MT2受体介导褪黑素对小鼠前胃癌细胞的抑制作用

目的探讨褪黑素(MLT)通过褪黑素膜受体MT2抑制小鼠前胃癌(MFC)细胞增殖及其与丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)-Akt信号通路的关系。方法应用siRNA技术沉默MT2表达,观察褪黑素对小鼠前胃癌细胞的抑制作用及ERK1/2、Akt的磷酸化的影响。结果 1.siRNA介导的MT2沉默能明显拮抗褪黑素对胃癌细胞增殖的抑制作用;2.沉默MT2可部分阻断褪黑素抑制ERK1/2、Akt磷酸化的作用。结论褪黑素可通过MT2受体抑制ERK1/2、Akt的磷酸化从而抑制胃癌细胞增殖。

褪黑素MT2受体激动剂IIK-7对骨癌大鼠产生镇痛作用

目的:研究褪黑素MT2受体激动剂IIK-7对骨癌疼痛(bone cancer pain,BCP)大鼠机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)的影响。方法:将30只180~220 g清洁级雌性SD大鼠随机分为5组(n=6):空白对照组(CONT组)、假手术组(Sham组)、骨癌痛组(BCP组)、IIK-7组及DMSO组。CONT组不做任何处理;Sham组大鼠左后肢胫骨骨髓腔内注射10μL PBS液,鞘内置管,术后第3天开始鞘内连续输注DMSO(1μL/h,10 h);BCP组大鼠左后肢胫骨骨髓腔内注射10μL Walker256大鼠乳腺癌细胞PBS混悬液,连续输注DMSO(1μL/h,10 h);IIK-7组大鼠左后肢胫骨骨髓腔内注射10μL Walker256大鼠乳腺癌细胞PBS混悬液,术后第3天开始鞘内连续输注IIK-7(1μL/h,0.5μg/μL,10 h);DMSO组大鼠左侧后肢胫骨骨髓腔内注射10μL Walker256大鼠乳腺癌细胞PBS混悬液,术后第3天开始鞘内连续输注DMSO(1μL/h,10 h)。用Von Frey纤毛测痛仪测定术前及术后第7、14、21天各组大鼠左后肢MWT;X线拍摄检测大鼠左后肢骨癌模型建立情况。结果:影像学结果显示,骨癌痛大鼠(BCP组)术侧胫骨骨皮质不连续,骨小梁缺失,周围组织明显肿胀。术前,各组大鼠术侧后肢MWT比较,差异均无统计学意义(P>0.05);术后第7、14、21天,CONT组与Sham组术侧后肢MWT较术前均无明显变化(P>0.05),但BCP组大鼠术侧后肢MWT均较CONT组明显降低(P<0.05);术后第7天,IIK-7组大鼠术侧后肢MWT与BCP组比较,差异无统计学意义(P>0.05),术后第14、21天,IIK-7组大鼠术侧后肢MWT较BCP组均明显升高(P<0.05)。结论:褪黑素MT2受体激动剂IIK-7可以提高骨癌痛大鼠MWT,缓解骨癌大鼠的疼痛。

治疗失眠症新药雷美替胺

雷美替胺(ramelteon)通过选择性激动褪黑激素MT1和MT2受体,用于治疗难以入睡型失眠症。研究表明:其能有效地缩短入睡时间,提高总睡眠时间和入睡效率,且使用安全,无严重药物不良反应,长期用药不会产生滥用或药物依赖性。现对该药的药理学、药效学及临床应用等进行综述。

MTNR1B基因rs4753426位点单核苷酸多态性与妊娠期糖尿病的关系

目的研究褪黑素受体1B(MTNR1B)基因启动子区主要的功能性位点rs4753426单核苷酸多态性(SNP),在中国汉族妊娠期糖尿病(GDM)孕妇与健康孕妇之间基因型及等位基因频率分布差异,以及与妊娠期糖尿病发病相关性。方法 2011年6月—2012年7月,选择我院门诊和住院的GDM孕妇93例为GDM组,同期健康体检孕妇165例为对照组。记录两组孕妇年龄、孕周、身高、早孕期体质量,并计算体质量指数(BMI),测定两组孕妇空腹胰岛素(FIN)水平、OGTT血糖水平;采用改良Miller法抽提受检者全血DNA,以聚合酶链反应及基因测序方法计算MTNR1B-rs4753426位点基因型和等位基因频率;比较两组孕妇基因型频率、等位基因频率、空腹血糖(FPG)水平、FIN水平、BMI以及稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)的差异。结果 GDM组孕妇FPG、FIN水平及HOMA-IR高于对照组,差异有显著性(t=2.518～6.074,P<0.05);HOMA-β则较对照组显著降低,差异有显著性(t=18.391,P<0.05)。两组间MTNR1B-rs4753426基因型频率与等位基因频率比较,差异均有显著性(χ2=9.342、5.285,P<0.05)。结论 MTNR1B-rs4753426位点SNP可能与GDM发病相关,C等位基因可能是GDM的易感基因。

LC-MS导向分离灯心草中激动5-HT_(1A)和MT_2受体的活性成分

本文对灯心草Juncus effusus的活性部位进行研究,在LC-MS导向下,利用多种色谱技术(硅胶、氧化铝、Sephadex LH-20和HPLC)从中分离得到9个化合物,根据波谱学数据鉴定其化学结构为厄弗酚(1)、去氢厄弗酚(2)、灯心草酚(3)、juncuenin G(4)、dehydrojuncuenin D(5)、5-(hydroxymethyl)-1-methylphenanthrene-2,7-diol(6)、齐墩果酸(7)、5-羟甲基-2-呋喃糠醛(8)、麦芽酚-3-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(9)。化合物8、9为首次从灯心草属植物中分离得到并且化合物9为首次从天然来源获到。在1.0 m M浓度下,化合物1、3、4对5-HT1A受体的激动率分别为65.35±6.70%、71.33±7.39%和64.11±5.33%;对MT2受体的激动率分别为62.77±12.06%、67.28±9.26%和56.21±11.43%。该研究首次利用LC-MS与活性追踪相结合的方法,快速分离灯心草中激动5-HT1A和MT2受体的活性成分,为其进一步开发与利用奠定了基础。

褪黑激素受体1B基因rs4753426位点单核苷酸多态性与妊娠期糖尿病的相关性

目的：研究褪黑激素受体1B （MTNR1B）基因rs4753426位点单核苷酸多态性（SNP）在妊娠期糖尿病（ GDM）孕妇与健康孕妇之间基因型及等位基因频率的差异，以及与GDM发病的相关性。方法选择2011年7月至2012年7月青岛大学附属医院GDM孕妇93例（ GDM组），同期选取健康孕妇165例为对照组。记录两组孕妇的年龄、孕周、身高、早孕期体质量，并计算体质指数（BMI），检测两组孕妇空腹胰岛素（ FIN）、空腹血糖（ FPG）水平；以 PCR 及 DNA 测序技术检测MTNR1B基因rs4753426位点SNP基因型频率和等位基因频率；比较分析两组孕妇基因型频率、等位基因频率、FPG、FIN、BMI 及稳态模型评估的胰岛素抵抗指数（ HOMA-IR ）、胰岛β细胞功能指数（HOMA-β）的差异。结果（1）GDM组孕妇CC、CT和TT基因型频率分别为72.0％（67／93）、21.5％（20／93）和6.5％（6／93），T、C等位基因频率分别为17.2％（32／186）、82.8％（154／186）；对照组CC、CT和TT基因型频率分别为53.9％（89／165）、40.0％（66／165）和6.1％（10／165），T、C等位基因频率分别为26.1％（86／330）、73.9％（244／330）；GDM组与对照组间MTNR1B基因rs4753426基因型频率及等位基因频率分别比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（2）GDM组孕妇的FPG、FIN、HOMA-IR水平高于对照组，差异均有统计学意义（ P＜0.05）；HOMA-β则较对照组降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。（3）GDM组内CC及CT基因型孕妇FPG水平高于TT基因型孕妇，HOMA-β则低于TT基因型者，分别比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 MTNR1B基因rs4753426位点SNP与GDM的发病相关，该位点可能是GDM发病的易感位点，C等位基因是GDM的易感基因。

增生性瘢痕组织中褪黑素受体的表达

目的 检测人增生性瘢痕组织和正常皮肤中褪黑素受体含量的差异,探讨其意义.方法 人增生性瘢痕组织和正常皮肤各10例,免疫组化检测组织中褪黑素受体GPR50的表达,荧光定量PCR（SYBR Green）检测组织中褪黑素受体MT1、MT2 mRNA含量,并将PCR阳性产物基因测序.结果 免疫组化显示褪黑素受体GPR50表达于细胞膜和细胞质,正常皮肤表皮基底层细胞、毛囊和汗腺均有褪黑素受体阳性表达,增生性瘢痕组织表皮、残留的毛囊和汗腺内也存在褪黑素受体表达;同时发现增生性瘢痕真皮成纤维细胞有广泛褪黑素受体阳性表达,而正常皮肤组织中则少见表达.荧光定量PCR显示增生性瘢痕组织中MT1、MT2 mRNA含量分别为（1.16584 4±0.21829）和（0.99550 ±0.14624）拷贝数/μl cDNA,正常皮肤中为（0.99081±0.26485）和（0.77083±0.15927）拷贝数/μl cDNA,增生性瘢痕组织中MT1、MT2 mRNA含量均高于正常皮肤（P〈O.05）,同时MT1 mRNA含量在两种组织中均高于MT2 mRNA（P〈0.05）;基因测序显示扩增产物与GeneBank中人MT1、MT2受体基因序列相吻合.结论 褪黑素受体在增生性瘢痕组织和正常皮肤中均有表达,而且在增生性瘢痕组织中高于正常皮肤,褪黑素受体在增生性瘢痕形成过程中可能发挥着重要作用.

褪黑素受体1B基因rs10830963位点多态性与妊娠期糖尿病遗传易感性的关系

目的探讨褪黑素受体1B（melatonin receptor1B，MTNR1B）基因rs10830963位点单核苷酸多态性与妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus，GDM）遗传易感性的关系。方法选择来自浙江省衢州市妇幼保健院的GDM孕妇87例（GDM组）和同期正常妊娠妇女91例（对照组），应用PCR扩增和DNA测序技术确定所有研究对象MTNR1B基因rs10830963位点等位基因和基因型频率分布，并比较2组之间rs10830963位点等位基因和基因型频率的差异。此外，利用Logistic回归分析判断风险等位基因与空腹血糖和糖化血红蛋白（glycosylated hemoglobinA1c，HbAlc）的关系。结果GDM组rsl0830963位点G等位基因频率和GG基因型频率均明显高于对照组，G等位基因携带者和GG基因型妇女发生GDM危险性分别是C等位基因和CC基因型的1．53倍（OR=1．53，95％CI：1．005～2．324，P=0．047）和2．16倍（OR=2．16，95％CI：1．052～4．434，P=0．034）。利用Logistic回归校正年龄、孕前体重指数（body mass index，BMI）和糖尿病家族史等因素之后，GG基因型妇女发生GDM的危险性仍然显著增加（OR=2．07，95％CI：1．048～4．372，P=0．022）。多元线性回归分析显示风险等位基因G与空腹血糖（0．068mmol／L，P=0．015）水平及HbAlc（0．073％，P=0．028）水平呈显著正相关。结论MTNR1B基因rs10830963位点单核苷酸多态性和GDM遗传易感性有关。rs10830963位点G等位基因为GDM发生的遗传风险因子。