脂肪分化相关蛋白反义寡核苷酸抑制细胞内胆固醇积聚及其在动脉粥样硬化中的改变

目的:研究ADRP与As发生和发展的关系。方法:使用80mg/LOx -LDL和/或1mmol/L反义ADRP寡核苷酸与小鼠腹腔巨噬细胞共孵育72h。测定细胞内胆固醇酯;油红O染色显示细胞内中性脂质;RT -PCR和Westernblotting观察反义寡核苷酸对ADRP表达的影响。高胆固醇饲料喂养新西兰白兔12周,复制As模型。测定血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯及动脉壁胆固醇;苏丹Ⅳ染色显示主动脉病变面积;HE染色观察主动脉及肝脏的病变;免疫组织化学方法显示ADRP在主动脉病变区及肝脏中的表达。结果:反义ADRP寡核苷酸使细胞内胆固醇酯由(46. 6±3 .4 )mg/gprotein下降到(19. 9±1 .9)mg/gprotein ,细胞内中性脂质明显减少,ADRP基因和蛋白的表达显著下降。喂高胆固醇饲料的动物血清TC、LDL -C、TG及动脉壁胆固醇显著升高,主动脉病变面积为(40 . 1±7 .3) % ,ADRP在主动脉病变区免疫组织化学染色强阳性,在肝脏中染色阴性。结论:反义ADRP寡核苷酸能够明显抑制由氧化低密度脂蛋白引起的小鼠腹腔巨噬细胞中胆固醇酯的聚集。ADRP在兔As病变中表达明显增高。提示高表达ADRP促使As发生和发展。

β-胡萝卜素对大鼠肺泡巨噬细胞膜的保护作用

的 探讨β -胡萝卜素对烹调油烟致大鼠肺泡巨噬细胞 (AM)膜损伤的保护作用。 方法 大鼠吸入烹调油烟 ,同时给予 β -胡萝卜素 ,测定不同染毒时间后大鼠AM膜流动性及肺组织LPO含量。 结果 烹调油烟可引起大鼠肺脂质过氧化 ,并降低AM膜流动性 ,而 β -胡萝卜素能使染毒大鼠AM膜流动性明显升高 ,肺LPO含量明显下降。结论 β

大鼠巨噬细胞感染弓形虫的基因表达谱分析

目的分析大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞感染弓形虫RH株的基因表达谱差异。方法以弓形虫RH株速殖子感染SD大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞0h、6h后提取细胞总RNA,采用NimbleGen 12x135K微阵列基因表达分析芯片检测差异表达基因,并对部分表达变化的基因进行Real time PCR验证。结果表达分析芯片涵盖大鼠26 419个基因,对差异表达基因(Fold Change≥4.0)进行聚类分析显示,经弓形虫RH株作用6h和0h的RNA表达谱相比,大鼠肺泡巨噬细胞上调的基因有49个(主要包括Zfp90,Map4k4,Mrpl42等),下调的基因有130个(主要包括Pitx1,Chpt1,Chd6等)。大鼠腹腔巨噬细胞上调的基因有136个(主要包括Map2k3,Il17b,Phka2等),下调的272个(主要包括Tlr2,Tgfb2,Wnt2等)。GO、Pathway分析差异表达的基因,大鼠腹腔巨噬细胞能够引发更多和弓形虫有关的信号通路变化,其肺泡巨噬细胞则不能引起这一效应。Real time PCR和基因芯片检测结果一致。结论大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞感染弓形虫不同的表现型,可能和其基因表达差异引起的信号通路变化有关。

糖基化终产物对单核细胞源性巨噬细胞过氧化物酶体增殖物激活型受体γ表达的影响

目的研究糖基化终产物(AGEs)对单核细胞源性巨噬细胞过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)表达的影响。方法将AGEs-牛血清白蛋白(AGEs-BSA)与佛波酯(PMA)诱导分化72h后的巨噬细胞共同孵育,按加入AGEs-BSA的浓度不同分为A组(50mg/L)、B组(100mg/L)、C组(200mg/L)、D组(400mg/L),另外仅加100mg/L BSA的为对照组,各组分别处理细胞24h,另用200mg/L AGEs-BSA分别于0、12、24、36和48h时处理细胞,运用RT-PCR和Western blot方法检测细胞PPARγmRNA和蛋白的表达。结果细胞PPARγmRNA和蛋白的表达量A组为0.727±0.041和1.260±0.033、B组0.655±0.029和1.059±0.047、C组0.527±0.032和0.899±0.036、D组0.353±0.026和0.415±0.025;较对照组明显降低(P<0.05)。不同时相点作用下,细胞PPARγmRNA和蛋白表达量12h为0.918±0.048和2.830±0.063、24h为0.718±0.023和1.288±0.006、36h为0.567±0.028和0.876±0.037、48h为0.367±0.019和0.455±0.009;较0h时相点比较明显降低(P<0.05)。结论AGEs可抑制单核细胞源性巨噬细胞PPARγmRNA和蛋白的表达,呈浓度和时间依赖性。

KG881对佐剂性关节炎大鼠免疫功能的影响

ＫＧ８８１是一种口服含金抗类风湿性关节炎新药，福氏完全佐剂致炎后ｄ１９ｉｇ给药（含金量５、１０、２０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１），连续７ｄ，对佐剂性关节炎（ＡＡ）大鼠免疫功能有明显的抑制作用：降低刀豆素Ａ（ＣｏｎＡ）及脂多糖（ＬＰＳ）诱导的ＡＡ大鼠脾淋巴细胞的增殖反应；抑制ＬＰＳ诱导的ＡＡ大鼠腹腔巨噬细胞产生的白细胞介素１。此抑制作用有剂量依赖性。

In vitro effect of danazol on the cytokine production ofperitoneal macrophages in patients with endometriosis

Objective: To study the effect of danazol in vitro on the cytokine production of peritoneal macrophages in patients with endometriosis. Methods: Peritoneal macrophages were obtained from 14 cases of patients with endometriosis. Danazol at concentration of 10 ng/ml and 100 ng/ml were added to the peritoneal macrophages cultures. The tumor necrosis factor a (TNFα)and interleukin 6 (IL-6) levels of peritoneal macrophage supernatant were detected by enzyme linked immunoassay. Results: Danazol at concentration of 100 ng/ml significantly inhibited TNFα and IL-6 production of peritoneal macrophages in patients with endometriosis. Conclusion: It is suggested that the immunomodulatory effect of danazol may contributed to the efficacy in the treatment of endometriosis.

巨噬细胞移动抑制因子抗体对HepG2细胞增殖的影响

目的研究巨噬细胞移动抑制因子（MIF）抗体对HepG2细胞增殖的影响，并探讨其作用机制。方法四甲基偶氮唑盐法检测MIF抗体（50、100，200、400μg／L）对HepG2细胞增殖的抑制作用；流式细胞仪检测细胞周期的变化；免疫组织化学法检测Cyclin D1蛋白表达；Westernblot检测血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达；酶联免疫吸附法检测MIF抗体对HepG2细胞分泌IL-6水平的影响。结果MIF抗体可以抑制HepG2细胞生长并具有剂量和时间依赖性。MIF抗体可使细胞周期停滞于G0／G1期，不同浓度（0、50、100、200、400μg／L）MIF抗体作用48h后，G0／G1期细胞比例分别为61．34％±1．08％、65．08％±2．71％、71．19％±1．19％、78．39％±1．00%、83．92％±0．51％。不同浓度MIF抗体作用后CyclinD1蛋白表达率分别为26．060／0±0．47％、22．34％±0．75％、18．06％±1．16％、14．03％±0．59％，明显低于对照组（29．51％±1．28％）。不同浓度MIF抗体作用后，VEGF蛋白表达分别为21．22％±0．68％、19．64％±0．54％、18．04％±0．42%、16．59％±0．66％，明显低于对照组（23．23％±0．51％）。MIF抗体对HepG2细胞分泌IL-6有抑制作用，随着MIF抗体浓度的增加，其IL-6分泌量也相应降低，分别为（210．67±9．31）pg／ml、（181．67±10．05）pg／ml、（160．50±6．60）pg／ml、（143．67±10．56）pg／ml、（118．01±7．48）pg／ml。结论MIF抗体可抑制HepG2细胞的增殖，其可能机制是下调CyclinD1蛋白的表达，从而阻止其由G0／G1期向S期分化；也可能与其抑制VEGF蛋白的表达、减少IL-6的分泌有关。

温石棉对肺泡巨噬细胞的脂质过氧化作用研究

采用硫代巴比妥酸法，探讨了茫崖及涞源温石棉对肺泡巨噬细胞的脂质过氧化作用。结果表明，两种温石棉与巨噬细胞温育后，其反应体系中丙二醛水平升高，且与石棉剂量及温育时间有关。说明两者可致肺泡巨噬细胞脂质过氧化。柠檬酸铝可明显抑制两种温石棉对细胞的损伤，但对其脂质过氧化作用的抑制则较弱。提示脂质过氧化与温石棉的细胞损伤作用似无直接联系。

地塞米松和福莫特罗对THP-1细胞分化的巨噬细胞表面TLR4表达的影响

目的通过体外实验测定地塞米松和福莫特罗对人单核细胞系（THP一1）分化的巨噬细胞表面Toll样受体4（TLR4）表达的影响。方法用不同浓度地塞米松和（或）福莫特罗刺激THP．1细胞系分化的巨噬细胞，采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和蛋白质印迹法（Westernblotting）测定细胞在有或没有脂多糖刺激时TLR4mRNA和蛋白表达水平。结果脂多糖浓度依赖性上调TLR4mRNA和蛋白表达水平。单用地塞米松（10^-10～10^-6mol／L）下调TLR4表达，单用福莫特罗（10^-7和10^-6moL／L）上调TLR4水平。联合刺激时，福莫特罗（10^-6mol／L）能部分逆转地塞米松（10^6mol／L）对TLR4表达的下调作用。结论福莫特罗和（或）地塞米松对TLR4的影响可能是联合作用的机制之一，对治疗革兰阴性细菌引起的气道炎症有重要意义。