基于HPLC-QAMS多组分定量联合多元统计分析及加权TOPSIS法的畲药树参综合品质评价

目的建立同步检测畲药树参中紫丁香苷、绿原酸、芥子醛葡萄糖苷、松柏醇、芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸和4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量的高效液相色谱一测多评(HPLC-QAMS)方法,并采用多元统计分析及加权优劣解距离(technique for order preference by similarity to ideal solution method,TOPSIS)法对其品质进行综合评价。方法以Waters Xbridge C 18色谱柱;乙腈-0.05%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长260 nm。以山柰酚-3-O-芸香糖苷为参照物,建立内参物与其他8个待测成分的相对校正因子(relative correction factor,RCF),进行RCF耐用性考察及色谱峰定位,同时与外标法实测结果进行对比,验证HPLC-QAMS法准确性和可靠性。运用主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)等多元统计分析以及W-TOPSIS法对9个成分HPLC-QAMS法含量结果的相关性进行分析,挖掘影响畲药树参产品质量的主要潜在标志物,建立畲药树参综合质量优劣评价方法。结果9种成分分别在3.27~81.75μg/mL、9.85~246.25μg/mL、0.43~0.75μg/mL、0.31~7.75μg/mL、1.58~39.50μg/mL、0.59~14.75μg/mL、1.26~31.50μg/mL、4.55~113.75μg/mL和1.98~49.50μg/mL范围内线性关系良好,平均加样回收率96.82%~100.07%(RSD<2.0%);HPLC-QAMS和外标法(ESM)含量测定结果差异无统计学意义(P>0.05),HPLC-QAMS法可用于畲药树参多组分定量控制;多元统计分析结果显示,前2个主成分累计方差贡献率89.589%,绿原酸、紫丁香苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸和4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸是影响畲药树参产品质量的主要潜在标志物;加权TOPSIS法结果显示浙江地区所得畲药树参质量最优,其次为江西、安徽、湖南和湖北产树参,云南和贵州产树参位于排名后4位。结论所建立的HPLC-QAMS多组分定量控制方法,操作便捷、结果准确;多元统计分析联合加权TOPSIS法全面客观,可用于畲药树参品质的综合评价。

HPLC特征图谱技术在中药制剂质量控制中的应用进展

高效液相色谱特征图谱技术具有整体性的特点,与中药复杂的化学成分特征相符,已被国内外公认为中药质量控制的良好方法之一,是表征中药制剂质量和保证中药制剂临床疗效的重要手段。本文综述了近年高效液相色谱特征图谱技术在中药制剂质量控制中的应用特点,为持续提升中药制剂质控水平提供参考。

Protective effect of different medicinal parts of Lonicera japonica Thunb. on myocardial ischemic injury induced by isoproterenol in rats

Background:To study the protective effect of different medicinal parts of honeysuckle on myocardial ischemia injury in rats.Method:SD mice were randomly divided into 6 groups:the normal group,model group,compound salvia miltiorrhiza group,Lonicera japonica Thunb.of flower bud group,flower group,and the stem leaf group.There were 8 rats in each group,including 4 males and 4 females.The normal group and model group were given equal amount of distilled water,whereas the other dosage groups were given the appropriate drug by intragastric administration,continuous gavage for 14 days.From the 12 days,in addition to the normal group were injected of the same amount of normal saline,the other groups were injected with 5g/kg.Injection of isoproterenol to establish the mouce mycardial ischemia model,its continuously 3d.To detect the serum of AST,CK,CK-MB,LDH and the myocardial issue of Chinese super oxideismutase and malondialdehyde level.Results:Compared with normal group,the levels of AST,CK,CK-MB,cTn-I,LDH and malondialdehyde were significantly increased in the model group(P<0.01)and the level of super oxideismutase decreased significantly(P<0.01)the levels of AST,CK,CK-MB,cTn-I,LDH and malondialdehyde in the serum of flower bud group,flower group and stem leaf group were significantly decreased(P<0.05),and the decreasing level of flower bud group,flower,leaf group of AST,CK,CK-MB,cTn-I,LDH and malondialdehyde was flower bud group>flower>leaf group,the activity of super oxideismutase was obviously increased,and the activity level of super oxideismutase of flower bud group,flower group and stem leaf group was flower bud group>flower>leaf group.Conclusion:In the myocardial ischemic injury model of rats induced by isoproterenol,Lonicera japonica Thunb.had a protective effect in all parts,and Lonicera japonica Thunb.bud had the greatest protective effect.

基于HPLC和化学计量法分析蜘蛛香不同部位3类化合物10种成分差异研究

目的 对蜘蛛香不同部位中酚酸类(新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C),黄酮类(橙皮苷、蒙花苷)及缬草三酯类(乙酰缬草三酯、缬草三酯)化合物含量进行测定,结合化学模式识别比较含量差异。方法 采用HPLC法对蜘蛛香地上部位(叶)和地下部位(根茎和根)中10种成分含量进行测定,对结果进行聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘判别分析。结果 地上部位10种成分平均含量绿原酸>异绿原酸A>蒙花苷>缬草三酯>橙皮苷>异绿原酸C>乙酰缬草三酯>异绿原酸B>新绿原酸>咖啡酸,地下部位10种成分平均含量缬草三酯>异绿原酸A>橙皮苷>绿原酸>乙酰缬草三酯>异绿原酸C>异绿原酸B>蒙花苷>新绿原酸>咖啡酸;蜘蛛香不同部位酚酸类和黄酮类含量均为地上部位>地下部位,缬草三酯类含量为地下部位>地上部位;造成蜘蛛香不同部位差异的标志物为缬草三酯、蒙花苷、橙皮苷。结论 蜘蛛香各部位样品中10个成分的含量存在较大差异;蜘蛛香的非药用部位也含有大量的酚酸类、黄酮类和缬草三酯类,应充分利用,避免中药资源的浪费。

基于HPLC指纹图谱和多成分含量测定结合化学计量学的蒙药山柰配方颗粒质量评价研究

目的建立蒙药山柰配方颗粒指纹图谱及多成分含量测定方法,并结合化学计量学对不同批次的山柰配方颗粒进行质量评价。方法采用HPLC法,色谱柱为COSMOSIL 5C18-AR-Ⅱ(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%乙酸水溶液,流速为1.0 mL·min^(-1),柱温40℃,检测波长250 nm。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012年版)》进行指纹图谱相似度评价,SPSS 25.0软件进行聚类分析(CA),SIMCA 14.1进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)。结果15批山柰配方颗粒指纹图谱相似度均>0.90,共标定12个共有峰,并指认出5种成分,绿原酸、香草酸、阿魏酸、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷和对甲氧基肉桂酸乙酯含量分别为0.074~0.088、0.023~0.031、0.017~0.033、0.102~0.132、31.014~40.729 mg·g^(-1)。CA、PCA、OPLS-DA结果显示,15批山柰配方颗粒可分为两类,5个已知成分中,绿原酸等3个成分VIP值>1。结论建立的山柰配方颗粒指纹图谱及多成分含量测定方法准确、稳定、重复性好,化学计量学方法能够较好地筛选出标志性成分,可为山柰配方颗粒质量标准提供参考。

HPLC法测定蒙药材金露梅中没食子酸含量

目的:建立高效液相法测定金露梅中没食子酸含量。方法:采用Kromasil 100-5-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.1%磷酸(10∶90)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长273 nm,柱温30℃,进样量为10μL。结果:没食子酸在3.44~137.52μg/mL范围内线性关系良好,相关系数r=1.000;平均回收率为99.4%(RSD%=1.588%);6批不同产地金露梅中没食子酸含量在3.156~11.537 mg/g之间。结论:所建立的高效液相法稳定可靠,可用于金露梅中没食子酸的含量测定。

HPLC-RID法测定不同厂家益母草药材中盐酸水苏碱含量

建立了测定益母草中盐酸水苏碱含量的HPLC-RID方法,并测定分析了14家药厂的益母草中盐酸水苏碱的含量。结果表明:以Mercury益母草专用柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以70%乙腈溶液为流动相、流速1.0 mL/min、柱温45℃的条件下采用示差检测器进行检测,盐酸水苏碱在0.100~0.523 mg/mL浓度范围内呈良好的线性关系;回归方程为y=91519 x+1342.2(R^(2)=0.9916),平均回收率100.07%,RSD为0.71%,且该方法具有重复性好、操作简便、快速、稳定、易于普及等优点;各厂家的益母草药材中盐酸水苏碱含量差异较大,14家厂家中仅有1367和8656这2家的益母草药材符合药典标准;盐酸水苏碱含量与益母草药材性状具有关联性,市民、药企和中药商等在购买益母草药材时,建议选择性状为叶多、青绿、茎细的益母草药材。

HPLC法测定葫芦七不同部位中7种倍半萜的含量

[目的]建立HPLC法测定葫芦七不同部位(根、茎、叶)中7种倍半萜类化合物的含量。[方法]采用Kromasil C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(40∶60);柱温35℃;检测波长240 nm;进样体积10μL。[结果]7种被测成分在测定质量浓度范围内线性关系良好(R^(2)≥0.9990);平均回收率在95.18%~97.61%,RSD在0.41%~1.60%;被检测的7种倍半萜类成分在葫芦七根、茎、叶不同部位中的含量差异明显,根中所含化合物的种类相对较多,含量相对较高。[结论]该方法快速、简便、准确,可用于葫芦七药材的质量控制。

HPLC测定万寿菊发育过程中不同部位黄酮含量变化

建立一种高效液相色谱(HPLC)方法,对不同发育时期的万寿菊花、叶、茎、根中的8种黄酮成分进行测定。结果表明:(1)建立的高效液相色谱方法精密度、重复性及稳定性良好,可用于万寿菊中黄酮成分含量的测定。(2)万寿菊各部位的黄酮含量差异显著,总量对比为花>叶>茎>根。(3)槲皮万寿菊苷和槲皮万寿菊素是花的主要黄酮成分,而根、茎、叶的主要黄酮成分分别为槲皮万寿菊素、槲皮万寿菊苷和山奈苷。(4)随着生长发育,万寿菊花中总黄酮含量呈先上升后下降的趋势,在半开花蕾期最高;根、茎、叶中黄酮总量整体呈下降趋势,均在幼苗期最高。该研究建立了一种同时测定万寿菊中8种黄酮成分的HPLC检测方法,确定了万寿菊的主要黄酮成分为槲皮万寿菊素,且半开花蕾期的花中含量最高,适用于大量提取万寿菊黄酮。该结果为万寿菊的进一步合理开发与综合利用提供了参考依据。

蒙药扁蕾HPLC指纹图谱及3种成分含量测定研究

目的建立蒙药扁蕾的高效液相色谱(High performance liquid chromatography,HPLC)指纹图谱,建立其中3种成分的含量测定方法。方法采用HPLC法,选用Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃,甲醇-0.1%乙酸洗脱,紫外检测波长260 nm,流速0.8 mL/min,记录时间110 min;采用化学计量学软件建立10批扁蕾HPLC指纹图谱,进行相似度评价并测定样品中3种成分的含量。结果建立了蒙药扁蕾药材的指纹图谱,确定了16个特征峰,其中3、4、11号峰分别为当药黄素、当药醇苷和木犀草素,10批药材相似度≥0.974;含量测定结果显示,3种成分的线性关系良好(r≥0.9991),加样回收率为97.30%~100.2%。结论此研究所建立的HPLC指纹图谱和含量测定方法具有操作简便、准确、重复性好等特点,可用于蒙药扁蕾药材的质量控制。

HPLC法测定中药热敷包中羟基红花黄色素A的含量

目的建立中药热敷包中羟基红花黄色素A的含量测定方法。方法采用Agilent 1260高效液相色谱仪测定热敷包中羟基红花黄色素A的含量,样品用25%乙醇超声提取40 min。Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温:30℃;流动相为乙腈-甲醇-0.7%磷酸水溶液(2∶26∶72),流速:1.0 ml·min^(-1);检测波长:403 nm。结果羟基红花黄色素A在0.511~1.789μg范围内与其色谱峰面积有良好的线性关系(r=0.9999),该方法的平均回收率为98.65%,RSD为0.61%(n=6),3批中药热敷包中羟基红花黄色素A平均含量为0.83 mg·g^(-1)。结论本法稳定可靠,重复性好,可用于中药热敷包的质量检测。

土家药刺老苞不同极性提取物的HPLC指纹图谱方法验证研究

目的建立一种可用于不同极性刺老苞提取物的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱方法。方法采用HPLC法对色谱条件进行优化,并进行方法学验证。结果色谱条件为Agilent C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈(A)-0.1%磷酸(B)流动相梯度洗脱,检测波长280 nm,柱温30℃,进样量10μL。方法学验证显示,该HPLC指纹图谱法精密度、稳定性、重复性的相对标准偏差(RSD)符合要求。结论该HPLC指纹图谱法可同时应用于刺老苞不同极性提取物的检验,可初步比较各提取物之间的差异。

QuEChERS-HPLC-MS/MS法测定中药中4种交链孢霉毒素

样品用1%甲酸-乙腈溶液提取,经N-丙基乙二胺(PSA)净化,采用BEH-C_(18)色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,采用电喷雾离子源负离子模式扫描,多反应模式(MRM)监测目标物,内标法定量。4种交链孢霉毒素在0.200~200 ng/mL的范围内呈现良好的线性关系(R^(2)≥0.999),并以西洋参为例做方法学验证。该方法还可应用在铁皮石斛、薏仁、陈皮、莲子和橄榄这五种基质中。该方法操作简单快捷,可用于中药中4种交链孢霉毒素的检测。

HPLC法同时测定杜仲3个药用部位中8种成分

目的建立HPLC法同时测定杜仲Eucommia ulmoides Oliver板皮、枝皮及叶中8种成分的含有量。方法分析采用Agilent Zorbax Eclipse C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）;流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;体积流量1 m L/min;柱温30℃;检测波长208 nm（桃叶珊瑚苷、槲皮素）、238 nm（京尼平苷酸、京尼平苷、京尼平和松脂醇二葡萄糖苷）和320 nm（绿原酸、咖啡酸）。结果桃叶珊瑚苷、槲皮素、京尼平苷酸、京尼平苷、京尼平、松脂醇二葡萄糖苷、绿原酸和咖啡酸分别在0.037 5~2.25、0.024 4~0.488、0.008 7~0.487 2、0.019 85~0.397、0.022 9~0.458、0.027 5~1.1、0.029 45~0.736、0.004 526~0.238 1μg范围内呈良好的线性关系。叶中黄酮和苯丙素含有量高于板皮,枝皮中木脂素含有量与板皮相当,而且这两个药用部位中环烯醚萜含有量都较高。结论在降血压和抗炎应用中,杜仲枝皮与叶可作为板皮的替代物。

HPLC测定不同采收途径及不同部位白花丹中白花丹醌的含量

目的:分析不同采收途径及不同部位的白花丹中白花丹醌含量,寻找富集白花丹醌的药用部位和白花丹的最佳采收途径。方法:采用HPLC法测定不同采收途径白花丹和不同部位中白花丹醌的含量:色谱柱为Hypersil ODS(25cm×4.6mm,25μm),流动相为甲醇-水(65∶35),流速为1.0mL/min,检测波长为213nm,柱温30℃。结果:白花丹醌在0.01μg～0.32μg含量范围呈线性关系,Y=18211600X+10434.57758,r=0.99946,RSD=1.28%(n=6);新鲜的白花丹根部、茎部及叶中白花丹醌的含量分别为0.026%、0.006%和0.014%;干燥的白花丹根部、茎部及叶中白花丹醌的含量分别为0.324%、0.082%和0.174%;枯萎的白花丹茎部、叶及穗中白花丹醌的含量分别为0.002%、0.001%和0.003%。结论:干燥组白花丹中白花丹醌含量高于新鲜组和枯萎组,白花丹根部的白花丹醌含量最高,其次是穗,叶、茎。本法简便、准确,灵敏度高,重复性好,可用于控制白花丹药材的质量。

HPLC法测定八角枫药材不同药用部位中L(-)-八角枫碱的含量

目的:建立测定八角枫药材不同药用部位(茎、根茎、须根及支根)中L(-)-八角枫碱含量的方法,为八角枫药材的开发利用提供参考。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Thermo C18,流动相为甲醇-磷酸缓冲液(22∶78,V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为259 nm,柱温为30℃,进样量为10μl。结果:L(-)-八角枫碱的进样量线性范围为0.020 62~0.257 80μg(r=0.999 9);定量限为1.7 ng,检测限为0.5 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2%;加样回收率为97.38%~98.86%(RSD=0.6%,n=6)。不同药用部位中L(-)-八角枫碱含量,须根>支根>根茎>茎。结论:该方法操作简便、结果准确、重复性好、专属性强,适用于测定八角枫药材不同药用部位(茎、根茎、须根及支根)中L(-)-八角枫碱的含量。

黄连、吴茱萸配伍药对的HPLC指纹图谱研究

目的:采用高效液相色谱法建立黄连、吴茱萸配伍药对的指纹图谱,考察不同配伍对药对的化学成分的影响,探讨该药对配伍应用的科学性。方法:以Agilent Zorbax Extend-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-水(含0.3%磷酸及0.2%三乙胺)为流动相梯度洗脱,检测波长268 nm;流速0.7 mL/min;柱温20℃。结果:方法学考察表明,所用色谱条件符合定性研究要求;以盐酸小檗碱峰为参照峰,确定了19个共有峰,并初步对各共有峰进行归属判断。结论:从药对的指纹图看出,黄连有利于吴茱萸脂溶性生物碱溶出,呈正比关系。

HPLC法同时测定鲜鱼腥草不同部位8个活性成分的含量

目的：同时测定鲜鱼腥草不同药用部位8个活性成分的含量。方法：Alltima C18柱（7．5mm×4．6mm，5μm），流动相：0．2％的冰乙酸溶液（A），乙腈（B），梯度洗脱：0～20min，5％～20％B；20～40min，20％～20．5％B；40～50min，20．5％～35％B；50～90min，35％～90％B；流速：0．6mL/min；检测波长：280nm。结果：表明不同药用部位含量不同。结论：该法简便、准确、分离效果好，适用于鱼腥草的质量控制。

高良姜等五味山姜属中药乙酸乙酯部位的HPLC指纹图谱

以95%乙醇作为提取的溶媒,将加热回流提取得到的提取液水浴挥干得到浸膏,并用甲醇配制成1 mg·m L^(-1)供试液。采用phenomenex-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 m L·min^(-1),柱温为30℃,检测波长为260 nm HPLC色谱法测定,采用国家药典委员会相似度评价软件进行分析。结果表明:建立了精密度、稳定性和重现性均较好的5味山姜属中药乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱,确定了9个共有峰,6个强峰;其中高良姜、大高良姜含有5个共有峰,高良姜和草豆蔻含有3个共有峰,大高良姜和红豆蔻含有2个共有峰,高良姜和益智含有3个共有峰。对5味山姜属中药乙酸乙酯部位化学成分进行相似度分析,得出其相似度分别为0.955、0.805、0.371、0.794、0.345。所建立的5味山姜属中药乙酸乙酯部位的指纹图谱方法稳定、简便、可靠,其特征峰所代表的化学成分的相似性不尽相同,高良姜、大高良姜、草豆蔻的相似性较大,红豆蔻、益智的相似性较小,说明同基原中药之间的化学成分有一定的相关性。该研究结果为探讨山姜属中药亲缘关系与化学成分相关性提供了思路与基础。

HPLC测定4种藏药中没食子酸的含量

目的 建立 4种藏药中没食子酸的含量测定方法。方法 采用HPLC法 ,ODS色谱柱 (2 0 0mm× 4 .6mm ,5 μm ,Dikma) ;流动相为甲醇 - 0 .1%磷酸 (5∶95 ) ;流速 1ml·min-1;波长 2 80nm。结果 没食子酸在浓度 0 .1～ 15 0 μg·ml-1范围内线性关系良好 (r≥ 0 .9991) ,平均回收率为 98%～ 10 1% ,精密度为 1%～ 3% ,重复性为 2 %～ 4 %。结论 所建立的没食子酸的HPLC法适用于 4种藏药的质量控制。