宫颈癌组织中maspin、AKT、p-AKT表达变化及其与肿瘤微淋巴管密度的相关性

目的观察宫颈癌组织中maspin、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的表达变化,并分析其与肿瘤微淋巴管密度(LMVD)的相关性。方法收集127例份宫颈石蜡组织标本,其中慢性宫颈炎组织20例份(炎症组)、CINⅠ级组织20例份(CIN1组)、CINⅡ级组织20例份(CIN2组)、CINⅢ级组织20例份(CIN3组)、宫颈癌组织47例份(宫颈癌组,其中无淋巴结转移32例为宫颈癌1组、有淋巴结转移15例为宫颈癌2组)。采用免疫组化SP法检测各组maspin、AKT、P-AKT,测算肿瘤微淋巴管密度(LMVD)。结果宫颈癌1组、宫颈癌2组maspin蛋白阳性表达比例低于其余各组(P均<0.05)。宫颈癌1组、宫颈癌2组AKT、p-AKT阳性表达比例高于其余三组(P均<0.05)。宫颈癌2组p-AKT阳性表达比例高于宫颈癌1组(P<0.05)。宫颈癌组织中maspin与AKT表达呈负相关关系(r_s=-0.472,P=0.001),maspin与p-AKT表达也呈负相关关系(r_s=-0.598,P=0.000)。宫颈癌1组、宫颈癌2组LMVD分别为(19.44±2.95)、(23.24±2.46)支/mm^2,淋巴结转移与LMVD呈正相关关系(r_s=0.44,P=0.000)。宫颈癌组织中LMVD与maspin表达呈负相关关系(r_s=-0.554,P=0.000),LMVD与p-AKT表达呈正相关关系(r_s=0.39,P=0.007)。结论宫颈癌组织中maspin表达下调,AKT、p-AKT表达上调,且maspin表达与AKT、p-AKT表达均呈负相关关系;宫颈癌组织中LMVD与maspin表达呈负相关关系,LMVD与p-AKT表达呈正相关关系。maspin表达下调可能参与了宫颈癌的发生发展,机制可能与AKT通路异常激活、促进肿瘤微淋巴管生成有关。

maspin mRNA和蛋白在胃癌中的表达及意义

目的:研究胃癌及正常胃黏膜中maspin的表达,并探讨其与临床病理特征的关系。方法:应用免疫组化S-P法检测胃管状腺癌(30例)、胃印戒细胞癌(30例)、正常胃黏膜组织(20例)中maspin的蛋白表达水平;同时应用半定量逆转录酶链反应(RT-PCR)检测正常胃黏膜组织和胃癌组织中maspin mRNA的转录水平。结果:在胃管状腺癌、胃印戒细胞癌、正常胃黏膜组织中,maspin蛋白阳性表达率分别为50%、46.7%、90%。正常胃黏膜组织maspin mRNA相对表达量明显高于胃癌组织(P<0.01)。maspin蛋白的表达与侵润深度、淋巴结转移相关,而与肿块的大小和TNM分期无关。Maspin mRNA的水平和蛋白的表达影响胃癌的润深度、淋巴结转移,而对肿块的大小和TNM分期无影响。结论:maspin基因的蛋白和mRNA在胃癌中表达下调可能在胃癌的发生发展中起着重要的作用,maspin的表达可能对胃癌的侵润转移具有抑制作用。

抑癌基因maspin在肝癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨抑癌基因maspin在肝癌组织中的表达及其临床意义。方法选取肝癌组织及其癌旁肝组织各32例,另选择正常肝脏组织30例作为对照,采用免疫组化法检测3种组织中maspin基因的表达情况,并分析maspin基因表达与肝癌临床参数的关系。结果肝癌组织maspin基因阳性率(28.1%)显著低于癌旁组织(62.5%)和正常肝组织(86.7%);肝癌组织中maspin基因表达阳性率与肿瘤分化程度、有无肝内外转移有关(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤直径、TMN分期和有无门静脉侵犯无关(P>0.05)。结论 maspin基因在肝癌组织中呈低表达,其表达情况可作为判断肝癌进展情况和恶性程度的指标之一。

三维彩色能量超声联合孕妇血浆中u-maspin基因监测子痫前期孕妇风险的研究

目的探讨三维彩色能量超声(3D-CPA)检测胎盘组织血流灌注联合检测孕妇血浆中u-maspin基因含量以监测子痫前期患者风险的临床价值。方法正常晚期妊娠者15例为对照组,子痫前期轻度组18例,子痫前期重度组22例,对孕妇胎盘床血管进行三维重建,Vocal软件测量血管化指数(VI)、血流指数(FI)、血管化血流指数(VFI)。抽取孕妇血浆,应用甲基特异性PCR的原理及荧光定量PCR的方法,相对定量法检测u-maspin基因的含量。结果子痫前期轻度和重度组的VI、FI、VFI较对照组减小,子痫前期重度组的VI、FI、VFI较子痫前期轻度组减小(均P<0.01)。40例子痫前期患者均检出u-maspin基因,u-maspin基因含量子痫前期轻度组是对照组的2.39倍,子痫前期重度组是对照组的5.78倍。结论 3D-CPA可更早更精确地提示子痫前期患者的胎盘血流灌注情况,孕妇外周血中u-maspin基因含量能够反映子痫前期患病的严重程度,二者结合可以更好监测子痫前期患者风险,指导临床。

RNA干扰maspin基因对胃癌细胞株MKN-28凋亡的影响

目的:探讨转染maspin特异性短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)重组质粒对胃癌细胞株MKN-28凋亡的影响。方法:设计并合成针对maspin基因的shRNA,并将其与真核表达载体pGenesil-1.1连接,构建重组质粒pGenesil-maspin。应用RT-PCR和Western印迹法检测转染重组质粒后MKN-28细胞中maspin、bcl-2和bax mRNA及蛋白的表达变化,应用FCM法检测转染重组质粒对MKN-28细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响。结果:成功构建maspin特异性shRNA重组质粒pGenesil-maspin1、pGenesil-maspin2及pGenesil-HK(阴性对照);pGenesil-maspin成功转染后可明显下调胃癌细胞MKN-28中maspin和bax mRNA及蛋白的表达水平(P<0.01),并上调bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01);重组质粒转染后,MKN-28细胞的细胞周期呈现G0/G1期细胞减少(P<0.01),细胞凋亡率下降(P<0.01)。结论:外源性maspin shRNA转染MKN-28细胞后能下调maspin的表达,抑制胃癌细胞的凋亡,且使细胞周期分布发生改变;其分子机制可能与上调bcl-2和下调bax的表达有关。

maspin基因启动区的初步鉴定

目的:研究maspin基因表达的调控机制。方法:利用PCR技术扩增maspin基因5'上游启动区860bp(-765～+95bp)不同的缺失片段,并将它们分别与荧光素酶(LUC)报告基因相连,构建了6种maspin-LUC报告基因表达质粒,通过转染实验检测maspin启动区不同长度片段在雄激素依赖性前列腺癌细胞(LNCaP)和雄激素非依赖性前列腺癌细胞(PC-3M)中驱动荧光素酶表达的活性。并转染雄激素表达受体(AR)到PC-3M细胞,观察雄激素及其受体对不同片段表达活性的作用。结果:maspin基因启动区(-312～247bp)之间含有与雄激素受体相关的负性调控元件,在(+14～95bp)之间含有一个功能性的中文(Sp1)调控元件。结论:maspin基因的表达受雄激素受体及Sp1的调节。

maspin、Mn-SOD表达与鼻咽癌组织放疗敏感相关性研究

目的研究maspin及Mn-SOD在放射治疗鼻咽癌中的表达,探讨其在放射治疗鼻咽癌中的意义。方法取60例2006年第1次入院放射治疗鼻咽癌,运用原位杂交方法检测放射治疗鼻咽癌中maspin及Mn-SOD mRNA的表达。结果在放疗敏感及放疗抗拒鼻咽癌中,maspin mRNA中度及强阳性表达率分别为70.00%和42.50%,Mn-SOD mRNA中度及强阳性表达率分别为55.00%和40.00%,差异有统计学意义。在放疗抗拒鼻咽癌中,maspin及Mn-SOD mRNA中度及强阳性表达率均与T分期呈正相关,T3和T4期中表达率分别为63.16%和63.16%,T1和T2期中表达率分别为23.81%和19.05%。在有、无远处转移中,maspin mRNA中度及强阳性的表达率分别为72.73%和31.03%,Mn-SOD mRNA中度及强阳性表达率分别为81.82%和24.14%,差异有统计学意义。结论 maspin、Mn-SOD参与了放射抗拒鼻咽癌的发展。

Maspin在非小细胞肺癌中的表达及与p53的相关性

目的探讨maspin在非小细胞肺癌中的表达及其与p53的关系。方法对99例非小细胞肺癌组织maspin及p53蛋白的表达情况通过免疫组化法进行检测,分析其临床病理意义及相关性。结果 maspin蛋白表达与肿瘤病理类型、肿瘤分化程度、淋巴结状态及临床分期相关(P<0.05)。而p53蛋白的表达则与临床分期、淋巴结状态相关(P<0.05)。maspin与p53蛋白的表达呈负相关(γ=-0.180),但无统计学意义(P=0.075)。结论 Maspin及p53蛋白的表达在非小细胞肺癌的发生、发展过程中起重要作用,但本研究未发现两者具有统计学意义的相关性。

Maspin基因及其在胃肠道肿瘤中的研究进展

Maspin是一种抑癌基因,在多种肿瘤组织中有不同程度的表达,具有诱导细胞凋亡,抑制肿瘤细胞浸润、转移及肿瘤组织新生血管生成的作用。近年的研究多集中于Maspin基因结构、功能及其在不同肿瘤中作用机制的探讨。Maspin在不同肿瘤中表达趋势不完全相同,探讨其在胃肠道肿瘤中的表达及其相关机制,为分析胃肠道肿瘤的耐药机制及基因靶向治疗提供了一定的理论依据。

肿瘤抑制蛋白Maspin在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨Maspin蛋白在口腔鳞状细胞癌(OSCC)发生发展过程中的作用,为临床应用提供理论依据。方法采用鼠抗人Maspin单克隆抗体及SP免疫组化法检测45例OSCC、33例癌旁组织及15例正常口腔组织中Maspin蛋白的表达水平,用半定量积分法判断结果。结果在正常口腔组织、癌旁组织和OSCC组织中Maspin蛋白表达阳性率分别为86.67%(13/15)、72.73%(24/33)和37.78%(17/45)。Maspin蛋白在OSCC组织、癌旁组织和正常口腔组织中表达逐渐增高,其中OSCC组织和正常口腔组织、OSCC组织和癌旁组织、癌旁组织和正常口腔组织之间表达差异有统计学意义(P<0.05)。Maspin蛋白的表达与OSCC淋巴结转移和组织学分级有关(P<0.05),与TNM分期无关(P>0.05)。结论Maspin蛋白在OSCC的发生发展过程中可能起着重要作用,检测OSCC组织中Maspin蛋白的表达水平可能有助于对淋巴结转移潜能的预测。

maspin基因的抑癌作用机制及其在肝癌中作用的研究进展

maspin是一种肿瘤抑制基因,该基因具有诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞运动、侵袭、转移和肿瘤新生血管生成等作用。maspin基因表达受体内多条途径的精确调控,但其在肝癌中作用的研究较少。该文就maspin基因的抑癌作用机制及其在肝癌中作用的研究进展作一综述。

Maspin基因在乳腺癌骨髓微小转移检测中的应用

目的研究maspin基因在乳腺癌患者骨髓微小转移检测中的应用价值以及其与临床病理因素之间的相关性。方法采用巢式逆转录-聚合酶链反应检测20例良性乳腺疾病和67例乳腺癌患者骨髓中maspin mRNA的表达。结果对照组骨髓中均未检测出maspin mRNA,而在乳腺癌患者骨髓中有30例(44.8%)检测到maspin mRNA。乳腺癌患者骨髓中maspin mRNA表达率随肿块直径增大、临床分期进展而升高,但均无显著性差异;阳性淋巴结个数0～3个组和4个以上组maspin mRNA表达率分别为36.5%和73.3%,差异有显著性(χ2=6.374,P=0.012);0～1期组和2～4期组maspin mRNA表达率分别为22.2%和53.1%,差异有显著性(χ2=5.063,P=0.024);ER阴性组(61.5%)maspin mRNA表达率高于ER阳性组(34.1%)(χ2=4.828,P=0.028);如将患者按复发风险分组,maspinm RNA表达随复发风险性增高而升高,分别为低危组16.7%、中危组40.5%和高危组72.2%(χ2=9.587,P=0.008)。结论Maspin基因用于乳腺癌患者骨髓微小转移检测具有很高的特异性,乳腺癌患者骨髓中maspin mRNA表达与淋巴结转移程度、疾病进展有相关性并可能预示高复发风险。

Maspin基因在不同转移习性的人鼻咽癌细胞株中表达水平的研究

目的:在mRNA和蛋白水平检测5种不同转移习性的人鼻咽癌细胞株中Maspin基因表达的差异,探讨Maspin基因与已知转移习性人鼻咽癌细胞株之间的相关性,为鼻咽癌发生转移的可能机制及临床预测转移风险提供理论基础。方法:体外培养SUNE-1-5-8F、SUNE-1、CNE-2Z、CNE-1、SUNE-1-6-10B 5株不同转移习性的人鼻咽癌细胞株。用RT-PCR及Western blot 2种方法在mRNA和蛋白水平检测5种人鼻咽癌细胞株中Maspin基因表达情况。结果:Maspin基因在SUNE-1-5-8F、SUNE-1、CNE-1及SUNE-1-6-10B细胞株均有不同程度表达,差异无统计学意义(P>0.05),在CNE-2Z细胞株中不表达,且在mRNA和蛋白水平Maspin基因表达具有一致性;Maspin基因在不同转移习性人鼻咽癌细胞株中mRNA和蛋白表达量总体存在差异(P<0.05),但表达量不随鼻咽癌细胞株转移习性增高而降低(P>0.05)。结论:Maspin基因在不同转移习性的人鼻咽癌细胞株中mRNA和蛋白表达量不同;Maspin基因可能与人鼻咽癌细胞株的转移潜能无相关性。

食管鳞癌组织中肿瘤抑制基因 Maspin 的表达

采用免疫组织化学（ＡＢＣ）法检测河南食管癌高发区新乡市居民食管鳞癌组织中肿瘤抑制基因Ｍａｓｐｉｎ的表达。结果：食管癌组织中Ｍａｓｐｉｎ免疫阳性表达率为１２％（３／２５），免疫阳性反应主要位于癌组织的细胞浆中，其中２例呈局灶型分布，１例呈弥漫型分布。提示：肿瘤抑制基因Ｍａｓｐｉｎ可能在食管癌变过程中起一定的作用。

乳腺癌组织中Maspin蛋白表达与maspin基因启动子甲基化关系的研究

背景与目的:探讨乳腺癌与maspin基因失活之间的关系。材料与方法:采用免疫组织化学方法检测30例乳腺癌患者癌组织、癌近旁组织和癌远旁组织中Maspin蛋白的表达情况,用亚硫酸氢钠测序法检测乳腺癌组织maspin启动子CpG岛的甲基化情况。结果:乳腺癌组织中的Maspin蛋白表达明显低于癌近旁组织(P<0.05)和癌远旁组织(P<0.01),乳腺癌组织maspin基因启动子CpG岛甲基化率为98.72%。结论:乳腺癌的发生与maspin基因失活关系密切,启动子异常甲基化可能是maspin基因在乳腺癌中失活的重要途径。

食管和贲门癌组织中肿瘤抑制基因maspin的表达

采用免疫组织化学（ＡＢＣ）法检测食管癌高发区５５例食管和贲门癌组织中肿瘤抑制基因ｍａｓｐｉｎ的表达。结果表明，食管癌组织中ｍａｓｐｉｎ免疫阳性表达率为１０％（３／３０），免疫阳性反应主要位于癌组织的细胞浆中；贲门癌组织中ｍａｓｐｉｎ免疫阳性表达率为２４％（６／２５），免疫阳性反应主要位于癌组织的细胞核中。提示：肿瘤抑制基因ｍａｓｐｉｎ可能在食管和贲门癌变过程中起一定的作用。

maspin基因在涎腺肿瘤中的表达

目的探讨maspin基因在不同的涎腺肿瘤中的表达差异及其在鉴别诊断中的应用价值。方法应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP)显色技术检测maspin基因在多形性腺瘤(PA)、腺样囊性癌(ACC)、黏液表皮样癌(MEC)和腺泡细胞癌(ACCa)中的表达。结果 maspin基因在4种涎腺肿瘤中均有表达,其中在PA中阳性表达率为92%,ACC中阳性表达率为36%,MEC中阳性表达率为45%,ACCa中阳性表达率为50%。maspin基因在PA中的阳性表达率显著高于ACC、MEC和ACCa,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 maspin基因表达与涎腺肿瘤的发生和发展有一定相关性,对涎腺肿瘤之间的鉴别诊断有一定参考意义。

Maspin基因甲基化对口腔黏膜鳞癌细胞的调控作用

目的:分析口腔黏膜鳞癌细胞增殖过程中Maspin基因甲基化的调控作用机制,为相关研究及临床治疗提供借鉴。方法:鳞状细胞癌HIOEC-B(a)P细胞系随机分为4组:5-氮-2-脱氧胞苷+曲古抑菌素A(ADC+TSA)阴性组、低(0.1μmol/L+0.05μmol/L)、中(1μmol/L+0.5μmol/L)和高剂量组(10μmol/L+5μmol/L)。以正常口腔黏膜上皮细胞作为对照组。实时定量PCR检测各组细胞Maspin基因的甲基化程度,MTT法检测各组细胞的增殖情况,4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色检测细胞凋亡。采用SPSS20.0软件包对数据进行单因素方差分析。结果:与对照组相比,癌细胞的Maspin基因甲基化程度显著增强(P<0.01),与阴性组相比,中剂量和高剂量组Maspin基因甲基化程度显著减弱(P<0.05,P<0.01),低、中、高剂量组的细胞增殖抑制率显著高于阴性组(P<0.05,P<0.01)。随着药物剂量的提高,细胞凋亡程度逐渐增加(P<0.05)。结论:Maspin基因甲基化可能参与口腔黏膜鳞癌细胞的增殖过程。

胃窦部腺癌和慢性胃炎组织 Maspin 的表达

采用免疫组化方法，取胃窦部粘膜上皮，对２９例慢性胃炎和腺癌组织肿瘤抑制基因Ｍａｓｐｉｎ的表达变化进行比较研究。结果：Ｍａｓｐｉｎ蛋白在慢性胃炎中的表达率为５３％（８／１５），在胃癌中的表达率为２１％（３／１４），两者差异有显著性（Ｐ＜０．０５），且Ｍａｓｐｉｎ蛋白在慢性胃炎和腺癌病变中的免疫反应类型不同，前者免疫反应部位以胞浆为主，后者主要位于胞核。提示：Ｍａｓｐｉｎ的表达是胃癌癌变早期阶段的一种重要分子学改变。

maspin CD_(44)V_6在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:探讨maspin及CD44V6在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义,分析maspin与CD44V6的表达有无相关。方法:应用免疫组织化学PictureTM通用型二步法检测94例NSCLC组织、54例正常支气管粘膜组织、28例肺良性病变中maspin和CD44V6的表达情况。结果:maspin在正常支气管粘膜组织及肺良性病变中的阳性表达率分别为100%和89.28%,在肺癌组织中的阳性表达率为54.26%,正常支气管粘膜组织与肺癌之间、肺良性病变与肺癌之间的阳性表达率差异有显著意义(P<0.05),maspin阳性表达率与NSCLC临床分期、淋巴结转移成负相关,与病理类型、组织分化程度无关。CD44V6在NSCLC中的阳性表达率68.09%,与临床分期、淋巴结转移成正相关,与病理类型、组织分化程度无关;而在正常支气管粘膜组织及肺良性病变中无阳性表达。maspin基因表达与CD44V6呈负相关(r=-0.213,P<0.01)。结论:maspin和CD44V6在肺癌的发生、发展、转移过程中发挥调控作用,可作为判断肺癌预后和转移的重要生物学指标。