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水通道蛋白-4表达变化与急性高眼压视网膜损伤的相关性研究 被引量:2
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作者 陈海 孙善全 +3 位作者 汪克建 杨美 谭戈 刘超 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期677-682,共6页
目的观察不同高眼压作用下,水通道蛋白-4(AQP4)及其mRNA在大鼠视网膜内的表达变化,以探讨AQP4与眼压异常性疾病的关系。方法采用前房加压灌注法,分别制作75cm、125cm和150cm水柱不同压力急性高眼压大鼠模型;通过HE和尼氏染色了解视网膜... 目的观察不同高眼压作用下,水通道蛋白-4(AQP4)及其mRNA在大鼠视网膜内的表达变化,以探讨AQP4与眼压异常性疾病的关系。方法采用前房加压灌注法,分别制作75cm、125cm和150cm水柱不同压力急性高眼压大鼠模型;通过HE和尼氏染色了解视网膜病理改变和神经节细胞数目变化;应用免疫组织化学、免疫荧光双标、原位杂交以及RT-PCR等技术检测不同高眼压作用下,AQP4及其mRNA在视网膜内的表达变化。结果与对照组相比,各实验组大鼠视网膜呈不同程度水肿样改变,其内层厚度增加,神经节细胞数目明显减少;AQP4及其mRNA在视网膜内的表达明显增强,其表达上调水平与眼压升高程度呈正相关,并与视网膜内层厚度增加以及节细胞数目减少相关(P<0.01)。结论急性高眼压作用下,大鼠视网膜内AQP4及其mRNA的表达明显增强,呈压力依赖性,其异常高表达可能与急性高眼压的病理损伤过程以及眼内水、电解质代谢失衡有关。 展开更多
关键词 急性高眼压 视网膜 MÜLLER细胞 水通道蛋白-4 免疫荧光双标记 大鼠
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rhEPO对高糖状态下大鼠Müller细胞凋亡及对Bcl-2和Bax表达的影响 被引量:2
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作者 孟岩 李艳 +1 位作者 叶尚尚 张月 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1132-1135,共4页
目的探讨重组人促红细胞生成素(recombinant hu-man erythropoietin,rhEPO)对高浓度葡萄糖作用下体外培养大鼠视网膜Müller细胞凋亡的保护作用及对Bcl-2和Bax表达的影响。方法提取大鼠视网膜神经细胞及胶质细胞进行混合培养,反复... 目的探讨重组人促红细胞生成素(recombinant hu-man erythropoietin,rhEPO)对高浓度葡萄糖作用下体外培养大鼠视网膜Müller细胞凋亡的保护作用及对Bcl-2和Bax表达的影响。方法提取大鼠视网膜神经细胞及胶质细胞进行混合培养,反复胰酶消化法提纯Müller细胞,随机分为空白组,高糖组及不同浓度rhEPO干预组,培养48 h后应用TUNEL法检测细胞凋亡情况,酶联免疫吸附法检测各组细胞上清液中Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果 TUNEL法检测显示空白组见少量凋亡阳性细胞,高糖组阳性细胞明显增多(P<0.05),各rhEPO干预组同高糖组相比凋亡细胞明显减少(P<0.05)。酶联免疫吸附法见高糖组Bcl-2蛋白的表达降低而Bax蛋白表达增高,与对照组相比活性下降,而各浓度rhEPO干预组与高糖组相比细胞活力明显增强,Bcl-2蛋白的表达增加(P<0.05),Bax蛋白的表达降低(P<0.05)。结论高糖能够引发大鼠视网膜Müller细胞发生凋亡,而rhEPO能减少体外培养高浓度葡萄糖状态下大鼠视网膜Müller细胞的凋亡,并能明显增强Bcl-2蛋白的表达,降低Bax蛋白的表达。提示上调Bcl-2及下调Bax蛋白的表达可能是rhEPO对视网膜Müller细胞抗凋亡保护作用的机制之一。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 重组人促红细胞生成素 MÜLLER细胞 细胞凋亡 BCL-2 BAX
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视网膜Mller细胞调控豚鼠形觉剥夺性近视形成的研究 被引量:2
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作者 毛俊峰 刘双珍 +3 位作者 秦文娟 李凤云 谭浅 吴小影 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2008年第12期881-884,共4页
目的研究视网膜Mller细胞在豚鼠形觉剥夺性近视形成中的作用。方法眼罩遮盖建立豚鼠形觉剥夺性近视眼模型,分为正常对照组、DL-α-氨基己二酸(DL-α-AAA)组、生理盐水组、遮盖组、遮盖+DL-α-AAA组、遮盖+生理盐水组。DL-α-AAA组和遮... 目的研究视网膜Mller细胞在豚鼠形觉剥夺性近视形成中的作用。方法眼罩遮盖建立豚鼠形觉剥夺性近视眼模型,分为正常对照组、DL-α-氨基己二酸(DL-α-AAA)组、生理盐水组、遮盖组、遮盖+DL-α-AAA组、遮盖+生理盐水组。DL-α-AAA组和遮盖+DL-α-AAA组右眼玻璃体内注射8μgDL-α-AAA。14d后检影验光测屈光度,A型超声测眼轴长度,免疫组织化学、Western blotting检测视网膜中Vimentin的表达,TUNEL染色检测凋亡细胞。结果眼罩遮盖14d后,豚鼠遮盖眼眼轴延长,近视形成。Vimentin蛋白阳性表达于视网膜Mller细胞。DL-α-AAA组右眼远视度数高于正常对照组,但视网膜Vimentin蛋白表达量下调(P<0.05)。DL-α-AAA引起遮盖眼近视度数减轻、视网膜Vimentin蛋白表达量下调(P<0.05)。各实验组的视网膜均未发现凋亡细胞。结论玻璃体内注射DL-α-AAA能特异性作用于视网膜Mller细胞,有效抑制豚鼠眼球正视化和近视形成。 展开更多
关键词 mailer细胞 视网膜 近视 DL-α-氨基己二酸 豚鼠
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高糖对体外培养兔视网膜Müller细胞AQP4表达的影响 被引量:1
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作者 田阔 倪劲松 +4 位作者 王心蕊 陈迪 吴家祥 赵雪俭 杨保学 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期871-874,共4页
目的:观察体外培养兔视网膜M櫣ller细胞在高糖条件下水通道蛋白-4(AQP4)表达的变化。方法:采用体外培养的兔视网膜Müller细胞,分为正常对照组及高糖组(葡萄糖浓度:30、40和50mmol.L-1),分别培养1、3和5d;采用免疫细胞化学、流式细... 目的:观察体外培养兔视网膜M櫣ller细胞在高糖条件下水通道蛋白-4(AQP4)表达的变化。方法:采用体外培养的兔视网膜Müller细胞,分为正常对照组及高糖组(葡萄糖浓度:30、40和50mmol.L-1),分别培养1、3和5d;采用免疫细胞化学、流式细胞术及RT-PCR方法对Müller细胞AQP4的表达情况进行检测。结果:高糖组M櫣ller细胞AQP4表达的绿色荧光明显弱于正常对照组(P<0.01);流式细胞仪检测中波峰位置明显提前,AQP4表达强度较对照组明显减弱(P<0.01),且随着葡萄糖浓度的增高和作用时间的延长,AQP4表达强度逐渐减弱;血糖浓度50mmol.L-1培养3d时,RT-PCR半定量分析显示,AQP4 mRNA的表达比对照组明显降低(P<0.01)。结论:高糖能降低视网膜M櫣ller细胞AQP4的表达,且随着葡萄糖浓度的增高和作用时间的延长,AQP4的表达强度也逐渐减弱;高糖时AQP4的表达下降可能是机体对糖尿病视网膜病变的一种保护性反应。 展开更多
关键词 高糖 MÜLLER细胞 AQP4 糖尿病视网膜病变
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通窍活血方对体外培养的视网膜Müller细胞在高压缺氧状态下谷氨酸摄取功能的影响
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作者 翟楠 秦伟 +8 位作者 杨宇琦 陈一兵 王雪菁 王炜 刘春兰 张月 李懿 曾东兴 刘丹 《陕西中医学院学报》 2015年第6期94-98,共5页
目的观察在高压缺氧条件下视网膜Müller细胞谷氨酸(Glu)摄取功能改变,以及通窍活血方对其影响。方法体外纯化培养7天SD大鼠视网膜Müller细胞至P2代;采用中药血清药理学方法制备通窍活血方含药血清;根据[3H]标记的D,L-Glu摄入... 目的观察在高压缺氧条件下视网膜Müller细胞谷氨酸(Glu)摄取功能改变,以及通窍活血方对其影响。方法体外纯化培养7天SD大鼠视网膜Müller细胞至P2代;采用中药血清药理学方法制备通窍活血方含药血清;根据[3H]标记的D,L-Glu摄入量判断Müller细胞谷氨酸(Glu)摄入功能。结果高压缺氧条件下Müller细胞谷氨酸(Glu)摄取功能明显下降(P<0.05);通窍活血方含药血清可明显改善高压缺氧条件下Müller细胞谷氨酸(Glu)摄取功能(P<0.05)。结论通窍活血方含药血清可明显改善高压缺氧条件下Müller细胞谷氨酸(Glu)摄取功能,这可能是通窍活血复方对青光眼患者视神经保护的药物干预途径之一。 展开更多
关键词 通窍活血 Miiller细胞 高压缺氧 谷氨酸
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神经干细胞标志物nestin在成人Müller细胞中表达特征的初步研究 被引量:1
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作者 张荣 章淑杰 +2 位作者 陈君毅 何杰 吴继红 《中国眼耳鼻喉科杂志》 2016年第5期305-308,共4页
目的研究神经干细胞标志物巢蛋白(nestin)在原位和体外培养成人Müller细胞中的表达特征。方法取正常成人眼球,制备冷冻切片,采用免疫荧光方法对谷氨酸合成酶(GS)和nestin进行双标检测;采用免疫荧光方法检测原代和传代培养的Mü... 目的研究神经干细胞标志物巢蛋白(nestin)在原位和体外培养成人Müller细胞中的表达特征。方法取正常成人眼球,制备冷冻切片,采用免疫荧光方法对谷氨酸合成酶(GS)和nestin进行双标检测;采用免疫荧光方法检测原代和传代培养的Müller细胞nestin表达;取原代培养的成人Müller细胞给予过氧化氢(H2O2)刺激,采用免疫荧光方法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和nestin的表达,并计数分析。结果在成人眼球切片中,原位成人Müller细胞GS免疫荧光染色阳性,但nestin染色阴性。原代培养的Müller细胞中检测到部分nestin阳性表达的细胞,10代以内细胞nestin阳性比例为(15.16%±5.07%)^(22.42%±4.6%),且代次间无显著差异。H2O2刺激原代培养的Müller细胞后,GFAP阳性细胞数增加,是对照组的1.30~2.08倍,但nestin阳性细胞比例未见显著变化。结论正常成人Müller细胞原位时呈静息状态,不表达干细胞标志物nestin;体外培养条件可能作为一种刺激因素使部分Müller细胞离开静息状态呈现干细胞特性;人Müller细胞在体外传代及H2O2刺激后nestin阳性细胞数未见显著变化,提示并非全部Müller细胞均具有干细胞潜能,成人Müller细胞可能存在不同的亚型。 展开更多
关键词 成人Muller细胞 巢蛋白 干细胞潜能 亚型
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花色苷对高糖培养的视网膜Müller细胞L-谷氨酸/L-天门冬氨酸转运体表达的影响 被引量:2
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作者 钱志刚 柯敏 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期170-173,共4页
目的观察花色苷对体外高糖培养的视网膜Meuller细胞L-谷氨酸/L-天门冬氨酸转运体(GLAST)表达的影响。方法取出生后10d的雄性Sprague—Dawley(SD)大鼠视网膜组织,体外原代培养Mueiler细胞。第2~4代细胞用于实验。将实验分为正常... 目的观察花色苷对体外高糖培养的视网膜Meuller细胞L-谷氨酸/L-天门冬氨酸转运体(GLAST)表达的影响。方法取出生后10d的雄性Sprague—Dawley(SD)大鼠视网膜组织,体外原代培养Mueiler细胞。第2~4代细胞用于实验。将实验分为正常对照组(A组)、高糖对照组(B组)、高糖+30μmol/L花色苷组(C组)、高糖+60μmol/L花色苷组(D组)、高糖+100μmol/L花色苷组(E组)进行。采用噻唑蓝比色法(MTT)测定波长570nm处的吸光度[A,旧称光密度(OD)]值,以各组A值计算细胞相对存活率。采用免疫蛋白印迹法(Westernblot)检测各组大鼠视网膜MOiler细胞上GI。AST的蛋白表达。结果MTT检测显示,A、B、C、D、E组A值分别为0.4508±0.0204、0.2701±0.0314、0.3320±0.0232、0.4283±0.0172、0.3619±0.0270,细胞相对存活率分别为100.0%、59.9%、73.6%、95.0%、80.3%。其中,C、D、E组A值均较B组增高,差异有统计学意义(F=32.25,P〈0.05);D组A值较C、E组显著增高,差异也有统计学意义(F=21.07,P〈0.05)。Western blot检测显示,B组大鼠视网膜Mueller细胞的GI,AST蛋白表达较A组降低,差异有统计学意义(t=5.25,P〈0.05);A、C、D、E组间大鼠视网膜Mueller细胞的GI。AST蛋白表达无明显变化,差异无统计学意义(F=2.979,P〉0.05)。结论花色苷可逆转高糖引起的Mueller细胞GLAST蛋白表达下降。 展开更多
关键词 原花青素类/药物作用 糖尿病视网膜病变/病理生理学 谷氨酸质膜转运蛋白质类/生 理学 MUELLER细胞
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