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Core clock component MtLUX controls shoot architecture through repression of MtTB1/MtTCP1A in Medicago truncatula 被引量:2
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作者 Liping Wang Anqi Zhou +7 位作者 Lulu Wang Jing Li Mingkang Yang Tingting Duan Jian Jin Liang Chen Liangfa Ge Wei Huang 《The Crop Journal》 SCIE CSCD 2023年第3期723-732,共10页
Plants are capable of regulating their shoot architecture in response to diverse internal and external environments.The circadian clock is an adaptive mechanism that integrates information from internal and ambient co... Plants are capable of regulating their shoot architecture in response to diverse internal and external environments.The circadian clock is an adaptive mechanism that integrates information from internal and ambient conditions to help plants cope with recurring environmental fluctuations.Despite the current understanding of plant circadian clock and genetic framework underlying plant shoot architecture,the intricate connection between these two adaptive mechanisms remains largely unclear.In this study,we elucidated how the core clock gene LUX ARRHYTHMO(LUX)regulates shoot architecture in the model legume plant Medicago truncatula.We show that mtlux mutant displays increased main stem height,reduced lateral shoot length,and decreased the number of lateral branches and biomass yield.Gene expression analysis revealed that Mt LUX regulated shoot architecture by repressing the expression of strigolactone receptor MtD14 and MtTB1/MtTCP1A,a TCP gene that functions centrally in modulating shoot architecture.In vivo and in vitro experiments showed that Mt LUX directly binds to a cis-element in the promoter of MtTB1/MtTCP1A,suggesting that Mt LUX regulates branching by rhythmically suppressing MtTB1/MtTCP1A.This work demonstrates the regulatory effect of the circadian clock on shoot architecture,offering a new understanding underlying the genetic basis towards the flexibility of plant shoot architecture. 展开更多
关键词 medicago truncatula Circadian clock MtLUX Shoot architecture MtTB1/MtTCP1A
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蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)全长转录组测序及分析 被引量:6
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作者 尚骁尧 周玲芳 +1 位作者 尹芊芊 晁跃辉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期131-140,共10页
为了深入分析和探索豆科模式植物蒺藜苜蓿的mRNA完整结构,使用单分子长读数测序技术(single-molecule long-read sequencing technology,SMRT)对蒺藜苜蓿进行全长转录组测序及分析。共获得7 728 183个subread和509 014条全长非嵌合序列(... 为了深入分析和探索豆科模式植物蒺藜苜蓿的mRNA完整结构,使用单分子长读数测序技术(single-molecule long-read sequencing technology,SMRT)对蒺藜苜蓿进行全长转录组测序及分析。共获得7 728 183个subread和509 014条全长非嵌合序列(full-length non-chimeric read,FLNC),通过比对分析发现,94.36%的序列与93.01%的序列分别与蒺藜苜蓿R108与A17参考基因组匹配。总计存在8 406种可变性剪接,其中主要的剪接方式为内含子保留(intron retention,RI)。共发现23 926个基因,其中12 049个基因存在295 545条转录本,在这些转录本中至少存在一个poly(A)位点。此外,共鉴定出3 223条转录因子,6 595条长非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)和479条融合转录本。使用SMRT技术能够深入发掘蒺藜苜蓿转录数据,也为更好地利用蒺藜苜蓿基因组资源提供数据补充。 展开更多
关键词 蒺藜苜蓿 单分子全长读数测序 可变性剪接 融合转录本
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蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)叶片衰老的转录组分析 被引量:3
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作者 周玲芳 尚骁尧 +1 位作者 张铁军 晁跃辉 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期2158-2168,共11页
为探究蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)叶片衰老过程中相关基因的分子机制及代谢通路,本研究以其成熟叶片和衰老初期、中期、末期叶片为研究对象。通过转录组测序,比较4个发育阶段样品之间的转录组差异。结果表明,与成熟叶片相比,共筛选... 为探究蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)叶片衰老过程中相关基因的分子机制及代谢通路,本研究以其成熟叶片和衰老初期、中期、末期叶片为研究对象。通过转录组测序,比较4个发育阶段样品之间的转录组差异。结果表明,与成熟叶片相比,共筛选出2990个差异表达基因(DEGs),在所有衰老样本中表达水平均发生显著变化,其中有2684条(89.77%)可进行基因功能注释;同时利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果证实了转录组测序的可靠性。进一步分析发现,DEGs涉及高等植物转录因子33个家族,包括ERF、WRKY、bHLH、MYB、NAC和bZIP。此外,还发现了837个与叶片衰老相关的基因。本研究发现了蒺藜苜蓿叶片衰老过程中大量差异表达的基因,为进一步分析蒺藜苜蓿叶片发育和衰老的调控机制提供参考。 展开更多
关键词 蒺藜苜蓿 叶片衰老 转录组测序 功能注释
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In silico genome-wide identification,phylogeny and expression analysis of the R2R3-MYB gene family in Medicago truncatula 被引量:10
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作者 ZHENG Xing-wei YI Deng-xia +1 位作者 SHAO Lin-hui LI Cong 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2017年第7期1576-1591,共16页
The R2R3-MYB genes make up one of the largest transcription factor families in plants, and play regulatory roles in various biological processes such as development, metabolism and defense response. Although genome-wi... The R2R3-MYB genes make up one of the largest transcription factor families in plants, and play regulatory roles in various biological processes such as development, metabolism and defense response. Although genome-wide analyses of this gene family have been conducted in several species, R2R3-MYB genes have not been systematically analyzed in Medicago truncatula, a sequenced model legume plant. Here, we performed a comprehensive, genome-wide computational analysis of the structural characteristics, phylogeny, functions and expression patterns of M. truncatula R2R3-MYB genes. DNA binding domains are highly conserved among the 155 putative MtR2R3-MYB proteins that we identified. Chromosomal location analysis revealed that these genes were distributed across all eight chromosomes. Results showed that the expansion of the MtR2R3-MYB family was mainly attributable to segmental duplication and tandem duplication. A comprehensive classification was performed based on phylogenetic analysis of the R2R3-MYB gene families in M. truncatula, Arabidopsis thaliana and other plant species. Evolutionary relationships within clades were supported by clade-specific conserved motifs outside the MYB domain. Species-specific clades have been gained or lost during evolution, resulting in functional divergence. Also, tissue-specific expression patterns were investigated. The functions of stress response-related clades were further verified by the changes in transcript levels of representative R2R3-MYB genes upon treatment with abiotic and biotic stresses. This study is the first report on identification and characterization of R2R3-MYB gene family based on the genome of M. truncatula, and will facilitate functional analysis of this gene family in the future. 展开更多
关键词 R2R3-MYB medicago truncatula gene family stress response function prediction
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Synonymous codon usage pattern in model legume Medicago truncatula 被引量:6
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作者 SONG Hui LIU Jing +1 位作者 CHEN Tao NAN Zhi-biao 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2018年第9期2074-2081,共8页
Synonymous codon usage pattern presumably reflects gene expression optimization as a result of molecular evolution. Though much attention has been paid to various model organisms ranging from prokaryotes to eukaryotes... Synonymous codon usage pattern presumably reflects gene expression optimization as a result of molecular evolution. Though much attention has been paid to various model organisms ranging from prokaryotes to eukaryotes, codon usage has yet been extensively investigated for model legume Medicago truncatula. In present study, 39 531 available coding sequences (CDSs) from M. truncatula were examined for codon usage bias (CUB). Based on analyses including neutrality plots, effective number of codons plots, and correlations between optimal codons frequency and codon adaptation index, we conclude that natural selection is a major driving force in M. truncatula CUB. We have identified 30 optimal codons encoding 18 amino acids based on relative synonymous codon usage. These optimal codons characteristically end with A or T, except for AGG and TTG encoding arginine and leucine respectively. Optimal codon usage is positively correlated with the GC content at three nucleotide positions of codons and the GC content of CDSs. The abundance of expressed sequence tag is a proxy for gene expression intensity in the legume, but has no relatedness with either CDS length or GC content. Collectively, we unravel the synonymous codon usage pattern in M. truncatula, which may serve as the valuable information on genetic engineering of the model legume and forage crop. 展开更多
关键词 codon usage gene expression medicago truncatula natural selection optimal codon
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Phytosulfokine-α Promotes Root Growth by Repressing Expression of Pectin Methylesterase Inhibitor (PMEI) Genes in Medicago truncatula 被引量:3
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作者 Liangliang Yu Wenjun Zhou +2 位作者 Danping Zhang Junhui Yan Li Luo 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 SCIE 2020年第4期873-881,共9页
Phytosulfokine-α(PSK-α),a sulfated pentapeptide with the sequence YIYTQ,is encoded by a small precursor gene family in Arabidopsis.PSK-αregulates multiple growth and developmental processes as a novel peptide hormo... Phytosulfokine-α(PSK-α),a sulfated pentapeptide with the sequence YIYTQ,is encoded by a small precursor gene family in Arabidopsis.PSK-αregulates multiple growth and developmental processes as a novel peptide hormone.Despite its importance,functions of PSK-αin M.truncatula growth remains unknown.In this study,we identified five genes to encode PSK-αprecursors in M.truncatula.All of these precursors possess conserved PSK-αsignature motif.Expression pattern analysis of these MtPSK genes revealed that each gene was expressed in a tissue-specific or ubiquitous pattern and three of them were remarkably expressed in root.Treatment of M.truncatula seedlings with synthetic PSK-αpeptide significantly promoted root elongation.In addition,expression analysis of downstream genes by RNA-seq and qRT-PCR assays suggested that PSK-αsignaling might regulate cell wall structure via PMEI-PME module to promote root cell growth.Taken together,our results shed light on the mechanism by which PSK-αpromotes root growth in M.truncatula,providing a new resource for improvement of root growth in agriculture. 展开更多
关键词 Phytosulfokine-α PSK-α PMEI root growth medicago truncatula
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蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)MtAP2转录因子的克隆及自激活检测
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作者 晁守政文 王梦迪 +1 位作者 何旭升 张铁军 《东南园艺》 2020年第2期6-13,共8页
AP2转录因子在植物生长发育过程中具有重要作用,为深入研究蒺藜苜蓿MtAP2转录因子的功能,于蒺藜苜蓿中克隆MtAP2转录因子,进行生物信息学分析,构建诱饵表达载体PGBKT7-MtAP2并转入酵母菌中,进行自激活活性检测。结果显示,本研究成功克... AP2转录因子在植物生长发育过程中具有重要作用,为深入研究蒺藜苜蓿MtAP2转录因子的功能,于蒺藜苜蓿中克隆MtAP2转录因子,进行生物信息学分析,构建诱饵表达载体PGBKT7-MtAP2并转入酵母菌中,进行自激活活性检测。结果显示,本研究成功克隆了蒺藜苜蓿MtAP2转录因子,其开放阅读框为624 bp,编码207个氨基酸。生物信息学分析显示,蒺藜苜蓿MtAP2蛋白与鹰嘴豆的亲缘关系最为接近。诱饵表达载体PGBKT7-AP2构建成功,转入到Y2H酵母菌中,且通过在营养缺陷型培养基培养证明其没有自激活活性。本研究成功克隆了蒺藜苜蓿MtAP2转录因子,构建了酵母诱饵表达载体PGBKT7-MtAP2,并证明其不存在自激活现象,后续可进行互作蛋白筛选。 展开更多
关键词 蒺藜苜蓿 自激活活性 酵母双杂交 MtAP2转录因子
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蒺藜苜蓿MtCIM基因结构和功能分析 被引量:1
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作者 谢宏 周丽莹 +3 位作者 李舒文 王梦迪 艾晔 晁跃辉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期262-269,共8页
【目的】CIM(cytokinin induce messager)属于Expansin蛋白家族,该蛋白是一类在植物生长和发育过程中起关键作用的蛋白质。为分析蒺藜苜蓿MtCIM基因结构、表达、亚细胞定位及在植物生长和发育过程中的功能。【方法】利用生物信息学工具... 【目的】CIM(cytokinin induce messager)属于Expansin蛋白家族,该蛋白是一类在植物生长和发育过程中起关键作用的蛋白质。为分析蒺藜苜蓿MtCIM基因结构、表达、亚细胞定位及在植物生长和发育过程中的功能。【方法】利用生物信息学工具对其进行深入分子量、理论等电点、不稳定系数及蛋白质结构预测和分析;同时,利用RT-qPCR方法,对不同激素处理(IAA、ABA、GA3)下的基因表达进行了检测;并通过融合蛋白瞬时表达及酵母表达方法鉴定其亚细胞定位及转录自激活情况;对MtCIM转基因植株进行低磷环境的适应分析。【结果】生物信息学分析显示,CIM蛋白的相对分子量为29.563 kD,理论等电点为5.54,不稳定系数为41.62,其蛋白质性质不稳定。二级及三级结构预测表明,该蛋白主要由无规则卷曲构成。外施IAA能够显著提高MtCIM的表达,外施ABA和GA3后,MtCIM表达呈现先升高后降低的趋势。亚细胞定位结果显示,其定位于细胞质中。对MtCIM进行转录自激活活性分析显示,蒺藜苜蓿MtCIM不存在自激活活性。对获得的20株转基因株系进行分析表明,转基因株系叶片细胞壁更厚;转基因植株对低磷环境具有更好的适应能力。【结论】对蒺藜苜蓿MtCIM的全面分析,揭示了其作为Expansin蛋白家族成员在植物生长和发育中的关键作用,并提高了植物在低磷环境中适应能力。 展开更多
关键词 蒺藜苜蓿 MtCIM基因 自激活检测 表达分析 亚细胞定位 低磷响应
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蒺藜苜蓿MtMYB16基因克隆、表达及转录自激活分析
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作者 王悦 刘亚玲 +2 位作者 苑峰 王梦迪 晁跃辉 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期1-10,共10页
植物中MYB转录因子数量众多,功能多样,在植物生长发育、逆境响应等多方面发挥着重要作用。为研究MYB转录因子在蒺藜苜蓿中的功能,本研究采用PCR技术从蒺藜苜蓿中克隆MtMYB16基因,该基因开放阅读框1074 bp,共编码357个氨基酸。进化树分... 植物中MYB转录因子数量众多,功能多样,在植物生长发育、逆境响应等多方面发挥着重要作用。为研究MYB转录因子在蒺藜苜蓿中的功能,本研究采用PCR技术从蒺藜苜蓿中克隆MtMYB16基因,该基因开放阅读框1074 bp,共编码357个氨基酸。进化树分析结果显示,MtMYB16蛋白与白花草木樨中MYB蛋白同源性最高。亚细胞定位结果显示,MtMYB16蛋白定位在细胞核中。酵母自激活检测结果显示,MtMYB16蛋白具有自激活活性,自激活结构域位于C端。表达分析结果显示,MtMYB16在蒺藜苜蓿根、茎、叶、花、果实中均有表达,在根中表达水平最高;IAA、MeJA能够降低MtMYB16表达水平;盐胁迫和干旱胁迫下,MtMYB16表达量在1.0 h时迅速增加,说明MtMYB16可能具有响应盐及干旱胁迫的功能。 展开更多
关键词 MtMYB16 蒺藜苜蓿 亚细胞定位 酵母表达 胁迫
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蒺藜苜蓿MtbHLH25基因克隆、亚细胞定位及表达分析
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作者 王悦 王梦迪 晁跃辉 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期920-929,共10页
[目的]bHLH转录因子数量众多,能够广泛参与植物的生长发育和逆境胁迫等过程。试验以蒺藜苜蓿R108为材料,克隆MtbHLH25基因并探究其功能,为研究蒺藜苜蓿bHLH转录因子的功能提供帮助。[方法]通过PCR扩增技术从蒺藜苜蓿中克隆MtbHLH25基因... [目的]bHLH转录因子数量众多,能够广泛参与植物的生长发育和逆境胁迫等过程。试验以蒺藜苜蓿R108为材料,克隆MtbHLH25基因并探究其功能,为研究蒺藜苜蓿bHLH转录因子的功能提供帮助。[方法]通过PCR扩增技术从蒺藜苜蓿中克隆MtbHLH25基因和启动子,构建酵母表达载体,并用LiAc转化法转移到Y2H Gold酵母菌株中进行酵母自激活检测,构建亚细胞定位载体,并通过冻融法转入农杆菌EHA105,菌液注射到烟草下表皮细胞后,用SP8激光共聚焦显微镜观察,通过实时荧光定量PCR技术研究MtbHLH25基因的时空表达水平。[结果](1)从蒺藜苜蓿中克隆出MtbHLH25基因和启动子,该基因总长882 bp,共编码293个氨基酸。启动子序列分析表明其包含ABA、MeJA、GA和SA等响应元件。(2)MtbHLH25蛋白与蚕豆和长柔毛野豌豆中bHLH蛋白高度同源。(3)MtbHLH25蛋白定位于细胞核。(4)酵母自激活检测结果显示MtbHLH25蛋白具有自激活活性。(5)MtbHLH25在蒺藜苜蓿根、茎、叶、花和果实中均有表达,其中在根中表达水平最高;外源SA、MeJA、ABA、GA以及盐胁迫使MtbHLH25基因表达量都呈下降趋势,表明SA、MeJA、ABA、GA以及盐胁迫对MtbHLH25基因表达起负调控作用。干旱胁迫能够显著诱导MtbHLH25基因表达量上调,说明该转录因子在干旱胁迫中起正调控作用。[结论]MtbHLH25基因对盐胁迫敏感,在干旱胁迫中发挥正调控作用;MtbHLH25蛋白具有自激活活性,对下游启动子调控的报告基因具有激活作用。 展开更多
关键词 MtbHLH25 蒺藜苜蓿 激素调节 转录自激活
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苜蓿体内H_(2)S信号与Ca^(2+)调节气孔运动的作用机制 被引量:1
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作者 郝雪峰 亢春霞 +1 位作者 裴雁曦 金竹萍 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期281-287,共7页
为探究H_(2)S信号在苜蓿(Medicago sativa)体内调节气孔运动的作用,及在此过程中H_(2)S与Ca^(2+)的关系,以蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)的野生型和钙离子转运体突变体为试验材料,分别从转录水平、细胞水平和生理水平开展研究。采用qRT... 为探究H_(2)S信号在苜蓿(Medicago sativa)体内调节气孔运动的作用,及在此过程中H_(2)S与Ca^(2+)的关系,以蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)的野生型和钙离子转运体突变体为试验材料,分别从转录水平、细胞水平和生理水平开展研究。采用qRT-PCR比较相关基因的表达量变化、荧光探针显示体内Ca^(2+)含量、电极法测定H_(2)S含量、光学显微镜观察和测量气孔孔径等。结果表明:蒺藜苜蓿突变体NF3011和NF2734体内H_(2)S的含量与野生型相比极显著降低(P<0.01);H_(2)S信号在一定程度上抑制钙离子转运体编码基因MTR_6g027580的表达;外源生理浓度H_(2)S熏蒸可诱导蒺藜苜蓿气孔关闭,与Ca^(2+)通道阻断剂LaCl_(3)联合处理对野生型气孔运动未产生影响,而在突变体中的结果截然相反;利用荧光探针测定保卫细胞内的Ca^(2+)含量,所得结果与气孔孔径的变化规律完全一致。综上所述,H_(2)S信号促进叶片保卫细胞内Ca^(2+)的含量增加,最终表现为植物气孔孔径变小,在此过程中胞内Ca^(2+)含量变化主要通过Ca^(2+)转运体进行,少部分依赖Ca^(2+)离子通道。该研究结果不仅在理论上丰富了H_(2)S信号的作用机制,更具应用于苜蓿生产实践并推广于其他作物的潜力。 展开更多
关键词 H_(2)S信号 CA^(2+) 气孔运动 蒺藜苜蓿
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蒺藜苜蓿MtDWF1基因克隆、亚细胞定位及表达特征分析 被引量:1
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作者 谢宏 李舒文 +4 位作者 董迪 王梦迪 贾薇 晁跃辉 赵彦 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期984-991,共8页
Delta24-甾醇还原酶(Delta24-sterol reductase,DWF1)是油菜素内酯(Brassinosteroide,BR)合成途径中的关键酶,在植物生长发育中起着关键性的作用。为了研究DWF1基因在蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)中的功能,本试验从蒺藜苜蓿R108中克隆... Delta24-甾醇还原酶(Delta24-sterol reductase,DWF1)是油菜素内酯(Brassinosteroide,BR)合成途径中的关键酶,在植物生长发育中起着关键性的作用。为了研究DWF1基因在蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)中的功能,本试验从蒺藜苜蓿R108中克隆MtDWF1基因全长序列,该基因开放阅读框(ORF)1704 bp,编码567个氨基酸,分子量65.911 kD,理论等电点为8.53。亚细胞定位显示,该蛋白定位于细胞质内。进化分析表明,蒺藜苜蓿MtDWF1蛋白与鹰嘴豆(Cicer arietinum)、红三叶(Trifolium pratense)及豌豆(Pisum sativum)亲缘关系较为接近。MtDWF1基因在蒺藜苜蓿根、茎、叶中均有表达,在茎和叶中的表达水平较高。外源激素脱落酸(Abscisic acid,ABA)能够明显提高MtDWF1表达,水杨酸(Salicylic acid,SA)能够显著降低MtDWF1表达水平。同时,经油菜素内酯诱导后,MtDWF1表达水平整体呈现增加趋势。本研究为进一步探索MtDWF1基因在蒺藜苜蓿发育过程中的作用提供理论研究基础。 展开更多
关键词 MtDWF1 蒺藜苜蓿 基因克隆 表达分析 亚细胞定位
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蒺藜苜蓿miR167c调控生长和花器官发育的功能验证
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作者 张立霞 李霄 +6 位作者 许蕾 旦真措 刘亚娇 苏德毕力格 丛丽丽 杨青川 龙瑞才 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期2925-2937,共13页
MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性非编码小分子RNA,参与调控植物的生长发育、代谢和逆境响应等过程。本研究通过构建蒺藜苜蓿miR167c的海绵载体,探究miR167c及其靶基因对拟南芥生长发育的影响。靶基因预测结果显示,生长素响应因子6/8(Auxi... MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性非编码小分子RNA,参与调控植物的生长发育、代谢和逆境响应等过程。本研究通过构建蒺藜苜蓿miR167c的海绵载体,探究miR167c及其靶基因对拟南芥生长发育的影响。靶基因预测结果显示,生长素响应因子6/8(Auxin response factor 6/8,ARF6/8)、类受体蛋白激酶家族蛋白(Receptor-like protein kinase-related family protein,RPK)和IAA-氨基酸水解酶(IAA-Alanine resistant 3,IAR3)基因为拟南芥miR167c的靶基因。实时荧光定量分析表明,转基因拟南芥植株中At-miR167c表达量较野生型显著降低,而上述4个靶基因的表达量显著上调。转基因拟南芥的花期提前,花序紧凑,花苞数量增多;莲座叶数量和鲜重显著增加;株高、分枝数和果荚数明显增加。研究结果为进一步解析miR167调控植物生长和花器官发育的分子机制提供了参考依据。 展开更多
关键词 蒺藜苜蓿 微小核糖核酸 生长素响应因子 拟南芥 生长发育
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一种新的蒺藜苜蓿遗传杂交方法
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作者 张浩巍 马昕巍 +3 位作者 高雅晴 石文敏 卢丽娟 席杰军 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期914-922,共9页
遗传杂交技术是开展遗传研究的基本工具,也是研究基因功能的必要手段之一。虽然对豆科模式植物蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)的研究愈来愈多,但其遗传杂交技术因难度较高而只被研究蒺藜苜蓿比较悠久的科研团体掌握。为了便于更多实验... 遗传杂交技术是开展遗传研究的基本工具,也是研究基因功能的必要手段之一。虽然对豆科模式植物蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)的研究愈来愈多,但其遗传杂交技术因难度较高而只被研究蒺藜苜蓿比较悠久的科研团体掌握。为了便于更多实验室能够掌握该项技术,本文在已报道的蒺藜苜蓿杂交方法的基础上提出了一种新的杂交技术。研究内容包括蒺藜苜蓿的花果发育周期、花解剖结构、不同发育时期花的花药发育、遗传杂交程序、母本花的选择标准以及杂交鉴定等。本研究所提出的蒺藜苜蓿杂交方法与已有其它杂交方法相比,具有操作难度低、杂交后无需特殊护理措施、杂交成功率高等特点。 展开更多
关键词 豆科植物 模式植物 蒺藜苜蓿 遗传杂交 人工杂交 花结构
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Medicago truncatula resources to study legume biology and symbiotic nitrogen fixation
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作者 Raja Sekhar Nandety Jiangqi Wen Kirankumar S.Mysore 《Fundamental Research》 CAS CSCD 2023年第2期219-224,共6页
Medicago truncatula is a chosen model for legumes towards deciphering fundamental legume biology,especially symbiotic nitrogen fixation.Current genomic resources for M.truncatula include a completed whole genome seque... Medicago truncatula is a chosen model for legumes towards deciphering fundamental legume biology,especially symbiotic nitrogen fixation.Current genomic resources for M.truncatula include a completed whole genome sequence information for R108 and Jemalong A17 accessions along with the sparse draft genome sequences for other 226 M.truncatula accessions.These genomic resources are complemented by the availability of mutant resources such as retrotransposon(Tnt1)insertion mutants in R108 and fast neutron bombardment(FNB)mutants in A17.In addition,several M.truncatula databases such as small secreted peptides(SSPs)database,transporter protein database,gene expression atlas,proteomic atlas,and metabolite atlas are available to the research community.This review describes these resources and provide information regarding how to access these resources. 展开更多
关键词 medicago truncatula Model legume medicago resources Tnt1 MUTAGENESIS medicago gene atlas
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蒺藜苜蓿生物钟基因MtTOC1a的克隆及功能验证
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作者 段婷婷 杨明康 +1 位作者 黄可 黄巍 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期803-809,共7页
【目的】分析蒺藜苜蓿Medicago truncatula生物钟基因MtTOC1a的蛋白结构,探究MtTOC1a在生物钟系统中的生物学功能,比较其与拟南芥Arabidopsis thaliana的AtTOC1功能相似性和差异性。【方法】通过生物信息学分析,在全基因组范围内鉴定了T... 【目的】分析蒺藜苜蓿Medicago truncatula生物钟基因MtTOC1a的蛋白结构,探究MtTOC1a在生物钟系统中的生物学功能,比较其与拟南芥Arabidopsis thaliana的AtTOC1功能相似性和差异性。【方法】通过生物信息学分析,在全基因组范围内鉴定了TOC1在蒺藜苜蓿中的同源基因。构建MtTOC1a基因的表达载体,利用农杆菌介导法引入到拟南芥野生型Col、及相应的功能丧失突变体toc1-2中,进行遗传互补分析。【结果】MtTOC1a和MtTOC1b均具有保守的功能结构域和三维结构。遗传分析表明,在早期光形态建成中,外源转化的MtTOC1a完全恢复了toc1-2的下胚轴伸长表型,但对toc1-2的提前开花表型没有显著影响。在引入CAB::LUC报告基因的株系中,外源转化MtTOC1a在连续光照下使短周期突变体toc1-2的近日节律周期延长,但仍不能完全恢复至野生型水平。【结论】MtTOC1a和拟南芥AtTOC1的功能存在相似性,但在不同的下游调控途径中所扮演的角色存在差异。本研究结果为进一步探索MtTOC1a基因的功能,利用MtTOC1a基因改造苜蓿的重要性状提供了理论依据。 展开更多
关键词 蒺藜苜蓿 拟南芥 MtTOC1a 生物钟 生物节律 农艺性状
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异源过表达蒺藜苜蓿MtATG7基因促进拟南芥抵抗碳氮饥饿胁迫
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作者 朱晓洁 王贤杰 +2 位作者 杨明康 黄巍 陈亮 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期810-817,共8页
【目的】真核生物通过保守的自噬途径降解错误折叠的蛋白质或受损细胞器,实现对营养物质的循环再利用。本文旨在解析苜蓿自噬基因在植物应对营养胁迫中发挥的功能,为指导苜蓿的选育和改良提供参考。【方法】以自噬途径的关键限速基因ATG... 【目的】真核生物通过保守的自噬途径降解错误折叠的蛋白质或受损细胞器,实现对营养物质的循环再利用。本文旨在解析苜蓿自噬基因在植物应对营养胁迫中发挥的功能,为指导苜蓿的选育和改良提供参考。【方法】以自噬途径的关键限速基因ATG7(Autophagy-related gene 7)为切入点,分析ATG7氨基酸序列在不同植物中的相似性。利用蒺藜苜蓿Medicago truncatula的MtATG7基因过表达载体转化拟南芥植株,获得异源过表达植株35S::MtATG7和互补拟南芥突变体的atg7/35S::MtATG7植株,并对其抗胁迫表型和自噬活性进行分析。【结果】在碳饥饿条件下,atg7/35S::MtATG7能够挽救atg7突变体叶片早衰的表型;恢复到正常生长条件以后,35S::MtATG7和atg7/35S::MtATG7植株存活率和野生型相比都显著提高。GFP-ATG8e的剪切试验表明,atg7/35S::MtATG7能够恢复atg7突变体的自噬降解活性。在氮饥饿条件下过表达MtATG7同样能够减缓拟南芥叶片的衰老速度。【结论】异源过表达MtATG7能增强拟南芥碳氮饥饿抗性的生物学功能,本研究为进一步利用MtATG7基因改良苜蓿农艺性状提供了理论依据。 展开更多
关键词 细胞自噬 MtATG 缺碳胁迫 缺氮胁迫 蒺藜苜蓿 拟南芥 异源过表达
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蒺藜苜蓿种子产量相关性状的遗传分析 被引量:5
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作者 雷艳芳 魏臻武 +2 位作者 杨占花 盖钧镒 王仪明 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期337-342,共6页
通过对蒺藜苜蓿(Medicago truncatula Gaertn.)种子产量相关性状的田间调查,解析影响蒺藜苜蓿种子产量的主要构成因素。结果表明:搜集的38份蒺藜苜蓿种质资源在种子产量方面存在显著差异(P<0.05),选系J1.12单株平均种子产量明显高于... 通过对蒺藜苜蓿(Medicago truncatula Gaertn.)种子产量相关性状的田间调查,解析影响蒺藜苜蓿种子产量的主要构成因素。结果表明:搜集的38份蒺藜苜蓿种质资源在种子产量方面存在显著差异(P<0.05),选系J1.12单株平均种子产量明显高于其他材料;不同种质在分枝数、伸展长度、小花数、结荚数和百荚重等构成因素上存在显著差异(P<0.05);对蒺藜苜蓿种质种子产量与其构成因素间的相关性进行分析发现,伸展长度与种子产量相关性最大,相关系数为0.719,每荚种子数与种子产量相关性最小。通过系统聚类,参试蒺藜苜蓿种质可分为3个类群,并从中筛选6份种子产量特性差异大的蒺藜苜蓿种质作为杂交亲本,利用SSR、EST-SSR和SRAP引物检测亲本的多态性,发现6份亲本多态性差异明显;通过应用主基因+多基因遗传模型发现蒺藜苜蓿A17×A20组合的RILs群体种子产量性状的最佳遗传模型是2对加性-上位性主基因模型,该组合群体种子产量遗传以主基因为主,多基因遗传率较低,第二对主基因的加性效应值高于第一对主基因的加性效应值。 展开更多
关键词 蒺藜苜蓿 种子产量 主基因+多基因遗传分析 EST—SSR标记 SRAP标记
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蒺藜苜蓿SSR反应体系优化及在一年生苜蓿种质鉴定中的应用 被引量:10
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作者 张丽芳 魏臻武 杨占花 《草地学报》 CAS CSCD 2007年第5期429-436,共8页
利用正交设计和完全随机试验优化蒺藜苜蓿(Medicago truncatula Gaertn)SSR标记的PCR反应体系。结果表明,适合于一年生苜蓿(Medicago L.)遗传分析的SSR技术体系为:10μL反应体系中TaqDNA聚合酶为1U,dNTP浓度为0.20mmol/L,Mg2+浓度为2.0m... 利用正交设计和完全随机试验优化蒺藜苜蓿(Medicago truncatula Gaertn)SSR标记的PCR反应体系。结果表明,适合于一年生苜蓿(Medicago L.)遗传分析的SSR技术体系为:10μL反应体系中TaqDNA聚合酶为1U,dNTP浓度为0.20mmol/L,Mg2+浓度为2.0mmol/L,引物浓度为1.5umol/L,模板DNA用量为20ng/uL;利用该反应体系将2个蒺藜苜蓿亲本和杂交种有效鉴别;利用SSR标记对19个一年生苜蓿种质进行SSR-PCR扩增,用8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,不同种质间DNA谱带多态性丰富,通过UPGMA方法聚类分析可以明确区分19个一年生苜蓿种质。 展开更多
关键词 一年生苜蓿 蒺藜苜蓿 SSR反应 正交设计 杂交种鉴定 种质鉴定
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豆科模式植物蒺藜苜蓿基因组研究进展 被引量:20
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作者 魏臻武 盖钧镒 《中国草地学报》 CSCD 2006年第6期83-90,共8页
鉴于豆科植物的重要性和特殊性,近年来国际上发起将蒺藜苜蓿作为豆科基因组研究模式植物。由于具有基因组小、染色体数为2×8(2n=16)、生长期短、自花授粉、根瘤固氮、遗传转化效率高、与豆科主要作物亲缘关系较近等特点,蒺藜苜蓿... 鉴于豆科植物的重要性和特殊性,近年来国际上发起将蒺藜苜蓿作为豆科基因组研究模式植物。由于具有基因组小、染色体数为2×8(2n=16)、生长期短、自花授粉、根瘤固氮、遗传转化效率高、与豆科主要作物亲缘关系较近等特点,蒺藜苜蓿已代替百脉根(Lotus japonicusL.)做为豆科模式植物。国际蒺藜苜蓿基因组研究计划于2001年启动,基因组全序列测定即将完成。目前已经构建了细胞遗传学图谱、物理图谱和遗传图谱,获得EST序列189714条。蒺藜苜蓿基因组长度470Mbp(1C=0.47pg,2C=1.15pg),基因密度7Kbp/基因,平均GC含量33.3%。细胞遗传学分析表明,蒺藜苜蓿染色体基因组分成常染色质和异染色质两个明显的区域,常染色质区富集基因,异染色质区富集大量重复序列。蒺藜苜蓿80%的基因组以异染色质的形式聚集在着丝粒附近。蒺藜苜蓿与苜蓿和豌豆有非常高的共线性关系,与大豆在宏线性水平和微线性水平也有较高的共线性关系,是豆科作物比较基因组研究的好材料,有待在我国开展相关的研究。 展开更多
关键词 蒺藜苜蓿 豆科作物 基因组 比较基因组学 共线性
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