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Study of Swine Leukocyte Antigen Class I-3 (SLA-3) Gene for Inbreeding Wuzhishan Pig 被引量:1
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作者 SUN Jun-li MU Wu-lian +2 位作者 LIU Xiao-lin FENG Shu-tang WANG Su-rong 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2007年第12期1502-1510,共9页
To elucidate the structure of SLA-3 alleles on inbred line of Wuzhishan pig (WZSP) population, we examined the partial exon 1, completed exon 2, and partial exon 3 of SLA-3 loci using the reverse transcription-polym... To elucidate the structure of SLA-3 alleles on inbred line of Wuzhishan pig (WZSP) population, we examined the partial exon 1, completed exon 2, and partial exon 3 of SLA-3 loci using the reverse transcription-polymerase chain reaction (RT- PCR) and the sequencing-based method in 32 WZSPs. According to pedigree and amplification results, PCR products of 8 WZSPs were selected to clone and sequence. Nine different nucleotide sequences were obtained. After comparing the DNA and protein sequences of the WZSPs SLA-3 alleles with the published GenBank SLA sequences, it was found that the SLA-3 alleles in WZSPs were all novel, but there were very few variations among them. Comparision of SLA-3 and HLA-A protein sequences indicated that there was more sequence homology. Meanwhile, the construction of a phylogenetic tree using the nucleotide sequences of 23 SLA-3 alleles and 1 HLA-A allele represented that the WZSP population owns its unique genetics resource. In this study, the alleles of SLA-3 on WZSP group were successfully detected and analyzed, which provided the firm basis on the genotype of SLA-3 for breeding specific haplotypes WZSPs. 展开更多
关键词 inbreeding Wuzhishan pig leucocyte antigen SLA classical class 1-3 gene RT-PCR
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MAGE-3逆抗原转染树突状细胞的抗胃癌免疫效率 被引量:2
2
作者 黎皓 陈雪华 +5 位作者 俞焙秦 柯山 郑重 朱正纲 顾琴龙 刘炳亚 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期512-515,共4页
目的构建逆抗原表达载体,以获得理想的肿瘤疫苗。方法运用RT-PCR方法合成MAGE-3cDNA,分别将RANTES基因分泌段前导序列和受体Fc段克隆至MAGE-3cDNA两端(pS-MAGE-3-Fc)再转染入DC表达,将致敏的DC与外周血T细胞和胃癌细胞共培养,观察产生... 目的构建逆抗原表达载体,以获得理想的肿瘤疫苗。方法运用RT-PCR方法合成MAGE-3cDNA,分别将RANTES基因分泌段前导序列和受体Fc段克隆至MAGE-3cDNA两端(pS-MAGE-3-Fc)再转染入DC表达,将致敏的DC与外周血T细胞和胃癌细胞共培养,观察产生的免疫效应。结果转染pS-MAGE-3-Fc的DC诱导的刺激淋巴细胞增殖反应和CTL杀伤效应均显著高于转染pMAGE-3的转染组和对照组(P<0.05)。结论逆抗原策略是理想的肿瘤疫苗策略,能够显著提高肿瘤免疫效率。 展开更多
关键词 黑色素瘤抗原编码基因-3 逆抗原 树突状细胞 转染 主要组织相容性复合体
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黑色素瘤抗原基因-1,3基因在肺癌组织中的表达及其意义 被引量:2
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作者 白黎智 姜志良 +1 位作者 王林 朴斐 《临床军医杂志》 CAS 2005年第3期294-296,共3页
目的了解肺癌组织中和黑色素瘤抗原基因(MAGE)1,3基因的表达,并探讨其作为免疫治疗的靶抗原在肺癌中的应用价值。方法采用RTPCR法检测72例肺癌患者的肿瘤组织和相应的癌旁“正常”组织中MAGE1,3基因的表达情况。结果72例肺癌组织中,MAGE... 目的了解肺癌组织中和黑色素瘤抗原基因(MAGE)1,3基因的表达,并探讨其作为免疫治疗的靶抗原在肺癌中的应用价值。方法采用RTPCR法检测72例肺癌患者的肿瘤组织和相应的癌旁“正常”组织中MAGE1,3基因的表达情况。结果72例肺癌组织中,MAGE1表达阳性率为72%(52/72例)MAGE3表达阳性率为69%(50/72例)MAGE1,3表达双阳性率为52%(38/72例),MAGE1,3任一基因表达阳性者64例,阳性率为89%(64/72例)。癌旁"正常"组织中MAGE1,3基因表达阳性率分别为47%(34/72例)和44%(32/72例),MAGE1,3表达双阳性率为31%(22/72例)。肺癌组织MAGE1,3基因表达阳性率均高于癌旁“正常”组织,5株肺细胞株MAGE1,3基因表达均为阳性。结论基于MAGE1,3基因在肺癌中的高表达率,可利用其作为靶分子进行免疫治疗,同时也可作为一种有临床价值的随访指标。 展开更多
关键词 肺癌组织 3基因 抗原基因-1 MAGE-1 其意义 表达及 黑色素瘤抗原基因 基因表达 PCR法检测 免疫治疗 阳性率 应用价值 肿瘤组织 肺癌患者 表达情况 临床价值 靶抗原 癌旁 RT- 阳性者 细胞株 表达率 靶分子
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黑色素瘤抗原基因-3在直肠癌的表达及意义 被引量:5
4
作者 李新明 陶凯雄 +4 位作者 王国斌 张宁 吴相柏 张景辉 田源 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2006年第3期308-310,320,共4页
目的检测黑色素瘤抗原基因3(MAGE3)在直肠癌中的表达,探索其与直肠癌临床病理的关系及其在直肠癌免疫治疗中的应用价值。方法采用RT PCR法,对33例直肠癌患者的癌组织及其相应距肿瘤边缘(5±1)cm的癌旁组织和手术切缘(乙状结肠端)以... 目的检测黑色素瘤抗原基因3(MAGE3)在直肠癌中的表达,探索其与直肠癌临床病理的关系及其在直肠癌免疫治疗中的应用价值。方法采用RT PCR法,对33例直肠癌患者的癌组织及其相应距肿瘤边缘(5±1)cm的癌旁组织和手术切缘(乙状结肠端)以及3例直肠息肉标本(无瘤)的MAGE3的表达情况进行检测,并对RT PCR扩增产物中的目的基因片段进行DNA测序验证。结果33例直肠癌组织中,MAGE3基因的表达阳性率为42.42%(14/33),在癌旁组织和手术切缘组织中,MAGE3基因的表达阳性率分别为18.18%(6/33)和15.15%(5/33),3例直肠息肉标本未见MAGE3表达。肿瘤组织MAGE3基因表达阳性率均显著高于癌旁组织和手术切缘组织(P<0.05);而与患者年龄、性别、肿瘤组织学类型、Dukes分期及淋巴结转移无关(P>0.05)。结论基于MAGE3基因在直肠癌中的高表达率,MAGE3表达的蛋白可以作为一种有前途的靶点用于免疫治疗,同时有望成为一种筛查和随访指标。 展开更多
关键词 直肠癌 黑色素瘤抗原基因-3 基因表达
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CpG ODN协同MAGE-3抗原肽致敏DC疫苗对膀胱癌细胞BIU-87的抑制作用 被引量:1
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作者 李秀真 薛庆节 +5 位作者 路海 聂尚丹 王晖 李运清 赵龙玉 谭文彬 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期891-897,共7页
目的:探讨含未甲基化胞嘧啶鸟嘌呤(CpG)序列的细菌寡核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN)免疫佐剂在增强黑色素瘤抗原基因-3(melanoma antigen gene-3,MAGE-3)抗原肽致敏DC抗膀胱肿瘤细胞的作用及其分子机制。方法:采用Ficoll法... 目的:探讨含未甲基化胞嘧啶鸟嘌呤(CpG)序列的细菌寡核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN)免疫佐剂在增强黑色素瘤抗原基因-3(melanoma antigen gene-3,MAGE-3)抗原肽致敏DC抗膀胱肿瘤细胞的作用及其分子机制。方法:采用Ficoll法从健康志愿者HLA-A2型外周血中分离单个核细胞,常规方法诱导培养制备成熟DC。MTT法检测不同方式(MAGE-3、CpG ODN、MAGE-3+CpG ODN和无关抗原对照)致敏DC对T淋巴细胞增殖和CTL对靶细胞BIU-87的杀伤作用。CpG ODN+MAGE-3抗原肽致敏DC抗裸鼠BIU-87膀胱癌细胞移植瘤治疗7、11 d测定移植瘤质量变化,MTT和Western blotting法分别检测移植瘤细胞的增殖水平及其凋亡蛋白表达的变化。结果:CpG ODN+MAGE-3抗原肽致敏DC能够促进T淋巴细胞增殖(P<0.05),并显著提高活化T淋巴细胞的CTL对靶细胞BIU-87的杀伤活性(P<0.05)。体内实验表明,致敏DC治疗7、11 d的各组移植瘤质量均明显降低(均P<0.05),移植瘤的增殖能力下降也较明显(P<0.05);与其他致敏DC方式相比较,尤以CpG ODN+MAGE-3致敏DC组在治疗11 d时的移植瘤质量降低非常显著(P<0.01),且明显促进荷瘤小鼠脾脏单个核细胞的增殖能力(P<0.01);该组在治疗第3天起移植瘤组织Bcl-2表达水平明显降低、Bax水平明显升高(均P<0.05或P<0.01)。结论:CpG ODN能促进MAGE-3抗原肽致敏DC对膀胱癌BIU-87细胞的抑制作用,为膀胱癌DC疫苗的临床应用提供了实验依据。 展开更多
关键词 膀胱癌 BIU-8细胞 树突状细胞 含CpG序列的细菌寡核苷酸 黑色素瘤抗原基因-3
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胃癌组织中黑色素瘤抗原基因-1,3基因的表达及其意义 被引量:1
6
作者 刘炳亚 陈雪华 +5 位作者 李建芳 张奕 瞿颖 顾琴龙 朱正纲 林言箴 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期571-574,共4页
目的 了解胃癌组织中黑色素瘤抗原基因 (MAGE) 1、3基因的表达 ,并探讨其作为免疫治疗的靶抗原在胃癌中的应用价值。方法 采用RT PCR法检测 36例胃癌患者的肿瘤组织和相应的癌旁“正常”黏膜中MAGE 1、3基因的表达情况 ,并以 37例慢... 目的 了解胃癌组织中黑色素瘤抗原基因 (MAGE) 1、3基因的表达 ,并探讨其作为免疫治疗的靶抗原在胃癌中的应用价值。方法 采用RT PCR法检测 36例胃癌患者的肿瘤组织和相应的癌旁“正常”黏膜中MAGE 1、3基因的表达情况 ,并以 37例慢性胃炎患者的胃镜活检组织和 4株胃癌细胞株作为对照。结果  36例胃癌组织中 ,MAGE 1表达阳性率为 72 .2 2 % (2 6 / 36例 ) ,MAGE 3表达阳性率为 6 9.4 4 % (2 5 / 36例 ) ,MAGE 1、3表达双阳性率为 5 2 .78% (19/ 36例 ) ,MAGE 1、3任一基因表达阳性者 32例 ,阳性率为 88.89% (32 / 36例 )。癌旁“正常”黏膜中MAGE 1、3基因表达阳性率分别为 4 7.2 2 % (17/ 36例 )和 4 4 .4 4 % (16 / 36例 ) ,MAGE 1、3表达双阳性率为 30 .5 6 % (11/ 36例 )。 37例慢性胃炎组织中 ,MAGE 1、3表达阳性率分别为 2 9.73% (11/ 37例 )和2 7.0 3% (10 / 37例 ) ,MAGE 1、3表达双阳性率为 8.11% (3/ 37例 )。胃癌组织MAGE 1、3基因表达阳性率均高于癌旁“正常”黏膜组织和慢性胃炎患者。 4株胃癌细胞株MAGE 1、3基因表达均为阳性。结论 基于MAGE 1、3基因在胃癌中的高表达率 ,可利用其作为靶分子进行免疫治疗 。 展开更多
关键词 胃癌 黑色素瘤抗原基因-1 黑色素瘤抗原基因-3 基因表达
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MAGE-3在胃癌组织中的表达及其临床意义 被引量:1
7
作者 何宋兵 汪良 +3 位作者 吴雨岗 陈彦 孙康 张雁云 《中国现代普通外科进展》 CAS 2007年第3期230-232,239,共4页
目的:检测黑色素瘤抗原基因-3(MAGE-3)在胃癌组织中的表达,探讨其在胃癌免疫治疗中的应用价值。方法:应用RT-PCR方法对40例胃癌组织和相应的癌旁组织以及20例胃慢性炎症组织中的MAGE-3基因进行检测,随机选取RT-PCR阳性扩增产物进行测序... 目的:检测黑色素瘤抗原基因-3(MAGE-3)在胃癌组织中的表达,探讨其在胃癌免疫治疗中的应用价值。方法:应用RT-PCR方法对40例胃癌组织和相应的癌旁组织以及20例胃慢性炎症组织中的MAGE-3基因进行检测,随机选取RT-PCR阳性扩增产物进行测序,并结合临床病理参数进行研究分析。结果:在40例胃癌组织中,MAGE-3基因的表达阳性率为67.5%(27/40),明显高于在相应的癌旁组织15%(6/40)及胃慢性炎症组织中的表达阳性率10%(2/20)。DNA测序证实RT-PCR产物确为MAGE-3基因的目的片段。胃癌组织中MAGE-3基因表达的阳性率与胃癌的浸润深度有关,而与病理分期、分化程度和淋巴转移无关。结论:MAGE-3基因在胃癌组织中有较高的表达率,可望将其编码的蛋白作为靶分子应用于胃癌的免疫治疗。 展开更多
关键词 胃肿瘤 黑色素瘤抗原基因-3
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MAGE-3基因mRNA的表达在胸腔积液鉴别诊断中的价值 被引量:2
8
作者 刘静 岳红梅 胡泉 《社区医学杂志》 2008年第11期1-3,共3页
目的研究MAGE-3基因mRNA在胸腔积液中的表达,探讨MAGE-3基因作为良、恶性胸腔积液鉴别诊断指标的价值。方法采用巢式逆转录-聚合酶链反应(nRT-PCR)方法,检测35例患者(25例恶性,10例良性)胸腔积液中MAGE-3的表达情况。结果10例良性胸腔... 目的研究MAGE-3基因mRNA在胸腔积液中的表达,探讨MAGE-3基因作为良、恶性胸腔积液鉴别诊断指标的价值。方法采用巢式逆转录-聚合酶链反应(nRT-PCR)方法,检测35例患者(25例恶性,10例良性)胸腔积液中MAGE-3的表达情况。结果10例良性胸腔积液组中,均未见有MAGE-3特异性条带;25例恶性胸腔积液组中,有14例可见MAGE-3特异性扩增条带,MAGE-3基因表达阳性率为56.00%,其敏感性、特异性、诊断符合率分别为56.00%、100.00%、68.57%。结论检测胸腔积液中MAGE-3基因mRNA的表达,可以作为鉴别良、恶性胸腔积液的一个指标。 展开更多
关键词 肺癌 MAGE-3基因 胸腔积液 巢式逆转录-聚合酶链反应
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黑色素肿瘤抗原基因-1、3在直肠癌肝转移组织的表达 被引量:1
9
作者 裴斐 李新明 +1 位作者 史火喜 张景辉 《咸宁学院学报(医学版)》 2010年第2期96-99,共4页
目的探索黑色素肿瘤抗原基因-1、-3(MAGE-1、MAGE-3)在直肠癌肝转移组织中的表达与直肠癌肝转移的相关性。方法采用RT-PCR法,对30例直肠癌肝转移患者的癌组织和30例直肠癌非肝转移患者的癌组织的MAGE-1、MAGE-3的表达情况进行检测,并对R... 目的探索黑色素肿瘤抗原基因-1、-3(MAGE-1、MAGE-3)在直肠癌肝转移组织中的表达与直肠癌肝转移的相关性。方法采用RT-PCR法,对30例直肠癌肝转移患者的癌组织和30例直肠癌非肝转移患者的癌组织的MAGE-1、MAGE-3的表达情况进行检测,并对RT-PCR扩增产物中的目的基因片段进行DNA测序验证。结果 30例直肠癌肝转移患者癌组织中,MAGE-1基因的表达阳性率为46.67%,MAGE-3基因的表达阳性率为56.67%,MAGE-1、MAGE-3都表达的阳性率为36.67%,至少表达其中一种的阳性率为66.67%;30例直肠癌非肝转移患者癌组织中,MAGE-1基因的表达阳性率为26.67%,MAGE-3基因的表达阳性率为40.00%,MAGE-1、MAGE-3都表达的阳性率为23.33%,至少表达其中一种的阳性率为43.33%。直肠癌肝转移患者癌组织中MAGE-1、MAGE-3基因表达阳性率均显著高于直肠癌非肝转移患者癌组织(P<0.05)。结论 MAGE-1,MAGE-3有望作为一种新的指标用于直肠癌的转移和预后监测。 展开更多
关键词 直肠癌 黑色素肿瘤抗原基因.1 黑色素肿瘤抗原基因-3 基因表达
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黑色素瘤抗原-1、3基因在肝内胆管细胞癌中的表达及临床意义
10
作者 卢欣 赵海涛 +4 位作者 桑新亭 毛一雷 陈蓉蓉 钟守先 黄洁夫 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期197-200,共4页
目的研究黑色素瘤抗原(MAGE)-1和MAGE-3基因在肝内胆管细胞癌(IHCC)组织中的表达,探讨MAGE-1、MAGE-3基因与IHCC患者临床指标的关系。方法RT-PCR方法检测20例IHCC患者癌组织及相应癌旁组织MAGE-1、MAGE-3基因表达,对全部RT-PCR扩增产物... 目的研究黑色素瘤抗原(MAGE)-1和MAGE-3基因在肝内胆管细胞癌(IHCC)组织中的表达,探讨MAGE-1、MAGE-3基因与IHCC患者临床指标的关系。方法RT-PCR方法检测20例IHCC患者癌组织及相应癌旁组织MAGE-1、MAGE-3基因表达,对全部RT-PCR扩增产物中目的基因片段进行DNA测序以证实其为MAGE-1、MAGE-3基因。分析MAGE-1、MAGE-3基因表达与患者性别、年龄、肿瘤直径、有无包膜、肿瘤形态以及乙肝病毒表面抗原等临床指标的关系。结果20例IHCC患者癌组织中MAGE-1、MAGE-3基因表达的阳性率分别为35%和45%,显著高于癌旁组织(0)(P<0·01)。IHCC患者癌组织中MAGE-1、MAGE-3基因表达的阳性率与患者性别、年龄、肿瘤直径、有无包膜以及乙型肝炎病毒感染等指标均无关(P>0·05);MAGE-3基因表达的阳性率与肿瘤形态有关(P<0·05)。结论MAGE-1、MAGE-3基因在IHCC患者肝癌组织中特异性高表达,MAGE-1、MAGE-3基因可能成为IHCC患者免疫治疗的攻击靶点。 展开更多
关键词 肝内胆管细胞癌 黑色素瘤抗原-1 3基因 聚合酶链反应
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siRNA介导MAGE-3沉默抗老年大鼠胃癌活性作用及相关机制
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作者 杨梅 皮国涛 +2 位作者 高欢 柳英辉 陈文习 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第17期4249-4253,共5页
目的探讨siRNA介导黑色素瘤抗原基因(MAGE)-3沉默抗老年大鼠胃癌活性的作用及相关机制。方法选取30只清洁级SD雄性老年大鼠,建立胃癌模型,成功27只,随机分为模型组、对照组和MAGE-3沉默组各9只。建立靶向MAGE-3基因寡核苷酸,观察胃癌肿... 目的探讨siRNA介导黑色素瘤抗原基因(MAGE)-3沉默抗老年大鼠胃癌活性的作用及相关机制。方法选取30只清洁级SD雄性老年大鼠,建立胃癌模型,成功27只,随机分为模型组、对照组和MAGE-3沉默组各9只。建立靶向MAGE-3基因寡核苷酸,观察胃癌肿瘤生长状况、病理学、胃癌细胞增殖情况,检测端粒酶催化亚单位(hTERT)、信号转导与激活因子(STAT)3、p53、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达。结果与模型组相比,对照组肿瘤质量、肿瘤体积升高,MAGE-3沉默组肿瘤质量、肿瘤体积下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,MAGE-3沉默组肿瘤质量、肿瘤体积降低,抑瘤率增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,对照组胃癌细胞增殖指数增加,MAGE-3沉默组胃癌细胞增殖指数下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,MAGE-3沉默组胃癌细胞增殖指数下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,对照组hTERT、STAT3、p53、VEGF蛋白表达升高,MAGE-3沉默组hTERT、STAT3、p53、VEGF蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,hTERT、STAT3、p53、VEGF蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论siRNA介导MAGE-3沉默能抑制老年大鼠胃癌肿瘤生长,通过调控hTERT、STAT3、p53、VEGF蛋白表达,抑制胃癌活性。 展开更多
关键词 SIRNA 黑色素瘤抗原基因-3 胃癌
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黑色素肿瘤抗原基因-1、3在直肠癌的表达及其意义
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作者 李新明 陶凯雄 +4 位作者 张贤珍 史火喜 王国斌 张景辉 田源 《肿瘤研究与临床》 CAS 2009年第3期168-171,共4页
目的检测黑色素肿瘤抗原基因-1、3(MAGE-1、MAGE-3)在直肠癌中的表达,探讨其与直肠癌临床病理的关系及其在直肠癌免疫治疗中的应用价值。方法采用RT—PCR法,对33例直肠癌患者的癌组织及其相应的癌旁组织和手术切缘(乙状结肠端)以... 目的检测黑色素肿瘤抗原基因-1、3(MAGE-1、MAGE-3)在直肠癌中的表达,探讨其与直肠癌临床病理的关系及其在直肠癌免疫治疗中的应用价值。方法采用RT—PCR法,对33例直肠癌患者的癌组织及其相应的癌旁组织和手术切缘(乙状结肠端)以及3例直肠息肉标本(无瘤)的MAGE-1、MAGE-3的表达情况进行检测,并对RT—PCR扩增产物中的目的基因片段进行DNA测序验证。结果33例直肠癌组织中,MAGE-1基因的表达阳性率为30.30%(10/33),MAGE-3基因的表达阳性率为42.42%(14/33),MAGE-1、MAGE-3均表达的阳性率为21.21%(7/33),至少表达其中-种的阳性率为51.51%;在癌旁组织和手术切缘组织中,MAGE-1基因的表达阳性率均为12.12%(4/33),MAGE-3基因的表达阳性率分别为18.18%(6/33)、15.15%(5/33);3例直肠息肉标本未见MAGE-1、MAGE-3表达。肿瘤组织MAGE-1、MAGE-3基因表达阳性率均显著高于癌旁组织和手术切缘组织(P〈0.05);而与患者年龄、性别、肿瘤组织学类型、Duke分期及淋巴结转移无关(P〉0.05)。结论基于MAGE-1、MAGE-3基因在直肠癌中的高表达率,MAGE-1、MAGE-3表达蛋白可以作为一种有前途的靶点用于免疫治疗,同时有望成为一种筛查和随访指标。 展开更多
关键词 直肠肿瘤 抗原 肿瘤 黑色素肿瘤抗原基因-1 黑色素肿瘤抗原基因-3 因表达
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腺病毒转染黑色素瘤抗原基因3的树突状细胞疫苗抗胃癌的免疫效应 被引量:2
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作者 何宋兵 汪良 张雁云 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期330-334,共5页
目的研究趋化因子巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)动员的树突状细胞(DC),经黑色素瘤抗原基因3(MAGE-3)腺病毒转染后对胃癌细胞的免疫效应。方法615小鼠尾静脉注射MIP-1α,分选得到B220^-CD11c^+细胞,加入细胞因子连续培养,检... 目的研究趋化因子巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)动员的树突状细胞(DC),经黑色素瘤抗原基因3(MAGE-3)腺病毒转染后对胃癌细胞的免疫效应。方法615小鼠尾静脉注射MIP-1α,分选得到B220^-CD11c^+细胞,加入细胞因子连续培养,检测其细胞表面标志和混合淋巴细胞反应(MLR)。收集培养后的B220^-CD11c^+细胞,加入编码MAGE-3的重组腺病毒进行转染,制备表达肿瘤抗原的DC疫苗,以荷载小鼠前胃癌(MFC)全肿瘤细胞抗原制备的DC疫苗作为阳性对照。采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法,检测活化的T淋巴细胞在体外对MFC细胞的杀伤作用。采用酶联免疫吸附试验(ELISA),检测γ干扰素(INF-γ)的分泌情况。DC疫苗皮下注射MFC荷瘤小鼠,观察小鼠瘤体生长情况和存活时间。结果MIP-1α注射后,外周血中B220-CD11c^+细胞明显升高。新鲜分离的B220-CD11c^+细胞在体外经过细胞因子诱导分化后具有典型的DC表面标志,并在MLR中具有极强的刺激T淋巴细胞增殖的能力。腺病毒转染MAGE-3的DC激活的T淋巴细胞表现出对MFC细胞的特异性杀伤作用,产生高水平的INF-γ[(1460.00±16.82)pg/ml]。实验组荷瘤小鼠接受DC疫苗治疗后,肿瘤生长缓慢,观察至MFC细胞接种后的第27天,其肿瘤体积仅为(3.46±1.12)cm^3;实验组小鼠的肿瘤体积与对照组之间的差异有统计学意义(P〈0.01)。实验组小鼠存活时间明显延长,与对照组之间的差异有统计学意义(P〈0.01)。结论注射趋化因子MIP—1α可快速动员并诱导分化为成熟DC。肿瘤抗原基因MAGE-3经腺病毒转染制备的DC疫苗,在体外可以诱导出针对胃癌细胞的特异性杀伤作用,在体内对MFC荷瘤小鼠有明显的免疫治疗作用。 展开更多
关键词 黑色素瘤抗原基因3 树突状细胞 巨噬细胞炎症蛋白- 胃肿瘤
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