HPLC-MS^2鉴定大青叶水提液中的5种化学成分

目的:鉴定大青叶水提液中的化学成分。方法:大青叶的水提液经HPLC分离后,收集各色谱峰的馏分进行二级质谱分析,并和胞苷、尿苷、鸟苷、黄嘌呤和次黄嘌呤对照品的水溶液进行比较。结果:大青叶水提液HPLC中的5个色谱峰分别与胞苷、尿苷、鸟苷、黄嘌呤和次黄嘌呤对照品的t_R和UV光谱一致,并具有相同的二级质谱碎片离子。结论:大青叶中含有胞苷、次黄嘌呤、尿苷、黄嘌呤和鸟苷等5种成分。

HPLC-MS^2法分析朝鲜淫羊藿中的化学成分

目的 研究朝鲜淫羊藿中的化学成分。方法 采用 Merck L i Chro CAR分析柱 ,乙腈 -水 -冰醋酸梯度洗脱 ,流速 :1m L/ min,检测波长 :2 70 nm,质谱记录总离子流图 (TIC)。结果 从朝鲜淫羊藿中鉴定出 9个化合物。结论HPL C- MS2 能快速、准确的鉴定出天然产物中的化学成分。

HPLC/MS^2法检测某些降糖中药制剂中的双胍类及磺酰脲类化学药

目的:建立液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用法测定纯中药降糖药中非法掺入的双胍类及磺酰脲类化学药,包括二甲双胍、苯乙双胍、格列吡嗪、格列本脲、格列美脲、格列喹酮、格列齐特。方法:选用Agilent C_(18)(4.6 mm×150 mm,5μm),以0.02 mol·L^(-1)醋酸铵溶液(醋酸调节pH至3.5)-甲醇-乙腈为流动相,梯度洗脱。根据所检测到化合物的色谱保留时间及一级、二级质谱信息,并与对照品比较,鉴别中药制剂中非法掺人的双胍类、酰脲类化学药。结果:通过相对分子质量、二级质谱碎片信息和液相色谱保留时间三方面信息,与对照品比较,证明样品A中非法掺有苯乙双胍、格列本脲,样品B中掺有二甲双胍、格列本脲。结论:该方法选择性强,灵敏度高,可作为分析检测非法中药制剂的有效手段。

基于MS(2)-AR-TVTP模型的I_(BD)波动周期非对称性和持续性分析

国际干散货运输市场源于国际贸易的衍生需求,受世界经济的影响,是一个典型的周期性市场。选取1999年11月~2021年12月的波罗的海干散货运价指数(I_(BD))月度数据,在检验序列平稳性的基础上,确定最优滞后长度,构建两区制的时变转换概率马尔科夫转换自回归模型,分析I_(BD)波动周期的持续时间、转换拐点和非对称性等主要特征。研究结果表明:模型能有效拟合I_(BD)波动周期的主要特征,周期平均持续时间为33.7个月,自2008年9月之后呈缩短态势,上升期和下降期交互更频繁;I_(BD)波动周期具有非对称性,周期内上升期持续时间比下降期长,I_(BD)维持上升期更具有稳定性。周期性特征结果可为干散货航运业造船投资和市场经营提供决策依据。

基于超高效液相色谱-串联质谱同时测定婴幼儿配方乳粉中2′-岩藻糖基乳糖和乳糖-N-新四糖

建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)同时测定婴幼儿配方乳粉中2′-岩藻糖基乳糖(2′-fucosyllactose,2′-FL)和乳糖-N-新四糖(lacto-N-neotetraose,LNnT)。样品经水提取,沉淀法除蛋白、针式水系滤膜净化,以乙腈和10 mmol/L甲酸铵水溶液(含0.1%甲酸,体积分数)为流动相,采用酰胺柱进行梯度洗脱,采用选择反应检测扫描模式(selective reaction monitoring,SRM)测定,外标法定量,稀释法评估溶剂效应、提取后添加法评估基质效应。结果表明,正离子模式下2′-FL和LNnT分别采用加合离子峰[M+NH^(+)_(4)]和[M+H^(+)]较好,梯度条件、流速优化后使得2′-FL和LNnT均能在8 min内完成洗脱,溶剂效应考察发现2′-FL和LNnT存在严重的溶剂效应,但在消除试验中发现在稀释20倍的情形下,50%乙腈甲酸铵水溶液作为净化样液的稀释溶剂可消除影响,线性范围考察发现2′-FL和LNnT线性范围分别为5.0~150.0 ng/mL和2.5~75.0 ng/mL,基质效应考察发现2′-FL和LNnT均不存在基质效应。方法验证表明,2′-FL和LNnT各项精密度正确度参数均满足国标要求,该方法适用于婴幼儿配方乳粉中2′-FL和LNnT的同时测定。

超临界CO_(2)萃取杉木屑精油工艺研究及其成分分析

采用正交实验确定超临界CO_(2)萃取杉木屑精油最佳工艺条件,用气相色谱−质谱联用法分析其化学组成。结果表明,杉木屑精油萃取最佳条件为:萃取温度40℃、萃取压力30 MPa、萃取时间2 h、杉木用量100 g、粒度40目~60目,此条件下,精油得率2.55%。气相色谱−质谱法共检测出100个峰,鉴定出67种化合物,占该精油总量的69.29%,其中柏木醇(46.16%)、泪杉醇(4.53%)、乙酸柏木酯(2.86%)、α-松油醇(2.17%)、α-毕橙茄醇(1.83%)、α-柏木烯(1.36%)等含量比较高。

气相色谱—串联质谱法测定阿哌沙班中2-氯乙酰乙酸乙酯的残留量

目的:建立一种气相色谱—串联质谱(GC-MS/MS)方法,用于测定阿哌沙班中潜在基因毒性杂质2-氯乙酰乙酸乙酯的残留量。方法:用聚乙二醇[VF-WAXms(30 mm×0.25 mm×0.25μm)]为固定液的毛细管色谱柱;进样口温度为230℃;流速1.0 mL/min;载气:氦气;不分流进样。采用电子轰击离子源(EI),选择离子监测模式(SIM)。结果:2-氯乙酰乙酸乙酯在0.05~1.02μg/mL质量浓度范围内呈现良好的线性关系(r=0.9985);定量限浓度是0.02μg/mL;检出限是0.01μg/mL;三份不同浓度水平的平均回收率为97.9%(RSD=4.2%)。结论:所建立的GC-MS/MS测定方法灵敏度高、专属性强和准确度好,可用于阿哌沙班中2-氯乙酰乙酸乙酯的测定。

通过量效关系评价CO_(2)超临界提取肉豆蔻挥发油质量

目的:气相色谱-三重四极杆质谱(GC-MS/MS)法定量分析16批次肉豆蔻挥发油中4-萜烯醇、α-蒎烯、甲基丁香酚、榄香素、黄樟素和肉豆蔻醚,结合抗炎活性量效分析,对肉豆蔻的药效成分进行质量评价。方法:采用CO_(2)超临界萃取法提取肉豆蔻挥发油,建立GC-MS/MS法分析肉豆蔻中6个成分的检测方法,进行方法学考察并对16批次挥发油样品中6个成分进行含量测定。气相色谱条件:J&W DB-17ms气相色谱柱(30 m×0.25 mm,0.25μm);升温程序:50℃,保持1 min,以10℃·min^(-1)的速率升高到150℃,保持3 min;再以20℃·min^(-1)的速率升高到250℃,保持3 min。进样口温度280℃;载气为氮气,流速为1 mL·min^(-1),分流比为10∶1,进样量为1μL;建立16批次挥发油处理脂多糖(LPS)诱导的Raw264.7巨噬细胞炎症模型,并进行药效分析;对挥发油中6个成分进行主成分分析(PCA-X)、Pearson相关性分析及药效分析,并将变量重要性投影(VIP)值>1及Pearson系数为正的化合物作为贡献性成分。结果:4-萜烯醇、α-蒎烯、甲基丁香酚、榄香素、黄樟素、肉豆蔻醚在相应的浓度范围内呈现良好的线性关系;6个成分精密度试验的RSD在0.18%~0.90%,重复性试验的RSD在1.53%~2.90%,稳定性试验的RSD在2.11%~2.94%;平均加样回收率(n=9)分别为98.32%、99.41%、94.79%、98.82%、96.14%、97.81%,RSD分别为1.51%、1.62%、1.87%、0.71%、1.82%、1.31%。16批次挥发油样品中4-萜烯醇、α-蒎烯、甲基丁香酚、榄香素、黄樟素、肉豆蔻醚的含量范围分别为4.674~12.432、2.316~11.121、0.201~4.653、1.047~10.488、201.776~402.163、7.888~39.570 mg·g-1。量效关系分析显示,抗炎活性与6个成分含量具有一定的相关性,甲基丁香酚、榄香素、肉豆蔻醚对抗炎活性有贡献,其中榄香素贡献最大。结论:建立了肉豆蔻16批次挥发油中6个成分的抗炎活性量效关系分析方法,本法简便快速,为肉豆蔻的质量控制及安全、有效的应用提供依据。

塑胶中邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯萃取剂及萃取时间的研究

本文通过研究甲苯、正己烷萃取在不同浓度的DEHP提取效率、回收率,针对塑胶制品确定了相对有效的萃取溶剂,同时通过改变超声温度挑选出最有效的超声温度,并用实际样品进行了相关实验验证。结果表明:甲苯萃取剂萃取效率更高(92.4%),超声萃取温度与30℃时效率最高,标液线性良好(R^(2)=0.999 8),回收率在(92.3~95.2)%。

水性环氧乳液的制备与MS-2型微表处性能

以环氧树脂E51和聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)为原料,通过相反转法制备水性环氧乳液,通过探究PEG相对分子质量和乳化剂用量对乳液的黏度、粒径以及稳定性的影响,筛选出综合性能最佳的水性环氧乳液,并分析该乳液固化后水性环氧树脂(waterborne epoxy resin,WER)的热稳定性、微观结构。使用荧光显微镜探究水性环氧树脂与乳化沥青的相容性,并得出最佳的水性环氧树脂质量掺量。在此基础上制备MS-2型水性环氧树脂改性乳化沥青微表处,考察不同水性环氧树脂改性乳化沥青制备方法、不同固化剂种类对微表处混合料施工性能和路用性能的影响,并分析自制乳液和市售乳液的性价比及对应微表处性能的性价比。结果表明,当PEG相对分子质量为6 000、乳化剂质量掺量为20%时得到的水性环氧乳液综合性能最佳,对应的水性环氧树脂具备优异的热稳定性和良好的微观结构。水性环氧树脂质量掺量为6%时得到的水性环氧树脂改性乳化沥青相容性最好。最佳的水性环氧树脂改性乳化沥青制备方法是水性环氧乳液与乳化沥青混合后再加入水性环氧固化剂;相较于基础胺类固化剂,水性环氧固化剂制备的微表处具有更加优异的综合性能。自制水性环氧乳液性价比高于市售乳液,具备较好的应用价值。

LC-IT-TOF-MS^n快速鉴别沉香中2-(2-苯乙基)色酮类成分

目的:基于LC-MS技术对沉香中2-(2-苯乙基)色酮类成分进行快速鉴别与分析。方法:通过LC-IT-TOF-MS^n对31个对照品进行多级质谱采集,确定2-(2-苯乙基)色酮类成分的裂解规律,利用其裂解规律对沉香中的色酮类成分进行分析。结果:在沉香药材中发现了4个三元氧环四氢色酮,18个四羟基四氢色酮,4个氯代四氢色酮和51个简单2-(2-苯乙基)色酮。结论:本研究采用的方法快速高效,可为沉香中2-(2-苯乙基)色酮类成分的分析和鉴定提供基础。

老年2型糖尿病患者血尿酸浓度与代谢综合征的相关性分析

目的探讨老年2型糖尿病患者血清尿酸与代谢综合征的关系。方法回顾分析首都医科大学附属北京同仁医院内分泌科2018年1月至2020年12月住院的612例老年2型糖尿病患者,其中合并代谢综合征(metabolic syndrome,MS)组439例,不合并MS(non-metabolic syndrome,NMS)组173例。比较两组基本临床资料及血清尿酸浓度;比较不同代谢综合征组分的尿酸浓度;使用Person相关法分析血尿酸与MS各组分因子之间的关系;使用Logistic回归模型,进行血尿酸与MS关系的多因素分析;使用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线观察血尿酸预测MS的作用,并筛选截断值。结果MS组血清尿酸浓度显著高于NMS组(P<0.05),随着MS组分数目增加,尿酸浓度升高;Person相关分析结果显示,尿酸与高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)相关(r=-0.233,P=0.000);多因素Logistic回归分析结果显示,尿酸(uric acid,UA)是MS的独立危险因素(OR=1.005,P<0.05)。ROC曲线分析得出,男性血尿酸预测MS截断值为336.50,女性血尿酸预测MS的截断值为317.00。结论老年2型糖尿病患者血清尿酸浓度与代谢综合征相关,老年2型糖尿病患者血清尿酸浓度升高,发生代谢综合征的危险性增大。

吹扫捕集-GC-MS/MS法测定饮用水中2-甲基异莰醇和土臭素

目的利用吹扫捕集—气相色谱串联质谱(GC-MS/MS)法测定生活饮用水中2-甲基异莰醇和土臭素的分析方法。方法取5 mL水样,以高纯氮气会载气在40 mL/min流速下吹扫11 min后,热解吸进入GC-MS/MS进行分析,以2-异丁基-3-甲氧基吡嗪为内标进行定量。结果在优化的实验条件下,2-甲基异莰醇和土臭素在5.0~100 ng/L浓度范围内线性较好,相关线性系数(R^(2))分别为0.9996和0.9998,方法检出限分别为0.13 ng/L和0.06 ng/L,水样加标回收率在92.3%~104.5%之间,相对标准偏差(RSD)为1.89%~4.07%。结论该方法简便、快速、准确、灵敏度高,可用于测定饮用水中2-甲基异莰醇和土臭素。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS的沉香2-(2-苯乙基)色酮聚合物成分分析

为了明确沉香(Aquilaria spp.)药材中2-(2-苯乙基)色酮聚合物(PPECs)组分及其结构,本研究采用超高效液相色谱-串联四级杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)采集沉香样品一级与二级质谱图,对PPECs的质谱裂解途径进行分析,对沉香药材中PPECs组分进行筛查与结构确证。共鉴定出PPECs组分55个,根据结构特征,55个组分分属于3种结构类型,即2-(2-苯乙基)色酮二聚物(DPECs)、2-(2-苯乙基)色酮三聚物(TPECs)和萜类-2-(2-苯乙基)色酮二聚物(SPECs)。鉴定的全部组分包括44个DPECs、3个TPECs和8个SPECs,其中9个DPECs、1个TPECs和1个SPECs首次在沉香中被发现;其次,沉香PPECs的部分组分具有2~4个同分异构体。综上,沉香药材中PPECs组分及其同分异构体丰富,且DPECs类型的组分在总PPECs中所占比例最高(80%)。该研究结果可为沉香药效物质基础研究及开发利用提供参考。

粗毛纤孔菌三萜成分分析及其对HepG 2细胞模型的脂质调节作用

为探索粗毛纤孔菌中的总三萜活性成分及其体外降脂能力,采用超高液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UPLC-TOF-MS/MS)对粗毛纤孔菌中的总三萜进行定性分析,并通过油酸诱导建立HepG_(2)细胞高脂模型,以HepG_(2)细胞高脂模型的存活率、脂质积累量和血脂四项为指标,考察粗毛纤孔菌纯化后总三萜的体外降脂能力。根据UPLC-TOF-MS/MS得到的洗脱顺序、保留时间、分子量、质谱信息,结合文献,共鉴定出粗毛纤孔菌中三萜成分8种。体外实验表明,400μmol/L油酸孵育HepG_(2)细胞24 h时,HepG_(2)细胞内的脂质积累量最高。相较于其他浓度组,总三萜质量浓度为250μg/mL时,高脂HepG_(2)细胞内的脂质含量下降最为显著,总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇的清除率分别达到41.86%、44.44%、44.02%,高密度脂蛋白胆固醇的增长率达到57.33%。研究结果证实了粗毛纤孔菌三萜的体外降脂功能,为开发新型降血脂功能食品提供了实验依据。

气相色谱-质谱法测定土壤中2-氯苯酚含量

土壤样品以二氯甲烷:正己烷组成的混合液进行萃取,萃取液经除水、浓缩后,采用弗罗里硅土柱净化,利用二氯甲烷和正己烷混合液洗脱净化柱。洗脱液经氮吹浓缩后,加入一定量的内标溶液后定容。采用气相色谱-质谱仪测定浓缩液中2-氯苯酚的含量,利用DB-5MS色谱柱分离,选择离子扫描模式定量。采用内标法制作标准系列,2-氯苯酚的线性范围在6.00μg/mL范围内,方法检出限为0.25μg/kg。以空白石英砂和实际土壤样品为基体进行了加标回收试验,所得回收率为63.7%~80.3%,测定值的相对标准偏差(n=6)为2.8%~13.3%。

基于UPLC-Q-TOF-MS^(E)与网络药理学研究黄地安消胶囊干预2型糖尿病的主要物质基础和作用机制

目的运用UPLC-Q-TOF-MS^(E)结合网络药理学方法探索黄地安消胶囊治疗2型糖尿病(T2DM)的主要物质基础和作用机制。方法采用UPLC-Q-TOF-MS^(E)对2型糖尿病模型大鼠灌胃黄地安消胶囊后的血清样品进行检测,确定药物的入血成分,并通过Swiss Target Prediction数据库检索作用靶点,在GeneCards数据库和DrugBank数据库中检索T2DM相关作用靶点。所得成分疾病交集靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析并进行可视化分析。结果黄地安消胶囊28个入血原型成分作用于495个靶点,与782个T2DM相关靶点交集获得黄地安消胶囊治疗T2DM的潜在作用靶点基因141个;PPI进一步筛选出关键靶点VEGFA、AKT1、SRC、EGFR等。GO富集分析中生物学过程条目5050个,细胞组分条目431个,分子功能条目802个;KEGG富集分析获得与关键靶点相关通路19条。RT-q PCR和Westernblot实验结果表明,黄地安消胶囊含药血清可调控HUVECs中VEGFA、AKT1、SRC、EGFR的表达。结论黄地安消胶囊28个入血成分中木兰花碱、高良姜素、槲皮素等可能通过作用于VEGFA、AKT1、SRC、EGFR调控AGE-RAGE糖尿病并发症和AMPK等信号通路,从而发挥治疗作用。

基于网络药理学探讨黄芩提取物防治猪链球菌2型感染的作用机制

【目的】探索黄芩提取物防治猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)感染的潜在作用机制。【方法】利用GEO数据库收集SS2感染不同细胞的转录组数据,通过GEO2R在线软件筛选差异表达基因,并利用STRING数据库与Cytoscape v3.8.2软件构建蛋白互作(PPI)网络并进行拓扑分析,通过GO功能和KEGG通路富集分析筛选SS2感染机体后核心蛋白、生物功能和信号转导途径变化。采用液相色谱质谱联用(LC-MS)分析并鉴定黄芩提取物的组成成分,利用Swiss ADME和SwissTargetPredication数据库筛选黄芩提取物的活性成分并预测其作用靶点;运用网络药理学方法将疾病靶点与黄芩提取物有效成分作用靶点相结合,进一步明确黄芩提取物抗SS2感染机制。通过分子对接和实时荧光定量PCR方法验证网络药理学预测结果的可行性。【结果】GEO数据库的2组基因芯片共鉴定出1308个SS2感染差异表达基因,PPI分析筛选出核心基因70个,GO功能富集分析显示显著富集条目主要涉及细胞因子介导的信号通路和对细胞因子刺激的反应等,KEGG通路富集分析涉及TNF、PI3K-Akt、JAK-STAT等信号转导途径。黄芩提取物共包括31个有效成分,包括汉黄芩素和黄芩苷等,其可能影响VEGFA、TNF和PPARG等核心靶点,涉及炎症反应、细胞凋亡和促进血管新生等多个生物功能和信号通路。分子对接结果显示,黄芩提取物中汉黄芩素和黄芩苷与TNF、PPARG和VEGFA有较好的结合能。实时荧光定量PCR结果显示,SS2感染后猪肺泡巨噬细胞(PAMs)细胞中CA9、PPARG、JUN、SCD、JAK3和VEGFA基因mRNA水平均显著上调(P<0.05),黄芩提取物干预后,上述基因mRNA表达水平均显著下降(P<0.05)。【结论】SS2感染机体后涉及细胞因子介导的生物过程、TNF等信号通路发生变化,黄芩提取物有效成分可能通过AMPK、PI3K-Akt、GFR、TNF等信号通路共同参与机体凋亡调控、炎症反应、血管生成等生物过程从而抗SS2感染。

滇红玫瑰精油超临界CO_(2)萃取工艺、挥发性成分及抗氧化活性研究

目的:综合利用云产滇红玫瑰花资源,提高产品附加值。方法:以玫瑰花精油得率为判别指标,通过单因素试验和响应面试验优化超临界CO_(2)萃取玫瑰花精油的提取工艺;通过气相色谱—质谱技术分析不同精油的成分及相对含量,并评价不同玫瑰精油的抗氧化活性。结果:超临界CO_(2)萃取玫瑰花精油的最佳工艺参数为:玫瑰花粉末颗粒40目,萃取压力25.5 MPa、萃取温度45.5℃、萃取时间123 min,CO_(2)流量20 L/h,该工艺条件下玫瑰花精油得率为1.185%;不同产地滇红玫瑰精油中共鉴定出74种挥发性成分,安宁产的滇红玫瑰花精油挥发性物质总量最高;不同产地滇红玫瑰花精油均具有较好的自由基清除能力,但不同产地的抗氧化能力存在明显差异。结论:超临界CO_(2)萃取的滇红玫瑰花精油品质较好,可作为一种天然抗氧化剂应用。

GC-MS法测定甲醇中邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯的不确定度评定

根据对GC-MS法测定甲醇中邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯实验流程的分析,确定测定过程中的不确定来源,主要有标准曲线配置、曲线拟合、仪器测量重复性引入的不确定度分量,最后合成GC-MS法测定甲醇中邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯的标准不确定度,并计算出扩展不确定度。通过对不确定度各个分量的分析与计算,得出标准曲线配制过程中所引入的不确定度影响程度最大,在实际样品的分析测试过程中,我们应严格控制实验室温度,配置标准曲线时选择合适体积的微量注射器,注意曲线配置各个环节,并确保仪器设备性能稳定,以减少分析过程引入的误差。