APPLICATION OF MEDIAN-EFFECT IN QUANTITATIVE ANALYSIS OF ANTITUMOR DRUGS IN VITRO

Objective: To analyze quantitatively the synergistic and antagonistic effects of combined oxymatrine (OMT) and 5-fluorouracil (5-GU) on a cell line of human liver cancer (HepG2) with median-effect principle in vitro. Methods: The median-effect principle and MTT method were used in the quantitative analysis of effects of the two drugs. Results: Cytotoxic activity of the individual drugs enhanced as drug concentration increased. As fa=0.41, a CI equal to 1 indicated additivity; fa<0.41, a CI less than 1 indicated synergy; and fa>0.41, a CI greater than 1 indicated antagonism. The sequence of administration did not influence the cytotoxic activity of the combined antitumor drugs. The ratio of drug concentration was a factor that can influence the killing effect. Conclusion: The combined drugs interaction (CI<1) was synergistic at lower concentration and antagonistic at higher concentration. The ratio of drug concentration is a factor that can influence the killing effect.

奥曲肽联合奥美拉唑体外对胃癌细胞株SGC-7901生长的影响

目的探讨联合奥曲肽与奥美拉唑在体外对人胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响及其可能的作用机制。方法采用MTT法检测奥曲肽和奥美拉唑对SGC-7901细胞生长的影响,根据中效原理判断联合用药的效果;流式细胞仪检测联合用药对SGC-7901细胞的细胞周期、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。结果奥曲肽联合奥美拉唑在体外能显著抑制SGC-7901细胞的生长,联合用药对SGC-7901细胞的抑制作用强于单独用药,两药联合应用在高水平效应合用指数小于1,具有明显的协同作用;联合用药能使SGC-7901细胞周期停滞于G0/G1期,下调Bcl-2且上调Bax蛋白的表达。结论奥曲肽联合奥美拉唑在体外可以抑制SGC-7901细胞的生长,具有协同效应,其机制可能与下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白表达有关。

金雀异黄素和5-FU对人结肠癌细胞株(SW480)的相互作用的体外观察

目的探讨金雀异黄素(Genistein)和5-氟脲嘧啶(5-FU)合用对人结肠癌细胞株(SW480)的相互作用。方法采用MTT法利用中效原理判定两药合用的效果。结果两种药物单独应用时随着药物剂量的增加其效应增加,合用时两药大剂量时(大于中效浓度)其拮抗作用,小剂量(小于中效浓度)时其有协同作用;两药给药时间及给药顺序都会影响效应的大小。结论上述两种药合用时,大剂量时有拮抗作用小剂量时有协同作用且效应大小与给药时间及给药顺序有关。

芹菜素对人鼻咽癌CNE-2Z细胞化疗敏感性的增强作用

目的观察芹菜素(AP)能否增强人鼻咽癌CNE-2Z细胞对顺铂(DDP)的化疗敏感性。方法采用MTT法对CNE-2Z细胞的增殖抑制率进行检测,中效原理法对联合用药的相互作用进行分析判断;采用流式细胞术和PI/Ho-echst33258荧光双染法检测细胞凋亡;RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2、bax mRNA表达的改变。结果 AP、DDP单用及合用均明显抑制CNE-2Z细胞的生长,且呈剂量依赖性关系,两药合用时在中、高浓度呈协同效应;流式细胞术和荧光双染法结果表明低浓度AP联合DDP更能明显促进肿瘤细胞的凋亡;与单独用药组比较,RT-PCR结果显示联合用药组bcl-2 mRNA表达明显降低,而bax mRNA表达明显增高。结论芹菜素可增强顺铂对CNE-2Z细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡作用,其机制可能与上调bax和下调bcl-2的表达,导致Bcl-2/Bax比值下降有关。

奈达铂联合顺铂体外干预人卵巢癌Skov-3细胞生长的实验研究

目的:研究奈达铂(NDP)联合顺铂(DDP)对人卵巢癌细胞株Skov-3增殖及凋亡的影响,并探讨其抑制增殖及诱导凋亡的机制。方法:采用MTT法检测不同浓度NDP与DDP单独或联合应用对Skov-3细胞的增殖抑制率;采用流式细胞术分析早期凋亡细胞比例;采用RT-PCR和Western blotting法分析增殖相关基因(蛋白)Ki-67及凋亡相关基因(蛋白)Bax、Bcl-2表达的变化。结果:NDP、DDP单独应用及两者联合使用明显抑制Skov-3细胞的生长,且呈剂量依赖性;根据中效原理发现两者联合使用高浓度时呈协同效应;流式细胞术结果表明正常对照组、NDP组、DDP组和联合组细胞早期凋亡比例依次增加;与单独用药组比较,联合用药组Ki-67、Bcl-2基因(蛋白)表达率显著降低,而Bax基因(蛋白)表达显著增高。结论:NDP和DDP联合应用与两药单独应用相比,对Skov-3细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡能力均有明显增强。

5-氟脲嘧啶及丝裂霉素对人胃癌细胞株BGc-823的相互作用

目的 体外观察 5 氟脲嘧啶及丝裂霉素合用对人胃癌细胞株 (BGc 82 3)的相互作用。方法 采用MTT法利用中效原理判定两药合用的效果。结果 两种药单独应用时随着药物剂量增加 ,其效应也增加 ;两药大剂量 (大于中效剂量 )合用时协同作用 (CI<1) ,小剂量 (小于中效剂量 )合用时为拮抗作用 (CI>1) ;两药给药时间次序不同不会影响效应大小。结论 上述两种药合用大剂量是协同小剂量拮抗 ,且效应大小与给药时间次序无关。

奈达铂与顺铂联合应用对人食管癌Eca-109细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究奈达铂(NDP)联合顺铂(DDP)对人食管癌细胞株Eca-109的增殖及凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用MTT法对Eca-109细胞的增殖抑制率进行检测,中效原理法对联合用药的相互作用进行分析判断;采用流式细胞术分析早期凋亡细胞比例;采用RT-PCR和免疫细胞化学分析Ki-67及Bax、Bcl-2表达的变化。结果:NDP、DDP均明显抑制Eca-109细胞的生长,且呈剂量依赖性;两者联合使用时,低浓度时呈拮抗效应,高浓度时呈协同效应;IC50浓度的NDP、DDP和1/2IC50(NDP)+1/2IC50(DDP)对Eca-109细胞的抑制率分别为(41.85±4.1)%,(47.38±2.9)%和(52.45±0.9)%;流式细胞术结果表明正常对照组、NDP组、DDP组、联合用药组细胞早期凋亡率依次增加,单独用药组与联合用药组相比有差异;与单独用药组比较,联合用药组Ki-67、Bcl-2表达率显著降低,而Bax表达显著增高。结论:与两药高浓度单独应用相比,低浓度NDP和DDP联合应用对Eca-109细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡能力均有明显增强。

顺铂、5-氟尿嘧啶、长春新碱配伍对人肝癌细胞株(7721)的相互作用

目的:观察顺铂、5-氛尿嘧啶、长春新碱配伍在体外对人肝癌细胞株(7721)的相互作用.方法:采用MTT法利用中效原理判定两药合用的效果.结果:3种药物单独应用时随着药物剂量增加,其效应也增加;两药大剂量(大于中效剂量)合用时可产生拮抗作用(CI>1);小剂量(小于中效剂量)合用时可产生协同作用(CI>1);两药合用时的浓度比例及给药时间次序不同均会影响效应大小.结论:上述3种药物任何两种合用小剂量产生协同作用,大剂量产生拮抗作用,且效应大小与两药浓度比例及给药时间次序有关.

尼美舒利联合5-Fu对胃癌细胞BGC-823的抗癌作用研究

目的 :研究尼美舒利 (Nimesulide)合用 5 -Fluorouracil(5 -FU)对人胃癌细胞株BGC -82 3的生长抑制作用 ,判断联合用药的效果。方法 :采用MTT法、中效原理等测定药物的体外杀伤作用 ,进行联合用药分析。结果 :尼美舒利合用 5 -FU能显著抑制BGC -82 3的生长 ,当抑制率为 10 -95 %时 ,两药合用时合用指数 (CI) <1,为协同作用 ,使用药浓度减少 1-10倍。结论 :尼美舒利联合 5 -FU能显著增加单用其中一种药物对人胃癌细胞株BGC -82 3的抑制作用 ,两药联合应用时具有较好的协同作用。

体外5-氟脲嘧啶及华蟾素对人胃癌细胞株的相互作用

目的 :体外观察 5 氟脲嘧啶 (5 Fu)及华蟾素合用对人胃癌细胞株 (BGC82 3)的相互作用。方法 :采用噻唑兰 (MTT)法 ,利用中效原理判定两药合用的效果。结果 :两种药单独应用及合用时随着药物剂量和时间增加 ,其效应也增加。结论 :两药合用时是协同作用。

雷公藤红素联合5-氟尿嘧啶在人结肠癌细胞中的相互作用

目的体外观察雷公藤红素与5-氟尿嘧啶(5-FU)联用在人结肠癌HCT-116细胞增殖中的相互作用。方法采用MTT法观察不同浓度雷公藤红素及5-FU单独或联合应用对结肠癌细胞的生长抑制作用,并利用中效原理判断联合用药的效果。结果雷公藤红素和5-FU单独应用时,随药物浓度增加对HCT-116细胞的抑制作用也增加,中效浓度分别为3.533μmol/L,9.254μmol/L,两药联用时在大部分效应范围(0<fa<83%)表现协同作用(CI<1),中效浓度为6.433μmol/L,其中雷公藤红素0.099μmol/L,5-FU6.33μmol/L。两药合用给药时间及次序不同时,合用效应无明显差异。结论上述两种药物联合应用时具有较好的协同效应,且药物效应与给药顺序无关。

二氢杨梅素联合阿霉素抗乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的体外研究

目的体外观察二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DMY)联合阿霉素(Adriamycin,ADM)抗人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的效应。方法采用MTT法观察不同浓度DMY、ADM单独应用对MDA-MB-231细胞生长的抑制作用,并利用中效原理判定两药合用的效应,应用联合作用指数来定量DMY与ADM的联合作用。结果 DMY和ADM对MDA-MB-231细胞有剂量依赖性的增殖抑制作用,作用48h,DMY和ADM的IC50值分别为54.8μg/ml和1.3μg/ml。中效原理分析显示,当抑制效应(Fraction affected,fa)≤0.75时,两药联合应用为协同效应;在相同的抑制效应下可明显降低DMY和ADM单用时的使用剂量。结论 DMY可以增加MDA-MB-231对ADM的敏感性,降低其有效治疗浓度。

紫杉醇联合染料木黄酮对人肝癌细胞株SMMC-7721的作用

目的利用中效原理体外定量分析紫杉醇及染料木黄酮联合应用对人肝癌细胞株SMMC-7721的作用。方法 采用MTT法观察两种药物单用及合用对肝癌细胞株SMMC-7721的抑制率,然后用中效方程计算各自的中效浓度,并计算两种药物合用时的合用指数(CI)。结果 两种药物单独使用时随着药物剂量的增加,其效应也增加,紫杉醇的中效浓度为8.912μmol/L,染料木黄酮的中效浓度为163.680μmol/L。两种药物合用时的中效浓度为58.340μmol/L。大剂量合用(大于中效浓度)时CI<1,表示协同;小剂量合用(小于中效浓度)时CI>1,表示拮抗。结论 紫杉醇联合染料木黄酮对人肝癌细胞株SMMC-7721有抑制作用,两种药物大剂量合用时具有协同作用,小剂量合用时则相互拮抗。

柔红霉素联合枸橼酸他莫昔芬对人乳腺癌细胞MCF-7的协同作用研究

目的：研究柔红霉素（Daunorubicin,DNR）和枸橼酸他莫昔芬（Tamoxifen Citrate,TMX）对人乳腺癌细胞MCF-7的协同作用。方法：取对数生长期MCF-7细胞,分为柔红霉素给药组（浓度范围0.25～1.5μmol/L）、枸橼酸他莫昔芬给药组（浓度范围2.5～15μmol/L）和两药混合给药组,采用MTT法考察各给药组作用24h后对MCF-7细胞的增长抑制作用,利用中效原理计算合用指数来判定DNR和TMX的协同作用。结果：联合给药组的细胞抑制率均高于单独给药组,并且IC50时联合给药组的柔红霉素和枸橼酸他莫昔芬剂量低于单独给药组剂量。两药合用时（DNR∶TMX=1∶10,摩尔比）,当DNR剂量≥0.188mmol/L,TMX≥1.887mmol/L时,合用指数CI〈1,二者表现为协同作用。结论：柔红霉素和枸橼酸他莫昔芬联合应用能抑制人乳腺癌细胞MCF-7生长,在一定条件下,两者为协同作用,并且随着药物剂量增加,效应增强,协同作用呈现更强。

5-氟脲嘧啶及丝裂霉素对人胃癌细胞株SGc-7901的相互作用——利用中效原理体外观察

目的 体外观察5-氟脲嘧啶及丝裂霉素合用对人胃癌细胞株（SGc-7901）的相互作用。方法 采用MTT法利用中效原理判定两药合用的效果。结果 两种药单独应用时随着药物剂量增加，其效应也增加；两药大剂量（大于中效剂量）合用时是协同作用（CI<1），小剂量（小于中效剂量）合用时是拮抗作用（CI>1）；两药给药时间次序不同不会影响效应大小。结论 上述两种药合用大剂量是协同小剂量拮抗，且效应大小与给药时间次序无关。

尼美舒利对胃癌细胞BGC823 COX-2、VEGF表达的影响

目的 研究尼美舒利（Nimesulide）对人胃癌细胞株BGC-823增殖和凋亡的干预作用，揭示其抗癌机制。方法 采用MTT法、流式细胞仪等检测细胞增殖、细胞周期和凋亡率以及细胞的形态学改变，同时检测尼美舒利对胃癌细胞COX-2、VEGF表达的影响。结果 尼美舒利抑制胃癌细胞的IC50μM／L。增殖抑制率达到80．31％，流式细胞仪分析发现100-200μM／L的尼美舒利作用48h后，细胞被阻滞于S期，凋亡率分别为5．69％，10．58％；光学显微镜观察到凋亡典型的形态学特征；免疫细胞化学结果显示尼美舒利作用后能降低COX2、VEGF蛋白表达，与对照组比较，具有非常显著性差异（P〈0．01）。结论 尼美舒利能显著抑制人胃癌细胞株BGC-823的生长，此作用可能与降低COX2、VEGF蛋白表达有关。

三氧化二砷联合木黄酮对人胃癌细胞株SGC-7901的作用

目的:体外观察三氧化二砷及木黄酮对人胃癌细胞株(SGC-7901)的相互作用。方法:采用MTT法检测药物效应,利用中效原理判定两药合用的效果。结果:两种药单独应用时随着药物剂量增加,其效应也增加,呈剂量-效应关系;两药合用时合用指数均小于1(CI<1)。结论:三氧化二砷联合木黄酮对人胃癌细胞株SGC-7901的作用是协同作用。

丝裂霉素、5-氟尿嘧啶、三苯氧胺联合应用对人乳癌细胞株的作用

目的:观察丝裂霉素、5-氟尿嘧啶、三苯氧胺联合应用对人乳腺癌细胞株(MDA-MB-435S)的相互作用。方法:采用MTT法利用中效原理判断联合用药的效应。结果:MMC、5-Fu单用及联合应用时,随着药物浓度增加其效应也增加;TAM与MMC、5-Fu合用时,对MDA-MB-435S细胞作用不明显;MMC与5-Fu高浓度合用时呈协同作用,低浓度时呈拮抗作用;两药合用时浓度比例变化及给药时间次序对效应影响不大。结论:MMC与5-Fu高浓度合用时为协同作用,低浓度时为拮抗作用。TAM与MMC、5-Fu合用时,对MDA-MB-435S细胞作用不明显。两药合用效应大小与两药浓度比例及给药时间次序无关。

利用中效原理评价蛇床子素与5-FU相互作用

目的研究中药单体蛇床子素(Osthole,Ost)与5-FU(Fluorouracil,5-FU)在人胃癌细胞株BGC-823以及人大肠癌细胞株LOVO中的体外相互作用。方法采用MTT法检测单药及联合用药对两株肿瘤细胞株的作用;利用中效原理评价两药之间的相互作用;利用流式细胞仪检测单药及联合用药对肿瘤细胞凋亡和周期的影响。结果Ost和5-FU对两株肿瘤细胞株均具有增殖抑制作用;作用于BGC-823细胞时,当Fa<0.65时,CI<1,两药合用效应为协同作用;作用于LOVO细胞时,当0.05<Fa<0.90时,CI<1,两药合用效应为协同作用。结论 Ost联合5-FU作用于BGC-823细胞在低剂量合用时产生协同效应,协同机制可能与诱导细胞凋亡及G2/M期阻滞相关。

中效原理在顺铂、5-氟脲嘧啶、长春新碱对人卵巢癌细胞株(SKOV_3)相互作用中的应用

目的 :体外观察顺铂、5 氟脲嘧啶、长春新碱配伍对人卵巢癌细胞株 (SKOV3)的相互作用。方法 :采用MTT比色法利用中效原理判定两药合用的效果。结果 :三种药物单用及合用时随着剂量增加其效应也增加 ;顺铂与 5 氟脲嘧啶合用时产生协同作用 ;顺铂与长春新碱合用时产生拮抗作用 ;5 氟脲嘧啶与长春新碱合用时 ,小于中效浓度时产生协同作用 ,大于中效浓度时产生拮抗作用。结论 :两种药物合用时可以产生协同或拮抗作用 ,而且效应大小与两药浓度比例有关。