益景汤调控MMPs/TIMPs相关分子拮抗高糖诱导的iBRB模型基底膜损害

目的:观察益景汤拮抗高糖诱导的体外血-视网膜内屏障(iBRB)模型基底膜(BM)损害及机制。方法:分离、培养大鼠内皮细胞(ECs)和视网膜微血管周细胞(RMPs)构建体外iBRB模型,随机分成低糖组、高糖组、米诺环素组、益景汤组,分别予25 mmol/L葡萄糖、60 mmol/L葡萄糖、60 mmol/L葡萄糖+10μg/mL米诺环素、60 mmol/L葡萄糖+10%益景汤含药血清干预,各组干预12 h后终止孵育。采用Western blot法检测各组BM相关蛋白[Ⅳ型胶原(collagenⅣ,CⅣ)、层黏连蛋白(laminin,LN)]及MMPs/TIMPs相关蛋白(MMP-2、MMP-3、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2)的表达。结果:与低糖组相比,高糖组、米诺环素组、益景汤组CⅣ蛋白表达增加,高糖组、米诺环素组LN蛋白表达增加(均P<0.05)。益景汤及米诺环素能够抑制高糖诱导的CⅣ、LN蛋白表达增加,益景汤组、米诺环素组与高糖组相比具有差异(均P<0.05)。与低糖组相比,高糖组、米诺环素组MMP-2、MMP-3、MMP-9蛋白表达增加(均P<0.05)。益景汤能够抑制高糖诱导的MMP-2、MMP-3、MMP-9蛋白表达增加,益景汤组与高糖组相比具有差异(均P<0.05)。低糖组、高糖组、米诺环素组、益景汤组各组之间TIMP-1、TIMP-2表达未见明显差异(均P>0.05)。结论:益景汤可能通过调控MMP-2、MMP-3、MMP-9、CⅣ、LN的表达,干预高糖介导的BM重塑,抑制iBRB的损害,从而干预DR。

The expression of MMPs and TIMPs in gliomas of the limbic system

To investigate the function of matrix metalloproteinase-2(MMP-2),matrix metalloproteinase-9(MMP-9) and tissue inhibitors of metalloproteinase-2(TIMP-2) in the invasion of gliomas of the limbic system.Methods The expression of MMP-2,MMP-9 and TIMP-2 in low and high-grade gliomas and meningiomas was detected by using immunohistochemical technique.Results (1) The expression levels of MMP-2 and MMP-9 were significantly higher in high grade gliomas than those in low grade gliomas (P<0.05 and P<0.01 respectively).They were also significantly higher in low grade gliomas than those in meninginomas (P<0.05 and P<0.01 respectively).(2) The TIMP-2 expression level was obviously lower in gliomas of grade Ⅲ and grade Ⅳthan that in gliomas of grade Ⅰ and grade Ⅱ.Also,the expression of TIMP-2 in gliomas of grade Ⅰ and grade Ⅱ was significantly lower than that in meningiomas. Conclusion (1) The expression of MMP-2 and MMP-9 in human brain gliomas is related to malignant progression of gliomas.They might be used as the indicators to evaluate the malignancy and prognosis of gliomas.(2) Imbalance between MMP-s and TIMP-s may be one of the improtant factors promoting glioma invasion.5 refs,3 figs.

MMPs和TIMPs与糖尿病心肌病心室重构的关系及糖心宁的干预作用

目的:探讨MMP-2、MMP-9、TIMP-2、TIMP-1在糖尿病心肌病心室重构过程中的作用,以及糖心宁的心肌保护作用及机制。方法:36只SD大鼠,其中9只作为空白对照组,27只腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病心肌病大鼠模型,随机分为模型组、糖心宁高剂量组、糖心宁等效剂量组3组,糖心宁组灌服中药,模型组及空白对照组灌服等量清洁饮用水,给药8周后处死大鼠,计算左心室肥厚指数,检测血清T-SOD活性和MDA含量;Masson染色观察心肌组织中胶原,免疫组化法检测心肌组织MMP-2、MMP-9、TIMP-2、TIMP-1的蛋白表达。结果:糖尿病心肌病大鼠用药8周后,糖心宁高剂量组、糖心宁等效剂量组均能降低左心室肥厚指数,减少MDA含量,升高T-SOD水平,且同时升高MMP-9/TIMP-1和MMP-2/TIMP-2比值,降低心肌胶原含量。结论:糖心宁具有通过改善氧化应激,重新调整MMP-9/TIMP-1平衡、减弱TIMP-1对MMP-9抑制从而减轻DCM心室重构的作用。

芪苈强心胶囊联合托伐普坦片对冠心病慢性心力衰竭MMPs/TIMPs调节作用的研究

目的观察芪苈强心胶囊联合托伐普坦片治疗冠心病心力衰竭的临床疗效,并研究其对MMPs/TIMPs的影响。方法选取116例冠心病心力衰竭患者,随机分为两组,每组58例。两组均采用常规治疗,对照组在常规治疗的基础上口服托伐普坦片,初始剂量为15 mg/d,逐渐增加至30 mg/d,最大剂量为60 mg/d;观察组在对照组的基础上加以口服芪苈强心胶囊,4粒/次,3次/d,两组均以4周为1个疗程,两组连续治疗2个疗程。比较两组的临床疗效;比较两组患者治疗前后的心率(HR)、6 min步行距离测试(6MWT)、左室收缩期末内径(LVESD)、左室射血分数(LVEF)、左室舒张期末内径(LVEDD);比较治疗前及治疗后基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、MMP-13、金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1、TIMP-2的水平;同时在治疗前后采用明尼苏达生活质量问卷(MLHFQ)评价两组患者的生活质量。结果观察组总有效率为91.4%,明显优于对照组(P<0.05)。观察组的阳气亏虚血瘀证中医证候各项积分均显著优于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组的气短喘息、神疲乏力、心悸、怕冷喜温、胃脘冷痛、畏寒肢冷、面色紫黯等中医证候积分均显著降低(P<0.05),观察组各中医证候积分均显著优于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者6MWT、LVEF水平明显升高(P<0.05),HR、LVESD、LVEDD水平及MLHFQ评分明显降低(P<0.05),并且观察组的6MWT、LVEF、HR、LVESD、LVEDD水平及MLHFQ评分的变化幅度明显优于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者的MMP-2、MMP-9及MMP-13水平均明显低于治疗前(P<0.05),TIMP-1、TIMP-2则明显升高(P<0.05),并且观察组MMP-2、MMP-9、MMP-13及TIMP-1、TIMP-2变化幅度显著高于对照组(P<0.05)。结论芪苈强心胶囊联合托伐普坦片治疗冠心病心力衰竭可调节MMPs/TIMPs的表达,有效改善心功能,具有较好的临床疗效。

肺癌MMPs和TIMPs的表达及浸润转移的研究

目的 研究肺癌组织中基质金属蛋白酶 (MMPs)及其抑制剂 (TIMPs)在肺癌组织中的表达情况 ,以探讨MMPs及TIMPs在肺癌浸润和转移中的作用。方法 用SP免疫组化技术检测MMP 1、MMP 2、MMP 9、MMP 13、TIMP 1、TIMP 2在 10 4例肺癌组织中的表达。结果 肺癌组织中MMPs、TIMPs的阳性表达率均显著高于正常肺组织。MMP 2与肺癌分级有密切关系 ,MMP 9与淋巴结转移有密切关系 ,TIMP 1与肺癌分期和淋巴结转移有密切关系。肺癌组织中MMP 2与其抑制剂TIMP 2的表达呈正相关 ,MMP 9与TIMP 2的表达呈正相关。结论 MMPs和TIMPs在肺癌发展过程中具有重要作用 ,尤其是MMP 9和TIMP

滋肾活血法对糖尿病肾病大鼠肾组织Ⅳ-C及MMPs/TIMPs系统的影响

目的观察活血降糖胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)蛋白表达及MMPs/TIMPs系统作用的影响。方法将SD雄性大鼠复制为DN动物模型,筛选DN成模大鼠,随机分成模型(DNM)组、中药(HX)组、西药(IR)组,并随机设正常对照(NC)组,分别予中西药物干预;8周后处死大鼠取肾组织,以免疫组织化学方法测定IV-C、MMP-9、MMP-2及TIMP-1、TIMP-2的蛋白表达,计算积分光密度及面密度比值。结果 HX组和IR组的Ⅳ-C免疫组织化学染色面密度及积分光密度较DNM组降低,MMP-9、MMP-2免疫组织化学染色面密度及积分光密度较DNM组升高,DNM组TIMP-1、TIMP-2与HX组和IR组比较呈强阳性表达,HX组和IR组染色面积及积分光密度均较DNM组降低,差异有统计学意义(P<0.01);MMPs/TIMPs比值与Ⅳ-C免疫组织化学染色面积呈负相关(r1=-0.929,r2=-0.908,P<0.01)。结论滋肾活血中药——活血降糖胶囊可能通过调节肾组织MMPs/TIMPs系统蛋白表达,改善Ⅳ-C代谢,延缓DN肾小球硬化进程,对DN肾脏发挥保护作用。

青光眼患者房水中MMPs/TIMPs表达与氧化应激、血管新生的相关性

目的:探讨青光眼患者房水中MMPs/TIMPs表达与氧化应激、血管新生的相关性。方法:选取在本院确诊并接受治疗的原发性青光眼患者110例作为青光眼组,同期在本院进行治疗的原发性白内障患者68例作为白内障组。对比两组房水中MMP-2、TIMP-2含量及MMP-2/TIMP-2比值,氧化应激相关指标、血管新生相关指标的差异,进一步经相关性分析评估青光眼患者MMP-2、TIMP-2含量及MMP-2/TIMP-2比值与氧化应激、血管新生的相关关系。结果:青光眼组房水中MMP-2、TIMP-2的含量及MMP-2/TIMP-2的比值均高于白内障组;房水中抗氧化指标T-AOC、CAT的含量低于白内障组,氧化指标ROS、AOPPs的含量高于白内障组;房水中血管新生相关指标PEDF的含量低于白内障组,VEGF、bFGF的含量高于白内障组(P <0.05)。Pearson检验发现,青光眼患者房水中MMP-2、TIMP-2含量及MMP-2/TIMP-2比值与机体氧化应激、血管新生程度均直接相关。结论:青光眼患者房水中MMP-2、TIMP-2含量及MMP-2/TIMP-2比值均异常增高,与眼部氧化应激及血管新生程度均呈正相关。

益气逐瘀解毒颗粒调控MMPs/TIMPs平衡抗大鼠肝纤维化作用研究

目的:探讨益气逐瘀解毒颗粒对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的治疗作用及机制。方法:将SD雄性大鼠给予CCl4橄榄油混合液进行皮下注射7周,制备肝纤维化大鼠模型,随机分为益气逐瘀解毒颗粒高、中、低剂量组、阳性对照组、模型组、空白组,给予相应治疗,5周后处死大鼠,检测外周血生化指标,逆转录-定量PCR法和蛋白印迹法分别检测大鼠肝组织中基质蛋白酶1 (Matrix metalloproteinase1, MMP-1)、MMP-2、MMP-9、MMP-13及基质蛋白酶抑制因子1 (tissue Inhibitor of metalloproteinases1,TIMP-1)表达水平,肝组织苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin staining, HE染色)、MASSON染色检测肝纤维化程度。结果:治疗后与空白组比较,模型组的ALT、AST无显著性差异(P> 0.05),MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13基因表达显著降低(P <0.05),TIMP-1基因表达显著升高(P <0.05),肝纤维化半定量计分(SSS)评分显著升高(P <0.01);与模型组比较,益气逐瘀解毒颗粒各剂量组ALT、AST无显著性差异(P> 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高剂量组MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13基因表达明显升高(P <0.05),中剂量组MMP-9、MMP-13基因表达明显增高(P <0.05),低剂量组MMP-13基因表达明显增高(P <0.05),高、中剂量组TIMP-1基因表达明显降低(P <0.05),益气逐瘀解毒颗粒各剂量组MMP-2、MMP-9蛋白表达量无显著性差异(P> 0.05),高、中剂量组MMP-13蛋白表达量显著升高(P <0.05),各剂量组TIMP-1蛋白表达量均显著下降(P <0.05),以低剂量组下降尤为显著,优于高、中剂量组(P <0.05),各药物干预组SSS评分显著降低(P <0.01);与阳性对照组比较,益气逐瘀解毒颗粒各剂量组ALT、AST无显著性差异(P> 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高剂量组MMP-2基因表达明显升高(P <0.05),高、中剂量组TIMP-1基因表达明显降低(P <0.05),益气逐瘀解毒颗粒高、中剂量组MMP-13蛋白表达显著升高(P <0.05),益气逐瘀解毒颗粒各剂量组TIMP-1蛋白表达显著降低(P <0.05),低剂量组下降尤为显著,优于高、中剂量组(P <0.05),益气逐瘀解毒颗粒高、中、低剂量组SSS评分显著降低(P <0.01)。结论:调控MMPs/TIMPs平衡可能是益气逐瘀解毒颗粒抗肝维化的作用机制之一,其通过升高MMP-13、降低TIMP-1表达水平,调控MMPs/TIMPs平衡,促进过度沉积的细胞外基质(Extracelluar matrix,ECM)降解,改善CCl4诱导肝纤维化大鼠模型的肝脏功能,从而改善其肝纤维化程度。

不同龈下菌斑清除方式对龈沟液中细胞凋亡因子、炎症因子及MMPs/TIMPs平衡的影响

目的:探讨手器刮治和喷砂清除龈下菌斑对龈沟液中细胞凋亡、炎症反应及MMPs/TIMPs平衡的影响。方法:将慢性牙周炎患者128例随机分为手器刮治组、喷砂组(n=64)。治疗前后用荧光定量PCR 2组患者龈沟液标本中凋亡分子表达量,用ELISA测定炎症因子、MMPs/TIMPs含量。结果:治疗前各项检测指标组间差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后7 d,2组Bcl-2 mRNA均升高(P<0.05),喷砂组高于手器刮治组(P<0.05)。Bax、Caspase-3 mRNA的表达量均降低(P<0.05),喷砂组低于手器刮治组(P<0.05)。龈沟液中炎症因子hs-CRP、IL-6的含量均降低(P<0.05),喷砂组低于手器刮治组(P<0.05)。IL-10的含量均升高(P<0.05),喷砂组高于手器刮治组(P<0.05)。龈沟液中MMP-2、MMP-8、MMP-13的含量均降低(P<0.05),喷砂组低于手器刮治组(P<0.05)。TIMP-1的含量均升高(P<0.05),喷砂组高于手器刮治组(P<0.05)。结论:手器刮治、喷砂刮治清除慢性牙周炎患者龈下菌斑均有效,但喷砂刮治在保护牙周组织,恢复内环境稳态方面更具优势。

PPAR_γ配体对人血单核细胞MMPs和TIMPs表达及活性的影响

目的探讨过氧化物酶体增生物激活受体-γ（PPARγ）配体15d-PGJ2对人血单核细胞基质金属蛋白酶及其内源性抑制物（MMPs和TIMPs）表达及活性的影响。方法 应用RT-PCR和Western blotting测定MMPs、TIMPs的基因和蛋白表达,Zymography测定MMPs活性。结果PPARγ配体15d-PGJ2可明显抑制人血单核细胞MMP-9的表达及其活性,但不影响MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达。结论 PPARγ配对15d-PGJ2可抑制人血单核细胞MMP—9的表达及其活性,对减少动脉粥样硬化斑块局部细胞外基质降解、增强斑块稳定性可能起到有益作用。

bFGF、MMPs和TIMPs在肿瘤临床研究中的进展

侵袭生长和转移是恶性肿瘤的特性之一。临床中发现恶性肿瘤患者大多数死于肿瘤的侵袭和转移。研究发现肿瘤的生长、侵袭、转移、预后、复发都与血管生成有关系,肿瘤血管的生成涉及到多种基因的突变和不同细胞因子及受体的表达[1]。

MMPs/TIMPs在甲状腺乳头状癌细胞中的表达与作用的研究

目的:探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)患者癌细胞中基质金属蛋白酶(matrix metallo-proteinases,MMPs)和金属蛋白酶的组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs)蛋白的表达水平,探讨MMPs/TIMPs与甲状腺乳头状癌发生、发展之间的相互关系。方法:应用ELISA方法检测甲状腺正常组织和乳头状癌癌细胞培养液中MMP-2、MMP-9以及TIMP-1、TIMP-2的分泌水平;采用MTS掺入试验检测在rhMMP-2或抗MMP-2中和抗体的作用下,甲状腺正常组织细胞和乳头状癌癌细胞增殖水平。结果:甲状腺乳头状癌癌细胞分泌MMP-2、MMP-9水平提高,而分泌TIMP-1、TIMP-2水平降低,MMPs与TIMPs的比值升高特别显著;MMP-2对甲状腺乳头状癌癌细胞有明显的促增殖作用,抗MMP-2单克隆抗体能明显地抑制癌细胞生长。结论:MMPs与TIMPs的比值有望作为预测甲状腺乳头状癌生长和转移的一项检测指标。

MMPs/TIMPs与肝纤维化的关系及中药对其作用研究进展

肝纤维化是细胞外基质（ECM） 的合成与降解失衡,导致其在细胞间质的过度沉积而引起的,是许多慢性肝病的共同病理过程[1-3].许多细胞因子参与了这一过程,其中主要由金属蛋白酶（MMPs）及其抑制因子（ TIMP） 共同调节肝脏ECM的代谢[4].MMPs几乎能降解ECM的所有成分,而其天然抑制剂-TIMPs 能与MMPs成员结合成复合物抑制其活性[5].

颈动脉粥样硬化患者MMPs、TIMPs与中医证候分型相关性的研究

目的:观察颈动脉粥样硬化患者不同中医证型与血清基质金属蛋白酶(MMPs)、基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)含量的相关性。方法:观察对象分为正常对照组、气滞血瘀组、脾虚痰阻组、肾精亏虚组4组,比较各组Crouse积分、血清MMPs、TIMPs等值方面的差异。结果:气滞血瘀组、脾虚痰阻组、肾精亏虚组各项指标显著高于正常对照组;在Crouse积分、血清MMPs、MMPs/TIMPs方面,脾虚痰阻组、肾精亏虚组显著高于气滞血瘀组。结论:脾虚痰阻组与肾精亏虚组临床发生心脑血管事件的风险高,尤以肾精亏虚组为甚。

成都汉族群体MMPs和TIMPs基因单核苷酸多态性及单体型分析

目的研究MMPs和TIMPs基因单核苷酸多态性(SNPs)在中国成都汉族人群中的分布特点。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测132名中国成都汉族个体MMPs基因6个SNPs(MMP1-1607 1G/2G、MMP2-1306C/T、MMP2-735C/T、MMP3-1612 5A/6A、MMP9-1562C/T、MMP21 572C/T)和TIMPs基因2个SNPs(TIMP2 303C/T、TIMP3-1296C/T)的多态性,并与中国北方汉族及日本、欧洲群体的MMPs和TIMPs基因SNPs等位基因频率的分布进行比较。结果获得了成都汉族人群的MMPs和TIMPs基因8个SNPs的群体遗传学资料。除MMP21 572C/T位点外,其余MMPs和TIMPs的SNPs基因型及等位基因频率及单体型的频率分布与中国北方汉族人群、日本及欧洲等人群之间的比较具有统计学意义(P<0.05)。结论成都地区汉族人群MMPs和TIMPs基因8个SNPs的等位基因频率同其他地区人群的存在较明显的不同。

MMPs和TIMPs与甲状腺癌

甲状腺癌是最常见的头颈部多发内分泌肿瘤,肿瘤转移、复发是治疗失败和患者死亡的主要原因。基质金属蛋白酶和组织金属蛋白酶抑制剂可通过多种机制影响甲状腺癌的发生、发展。许多研究证实,两者间的失衡在此过程中起重要的作用。对其的深入研究,有利于了解二者在甲状腺癌侵袭和转移中的作用,并能为甲状腺癌的早期诊断、判断良恶性提供一些新的依据。