临床中应用〔1〕。但是冠状动脉粥样硬化病变引起冠心病时,血清中多种指标均发生变化,这些指标临床中关注最多的是基质金属蛋白酶（MMPs）家族。而MMPs家族中,人们研究较多的是MMP-9〔2〕,MMP-3和MMP-14均可以有效地降解细胞外基质。

结直肠癌患者血清中MMP-2、MMP-9和MMP-14检测的临床意义

目的探讨MMP-2、MMP-9及MMP-14在结直肠癌患者血清中的表达水平,并分析其与结直肠癌分化程度、Dukes分期及淋巴结转移等病理参数的关系,以更好的指导临床工作。方法应用ELISA(酶联免疫吸附实验)分别检测200例结直肠癌患者(观察组)、60例健康成人(对照组)血清中MMP-2、MMP-9和MMP-14的含量。结果观察组血清中MMP-2、MMP-9及MMP-14表达量显著高于对照组(P<0.01),观察组中不同临床特征患者血清MMP-2、MMP-9和MMP-14的表达与肿瘤分化程度、Dukes分期以及淋巴结转移有关(P<0.01),经相关性分析,MMP-2和MMP-9、MMP-9和MMP-14的表达呈正相关(P均<0.05)。结论MMP-2、MMP-9和MMP-14在结直肠癌患者血清中高表达,三者可能在结直肠癌发生发展中起重要作用;早期联合检测MMP-2、MMP-9和MMP-14可能对判断患者的预后及指导临床治疗有重要价值。

结直肠癌中MMP-14及CD_(44)v6表达及临床意义

目的探讨MMP-14及CD44v6与结直肠癌临床病理因素的关系。方法对68例结直肠癌中MMP-14及CD44v6的表达进行免疫组化检测。结果MMP-14及CD44v6在正常肠黏膜组织及结直肠癌中的表达差异显著,不同性别及组织分型结直肠癌中MMP-14及CD44v6的表达无差异性,Dukes分期C-D期中MMP-14与CD44v6的表达明显高于A～B期(P<0.05)。结论结直肠癌中CD44v6及MMP-14中表达的检测,对结直肠癌侵袭性和预后的评估有实际的临床意义。

Axin与MMP-14在食管鳞癌中的表达及与浸润转移的关系

目的:探讨Axin蛋白和MMP-14蛋白在食管鳞癌中的表达及与浸润转移的关系以及两者表达的相关性。方法:采用免疫组织化学(SP)法对72例食管鳞癌标本中Axin蛋白和MMP-14蛋白的表达进行了检测。结果:食管鳞癌中Axin蛋白的阳性表达率仅为38.9%,在有纤维膜浸润食管癌中的表达明显低于无纤维膜浸润者(P<0.05);有淋巴结转移组的表达明显低于无淋巴结转移组(P<0.05)。食管鳞癌中MMP-14蛋白的阳性表达率为62.5%,在高分化的食管鳞癌组织中的表达明显低于中低分化者(P<0.05);在有纤维膜浸润食管鳞癌中的表达明显高于无纤维膜浸润者(P<0.05);有淋巴结转移组的表达明显高于无淋巴结转移组(P<0.01)。食管鳞癌Axin和MMP-14的表达具有相关性(P<0.05)。结论:Axin蛋白的低表达和MMP-14蛋白的高表达与食管鳞癌的浸润及转移均有关,二者表达呈负相关,有望成为判断食管鳞癌的转移潜能及预后的有效指标。

miR-9和MMP-14在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的检测微小RNA-9(miR-9)和基质金属蛋白酶-14(MMP-14)在晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清和组织中的表达情况,以及与患者临床特征及预后的关系。方法收集76例晚期(Ⅲb~Ⅳ期)NSCLC患者的血液样本和肿瘤组织样本,另收集气管肺部良性疾病患者50例。采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测血清和组织中miR-9表达。采用ELISA法和免疫组化法检测血清和组织中MMP-14表达。随访12个月患者生存情况。采用受试者工作特征(ROC)曲线计算血清miR-9、MMP-14对晚期NSCLC患者预后的预测价值。结果与良性疾病组患者比较,NSCLC组患者血清miR-9水平降低,MMP-14水平升高(P<0.05)。NSCLC患者血清miR-9和MMP-14水平呈负相关性(r=-0.399,P<0.001)。肿瘤组织中MMP-14蛋白阳性表达率为65.79%(50/76),MMP-14阳性表达者组织miR-9表达量低于MMP-14阴性表达患者(P<0.05)。血清和组织中miR-9、MMP-14表达与肺外转移、TNM分期和ALK基因突变有关。血清miR-9和MMP-14水平预测患者1年内死亡的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.696(95%CI:0.493~0.823)、0.704(95%CI:0.545~0.798),敏感度和特异度分别为93.3%、52.5%和80.3%、58.5%,截断值分别为0.825和44.80 pg/ml。结论晚期NSCLC患者血清和组织中miR-9表达量降低以及MMP-14水平升高与患者Ⅳ期、发生肺外转移和患者死亡有关,血清miR-9和MMP-14水平对于预测晚期NSCLC患者预后不良有一定的临床参考价值。

双靶向MMP-14和金属离子的结合肽筛选与分子模拟

以基质金属蛋白酶-14(MMP-14)催化结构域为靶标,通过噬菌体随机十二肽库筛选和分子模拟、细胞免疫荧光、金属离子亲和层析以及体外细胞作用测定等技术,进行了双靶向MMP-14和金属离子小分子结合多肽的筛选与研究.经4轮筛选,噬菌体得到有效富集并获得13条不同的多肽序列.序列分析显示,可能的一致序列有:AHQLH、HHXH、EI/LPLL/I.分子模拟与对接进一步确认一致序列AHQLH、HHTH、LPLL与MMP-14催化结构域的氨基酸120-125区域良好分子对接并具有一定的专一性,多条MMP-14结合肽不仅靶向MMP-14,同时结合金属离子.细胞生物学研究确认,所测定的结合肽噬菌体对MMP-14诱导表达的MG63细胞具有良好的结合作用,揭示结合肽对MMP-14的靶向结合特性,并且合成的AHQLH、LPLL一致序列多肽对MG63细胞活力具有一定的抑制能力.这些新的和具有一定MMP-14专一性的一致序列可望用于靶向MMP-14抗肿瘤药物的研发和利用.