MTH1(mut T homolog1)是Mut T的同源酶,是一种核苷酸焦磷酸酶,主要参与DNA损伤修复过程,尤其在肿瘤细胞的DNA复制过程中发挥着重要角色。最新的研究表明,MTH1可以清除肿瘤细胞中受损DNA功能结构的氧化构件,使得肿瘤细胞继续分裂与增殖,...MTH1(mut T homolog1)是Mut T的同源酶,是一种核苷酸焦磷酸酶,主要参与DNA损伤修复过程,尤其在肿瘤细胞的DNA复制过程中发挥着重要角色。最新的研究表明,MTH1可以清除肿瘤细胞中受损DNA功能结构的氧化构件,使得肿瘤细胞继续分裂与增殖,从而维持肿瘤细胞的生存,而更为重要的是正常细胞不需要MTH1,因此,MTH1有可能只与异常的细胞生长密切相关,这使得MTH1作为治疗靶点成为人们关注的焦点。该文着重对MTH1与肿瘤关系最新的研究成果进行综述,探讨MTH1维持肿瘤生长的相关机制及其与肿瘤治疗的关系,为靶向MTH1治疗肿瘤提供新的思路,为肿瘤研究工作者提供重要参考。展开更多
目的建立敲减MTH1基因的HeLa细胞稳定细胞株,研究MTH1基因的低表达对HeLa细胞内RNA氧化程度的影响。方法设计并合成针对MTH1基因的3条siRNA,分别转染HeLa细胞,选择干扰效果最为理想的靶序列连接入反转录病毒载体Retro-Q,在293T细胞内包...目的建立敲减MTH1基因的HeLa细胞稳定细胞株,研究MTH1基因的低表达对HeLa细胞内RNA氧化程度的影响。方法设计并合成针对MTH1基因的3条siRNA,分别转染HeLa细胞,选择干扰效果最为理想的靶序列连接入反转录病毒载体Retro-Q,在293T细胞内包装病毒颗粒,将病毒转染HeLa细胞后使用嘌呤霉素筛选抗性克隆株,用western b lot技术检测克隆株的MTH1的表达量以确定干扰效果最理想的稳定细胞株,用API5000型质谱仪检测稳定细胞株RNA中的8-oxoG与G的含量以评价RNA的氧化程度。结果本研究设计的3条siRNA中有2条干扰效率可达90%以上,所建立的敲减MTH1基因HeLa细胞稳定细胞株的干扰效果达80%以上,质谱检测结果表明MTH1基因低表达的稳定细胞株每106个G中含有14.9个8-oxoG,而对照细胞中则仅含9.7个8-oxoG。结论 MTH1基因的低表达可引起HeLa细胞中RNA氧化程度明显升高。展开更多
目的探讨MutT同源蛋白1(MutT homolog protein 1,MTH1)的表达对结肠癌(colorectal cancer,CRC)进展和预后的影响。方法笔者首先使用免疫组织化学方法检测了87例结肠癌组织和配对的癌旁正常组织中MTH1蛋白的表达,应用χ^2检验分析MTH1蛋...目的探讨MutT同源蛋白1(MutT homolog protein 1,MTH1)的表达对结肠癌(colorectal cancer,CRC)进展和预后的影响。方法笔者首先使用免疫组织化学方法检测了87例结肠癌组织和配对的癌旁正常组织中MTH1蛋白的表达,应用χ^2检验分析MTH1蛋白表达量与结肠癌临床病理特征之间的相关性,应用COX比例回归风险模型分析MTH1蛋白表达对结肠癌根治术后患者的总体生存预后判断价值。笔者使用实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测了6株结肠癌细胞HCT116、SW480、SW620、LoVo、COLO320、T84及人胚胎肠黏膜细胞CCC-HIE-2中MTH1基因mRNA和蛋白的表达水平,应用独立t检验比较了肿瘤细胞和正常肠黏膜上皮细胞中MTH1基因mRNA和蛋白相对表达量的均值,并且应用Spearman等级相关系数检测MTH1基因mRNA和蛋白表达的相关性。笔者使用本实验室构建成功的siRNA干扰MTH1基因mRNA表达的HCT116和LoVo细胞株,利用CCK-8和Transwell实验检测MTH1蛋白低表达对结肠癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。结果在87例结肠癌组织中,MTH1蛋白高表达患者手术治疗后总的生存率显著低于MTH1低表达患者(P=0.005)。COX多因素分析表明MTH1蛋白高表达是结肠癌预后不良的独立预测因素(HR=2.256,95%CI:1.008~5.049,P=0.048)。结肠癌细胞株中MTH1基因mRNA和蛋白表达量显著高于正常的肠黏膜细胞,而且mRNA与蛋白的表达呈正相关。siMTH1干扰MTH1基因mRNA表达量的下降与HCT116和LoVo细胞增殖、迁移、侵袭能力的下降显著相关(P<0.05)。结论MTH1蛋白表达影响了结肠癌的进展和预后。展开更多
Since accelerated metabolism produces much higher levels of reactive oxygen species(ROS)in cancer cells compared to ROS levels found in normal cells,human MutT homolog 1(MTH1),which sanitizes oxidized nucleotide pools...Since accelerated metabolism produces much higher levels of reactive oxygen species(ROS)in cancer cells compared to ROS levels found in normal cells,human MutT homolog 1(MTH1),which sanitizes oxidized nucleotide pools,was recently demonstrated to be crucial for the survival of cancer cells,but not required for the proliferation of normal cells.Therefore,dozens of MTH1 inhibitors have been developed with the aim of suppressing cancer growth by accumulating oxidative damage in cancer cells.While several inhibitors were indeed confirmed to be effective,some inhibitors failed to kill cancer cells,complicating MTH1 as a viable target for cancer eradication.In this review,we summarize the current status of developing MTH1 inhibitors as drug candidates,classify the MTH1 inhibitors based on their structures,and offer our perspectives toward the therapeutic potential against cancer through the targeting of MTH1.展开更多
文摘MTH1(mut T homolog1)是Mut T的同源酶,是一种核苷酸焦磷酸酶,主要参与DNA损伤修复过程,尤其在肿瘤细胞的DNA复制过程中发挥着重要角色。最新的研究表明,MTH1可以清除肿瘤细胞中受损DNA功能结构的氧化构件,使得肿瘤细胞继续分裂与增殖,从而维持肿瘤细胞的生存,而更为重要的是正常细胞不需要MTH1,因此,MTH1有可能只与异常的细胞生长密切相关,这使得MTH1作为治疗靶点成为人们关注的焦点。该文着重对MTH1与肿瘤关系最新的研究成果进行综述,探讨MTH1维持肿瘤生长的相关机制及其与肿瘤治疗的关系,为靶向MTH1治疗肿瘤提供新的思路,为肿瘤研究工作者提供重要参考。
文摘目的建立敲减MTH1基因的HeLa细胞稳定细胞株,研究MTH1基因的低表达对HeLa细胞内RNA氧化程度的影响。方法设计并合成针对MTH1基因的3条siRNA,分别转染HeLa细胞,选择干扰效果最为理想的靶序列连接入反转录病毒载体Retro-Q,在293T细胞内包装病毒颗粒,将病毒转染HeLa细胞后使用嘌呤霉素筛选抗性克隆株,用western b lot技术检测克隆株的MTH1的表达量以确定干扰效果最理想的稳定细胞株,用API5000型质谱仪检测稳定细胞株RNA中的8-oxoG与G的含量以评价RNA的氧化程度。结果本研究设计的3条siRNA中有2条干扰效率可达90%以上,所建立的敲减MTH1基因HeLa细胞稳定细胞株的干扰效果达80%以上,质谱检测结果表明MTH1基因低表达的稳定细胞株每106个G中含有14.9个8-oxoG,而对照细胞中则仅含9.7个8-oxoG。结论 MTH1基因的低表达可引起HeLa细胞中RNA氧化程度明显升高。
基金funded by the grant from the National Natural Science Foundation of China(81903425,to Yizhen Yin)
文摘Since accelerated metabolism produces much higher levels of reactive oxygen species(ROS)in cancer cells compared to ROS levels found in normal cells,human MutT homolog 1(MTH1),which sanitizes oxidized nucleotide pools,was recently demonstrated to be crucial for the survival of cancer cells,but not required for the proliferation of normal cells.Therefore,dozens of MTH1 inhibitors have been developed with the aim of suppressing cancer growth by accumulating oxidative damage in cancer cells.While several inhibitors were indeed confirmed to be effective,some inhibitors failed to kill cancer cells,complicating MTH1 as a viable target for cancer eradication.In this review,we summarize the current status of developing MTH1 inhibitors as drug candidates,classify the MTH1 inhibitors based on their structures,and offer our perspectives toward the therapeutic potential against cancer through the targeting of MTH1.
