B2型黑色素瘤抗原基因对肝细胞肝癌增殖的影响及其调控机制

目的探讨B2型黑色素瘤抗原基因（MageB2）对肝细胞肝癌（HCC）细胞增殖能力的影响及其可能的下游调控机制。方法Western blot检测HCC细胞株Huh7和正常肝脏细胞株HL7702内MageB2蛋白的表达。采用MageB2-小干扰RNA（siRNA）转染Huh7细胞，72h后应用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞活性，48h后流式细胞术检测细胞周期，反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞周期蛋白E1（Cyclin E1）和c-myc的mRNA表达水平。结果MageB2蛋白在Hub7和HL7702细胞中的相对表达量分别为0．80±0．13和0．34±0．07（P〈0．01）。MageB2-siRNA转染可成功抑制Huh7细胞中MageB2蛋白的表达，抑制率达（71．84±4．32）％（P〈0．01）。沉默MageB2后，Huh7细胞活性在72h后明显减弱，为空白对照组细胞活力的（62．43±3．95）％（P〈0．01）。48h后G0／G1期细胞比例升高，同时S和G2／M期细胞比例降低，分别为（70．87±2．08）％、（19．63±2．31）％和（9．49±0．56）％（P〈0．01）。此外CyclinE1和c-myc的mRNA表达均下降，分别降至（56．78±4．97）％和（39．38±6．72）％（P〈0．01）。结论MageB2在HCC细胞中表达较高，并参与其细胞周期的调控，沉默MageB2能抑制HCC细胞的增殖。