胃癌裸大鼠移植瘤淋巴管内皮细胞的分离培养与鉴定

目的建立一个稳定的大鼠胃癌移植瘤新生淋巴管内皮细胞(LEC)培养体系。方法SGC7901胃癌细胞被接种到4周龄的裸大鼠足垫,瘤周围注射1%的Evans蓝显示淋巴管,显微解剖淋巴管,应⒚免疫磁珠法分选纯化LEC后在EGM-2培养液中培养,细胞免疫组化法检测LEC特异性标记物淋巴管内皮透明质酸受体1(LYVE-1)、膜糖蛋白(podoplanin)、血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)的表达,以管腔形成实验判定LEC能否形成淋巴管样结构。结果成功构建裸大鼠胃癌移植瘤动物模型,显微解剖获得瘤周淋巴管。免疫磁珠法分选LEC,其纯度为95%,活细胞数大于70%。免疫组织化学检测表明,LEC表达VEGFR-3、podoplanin和LYVE-1。在Matrigel基质胶上,LEC能形成管腔样结构。结论淋巴管解剖和免疫磁珠法可成功分选胃癌移植瘤新生淋巴管内皮细胞,从而建立一种简便和稳定的LEC培养体系。