目的寻找基于蛋白质组学技术早期、快速诊断糖尿病肾病的尿蛋白标志物模型,并探讨其临床应用价值。方法应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption-ionization time of flight mass spectrometry,SELD...目的寻找基于蛋白质组学技术早期、快速诊断糖尿病肾病的尿蛋白标志物模型,并探讨其临床应用价值。方法应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption-ionization time of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术及Au芯片(proteinchipgoldarray)检测292例患者尿蛋白质谱,包括129例糖尿病肾病和163例对照者(61例糖尿病及102名健康体检者)。获得的蛋白质谱数据用Biomaker Wizard3.1软件筛选差异蛋白,通过生物标志模型软件(biomarker patterns software,BPS)建立决策树辨别分析模型,评价其临床诊断价值。对部分筛选的差异蛋白通过比对标准蛋白质谱数据,根据分子量大小进行初步鉴定。结果糖尿病肾病患者与对照者尿液中差异表达的蛋白质峰有40个,其丰度值两组间比较差异均有统计学意义(t值为-9.81~24.52,P均〈0.05),通过BPS自动筛选66916质荷比(m/z)蛋白建立的模型诊断糖尿病肾病敏感度为98.7%(78/79),特异度98.2%(111/113)。对糖尿病和糖尿病肾病患者尿蛋白质谱图分析后得到24个差异蛋白质峰,其丰度值两组间比较差异均有统计学意义(t值为-6.95~14.45,P均〈0.05),BPS筛选4008、11619、66916m/z蛋白建立模型区分糖尿病与糖尿病肾病的敏感度(129/129)和特异度(61/61)均为100%。通过比对标准蛋白质谱数据,糖尿病肾病患者尿差异蛋白中m/z 11619、23529、66916和79378,可能为β2-微球蛋白、α1-微球蛋白、白蛋白和转铁蛋白。结论基于SELDI-TOF-MS及Au芯片技术检测尿蛋白质谱在鉴别蛋白尿来源、糖尿病肾病的早期快速诊断及肾脏损害评估具有重要应用价值。展开更多
目的观察早期糖尿病肾病大鼠24 h尿蛋白(U Pro)及肾组织中nephrin、podocin基因表达,探讨nephrin、podocin分子在糖尿病肾病蛋白尿发生过程中的相互作用。方法将SD雄性大鼠随机分为6组:肾切组、模型组、厄贝沙坦组、中药低、中、高剂量...目的观察早期糖尿病肾病大鼠24 h尿蛋白(U Pro)及肾组织中nephrin、podocin基因表达,探讨nephrin、podocin分子在糖尿病肾病蛋白尿发生过程中的相互作用。方法将SD雄性大鼠随机分为6组:肾切组、模型组、厄贝沙坦组、中药低、中、高剂量组,各组相应药物剂量灌胃。于第6周末检测各组大鼠24 h U Pro量、肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测肾皮质nephrin、podocin表达水平。结果厄贝沙坦组、中药低、中剂量组与模型组比较,U pro量显著下降(P<0.05)。各治疗组与模型组比较,Scr、BUN明显降低(P<0.05),且nephrin、podocin表达显著增加(P<0.01);24 h U Pro与nephrin、podocin表达量呈负相关,nephrin与podocin表达量呈正相关。结论糖尿病大鼠肾小球上皮细胞足突nephrin、podocin表达的减少可能是糖尿病肾病蛋白尿发生的机制之一。展开更多
文摘目的寻找基于蛋白质组学技术早期、快速诊断糖尿病肾病的尿蛋白标志物模型,并探讨其临床应用价值。方法应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption-ionization time of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术及Au芯片(proteinchipgoldarray)检测292例患者尿蛋白质谱,包括129例糖尿病肾病和163例对照者(61例糖尿病及102名健康体检者)。获得的蛋白质谱数据用Biomaker Wizard3.1软件筛选差异蛋白,通过生物标志模型软件(biomarker patterns software,BPS)建立决策树辨别分析模型,评价其临床诊断价值。对部分筛选的差异蛋白通过比对标准蛋白质谱数据,根据分子量大小进行初步鉴定。结果糖尿病肾病患者与对照者尿液中差异表达的蛋白质峰有40个,其丰度值两组间比较差异均有统计学意义(t值为-9.81~24.52,P均〈0.05),通过BPS自动筛选66916质荷比(m/z)蛋白建立的模型诊断糖尿病肾病敏感度为98.7%(78/79),特异度98.2%(111/113)。对糖尿病和糖尿病肾病患者尿蛋白质谱图分析后得到24个差异蛋白质峰,其丰度值两组间比较差异均有统计学意义(t值为-6.95~14.45,P均〈0.05),BPS筛选4008、11619、66916m/z蛋白建立模型区分糖尿病与糖尿病肾病的敏感度(129/129)和特异度(61/61)均为100%。通过比对标准蛋白质谱数据,糖尿病肾病患者尿差异蛋白中m/z 11619、23529、66916和79378,可能为β2-微球蛋白、α1-微球蛋白、白蛋白和转铁蛋白。结论基于SELDI-TOF-MS及Au芯片技术检测尿蛋白质谱在鉴别蛋白尿来源、糖尿病肾病的早期快速诊断及肾脏损害评估具有重要应用价值。
文摘目的观察早期糖尿病肾病大鼠24 h尿蛋白(U Pro)及肾组织中nephrin、podocin基因表达,探讨nephrin、podocin分子在糖尿病肾病蛋白尿发生过程中的相互作用。方法将SD雄性大鼠随机分为6组:肾切组、模型组、厄贝沙坦组、中药低、中、高剂量组,各组相应药物剂量灌胃。于第6周末检测各组大鼠24 h U Pro量、肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测肾皮质nephrin、podocin表达水平。结果厄贝沙坦组、中药低、中剂量组与模型组比较,U pro量显著下降(P<0.05)。各治疗组与模型组比较,Scr、BUN明显降低(P<0.05),且nephrin、podocin表达显著增加(P<0.01);24 h U Pro与nephrin、podocin表达量呈负相关,nephrin与podocin表达量呈正相关。结论糖尿病大鼠肾小球上皮细胞足突nephrin、podocin表达的减少可能是糖尿病肾病蛋白尿发生的机制之一。