应用MTT比色法测定HSS体外生物学活性

为了寻求肝刺激物质研制中的跟踪测定方法，采用ＭＴＴ比色法测定其体外生物活性，经正交设计实验。筛选出ＭＴＴ比色法测定条件，即ＭＴＴ浓度５ｍｇ／ｍｌ，细胞接种数１×１０５个／ｍｌ，加入ＭＴＴ后培养６ｈ。ＭＴＴ比色法测定ＨＳＳ体外生物学活性，发现在一定ＨＳＳ蛋白剂量范围内，其活性随剂量增加而增大，超过一定剂量后活性降低。

不同溶剂和受试物颜色对MTT实验的影响

目的:探讨MTT实验中不同溶剂对细胞的生长抑制作用和受试物颜色对实验结果的影响。方法:用MTT比色方法比较不同溶剂(乙醇、脂肪乳、二甲基亚砜、乙酸乙酯、氯仿、吐温80)对卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制作用及受试物(黄芩素、茶多酚、阿霉素)颜色对MTT显色反应的影响。结果:10%以上浓度的乙醇、乙酸乙酯、5%二甲基亚砜、20%以上浓度的氯仿和所有浓度的吐温80对卵巢癌SKOV3细胞的生长均有不同程度的抑制作用,且随浓度的递增抑制作用进一步加强,而脂肪乳细胞毒性甚微,浓度高达50%仍不会对细胞产生明显的抑制作用。吐温80不宜作为MTT实验受试物的溶剂。药物黄芩素、茶多酚和阿霉素本身的颜色会增加MTT实验中的吸光值,导致结果出现假阴性。结论:不同浓度的溶剂和受试药物的颜色会干扰MTT的实验结果,在采用MTT法时必须设定溶剂和有颜色受试药物的对照组,否则将不能利用MTT的实验结果正确评价受试物对细胞的生长抑制作用。

MTT法在抗真菌药敏实验中的应用

目的:研究MTT法在抗真菌药敏实验中的应用。方法:采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐方案测定两性霉素B和伊曲康唑对5种常见真菌(白色念珠菌、光滑念珠菌、季也蒙念珠菌、申克孢子丝菌和石膏样小孢子癣菌)的最低抑菌浓度(MIC),终点判定分别采用NC CLS推荐的直接观察法和MTT法,对两法进行比较。结果:MTT法与常规直接观察法进行MIC终点判定所得结果具有很好的一致性。MTT法测得的A值与接种菌量具有正相关性。两性霉素B与伊曲康唑对丝状真菌和念珠菌都具有很好的抑制作用,MTT法测得的A值随药物浓度的增加而显著降低。结论:MTT法较之常规直接观察法结果更为客观、准确,且可量化,因而可以很好的替代肉眼观察法来判定真菌药敏试验的终点。

反复熔铸Ni-Cr烤瓷合金体外细胞毒性实验(MTT法)

目的:初步评价反复熔铸后Ni-Cr烤瓷合金的生物相容性。方法:根据ISO标准采用体外细胞毒性试验(MTT法)测试不同熔铸次数Ni-Cr烤瓷合金不同浓度的浸提液培养小鼠结缔组织成纤维细胞(L-929)的结果,从而对反复熔铸后Ni-Cr烤瓷合金的生物相容性进行初筛。结果:各浓度实验组细胞生长形态良好、细胞毒性级为0～1级;经过2～5次熔铸的Ni-Cr烤瓷合金不同浓度的浸提液、不同培养时间的A492均值与经过1次熔铸的Ni-Cr烤瓷合金相应A492均值无显著性差异(P>0.05)。结论:初步认为Ni-Cr烤瓷合金经过1～5次熔铸后具有较好的生物相容性。

奶牛乳房炎MTT检测方法的药敏试验研究

用MTT法对奶样中细菌进行药敏试验(氨苄青霉素、复方新诺明、头孢噻肟、头孢唑林钠、链霉素、红霉素、庆大霉素、阿米卡星和氟哌酸9种抗菌药),并与传统的纸片琼脂扩散法进行比较研究。结果表明,除了氟哌酸抑菌结果有差异,奶样中的细菌对链霉素、红霉素和复方新诺明耐药,对庆大霉素和阿米卡星中度敏感,对氨苄青霉素、头孢唑林钠、头孢噻肟敏感,两种试验方法的结果基本一致。说明MTT法可作为药敏试验的一种方法,直接用于检测乳房炎奶牛的细菌药敏试验。

MTT比色分析法检测卵巢癌药物敏感性

目的探讨四氮唑蓝比色分析法(MTT法)用于指导临床个体化化疗药物选择的实用性,为卵巢癌临床化疗用药提供参考。方法采用常用的12种化疗药物对65例卵巢癌进行MTT法药物敏感试验。结果不同类型的卵巢癌及同一类型的不同个体对化疗药物的敏感性差异较大。卵巢癌对紫杉醇、表阿霉素、卡铂和顺铂中度敏感,平均抑制率分别为(67.3±4.6)%、(54.5±4.8)%、(52.0±4.3)%和(50.8±4.5)%;对鬼臼乙叉甙、烃基喜树碱和长春地新低度敏感,平均抑制率分别为(39.6±3.8)%、(39.3±4.3)%和(30.7±2.6)%;而对丝裂霉素C、噻替哌、5氟尿嘧啶、长春新碱和氨甲喋呤则耐药,平均抑制率均小于30%。结论卵巢癌化疗敏感性个体差异较大。MTT法是一种简便而快速的肿瘤体外药物敏感实验方法,可为卵巢癌临床个体化化疗方案的选择提供客观依据。

体外抗癌药敏试验HTCA和MTT法对人肺癌细胞测定的对比性研究

目的：测定人肺癌细胞株ＳＫ－ＬＣ－６（大细胞癌）和ＳＫ－ＬＣＤ－７（腺癌）药物ＣＢＤＣＡ、５－Ｆｕ及蒽环类的反应曲线。方法：本研究用体外抗癌药敏试验ＨＴＣＡ和 ＭＴＴ法。结果：在 ＨＴＣＡ中，人肺癌细胞株的克隆形成率 ＰＥ值分为 ０． ４５８０和 ０ ９３００，表明ＨＴＣＡ适于对肺癌细胞进行培养、研究。没类型瘤细胞在ＨＴＣＡ中ＰＥ值不一样，揭示其肿瘤干细胞的生长特性不一样。结果亦表明：１、不同类型肿瘤细胞对同一药物反应性不同显示化疗个体化的必要性。２、同一类型肿瘤细胞对不同药物反应性不一，从而揭示抗癌药敏试验用于临床预测肺癌患者对抗癌药物敏感或耐药是可取的。３、同一类型肺癌对同类抗癌药物反应性相似，通过比较其量效关系曲线可筛选出有效抗癌新药。结论：通过两种方法的对比分析，显示两种方法有较好的相关性，ＨＴＣＡ测试结果稳定、准确，但其耗费大，技术要求高，而ＭＴＴ法操作简单快速、标本可测率高，便于推广，可望为肿瘤患者的治疗提供一定指导。

改良MTT药敏分析在成骨肉瘤个体化治疗中的意义

目的:为提高骨肉瘤患者的治疗有效率,通过改良MTT药敏分析,研究成骨肉瘤药物敏感性,探讨成骨肉瘤个体化治疗的可行性。方法:通过收集新鲜骨肉瘤组织收集培养骨肉瘤细胞,以MTT比色法观察6种常用化疗药对骨肉瘤细胞增殖的影响。结果:骨肉瘤细胞对MTX,紫杉醇和5-FU敏感性强,生长抑制率达到50.06%,48.35%和47.13%。结论:通过对骨肉瘤细胞进行MTT药敏分析研究,选择性地对患者开展个体化化疗,对提高骨肉瘤治愈率有重要的意义。

MTT法检测乳腺癌细胞对化疗药物敏感性的研究

目的:探讨3-(4,5)-2-噻唑-(2,5)-二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)药敏试验在指导临床乳腺癌化疗中的作用。方法:应用MTT法检测50例乳腺癌新鲜标本肿瘤细胞对10种化疗药物的敏感度。结果:对乳腺癌细胞抑制率强的药物为PTX、NVB、VP-16、5-FU、DDP,对乳腺癌细胞抑制率较弱的化疗药物为VCR、ADM、MTX、MMC、HCPT。结论:MTT体外药敏试验对指导临床乳腺癌个体化治疗具有重要意义。

MTT法测定异搏定联合化疗药物对胶质瘤细胞U251化疗敏感性评估

目的探讨应用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测胶质瘤细胞U251对异搏定联合化疗药物的化疗敏感性。方法利用MTT法检测异搏定分别联合化疗药物(阿霉素、长春新碱、足叶乙甙)在不同作用时间点和不同剂量的作用下胶质瘤细胞U251的存活率。结果异博定联合化疗药物具有一定的协同作用。随着化疗药物作用时间的延长,细胞存活度在各组中均有减少。72h时间点,阿霉素组细胞存活率为34.57%,联合长春新碱组细胞存活率为13.44%,足叶乙甙组细胞存活率为62.71%,组间比较有统计学差异。结论异搏定联合化疗药物与化疗敏感性存在一定关系,为临床化疗选择合适的化疗剂量和化疗周期提供了实验依据。

评价生物材料毒性的体内外实验相关性研究——体外细胞培养的MTT法与体内皮下埋植试验

目的 探讨MTT比色法与体内软组织皮下埋植试验的相关性。方法 对七种生物材料分别用MTT比色法和软组织皮下埋植试验进行生物相容性测试。结果 两种方法均显示2#材料毒性最大,1#材料毒性最小,其余材料毒性居中。结论 MTT比色法与软组织皮下埋植试验有良好的相关性。

3Y-TZP全瓷材料体外细胞毒性试验(MTT法)

目的:初步评价牙科全瓷材料3Y-TZP生物相容性。方法:根据ISO标准采用体外细胞毒实验(MTT法)测试不同浓度和浸提时间的材料浸提液L-929小鼠结缔组织成纤维细胞的影响从而对全瓷材料3Y-TZP的生物相容性进行初筛。结果:各浓度组OD值均与阴性对照无显著性差异(P>0.05),与阳性组差异显著(P<0.01),材料毒性级别0级。结论:两种材料体外细胞毒实验阴性,初步认为材料具有较好的生物相容性。

MTT法在非小细胞肺癌优化治疗方案中的应用

目的:通过非小细胞肺癌体外原代细胞的培养,对其常用的化疗药物进行敏感性检测,探讨不同化疗药物之间的敏感性差异,筛选出最佳的化疗药物或联合化疗方案。方法:应用MTT显色分析法测定40例非小细胞肺癌实体瘤标本对9种化疗药物及其组成的联合化疗方案的敏感性或耐药性,并比较结果。结果:非小细胞肺癌化疗敏感性个体差异较大。联合化疗药物的敏感性明显优于单药,P=0.038。各药物平均抑制率由高到低的顺序依次为DDP+HCPT>DDP+VP16>HCPT>DDP+NVB>DDP+ADM+IFO>ADM>CTX+ADM+VCR>DDP>NVB>VP16>CBP>IFO>VP16+CBP>VCR>CTX。无论是单药组间比较,还是联合药物组间比较,其敏感性的差异均有显著差异,均P<0.01。结论:体外肿瘤细胞药敏试验对临床肿瘤化疗用药有很强的指导性,并能发现耐药病例。对非小细胞肺癌患者进行化疗时,应尽量选择联合用药方案。

MTT法测定肿瘤细胞体外药物敏感性的临床应用

目的：评价 ＭＴＴ法测定肿瘤细胞体外药物敏感性的临床应用。方法：对７５例胃癌、５５例肠癌、５５例膀胱癌及６例舌癌进行肿瘤细胞分离、培养，以ＭＴＴ法对其体外药物敏感性进行检测。结果：对胃癌、肠癌、膀胱癌敏感度较高的药物与临床经验用药基本相符。７５例胃癌病人体外药敏结果和体内疗效总符合率为７７．３％，其中ＭＴＴ敏感组病人总有效率与经验化疗组相比有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。ＭＴＴ法对新药的临床应用也有较好的指导作用。结论：ＭＴＴ法对于临床合理用药，实现肿瘤病人的个体化化疗具有重要的价值。

MTT法体外检测癌细胞药敏试验及临床相关性研究

目的 研究MTT法检测癌细胞对抗癌药物的敏感性与临床个体化化疗的相关性。方法 取 5 7例癌症患者新鲜癌细胞 ,采用MTT法检测癌细胞对 8种常用抗癌药的敏感性 ,成功 46例 ,根据药敏结果对患者进行化疗 ,无敏感药物者按经验方案化疗 ,观察实验与临床结果的相关性。结果 药敏试验阳性者 2 5例 ,阴性者 2 1例。实验提示敏感药物化疗者的有效率为 76 .0 %(19/2 5 ) ,耐药者按经验方案化疗 ,其有效率仅为 2 8.6 % (6 /2 1) ,两者有非常显著性差异 ,P <0 .0 1。实验与临床符合率达 73 .9%(34/46 ) ;说明MTT法对癌症患者临床个体化化疗效果有预见价值。结论 MTT法体外癌细胞药敏试验可以指导临床个体化治疗。

MTT法在细菌活性检测及药敏试验中的应用

目的探讨四甲基偶氮唑盐(MTT)法在细菌活性检测和药敏试验中的应用价值。方法分别采用MTT法和微量肉汤稀释法检测鲍曼不动杆菌活性以及鲍曼不动杆菌对丁胺卡拉霉素和头孢他啶的敏感性,对两种方法的操作过程和结果进行比较。用统计软件SPSS 16.0对检测结果进行分析。结果随着细菌浓度增加,微量肉汤稀释法和MTT法检测的活菌或死菌的吸光度值均增加,但用微量肉汤稀释法检测的同一浓度的活菌和死菌的吸光度值之间差别不大,t检验结果显示差异无统计学意义(P>0.05);而与用MTT法检测的同一浓度死菌吸光度值相比,MTT法检测的活菌吸光度值明显增加,t检验结果显示差异均有统计学意义(P<0.05);用微量肉汤稀释法和MTT法检测的鲍曼不动杆菌对丁胺卡拉霉素和头孢他啶的敏感性均与临床药敏结果一致。结论同微量肉汤稀释法一样,MTT法可以用于检测细菌活性和药敏试验。

癌性胸腹水MTT法抗癌药物敏感性试验研究

目的 采用MTT比色法测定 39例癌性胸水及 2 7例癌性腹水对 10种常用化疗药物敏感性。方法 用常规方法收集胸腹水 ,并用肝素抗凝 (10u ml) ;不连续密度梯度离心法去除渗出液中血细胞 ,制成肿瘤单细胞悬液 ,进行药敏试验。结果 观察到肺癌患者的实体瘤组织与胸水之间肿瘤细胞相对抑制率有较好的相关性。同时观察到胸腹水中大量血细胞对药敏试验结果有较大影响 ,应预先除去。结论 根据药敏结果进行胸腹腔给药治疗 ,效果较好 ,80 %患者胸腹水近期得到控制 ,对于延长患者生命有重要意义。

MTT实验检测重组人角质细胞生长因子-2诱导不同细胞系增殖的差异

目的:用MTT法检测重组人角质细胞生长因子-2(rhKGF-2)诱导不同细胞系增殖的差异,建立验证rhKGF-2生物活性的细胞模型。方法:利用载体pBV220-KGF-2原核表达和纯化rhKGF-2,然后用MTT法分别检测rhKGF-2诱导大鼠气管上皮细胞RTE、大鼠小肠上皮细胞IEC-6、小鼠成纤维细胞NIH/3T3和人喉癌细胞Hep-2增殖的能力。结果:rhKGF-2具有强促Hep-2细胞增殖的生物活性,而对RTE细胞、IEC-6细胞、NIH/3T3细胞的诱导增殖作用不明显。结论:在体外,rhKGF-2具有较强的诱导Hep-2细胞增殖的作用。本研究为确立验证rhKGF-2生物活性的细胞模型的选择提供了实验依据。

MTT法对原发性肝细胞癌化疗药物敏感性的预测

作者采用噻唑蓝（ＭＴＴ）法，对人体手术切除的原发性肝细胞癌的新鲜标本，作顺铂、卡铂、丝裂霉素、阿霉累和５氟脲嘧啶的抗癌敏感药物试验，试图预测出针对性较强的化疗药物，为临床科学合理地选择用药提供可靠依据。作者共检测４９例原发性肝细胞癌，结果显示，对两种药物敏感者１４例，占２８．６％，对其它药种敏感者很少，敏感药物顺序与临床治疗结果大致相符。此结果可作临床药物选择时参考，在实体瘤药敏试验中，ＭＴＴ法仍然可行。

口腔癌原代培养细胞MTT法药敏试验方法的建立

目的 建立口腔癌原代培养细胞 MTT药敏试验的方法。方法 采用 MTT法对 2 8例口腔癌新鲜组织和 TCa8113系、ACC- 2细胞株进行药物敏感性检测 ,比较分析各操作步骤对检测结果的影响。结果 MTT法能准确检测口腔癌肿瘤细胞系 (株 )和新鲜口腔癌组织的药物敏感性。但在后者的检测中应特别注意肿瘤组织的取材、肿瘤细胞悬液的制备、肿瘤细胞的培养、MTT的温育时间以及甲浮液的离心等操作过程。结论 MTT法能准确检测新鲜口腔癌组织的药物敏感性 ,且重复性好 ,检测周期较短 ,适合大批量样本或大批量药物的筛选 ,同时无放射性污染。