MNU诱导的大白鼠膀胱肿瘤动物模型

目的 研究N - -甲基亚硝基脲 (MNU)诱发大白鼠膀胱肿瘤的作用。方法 以MNU为诱癌剂 ,进行大白鼠膀胱灌注 ,以光镜、扫描电镜、透射电镜等为观察手段 ,对其诱发的膀胱肿瘤进行观察。结果 每次灌注MNU2mg 只 ,每 2周 1次 ,共 4次 ,8周诱发膀胱肿瘤率 10 0 % ,其组织学形态及病理特征与人膀胱肿瘤十分相似。结论 MNU诱发的大白鼠膀胱肿瘤为一理想的动物模型。

MNU诱发SD大鼠膀胱肿瘤原位模型

目的在原位建立膀胱肿瘤的大鼠模型。方法实验动物随机分为两组,模型组55只,对照组10只,N-甲基亚硝基脲(MNU)对模型组SD大鼠进行膀胱灌注,于首次灌注MNU后第3、6、9周分别每次处死模型组10只大鼠以及对照组2只大鼠,在病变明显处多处取材进行组织病理学检查。在实验的12周处死剩余的模型组和对照组大鼠进行组织病理学检查。结果诱癌期间两组大鼠毛色、食量、营养状况及体重等一般情况无明显差别;对照组大鼠膀胱黏膜未见病变,12周时,所有模型组大鼠均有肿瘤形成且大多呈多发性,肿瘤大小不一;对照组大鼠膀胱黏膜上皮细胞排列有序,形态大小未见异常。模型组均发生程度不等病变,12周时肿瘤细胞浸润可达深肌层,肿瘤细胞异型明显,细胞核较大且极性紊乱或消失,核分裂相明显。结论成功在原位建立膀胱肿瘤的大鼠模型。

MNU灌肠诱导大鼠原位结肠癌及远处转移的模型建立

目的以MNU灌肠方式建立大鼠原位结肠癌及远处转移模型，实时观察大鼠结肠癌的发生、发展及转移过程。方法应用MNU（N-甲基-N-亚硝基脲）对SD大鼠进行灌肠，观察大鼠摄食、活动、排便等临床表现及成瘤时间、肿瘤生长、转移情况，分别于8、12、16周进行解剖，观察结肠原位肿瘤的生长及远处转移情况，通过病理分析，综合评价该模型。结果实验大鼠未发生死亡，灌肠8周后，大鼠即可出现大便性状改变、便血、淋巴结肿大等临床症状，灌肠后12周后，75％的SD大鼠发生了结肠癌，并同时发生了多处淋巴结转移，16周后大鼠结肠原位肿瘤诱导成功率达到91．7％，病理学证实了原位结肠癌及远处淋巴结转移。结论MNU能够通过灌肠方式有效地在SD大鼠上诱导出结肠癌及远处转移，诱导过程方便有效，贴近结肠癌的自然发生、发展过程，该模型淋巴结转移成功率较高，为结直肠癌原位生长及淋巴道转移机制，寻找新的治疗方案以及抗转移治疗等提供了理想的动物模型。

雌激素在MNU诱导大鼠膀胱肿瘤的抑癌作用及治疗膀胱癌的实验研究

本实验用切除卵巢的ｗｉｓｔａｒ大鼠。给予Ｎ－ｍｅｔｈｙｌ－Ｎ－ｎｉｔｒｏｓｏｕｒｅａ（ＭＮＵ）０．５ｍｇ进行膀胱内灌注，每周一次，共四周。ＭＮＵ总量２．０ｍｇ，再分别给予戊酸雌二醇和丙酸睾丸素肌肉注射至２０周。实验结果表明戊酸雌二醇对ＭＮＵ诱导的大鼠膀胱肿瘤有抑制作用。另外以苯甲酸雌二醇、戊酸雌二醇，乙烯雌酚，甲地孕酮，黄体酮对小鼠膀胱癌瘤株ＢＳＴ（７３９），ＢＴＴ（７３９）进行实验治疗研究，果表明对ＢＳＴ（７３９）、ＢＴＴ（７３９）均有治疗作用。

环境致癌加合物MNU－DNA的高效液相色谱分离与质谱鉴别

本文报道环境致癌物ＭＮＵ与ＤＮＡ形成的ＭＮＵ－ＤＮＡ加合物的ＨＰＬＣ与ＭＳ的分离、鉴别结果。加合物在水解后分析。ＨＰＬＣ法通过保留时间及各洗提物的ＵＶ吸收光谱在线检测，筛选出感兴趣的目标化合物（Ｎ７－ＭＧ，Ｏ６－ＭＧ），再通过质谱（ＥＩＭＳ及ＦＡＢＭＳ）鉴定。

杞菊地黄汤对MNU诱发的大鼠视网膜变性基因表达谱的影响

目的:观察杞菊地黄汤防治MNU诱发大鼠视网膜变性的基因表达谱变化,探索其作用的分子机制。方法:30只大鼠分为3组:药物组(杞菊地黄汤灌胃+MNU皮下注射)、模型组(生理盐水灌胃+MNU皮下注射)和正常组(生理盐水灌胃)。造模后12h,取视网膜进行基因芯片分析和RT-PCR检测。并用GO(gene ontology)分类和信号通路分析等方法对差异表达的基因进行分析。结果:模型组/正常组和模型组/药物组中分别有75个和118个差异表达基因,这些基因多与信号转导、发育、免疫和防御、凋亡等生物过程有关,主要涉及到MAPK、Toll样受体和凋亡信号通路。结论:在MNU诱导的大鼠视网膜变性中,杞菊地黄汤能特异性拮抗数个信号通路中的基因表达。

Caspase-3在MNU诱导的视网膜变性大鼠中的作用

目的研究Caspase3在N甲基N亚硝脲(MNU)诱导的光感受器细胞凋亡过程中的表达并观察其与细胞凋亡的关系。方法大鼠MNU腹腔注射造模后,分别在不同时间段,利用免疫组织化学法检测视网膜中Caspase3的表达,同时用TUNEL法检测视网膜细胞的凋亡。结果MNU腹腔注射后,外核层中Caspase3的表达渐增强,至2d时达高峰,此后渐下降。细胞凋亡数量的变化趋势与前者一致。结论Caspase3可能在MNU诱导的光感受器细胞凋亡中发挥主要作用,其表达量的高低与细胞凋亡的程度有密切联系。

膀胱灌注青藤碱对MNU诱发雄性SD大鼠膀胱癌的抑制作用

研究膀胱灌注青藤碱对N-甲基亚硝基脲(MNU)诱发大鼠膀胱癌的肿瘤免疫及细胞凋亡的影响。将SD大鼠随机分为对照组、模型组、青藤碱组、青藤碱+1/2BCG组、卡介苗(BCG)组等5组,建立大鼠膀胱癌模型,检测大鼠CTLA-4、PD-1、B7-H3的水平,评估大鼠膀胱病理结果。结果提示青藤碱组、青藤碱+1/2BCG组CTLA-4、PD-1均显著低于模型组,青藤碱+1/2BCG组、BCG组相比差异无显著性;膀胱炎症及HE染色评分均显著低于模型组。结果表明青藤碱能显著抑制大鼠膀胱癌CTLA-4、PD-1的表达,降低膀胱炎症及HE染色评分,抑制膀胱癌进展。

MNU诱导大鼠膀胱癌的机制研究

目的:研究N-甲基-N-亚硝基脲(N-methyl-N-nitrosourea,MNU)诱导膀胱癌发生的机制。方法:60只SD大鼠随机分成实验组和对照组。实验组用MNU2 mg/次,2周1次定期作膀胱内灌注,共4次。对照组膀胱内灌以生理盐水0.2 ml/次,每2周1次,共4次。第9周未处死大鼠,随即取大鼠膀胱放入-80℃液氮中保存。采用免疫组化检测H-Ras蛋白的表达,RT-PCR检测磷脂酶Cε(PLCε)mRNA的表达。结果:实验组50只SD大鼠36只成瘤,4只大鼠死亡,成瘤率为81.82%。对照组10只大鼠膀胱未见明显变化。免疫组化检测实验组36只成瘤大鼠中32只H-Ras蛋白阳性。对照组大鼠膀胱组织中H-Ras蛋白表达阴性。RT-PCR,检测实验组和对照组大鼠膀胱PLCε的表达。实验组36只成瘤大鼠PLCε阳性,对照组PLCε表达阴性。结论:MNU可诱导大鼠膀胱黏膜发生癌变,其可能机制为引起H-Ras基因突变并且过表达,同时引起PLCεmRNA表达增加。

MNU诱导大鼠膀胱癌基底膜病变与LN的相关性

目的观察N-甲基亚硝基脲(MNU)在诱导SD雌性大鼠膀胱癌的过程中,膀胱基底膜的病变情况与层粘连蛋白(Laminin,LN)的相关性。方法MNU 2 mg/次进行大鼠膀胱灌注,间隔2周,共4次;然后继续正常喂养6周,14周为诱癌终点。分别在MNU灌注后1周及诱癌终点14周用病理学检测观察膀胱粘膜变化情况;免疫组织化学检测基底膜中LN的表达情况,分析其相关性。结果病理结果显示:MNU灌注后膀胱粘膜经过了炎症性改变、异型增生、原位癌、浸润性癌等过程;免疫组化显示基底膜连续、完整的结构,出现断裂、缺损,最后视野下为散在碎片,无基底膜形态;LN在MNU诱导大鼠膀胱癌形成过程中随着基底膜的破坏逐渐减少,缺失;LN在基底膜中的表达在正常膀胱组织与膀胱癌之间存在差异性统计意义(χ2=25.37;P<0.01)。结论膀胱癌的发生、发展与基底膜的破坏密切相关,且LN的缺失是基底膜破坏导致膀胱癌的因素之一。

人参茎叶总皂苷对大鼠MNU所致视网膜色素变性的作用

目的探讨人参茎叶总皂苷对大鼠MNU所致RP的作用及机制。方法随机将大鼠分成空白对照组、MNU组(模型组)和人参茎叶总皂苷组(治疗组),模型组和治疗组分别腹腔注射注射(ip)MNU 60 mg/kg复制RP模型,对照组则ip等量生理盐水,治疗组连续7 d灌胃人参茎叶总皂苷50 mg/kg。进行视觉电生理检测,视网膜的病理组织学,采用Morris水迷宫检测视觉功能,采用流式细胞仪检测Beclin-1和LC3蛋白的表达。结果治疗组与模型组比较,视觉电生理检测、病理组织学检查显示,模型组视网膜电图波形振幅基本消失,动物视网膜外核层受损,细胞稀疏;人参茎叶总皂苷明显减轻上述的症状;水迷宫实验显示,治疗组与模型组比较总时间、潜伏期、路程、速度低于模型组;治疗组与模型组比较,Beclin-1和LC3表达降低。结论人参茎叶总皂苷对大鼠MNU所致RP具有保护作用,可能与降低Beclin-1和LC3表达有关。

大鼠原位膀胱癌模型的建立与CT诊断价值

目的研究N-甲基亚硝基脲诱导大鼠原位膀胱癌模型的构建过程以及计算机断层扫描对大鼠原位膀胱癌的诊断价值。方法50只SD大鼠随机分为两组,对照组A组15只,实验组B组35只。B组大鼠经尿道膀胱内灌注MNU每两周一次,每次2 mg,共4次。A组大鼠用生理盐水以同样的方法灌注。于第14周末对两组大鼠进行膀胱CT扫描诊断,并且处死后取膀胱组织行病理学观察。结果B组28只大鼠CT扫描膀胱均见明显异常,表现为局部肿块突起或膀胱壁不规则增厚、密度不均,病理诊断均为膀胱癌。A组13只大鼠经CT扫描未发现膀胱肿瘤,病理检查未见肿瘤组织。结论MNU可以诱导大鼠原位膀胱癌模型的建立。CT扫描可作为大鼠原位膀胱癌诊断的可靠方法,并能为肿瘤的化疗或放疗等后续实验提供更好的大鼠模型。

改良CT扫描及CT尿路成像在大鼠膀胱癌动物模型活体检测中的价值

目的：利用N‐甲基‐N‐亚硝脲（MNU）诱导构建大鼠原位膀胱癌动物模型，并提出一种改良的CT扫描和CT尿路成像（CTU）活体检测方法。方法将30只10～12周龄的SpragueDawley（SD）大鼠随机分为两组，A组10只为对照组，每2周予膀胱灌注枸橼酸缓冲液0．1mL，共4次；B组20只为MNU造模组，予A组同法膀胱灌注MNU溶液0．1mL（2mg）。2组大鼠造模诱导期后均常规饲养，观察一般情况。14周时，利用大鼠膀胱灌注欧乃派克稀释液后CT平扫的改良CT检测方法对存活大鼠进行活体成瘤鉴定，并通过三维重建进行CTU成像。活体检测后处死所有大鼠，取膀胱组织进行病理组织学观察。结果14周时A组大鼠无成瘤；B组成瘤率94％，病理诊断为膀胱尿路上皮癌。所有成瘤大鼠CT扫描均见异常，膀胱肿瘤表现为乳头状、团块状低信号新生物，凸向高信号膀胱腔形成充盈缺损。CTU下，膀胱原位肿瘤表现为椭球表面形状各异的凹陷，大小、边界、位置清晰。结论作者首次提出了一种改良CT及CTU小动物原位膀胱肿瘤检测方法，对膀胱癌动态生长和治疗效果的活体评价和连续监测有巨大价值，值得在今后膀胱癌相关动物实验中应用推广。

赫赛汀对大鼠膀胱肿瘤靶向治疗的体内研究

目的研究赫赛汀(Herceptin)对大鼠膀胱肿瘤的治疗作用。方法50只SD大鼠随机分两组,对照组膀胱灌注生理盐水,实验组膀胱灌注N-甲基-N-亚硝基脲(N-methyl-N-nitrosourea,MUN),每3周1次,共4次,MNU总量为10mg;于灌注后第11周切开膀胱取标本,用光镜、免疫组化及RT-PCR方法对其诱发的膀胱肿瘤进行检测。筛选HER-2阳性表达的SD大鼠膀胱癌动物随机分为治疗组(Herceptin按20mg/kg腹腔注射)和非治疗组,检测赫赛汀作用后肿瘤大小、形态,计算抑瘤率,并用免疫组化S-P法检测HER-2蛋白表达、TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡情况,分析赫赛汀对膀胱肿瘤的作用。结果抑瘤率结果提示治疗组与非治疗组相比抑瘤率为50.0%,差异有统计学意义(P<0.05),免疫组化S-P法结果提示赫赛汀作用后HER-2蛋白表达下降;TUNEL原位凋亡结果提示治疗组凋亡指数(64.0±6.3)%高于非治疗组(47.9±5.4)%(P<0.05)。结论赫赛汀对HER-2阳性的实验性膀胱肿瘤有抑制生长、促进凋亡的作用。

华蟾素对SD大鼠膀胱肿瘤的抑制作用

目的研究华蟾素对SD大鼠膀胱肿瘤的治疗作用。方法 50只SD大鼠按随机分为对照组和实验组,实验组40只大鼠膀胱灌注N-甲基-N-亚硝基脲(N-methyl-N-nitrosourea,MUN),每3周1次,共4次;于第14周将实验组大鼠随机分为生理盐水组(膀胱灌注生理盐水)、丝裂霉素组(5 mg/kg)、低浓度华蟾素组(5 mg/kg)及高浓度华蟾素组(20 mg/kg),每周灌注1次,连续灌注5次,计算抑瘤率,TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡情况。结果 MNU膀胱灌注成功建立膀胱肿瘤动物模型,以膀胱肿瘤质量计算高浓度华蟾素组的抑瘤率为76.7%,高浓度华蟾素组抑瘤率较丝裂霉素组及低浓度华蟾素组高;TUNEL法检测高浓度华蟾素组AI值为(24.21±1.24)%,较其他各组AI值明显增高,提示高浓度华蟾素组凋亡指数高于丝裂霉素及低浓度华蟾素组。结论华蟾素对膀胱肿瘤有抑制生长、促进凋亡的作用,且高浓度时抑瘤作用及促凋亡作用较强。

大肠上皮细胞癌变过程中DNA含量倍体水平变化特点及其生物学意义

应用图像细胞分析技术对外Ｎ－甲基－Ｎ－亚硝基脲（ＭＮＵ）建立的小鼠大肠癌模型进行细胞ＤＮＡ含量动态定量观察。正常成年小鼠结肠上皮以二倍体细胞（２Ｃ）为主。在ＭＮＵ作用下，不典型增生期出现４Ｃ细胞持续性扩增，并取代２Ｃ细胞成为主要的细胞群体；处于早期癌变时期仍主要以４Ｃ细胞为主要群体，但已开始出现异倍体（ＡＮ）干系的增殖；进入演进期后又出现ＡＮ干系的选择和优势性生长。研究表明在整个诱导癌变过程中大肠上皮细胞群体的ＤＮＡ干系主要呈现２Ｃ→４Ｃ→ＡＮ的选择过程，早期大肠癌以细胞ＤＮＡ含量４Ｃ为重要特征，而演进期大肠癌以ＤＮＡ含量ＡＮ为主要标志，为大肠癌发生的多阶段理论提供了实验依据。

大鼠原位膀胱癌模型的建立及CT鉴定方法

目的研究N-甲基亚硝基脲(N-methyl-nitrosourea,MNU)诱导大鼠原位膀胱癌模型的建立及CT鉴定方法。方法 50只SD大鼠随机分为两组,对照组(A组)15只,实验组(B组)35只。A组大鼠经尿道膀胱内灌注生理盐水,每两周一次,每次0.1ml,共4次。B组大鼠用MNU以同样的方法灌注,每次0.2mg。于第14周末对两组大鼠进行膀胱CT扫描诊断,并且处死后取膀胱组织行病理学观察。结果A组13只大鼠经CT扫描未发现膀胱肿瘤,病理检查未见肿瘤组织。B组28只大鼠CT扫描膀胱均见明显异常,表现为膀胱壁局部肿块突起或不规则增厚、密度不均,病理诊断均为膀胱癌。结论MNU诱导大鼠原位膀胱癌模型是一种较为简单、可靠的建模方法。活体大鼠膀胱CT扫描与病理学结果有高度一致性,可作为该模型的活体鉴定方法。

N-甲基亚硝基脲诱导小鼠胸腺淋巴瘤TCR基因重排分析

目的探讨N-甲基亚硝基脲(MNU)诱导的小鼠胸腺淋巴瘤的单克隆起源。方法采用巢式PCR方法,对8例MNU诱导的胸腺淋巴瘤组织进行T细胞受体β链(TCRβ)和γ链(TCRγ)克隆性基因重排分析,并对TCRγ基因重排的PCR产物直接测序。结果 8例胸腺淋巴瘤检测TCRβ和TCRγ均呈克隆性基因重排。DNA序列测定证实TCRγ基因PCR扩增产物为基因重排产物。结论巢式PCR TCR基因重排检测及DNA序列分析证实,MNU诱导的小鼠胸腺淋巴瘤是来源于T细胞的肿瘤。

SD大鼠膀胱肿瘤动物模型的制备及其HER-2检测

目的:建立N-甲基-N-亚硝基脲(N-methyl-N-nitrosourea,MUN)膀胱灌注诱发的SD大鼠膀胱肿瘤动物模型,检测其肿瘤HER-2表达情况.方法:50只SD大鼠随机分两组,对照组膀胱灌注生理盐水,实验组膀胱灌注MNU,3wk/次,共4次,MNU总量为10mg;于第1次灌注后第11周切开膀胱取标本,以光镜、免疫组化及RT-PCR为观察手段,对其诱发的膀胱肿瘤进行检测.结果:第11周对照组无肿瘤,实验组诱发膀胱肿瘤率95%,其组织学形态及病理特征与人膀胱肿瘤相似,免疫组化显示部分肿瘤HER-2蛋白阳性表达,RT-PCR显示其HER-2mRNA阳性.结论:MNU膀胱灌注可成功建立HER-2阳性表达的膀胱肿瘤动物模型.