抑癌基因Mxi1在白血病细胞中表达的研究

目的分析抑癌基因Mxil在白血病发病中的作用。方法利用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测初治急性白血病(AL)患者26例骨髓单个核细胞,经治疗达完全缓解的AL(AL-CR)患者23例、健康对照者30名外周血单个核细胞和2种髓系白血病细胞株(KG1、K562)Mxil基因表达情况。结果所有标本中均可检测到Mxi1基因的表达,Mxi1 mRNA在初治AL患者的表达水平平均为0.531±0.205,在K562和KG1细胞株中的表达水平平均为0.613±0.223和0.628±0.239,均明显低于健康对照组的0.923±0.187,差异有统计学意义(P<0.05);而AL-CR患者的表达水平为0.812±0.243,明显高于初治AL患者(P<0.05),接近健康对照组(P>0.05)。结论白血病患者细胞中Mxi1基因表达水平下降,提示其可能与白血病的发病有关。

C-MYC和MXI1在晚期肺腺癌组织中的表达及其临床意义

目的观察C-MYC和MXI1在晚期肺腺癌组织中的表达,同时探讨两者的相关性及其临床意义。方法使用免疫组化S-P法检测C-MYC和MXI1在100例晚期肺腺癌组织中表达情况,并分析其与晚期肺腺癌临床病理特征的关系。结果 C-MYC和MXI1在晚期肺腺癌组织中的阳性表达率分别为60.00%和55.00%。晚期肺腺癌组织中C-MYC、MXI1的表达呈负相关(r=-0.206,P<0.05)。C-MYC阴性患者比C-MYC阳性患者具有较长的生存时间(21.00个月vs 15.00个月),差异有统计学意义(χ~2=10.890,P<0.001);而MXI1阳性患者比MXI1阴性患者具有较长的生存时间(21.00个月vs 13.00个月),差异有统计学意义(χ~2=15.080,P<0.001)。结论 C-MYC和MXI1的异常表达可能与晚期肺腺癌的预后密切相关。

乳癌组织中C-MYC和MXI1的表达

目的:观察乳癌组织中C-MYC和MXI1蛋白表达状况,探讨其临床意义。方法:应用免疫组化SP法检测132例乳癌和20例正常乳腺组织中C-MYC和MXI1蛋白的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系。结果:乳癌组织中C-MYC和MXI1的阳性表达率分别为57.6%和50.0%,均明显高于正常乳腺组织(χ2=12.613、14.269,P均<0.001)。组织学分级高、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)均阴性以及Ki-67阳性的乳癌组织中C-MYC蛋白阳性表达率较高(χ2=9.135、8.188、7.816,P均<0.05),而MXI1蛋白阳性表达率较低(χ2=7.822、8.123、8.381,P均<0.05)。乳癌组织中C-MYC和MXI1蛋白表达呈负关联(rp=-0.182,P=0.035)。C-MYC阴性和阳性者、MXI1阴性和阳性者的生存曲线差异均有统计学意义(χ2=14.597、22.556,P均<0.05),C-MYC阴性者中位生存时间较C-MYC阳性者延长(55.98个月vs 46.34个月),MXI1阳性者中位生存时间较MXI1阴性者延长(56.26个月vs 44.61个月)。结论:C-MYC表达上调和MXI1表达下调可能与乳癌的发生、发展有关。

白血病细胞株KG-1中Mxi1基因突变的检测和表达载体的构建

目的检测白血病细胞株KG-1中Mxil基因SID和bHLHzip区突变情况并构建Mxil基因的野生型和突变型真核表达载体,观察其转染真核细胞后基因表达的情况。方法应用RT-PCR和SSCP分析KG-1细胞株Mxil基因的突变,将Mxil野生型/突变型基因cDNA插入到pDs-red2-N1质粒中,构建pDs-red2-N1/Mxil(野生型/突变型)真核表达载体,采用脂质体方法将质粒转染COS-7细胞,流式细胞仪检测红色荧光蛋白表达并计算转染效率。RT-PCR检测转染后Mxil基因的表达。结果 Mxil基因突变位于HelixⅡ区第82编码子的CAT/TAT(His/Tyr)。成功构建pDs-red2-N1/Mxil(野生型/突变型)真核表达载体,经酶切、电泳可以看到在4 700、1845 bp存在两条电泳条带,Mxil基因在COS-7细胞中得到表达,转染后COS-7细胞红色荧光蛋白表达的阳性细胞为18.07%,表达高峰出现在转染后第3天,并可持续表达6d左右。结论 Mxil基因的高度保守区域bHLHzip存在基因突变,Mxil突变基因的真核表达载体构建成功,并成功转染真核细胞COS-7。