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HIV流行毒株的DNA macroarray基因分型技术的研究 被引量:4
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作者 倪崖 谭卓 +4 位作者 房国坚 金妙坚 李坤 蒋娴 黄云坚 《中国卫生检验杂志》 CAS 2006年第1期12-14,共3页
目的:建立一种特异、相对简便的H IV流行毒株基因分型新技术。方法:从H IV-1抗体阳性标本中提取H IV前病毒DNA,使用H IV-1型共用引物进行PCR扩增。同时设计一条型特异性的探针,然后通过制作DNA m acroarray芯片,鉴别样本的H IV亚型。结... 目的:建立一种特异、相对简便的H IV流行毒株基因分型新技术。方法:从H IV-1抗体阳性标本中提取H IV前病毒DNA,使用H IV-1型共用引物进行PCR扩增。同时设计一条型特异性的探针,然后通过制作DNA m acroarray芯片,鉴别样本的H IV亚型。结果:DNA m acroarray分析可以检测我国H IV主要流行株基因型的特异性序列:B、C、CRF01-AE和CRF07-BC。结论:DNA m acroarray方法对H IV亚型进行分析是可行的,可以在H IV流行病学调查中应用。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 DNA macroarray 基因分型
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用于多基因表达检测的猕猴桃macroarray阵列
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作者 张波 徐昌杰 陈昆松 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期854-857,共4页
基因阵列是开展高通量功能基因组学研究的有效手段之一。对适用于多年生果树猕猴桃的macroarray阵列进行了探索,构建了含有42个基因的macroarray阵列,与α-32P标记的cDNA探针杂交产生清晰信号,有效分辨了不同基因或基因家族不同成员的... 基因阵列是开展高通量功能基因组学研究的有效手段之一。对适用于多年生果树猕猴桃的macroarray阵列进行了探索,构建了含有42个基因的macroarray阵列,与α-32P标记的cDNA探针杂交产生清晰信号,有效分辨了不同基因或基因家族不同成员的表达差异。DNase处理可去除基因组DNA污染,提高结果准确性。 展开更多
关键词 猕猴桃 macroarray 基因表达 构建
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A CLINICAL STUDY ON PROSTATE CANCER DIAGNOSIS WITH cDNA MACROARRAY 被引量:2
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作者 钟惟德 刘良式 +8 位作者 刘文华 江福能 曾广翘 戴奇山 何慧婵 毕学成 彭志强 谢克基 魏鸿霭 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2005年第1期66-70,共5页
Objective: To diagnose prostatic cancer (CaP) with cDNA macroarray. Methods: Total RNA was isolated from patients with prostate cancer and from normal people, and poly(A) RNA was further purified. Then differentially ... Objective: To diagnose prostatic cancer (CaP) with cDNA macroarray. Methods: Total RNA was isolated from patients with prostate cancer and from normal people, and poly(A) RNA was further purified. Then differentially expressed genes were analysed in CaP and normal prostate by cDNA macroarray system. Results: There were differential expressions of nine prostate-associated specific genes in CaP as compared with normal prostate, among which, 7 were significantly up-regulated and 2 were down-regulated. Conclusion: As a diagnostic approach at molecular level, the cDNA macroarray is supposed to elevate the detection rate of CaP. 展开更多
关键词 PROSTATE NEOPLASM cDNA macroarray
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The Use of Macroarray as a Simple Tool to Follow the Metabolic Profile of Lactobacillus plantarum during Fermentation
4
作者 Minna Kahala Virpi Ahola +2 位作者 Elina Makimattila Lars Paulin Vesa Joutsjoki 《Advances in Microbiology》 2014年第14期996-1016,共21页
This study focused on defining the differences in L. plantarum gene expression levels in different media and in different growth phases using an easy and cost-efficient monitoring of gene expression. A macroarray base... This study focused on defining the differences in L. plantarum gene expression levels in different media and in different growth phases using an easy and cost-efficient monitoring of gene expression. A macroarray based on a group of selected L. plantarum genes, 178 genes belonging to 18 main groups, printed onto a nitrocellulose filter was designed in this work. Using the macrofilters designed, the expression of a selected set of L. plantarum genes was assayed in synthetic MRS medium and in extracted carrot juice. To compare the potential differences of starter gene expression in hygienic and contaminated cultivation media, the L. plantarum strain was cultivated in both sterile and contaminated (yeast and Escherichia coli) MRS and carrot juice. The number of genes found to be regulated as a function of growth was clearly higher in MRS-based growth medium than in carrot juice, In carrot juice, expression of the gene encoding malolactic enzyme (MLE), which makes L. plantarum an advantageous microbe in e.g. wine making, was found to be upregulated in logarithmic phase of growth. The current study demonstrated that macroarrays printed on nitrocellulose filters with simple robotic systems can be analyzed by standard laboratory equipment and methods usually available in molecular laboratories. Using this technology, rapid and cost-efficient analysis of genome function of L. plantarum can be carried out e.g. in developing regions, where lactic acid fermentation of food and feed matrices is a common practice. 展开更多
关键词 macroarray Gene Expression L. plantarum
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新型低密度cDNA Macroarray的建立及其应用于干扰素抗HBV的研究 被引量:9
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作者 管世鹤 刘华平 +3 位作者 杨东亮 陆蒙吉 Michael Roggendorf Joerg F.Schlaak 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期236-239,共4页
目的了解人肝胚瘤细胞株HepG2和稳定转染HBV全基因组细胞株HepG2.2.15的干扰素(IFN)抗病毒基因表达谱。方法选择与IFN抗病毒及其信号转导途径相关的288个IMAGE克隆,经聚合酶链反应(PCR)扩增相应的基因片段,将扩增的DNA片段纯化后点样于... 目的了解人肝胚瘤细胞株HepG2和稳定转染HBV全基因组细胞株HepG2.2.15的干扰素(IFN)抗病毒基因表达谱。方法选择与IFN抗病毒及其信号转导途径相关的288个IMAGE克隆,经聚合酶链反应(PCR)扩增相应的基因片段,将扩增的DNA片段纯化后点样于阳离子尼龙膜上以制备成人工芯片。HepG2和HepG2.2.15细胞经IFN处理后,分离细胞总RNA,进行逆转录并且同时以32P标记;将标记的cDNA靶基因与尼龙膜上的探针进行分子杂交。经Cyclone扫描系统和OptiQuantTM软件处理,将图像信号转换成数据信息;再经Excel软件分析、处理形成Macroarray数据值。结果Macroarray分析提示,在HepG2和HepG2.2.15细胞仅有部分IFN诱导基因表达,多数IFN诱导基因呈低表达或不表达。通过比较HepG2和HepG2.2.15细胞,发现两者表达IFN诱导基因有差异,即对IFN应答有差异。进一步分析还发现,尽管与HepG2细胞存在差异的IFN应答,HepG2.2.15细胞的IFN信号转导途径(JakSTAT途径)却是开放的、未受损伤的。结论HepG2和HepG2.2.15细胞具有差异的IFN抗病毒基因表达谱。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 干扰素类 CDNA macroarray技术 表达的序列标记 macroarray HEPG2.2.15细胞 抗HBV 干扰素 聚合酶链反应(PCR)
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低密度cDNAMacroarray对干扰素α抗病毒蛋白的筛选 被引量:3
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作者 管世鹤 杨凯 +4 位作者 王琴 程中乐 潘颖 吴园园 杨东亮 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期774-778,共5页
目的 基于低密度cDNAMacroarray技术筛选出差异表达的干扰素(IFN)仅抗病毒基因,以探讨IFNα抗病毒蛋白的表达与HBV复制的关系。方法以一定浓度的IFNa处理肝胚瘤细胞株HepG2和HepG2.2.15细胞6h,用cDNAMacroarray分析比较两细胞株IF... 目的 基于低密度cDNAMacroarray技术筛选出差异表达的干扰素(IFN)仅抗病毒基因,以探讨IFNα抗病毒蛋白的表达与HBV复制的关系。方法以一定浓度的IFNa处理肝胚瘤细胞株HepG2和HepG2.2.15细胞6h,用cDNAMacroarray分析比较两细胞株IFN仅抗病毒基因表达谱,并筛选出差异表达的IFNa抗病毒基因。将表达HBV核心蛋白(HBc)的质粒DHBc-EGFP转染HepG2细胞,RT-PCR法分析HBc对IFN仅抗病毒基因表达的影响。将表达抗黏病毒A蛋白(MxA)的表达质粒pcDNA3.1Flag-MxA转染HepG2.2.15,以酶联免疫吸附试验、Dotblot、Southernblot等方法分别检测HepG2.2.15细胞表达释放的HBsAg与HBeAg、细胞外HBVDNA和细胞内HBVDNA复制中间体(松弛环状DNA、双股线性DNA),以判断HBV复制情况。两组间数据比较采用t检验,组间不同时间点数据比较采用单因素方差分析。结果cDNAMacroarray分析显示HepG2和HepG2.2.15细胞的抗病毒基因表达谱具有差异性:IFNa抗病毒基因中干扰素诱导跨膜蛋白(IFITM)1、IFITM2、IFITM3、RING4等在HepG2.2.15细胞的表达被部分抑制,而重要的抗病毒蛋白MxA表达被完全抑制。HBc转染组细胞中MxAmRNA表达的相对水平为0.31±0.05,低于空白对照组的0.74±0.04,差异有统计学意义,P〈0.05。MxA蛋白转染HepG2.2.15细胞48、72h后,MxA转染组细胞上清液中HBsAg的S/CO值分别为1.42±0.21和1.58±0.18,HBeAg的s/co值为1.44±0.14和2.28±0.24,而空白对照组细胞上清液中HBsAg的S/CO值为1.92±0.19和2.79±0.25,HBeAg的S/CO值为2.31±0.46和3.37±0.29,两组细胞上清液中HBV抗原的s/CO值差异均有统计学意义,P值均〈0.05。细胞外HBVDNA、胞内HBV复制中间体DNA均无明显变化。结论HBV及其抗原成分的复制和表达影响着IFNa抗病毒蛋白的表达;HBV通过抑制IFNd抗病毒蛋白的表达而发挥拮抗IFNa的抗病毒活性。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 干扰素 抗病毒蛋白 CDNA macroarray
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cDNA macroarray for analysis of gene expression profiles in prostate cancer 被引量:2
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作者 ZHONG Wei-de HE Hui-chan +3 位作者 BI Xue-cheng OU Ru-biao JIANG Shao-ai LIU Liang-shi 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2006年第7期570-573,共4页
Background Early diagnosis and timely treatment are important for improving therapeutic efficiency of prostate cancer. DNA array is a new bio-technology for disease diagnosis. This study was conducted to diagnose pros... Background Early diagnosis and timely treatment are important for improving therapeutic efficiency of prostate cancer. DNA array is a new bio-technology for disease diagnosis. This study was conducted to diagnose prostate cancer with cDNA macroarray and analysis gene expression profiles of some selective genes in prostate cancer. Methods Total RNA was isolated from patients with prostate cancer and from normal people, and poly(A) RNA was further purified. Then it was analyzed for differentially expressed genes in prostate cancer and normal prostate by cDNA macroarray system. Results There were different expressions in the nine prostate-associated specific genes in prostate cancer as compared with normal prostate, in which, 7 were significantly upregulated and 2 were down-regulated. Conclusion As a diagnostic approach at molecular level, the cDNA macroarray is an effectively diagnostic method for orostate cancer. 展开更多
关键词 prostate neoplasm cDNA macroarray gene expression profiles
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基于cDNA宏阵列的系统聚类分析猪发育阶段的基因表达谱 被引量:5
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作者 朱正茂 赵书红 +5 位作者 陈浩 余梅 刘榜 樊斌 朱猛进 李奎 《武汉大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期482-486,共5页
取杜洛克猪胚胎第33,45,55,65,75天的背最长肌样本,用cDNAMacroarray分析方法和聚类分析技术分析了327个EST在骨骼肌内不同发育阶段的基因表达谱,结果表明有98条EST在不同发育时期显著差异表达.第33天和第45天两阶段基因表达状态相似,... 取杜洛克猪胚胎第33,45,55,65,75天的背最长肌样本,用cDNAMacroarray分析方法和聚类分析技术分析了327个EST在骨骼肌内不同发育阶段的基因表达谱,结果表明有98条EST在不同发育时期显著差异表达.第33天和第45天两阶段基因表达状态相似,第55天和第65天基因表达状态相似,而第75天的基因表达与第55天和第65天两个阶段的基因表达具有相近的聚类关系.表达状态相近,基因功能相似的基因大都被聚类在一起. 展开更多
关键词 CDNA macroarray 胚胎 骨骼肌 发育 聚类分析
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肺癌细胞株中NVB和Doc药物敏感性关联基因的研究 被引量:6
9
作者 蔡莉 隋广杰 王滨 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期523-528,共6页
目的:筛选小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株中与诺维苯(NVB)、泰索帝(Doc)药物感受性相关的基因。方法:采用MTT比色分析法测定4株SCLC细胞株和6株NSCLC细胞株对NVB、Doc的药物感受性,同时应用cDNAmacroarray技术检测10株肺... 目的:筛选小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株中与诺维苯(NVB)、泰索帝(Doc)药物感受性相关的基因。方法:采用MTT比色分析法测定4株SCLC细胞株和6株NSCLC细胞株对NVB、Doc的药物感受性,同时应用cDNAmacroarray技术检测10株肺癌细胞株中1291个药物感受性关联基因的表达状态,分析二者之间的相关性。结果:与NVB和Doc药物敏感性关联(r≥±0.4)的基因共有56个。1)与NVB药物敏感性相关联的基因有36个,SCLC+NSCLC组与NSCLC组共同表达的基因有20个,其中,SCLC+NSCLC组表达的基因有27个,特异表达的有7个,NSCLC组为29个基因,9个基因特异表达。2)与Doc药物敏感性相关联的基因有50个,其中,SCLC+NSCLC组与NSCLC组共同表达的基因有12个,SCLC+NSCLC组表达的基因有24个,12个基因特异表达,NSCLC组为38个基因,26个基因特异表达。3)肺癌细胞株中与NVB、Doc药物感受性相关联基因的分类主要分布于:信号转导分子﹑代谢酶类及其抑制剂、细胞因子和转录因子等4类。结论:SCLC和NSCLC细胞株中NVB、Doc药物敏感性相关联基因存在明显差异,但分类基本相同。 展开更多
关键词 cDNA macroarray MTT比色分析法 肺癌 细胞株 药物感受性相关联基因 NVB DOC
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肺癌细胞株中GEM和CDDP药物敏感性相关基因的研究 被引量:2
10
作者 杨春雨 田振囡 +1 位作者 刘炜 蔡莉 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第10期1061-1068,共8页
背景与目的筛选小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)和非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞株中与健择(gemcitabine hydrochloride,GEM)和顺铂(cisplatin,CDDP)药物敏感性相关的基因,有助于进一步阐明抗癌药物作... 背景与目的筛选小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)和非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞株中与健择(gemcitabine hydrochloride,GEM)和顺铂(cisplatin,CDDP)药物敏感性相关的基因,有助于进一步阐明抗癌药物作用机制,为克服抗癌药物的耐药性、研制开发新的抗癌药物提供新线索,同时也将为临床的个体化治疗提供理论依据。方法采用MTT比色分析法测定4株SCLC细胞株和6株NSCLC细胞株对CDDP和GEM的药物敏感性,同时应用cDNA macroarray技术检测10株肺癌细胞株中1291个药物敏感性相关基因的表达状态,分析二者之间的相关性。结果与GEM药物敏感性呈明显正相关(r≥0.632,P<0.05)的基因有6个;与CDDP药物敏感性关联的基因共有45个;与GEM、CDDP敏感性关联(r≥±0.4)的基因有41个;肺癌细胞系中与GEM和CDDP两类药物敏感性呈明显相关的基因是Metallothinein(信号转导分子)、CathepsinB(组织蛋白酶B)和TIMP1(生长因子);肺癌细胞系中与GEM、CDDP药物敏感性相关联的基因主要分布于Metallothinein、Cathepsin B、生长因子TIMP1等类别。结论SCLC和NSCLC细胞株中GEM、CDDP存在药物敏感性相关基因,其中Metallothinein、Cathepsin B和TIMP1基因与GEM药物敏感性呈正相关,与CDDP药物敏感性呈负相关。 展开更多
关键词 cDNA macroarray MTT比色分析法 肺癌细胞株 药物敏感性 GEM CDDP
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非小细胞肺癌细胞株抗癌药物敏感性相关基因差异表达的初步研究
11
作者 蔡莉 王滨 隋广杰 《中国肺癌杂志》 CAS 2005年第3期163-169,共7页
背景与目的为了提高晚期肺癌的化疗效果,实行个体化治疗,筛选和鉴定肺癌细胞抗癌药物敏感性基因具有重要临床意义。本研究比较了非小细胞肺癌(NSCLC)和永生化人支气管上皮细胞(BET2A)细胞株抗癌药物敏感性相关基因的差异表达,以寻找与... 背景与目的为了提高晚期肺癌的化疗效果,实行个体化治疗,筛选和鉴定肺癌细胞抗癌药物敏感性基因具有重要临床意义。本研究比较了非小细胞肺癌(NSCLC)和永生化人支气管上皮细胞(BET2A)细胞株抗癌药物敏感性相关基因的差异表达,以寻找与抗癌药物敏感性相关的基因。方法应用cDNAmacroarray技术,对6株NSCLC和BET2A细胞株的抗癌药物敏感性相关基因进行差异表达分析,RTPCR技术验证滤膜杂交结果。结果在1291个候选基因中筛选出73个差异表达基因,其中45个基因表达上调,28个基因表达下调。RTPCR验证结果与cDNAmacroarray检测结果一致。结论抗癌药物敏感性相关基因的差异表达可能是药物敏感性产生不同的原因之一。本研究结果为逆转肺癌多药耐药性提供了理论基础和新靶点,并为临床新药开发及个体化治疗提供了实验依据。 展开更多
关键词 CDNA macroarray 基因表达 非小细胞肺癌
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