西府海棠(Malus micromalus) MaMAPK基因的克隆及表达特性

依据高等植物MAPK基因的保守区设计简并引物 ,用RT PCR方法 ,首次从西府海棠幼苗叶片中克隆了促分裂原活化蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinase,MAPK )基因 (MaMAPK )的cDNA全序列。Southern杂交结果表明在西府海棠中存在一个小的MAPK基因家族。 2 0 %PEG处理西府海棠幼苗不同时间后的Northern杂交分析表明 ,该基因在根系和叶片中均有表达 ,随着胁迫时间延长表达量增加 。

西府海棠(Malus micromalus)总黄酮提取及微乳液薄层分析

为研究西府海棠的黄酮类成分及含量,采用硝酸铝-亚硝酸钠-氢氧化钠法显色,采用分光光度法测定了西府海棠叶总黄酮的含量,优选出西府海棠总黄酮的最佳提取条件.利用乙酸乙酯和石油醚分别对样品进行萃取纯化,以层析比较其黄酮种类.结果表明:西府海棠叶总黄酮最佳提取工艺为固液比1:20,乙醇浓度70%,提取时间4h,提取温度80℃.微乳膜薄层层析显示,西府海棠叶中含有多种黄酮类,其中有芦丁、槲皮素、葛根素.

Breeding and Cultivation Techniques of Fly Fire,an Elite Variety of Malus micromalus

Fly fire is an elite variety of North American Begonia（ Malus micromalus）,which is characterized with dark red flowers,red young leaves,red peel,red bark,large flower amount,long flowering period and long fruit bearing period. It is propagated mainly through grafting,and is suitable for popularization and application in the landscape of the Yangtze River basin and north of the Yangtze River.

陕西省府谷县有机海红果生产技术规程

随着人们对有机食品需求的日益增加,结合国家有关有机食品生产标准和各地生产经验,针对当地特有树种海红树和海红果,在建园、砧木接穗苗木选择、栽植、覆草、灌溉、土壤、施肥、整形修剪、花果管理、病虫草害防治、采收、贮藏、运输、销售、认证证书与认证标志的使用管理共15个方面的栽培管理过程进行严格管控,确保有机产品从产地到消费者手中全程的保真性,生产出优质的有机海红果。

海棠属(Malus)锈病的综合防治

通过收集西府海棠锈病的相关资料,分析病害的病原生物、病害症状、发病条件、流行规律,结合园林植物病虫害综合防治策略的技术措施,提出科学的病害管理手段。从园林规划设计、培育抗病性强的植株、改善植株生长微环境、切断病原菌的传播和化学农药防治等五个方面讨论病害综合防治具体实施方法,提出综合防治,预防为主的锈病控制策略。

石家庄地区西府海棠常见病虫害及防治

西府海棠是园林景观中的重要观赏树种,为了更好地掌握西府海棠常见病虫害及防治措施,提高其在园林景观中的观赏价值和生态作用,该文以石家庄地区西府海棠为研究对象,对近年来的常见病虫害进行阐述,提出针对性的防治措施,以期提高西府海棠在石家庄地区园林景观中的应用价值。

哈茨木霉与枯草芽孢杆菌对海红果幼苗生长、光合特性和抗氧化酶活性的影响

【目的】探究哈茨木霉和枯草芽孢杆菌接种对海红果幼苗生长、光合特性和抗氧化酶活性的影响。【方法】以海红果幼苗作为试验对象进行盆栽试验,设置施用无菌水(CK)、接种哈茨木霉菌液(TH)、接种枯草芽孢杆菌菌液(BS)、哈茨木霉菌液与枯草芽孢杆菌菌液混合接种(TB)4个处理,分析接种后30 d和60 d对海红果幼苗生长指标,叶片SPAD值、气体交换参数以及抗氧化酶活性和丙二醛(MDA)含量的影响。【结果】TH、BS、TB处理均促进了海红果幼苗的生长、光合特性及抗氧化酶活性,TB处理效果最佳。与CK相比,接种30 d和60 d,TB处理幼苗株高、茎粗、叶片数、地上部干重、根干重、根长分别显著增加16.52%、7.43%、23.81%、13.71%、21.44%、31.06%和16.27%、16.54%、18.06%、9.36%、15.41%、24.18%(P<0.05);幼苗叶片SPAD值显著增加13.38%和10.85%(P<0.05),净光合速率、气孔导度、蒸腾速率、胞间CO_(2)浓度分别显著增加14.08%、14.08%、31.03%、9.84%和11.88%、27.13%、14.95%、10.92%(P<0.05),过氧化物酶、苯丙氨酸解氨酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、多酚氧化酶活性分别显著增加20.93%、30.10%、42.00%、21.52%、23.71%和21.21%、22.52%、35.39%、18.18%、18.11%(P<0.05);接种60 d,MDA含量显著下降9.54%(P<0.05)。【结论】哈茨木霉与枯草芽孢杆菌混合接种可以有效促进海红果幼苗生长、提高叶绿素含量和光合速率、增强抗氧化酶活性。

盐胁迫对不同耐盐性八棱海棠株系生理特性的影响

【目的】探究耐盐性不同的八棱海棠株系叶片生理指标对盐胁迫的响应模式,以期揭示耐盐性较强的八棱海棠株系的耐盐机制。【方法】采用盆栽过量灌溉盐水的方式,以耐盐性较强的八棱海棠(NY)组培株系为试材,普通八棱海棠(PT)组培株系为对照,以不同质量浓度NaCl(0、2、4、6、8、10 g·L^(-1))处理40 d,测定各处理植株的生物量以及叶片的生理生化指标。【结果】随着NaCl质量浓度的增加,两株系的总干质量、地上干质量、地下干质量逐渐减少;两株系的根冠比、相对电导率以及丙二醛、可溶性蛋白质和脯氨酸含量呈现增加的趋势;两株系的SOD活性、CAT活性呈现先升高后下降的趋势,POD活性呈现下降的趋势;两株系的可溶性糖含量变化趋势不同;高质量浓度(8 g·L^(-1))NaCl胁迫时,NY株系的相对电导率和丙二醛含量的增加程度显著低于PT株系,可溶性蛋白、脯氨酸含量以及SOD和CAT活性的增加程度显著高于PT株系。【结论】盐胁迫下,NY株系通过增加渗透调节物质含量,缓解渗透胁迫;通过提高SOD和CAT活性,维持植物体内的活性氧平衡,减少盐胁迫造成的氧化损伤,进而增强了其耐盐能力。

海红果多糖提取工艺及体外抗氧化活性研究

目的:探讨海红果多糖(polysaccharide from Malus prunifolia Borkh,PFM)提取工艺条件及其体外抗氧化活性。方法:采用三因素三水平正交试验设计,考察提取温度、时间和料液比3个因素对海红果多糖提取工艺的影响;以VC为对照,应用DPPH法测定海红果多糖清除有机自由基能力、ABTS法测定其总抗氧化能力、Fenton反应测定其清除羟自由基能力。结果:PFM最佳提取工艺条件为提取温度90℃、提取时间6h、料液比1:10(g/mL),此条件下PFM得率为6.75%;PFM对羟自由基具有较强的清除作用(P<0.05),效果优于清除DPPH自由基和ABTS+自由基,但弱于VC。结论:优化海红果提取工艺得到的PFM具有较强的体外抗氧化活性。

海红果多酚提取工艺优化

目的:优化海红果多酚的提取工艺。方法:在单因素试验基础上,选择乙醇体积分数、提取温度、提取时间为自变量,多酚得率为响应值,采用Box-Behnken试验设计法,研究各自变量及其交互作用对海红果多酚得率的影响。利用SAS软件得到回归方程的预测模型,并进行响应面分析。结果:海红果多酚提取的最佳条件为乙醇体积分数52.4%、提取温度79℃、提取时间3.2h,海红果多酚得率9.25mg/g。结论:实际值与模型预测值偏差为0.22%,证明所选工艺条件为最佳工艺条件。

农杆菌介导三价融合基因Rirol转化八棱海棠的研究

研究了以口蹄疫病毒FMDV 2A序列融合多基因在八棱海棠遗传转化上的应用,将DREB,IRT1和rolC融合三价基因(Rirol)通过农杆菌介导法转化八棱海棠,获得了一批nptⅡ抗性植株,经报告基因检测、PCR和Southern杂交分析证明融合基因成功导入到八棱海棠中。对转基因八棱海棠相关性状分析表明,转基因八棱海棠比对照具有较强的耐盐性,在表型上,表现节间缩短,分枝性强,侧根发达,证明外源融合基因在转基因植株中得到表达。试验初步证明了利用FMDV 2A序列进行多基因转化八棱海棠的可行性,为苹果等果树多基因转化提供了新的思路和途径。

八棱海棠中转录因子基因MrDREBA6的克隆及表达分析

DREB类基因是植物中重要的一类转录因子基因,其编码的产物广泛参与生长发育和各类生理过程。根据拟南芥和水稻DREB类基因序列,设计2个兼并引物,利用RACE法从八棱海棠cDNA文库中扩增出一编码DREB类转录因子的cDNA序列,命名为MrDREBA6。从cDNA序列、推测的氨基酸序列、进化树、功能域和分子结构模型进行预测和较为全面的分析,表明MrDREBA6属于DREB类转录因子的A6亚族,蛋白质三级结构与AtRAP2.4和AtERF1相似。荧光定量PCR分析MrDREBA6在各种处理下表达水平显示,MrDREBA6受到PEG、ABA、高盐和低温的诱导表达。另外,组织表达特异性检测表明,正常生长条件下MrDREBA6基因在叶中表达较高,在根和茎中的表达量略低。

将菜豆几丁酶基因导入苹果砧木的研究

以苹果砧木八楞海棠（Ｍａｌｕｓｍｉｃｒｏｍａｌｕｓ）为实验材料，用微束激光穿刺法将菜豆几丁酶基因导入苹果叶片，成功地获得了转基因植株。实验结果表明，以苗龄２６天的小苗上部刚展开的叶片再生频率可达１００％。经高渗缓冲液预处理后用激光微束穿刺导入外源ＤＮＡ可得到较高的转化频率。在１５０个再生叶片中经卡那霉素筛选得到２５株绿苗，经ＰＣＲ扩增检测，３株呈阳性结果，表明外源几丁酶基因已整合到苹果的基因组ＤＮＡ中。

海红果酚类物质种类及其抗氧化能力的研究

本文旨在探讨海红果抗氧化活性及其酚类物质组成,利用超声波法提取海红果不同部位的抗氧化物质并测定其总酚和总黄酮含量,应用DPPH·自由基清除能力、ABTS+·自由基清除能力和总还原力三个指标考察其抗氧化活性;利用HPLC法考察海红果酚类物质组成。实验结果发现,去核海红果总酚含量和总黄酮含量分别达160±5.03 mg galic acid q./100 g FW和54.45±1.52 mg rutin eq./100g FW,显著高于海红果皮和果肉,总黄酮含量与三个抗氧化指标均存在显著正相关关系,而总酚含量与三个抗氧化指标存在正相关关系但不显著,表明黄酮类物质对海红果抗氧化活性贡献较大。海红果酚类物质以羟基苯甲酸类(香草酸、没食子酸等)为主,海红果皮中黄酮醇类含量最高,黄烷-3-醇类的儿茶素和表儿茶素只在海红果肉中检出。在所有检出物质中,海红果皮内芦丁含量最高为(819.88±10.17μg/100 g),此外绿原酸等是海红果中重要的酚类组成物质。

西府海棠组织培养体系的建立与优化

以西府海棠成熟果实为外植体,消毒后取其种子进行培养获取无菌苗。以MS为基础培养基,应用双因素完全随机试验方法,研究了不同植物激素及其质量浓度配比对组培苗增殖、离体叶盘愈伤组织诱导及不定芽再生的影响,并研究了不同的IBA质量浓度及光照条件对生根的影响。结果表明:西府海棠最适增殖培养基为MS+6-BA 0.5 mg.L-1+IBA 0.2 mg.L-1,平均增殖倍数为6.30;最适离体叶盘再生培养基为MS+6-BA 4.0 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1;最适生根培养基为1/2 MS+0.3 mg.L-1IBA;弱光比强光更利于组培苗的生根诱导。

紫外分光光度法测定海红果中总黄酮的含量

目的建立海红果中总黄酮含量的测定方法。方法以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法在波长500 nm处测定海红果中的总黄酮。结果芦丁在0.011-0.055 mg/ml浓度范围内线性关系良好,总黄酮平均回收率为100.35%,RSD为1.3%(n=6)。海红干果中总黄酮含量为0.276 0%。结论该方法简便、快速、准确、灵敏,可作为测定海红果中总黄酮含量的方法。

拮抗酵母结合水溶性壳聚糖对海红果采后贮藏品质的影响

为探讨海红果采后贮藏的拮抗酵母复合技术,将人工接种灰葡萄孢(Botrytis cinerea)于海红果果实体内,以罗伦隐球酵母(Cryptococcus laurentii)作为拮抗酵母,筛选出酵母菌生防效果最适浓度。在此基础上,研究拮抗酵母与水溶性壳聚糖(water soluble chitosan,WSC)结合处理对海红果采后常温下贮藏品质的影响。拮抗酵母生防效果浓度筛选试验表明,105~108 CFU/mL酵母溶液均能显著降低海红果采后贮藏过程中的发病率和病斑直径,107 CFU/mL酵母菌溶液作用下的抑菌效果最佳(P<0.05)。海红果贮藏品质试验表明:整个贮藏期,7.50 g/L WSC复合处理组中的丙二醛含量最低,超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性最高;失重率、腐烂率、可溶性固形物和V C均在10.00 g/L WSC复合处理组的作用下效果好;海红果贮藏第9天开始,7.50~10.00 g/L WSC复合处理组的各项指标均显著优于酵母菌单独处理组(P<0.05),但两组的各项指标差异均不显著。考虑成本,107 CFU/mL C.laurentii结合7.50 g/L WSC是海红果采后贮藏的适宜方法,建议在实践中采用。

八棱海棠肌动蛋白基因(MrACT)的克隆及分析

以八棱海棠(Malus micromalus Makino)为材料,抽取RNA,反转录成cDNA。采用cDNA末端快速扩增(RACE)方法,5’-RACE获得长度1121bp的片段、3’-RACE获得883bp的片段,再通过设计引物扩增得到八棱海棠中一种肌动蛋白基因的cDNA的全长序列。该序列全长1134bp,推测其编码377个氨基酸,等电点为5.16,其编码的氨基酸与拟南芥(Arabidopsis thaliana)actin7编码的氨基酸只有2个氨基酸差别。通过对八棱海棠MrACT基因的表达分析,发现在不同组织中,该基因的表达水平没有明显差异,本文为进一步利用RT-PCR技术,以MrACT基因为内标,研究八棱海棠其他基因的丰度打好基础。

海红果无硫护色剂配方的响应面法优化

为解决海红果在加工过程中极易发生褐变的问题,开发海红果无硫护色剂,选取护色剂柠檬酸、L-半胱氨酸、氯化钠为影响因子,以海红果的褐变度为响应值。在单因素试验的基础上,采用Design-Expert V8试验设计,构建二次多项式回归方程模型,进行响应面分析。结果表明,护色剂对海红果色泽的影响程度依次为:L-半胱氨酸>氯化钠>柠檬酸,复合护色剂的最优配方为0.06%L-半胱氨酸、1.68%氯化钠、0.64%柠檬酸,在此条件下,加工的海红果护色效果好。

不同继代培养次数对苹果八棱海棠离体培养和遗传转化的影响

以苹果八棱海棠离体新梢和幼叶为外植体,研究不同继代次数对其离体繁殖、再生和遗传转化的影响。结果表明,随着继代培养次数的增加,继代10次和48次的八棱海棠离体增殖倍数、生根能力、不定芽的再生频率、每外植体再生芽数和GUS基因瞬时表达率均显著高于继代5次的;继代10次的增殖倍数和GUS阳性率明显多于继代48次的,其它指标相互间差异不显著;说明继代10次的芽苗较适合用于八棱海棠离体培养的外殖体材料,其幼叶较适于遗传转化研究。