黄曲霉毒素B_1抗体和纳米金颗粒的相互作用机理

研究了纳米金标黄曲霉毒素B1单克隆抗体（McAb）探针的制备及其标记机理,确定了稳定标记5种不同粒径金溶胶（10.7～67.4 nm）所需McAb的最适质量浓度,分别为0.07,0.051,0.033,0.019,0.012mg/mL,作用时间为5 min,pH为7.4.对金标探针复合物进行透射电镜、红外光谱和免疫反应性鉴定的结果表明,与未标记抗体相比,抗体探针的免疫亲和常数、效价和常温贮藏稳定性得到了明显提高.通过荧光光谱和圆二色谱研究纳米金与AFB1单抗McAb的相互作用机理,发现纳米金对McAb产生静态猝灭,猝灭的速率常数随着温度升高而降低.确定了结合位点数和结合常数.结果显示,表明McAb的色氨酸残基与纳米金颗粒之间发生了F rster偶极-偶极无辐射能量转移.初步确定反应前后McAb构象组成发生了变化是McAb探针亲和力和稳定性提高的原因.

应用光敏生物素标记探针检测杂交瘤细胞中小鼠白血病病毒

采用BamHⅠ酶切和琼脂糖凝胶电泳技术，从重组质粒pSF11中回收5kb小鼠白血病病毒（MuLv）DNA片段，用光敏生物素标记制备DNA探针，采用斑点杂交法检测杂交癌细胞，McAb纯品以及SP2／0细胞中的MuLv。结果表明，此探针特异性好，灵敏度可达25pg。在检测的13株杂交瘤细胞和2株SP2／0细胞中分别有5株和1株为MuLv阳性，在McAb纯品中未查出MuLv。

应用光敏生物素探针检测杂交瘤及细胞中的小鼠白血病病毒

采用ＢａｍＨＩ酶切和琼脂糖凝胶电泳技术，从重组质粒ＰｓＦｌｌ中回收５ｋｂ小鼠白血病病毒（ＭｕＬＶ）ＤＮＡ片段，经光敏生物素标记后制备ＤＮＡ探针，以斑点杂交法检测杂交瘤细胞、ＭｃＡｂ纯品以及ＳＰ２／０细胞中的ＭｕＬｖ。结果表明：此探针灵敏度可达２５ｐｇ，特异性好，在被检测的１３株杂交瘤细胞和２株ＳＰ２／０细胞中分别查出５株和１株为ＭｕＬｖ阳性，ＭｃＡｂ纯品中未发现ＭｕＬｖ。

单纯疱疹病毒分子生物学分型方法的研究

联合运用HSV-1和HSV-2型特异性核酸探针对28株HSV临床分离株做了鉴定分型,并与应用HSV型特异性单克隆抗体的三种免疫学方法的检测结果进行了比较。核酸探针与单克隆抗体之间的符合率为100%,但分型率不同,核酸探针为100%,单克隆抗体为64—82%。研究结果表明,本实验所建立的HSV-McAb-APAAP桥联免疫酶染技术具有简便、敏感、实用的特点。