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Comparative Analysis of Protein Expression Concomitant with DNA Methyltransferase 3A Depletion in a Melanoma Cell Line
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作者 Xiaoyan Liu Shengnan Tang +5 位作者 Tonghua Li Haoyue Wang Jiangming Sun Qian Qiao Jun Yao Jian Fei 《American Journal of Analytical Chemistry》 2011年第5期539-572,共34页
DNA methyltransferase 3A (Dnmt3a), a de novo methyltransferase, has attracted a great deal of attention for its important role played in tumorigenesis. We have previously demonstrated that melanoma is unable to grow i... DNA methyltransferase 3A (Dnmt3a), a de novo methyltransferase, has attracted a great deal of attention for its important role played in tumorigenesis. We have previously demonstrated that melanoma is unable to grow in-vivo in conditions of Dnmt3a depletion in a mouse model. In this study, we cultured the Dnmt3a depletion B16 melanoma (Dnmt3a-D) cell line to conduct a comparative analysis of protein expression con-comitant with Dnmt3a depletion in a melanoma cell line. After two-dimensional separation, by gel electro-phoresis and liquid chromatography, combined with mass spectrometry analysis (1DE-LC-MS/MS), the re-sults demonstrated that 467 proteins were up-regulated and 535 proteins were down-regulated in the Dnmt3a-D cell line compared to the negative control (NC) cell line. The Genome Ontology (GO) and KEGG pathway were used to further analyze the altered proteins. KEGG pathway analysis indicated that the MAPK signaling pathway exhibited a greater alteration in proteins, an interesting finding due to the close relation-ship with tumorigenesis. The results strongly suggested that Dnmt3a potentially controls the process of tu-morigenesis through the regulation of the proteins (JNK1, p38α, ERK1, ERK2, and BRAF) involved in tu-mor-related pathways, such as the MAPK signaling pathway and melanoma pathway. 展开更多
关键词 Dnmt3a melanoma cell line 1DE-LC-MS/MS MAPK Signaling PATHWAY melanoma PATHWAY
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聚多巴胺并木犀草素对细胞毒性淋巴细胞肿瘤杀伤作用的影响
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作者 李程琳 王梓聿 +3 位作者 曹丁元 国超凡 王爽 李玲 《精准医学杂志》 2023年第3期199-204,共6页
目的 探讨聚多巴胺(PDA)并木犀草素(LUT)通过光热治疗对细胞毒性淋巴细胞(CTL)肿瘤杀伤作用的影响。方法 通过扫描电子显微镜(SEM)和接触角测定仪观察和测定合成PDA的表征。将RAW264.7细胞分为Control组、LPS组(2μg/L)、PDA′组(50 000... 目的 探讨聚多巴胺(PDA)并木犀草素(LUT)通过光热治疗对细胞毒性淋巴细胞(CTL)肿瘤杀伤作用的影响。方法 通过扫描电子显微镜(SEM)和接触角测定仪观察和测定合成PDA的表征。将RAW264.7细胞分为Control组、LPS组(2μg/L)、PDA′组(50 000μg/L),常规培养48 h,采用CCK8实验检测细胞活力,通过流式细胞术检测LUT对RAW264.7细胞分化的影响。将雌性C57BL/6小鼠随机分为模型组、PDA组、LUT组以及PDA+LUT组,各组小鼠的后背部均皮下注射B16F10黑色素瘤细胞,建模后第10天在PDA组和PDA+LUT组建模小鼠肿瘤处注射PDA行光热治疗1次后,对建模小鼠右大腿肌肉分别注射PBS、PDA(2.5μg/只)、LUT(500μg/只)、PDA(2.5μg/只)+LUT(500μg/只),观察建模小鼠肿瘤生长以及存活情况。在治疗后第3、7天,取各组建模小鼠脾脏制备单细胞悬液,采用流式细胞术检测小鼠体内巨噬细胞分化和T细胞表达情况。结果SEM观察到合成的PDA具有较强的吸附能力和亲水性,并且CCK8实验检测结果显示PDA对细胞活力无影响(P>0.05)。各组RAW264.7细胞的CD206和iNOS平均荧光强度差异有显著性(F=30.72、1 516.00,P<0.05)。注射或不注射PDA时,则注射或不注射LUT小鼠的肿瘤大小和体内免疫细胞iNOS、CD206、IFN-γ^(+)CD4^(+)、TNF-α^(+)CD8^(+)表达水平比较差异均有显著性(F=23.10~235.52,P<0.05);注射或不注射LUT时,则注射或不注射PDA小鼠的肿瘤大小和体内免疫细胞iNOS、CD206、CD4^(+)IFN-γ^(+)、CD8^(+)TNF-α^(+)表达水平比较差异均有显著性(F=8.98~200.67,P<0.05);建模小鼠中PDA+LUT组存活率与其他组相比显著提高(χ^(2)=9.70,P<0.01)。结论 LUT具有抑制小鼠巨噬细胞向M2分化并促进其向M1分化的作用,PDA并LUT治疗可以有效抑制小鼠肿瘤生长,提高生存率,增强CTL的肿瘤杀伤作用。 展开更多
关键词 黑色素瘤 细胞系 肿瘤 光热疗法 多巴胺 聚合物 木犀草素 肿瘤逃逸 T淋巴细胞 细胞毒性
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小鼠眼内移植三种B16黑色素瘤细胞系的比较研究 被引量:8
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作者 赵军 李辰 +2 位作者 狄静芳 冯峥 赵松滨 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期914-916,T002,共4页
目的 :比较B16F0、B16F1、B16F10 3种黑色素瘤细胞系的细胞移植于该肿瘤细胞系来源的C5 7BL/6小鼠前房内的进展情况。方法 :将此三种黑色素瘤细胞系培养后的活细胞悬液移植于C5 7BL/6小鼠前房内 ,观察并比较其眼球溃破时间、淋巴结和肺... 目的 :比较B16F0、B16F1、B16F10 3种黑色素瘤细胞系的细胞移植于该肿瘤细胞系来源的C5 7BL/6小鼠前房内的进展情况。方法 :将此三种黑色素瘤细胞系培养后的活细胞悬液移植于C5 7BL/6小鼠前房内 ,观察并比较其眼球溃破时间、淋巴结和肺的转移及生存期。结果 :F10组移植肿瘤眼眼球溃破时间早于另两组 ,而F0组与F1组间无差异。在鼠前房移植肿瘤细胞后的 18d ,F1组及F10组鼠出现移植肿瘤眼同侧的颈部淋巴结转移 ,而F0组未出现类似情况 ;在鼠前房移植肿瘤细胞后的 2 8d ,3组均出现肺转移。F0组小鼠生存时间长于另两组 ,而F1组与F10组间无差异。结论 :3种黑色素瘤细胞系的细胞移植于小鼠前房内后进展不同 。 展开更多
关键词 黑色素瘤 细胞系 对比研究 小鼠
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赤芍总苷对人黑色素瘤细胞株凋亡诱导的作用机制 被引量:10
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作者 王亚珍 吕品田 +1 位作者 王凤红 王辰英 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第23期4606-4608,共3页
目的观察赤芍总苷(TPG)对人黑色素瘤A375细胞凋亡的影响并探讨其机制。方法将12.5、25、50、100、200 mg/L TPG分别加入体外培养的黑色素瘤细胞,对照组加等量生理盐水,孵育24、48 h后MTT测定细胞生长抑制率;25 mg/L TPG孵育细胞48 h,收... 目的观察赤芍总苷(TPG)对人黑色素瘤A375细胞凋亡的影响并探讨其机制。方法将12.5、25、50、100、200 mg/L TPG分别加入体外培养的黑色素瘤细胞,对照组加等量生理盐水,孵育24、48 h后MTT测定细胞生长抑制率;25 mg/L TPG孵育细胞48 h,收集细胞,FCM测定细胞凋亡率;RT-PCR和Western blot分别测定Caspase-3、Bcl-2、Bax、Fas、FasL mRNA和蛋白的表达水平。结果 TPG抑制A375细胞生长作用明显,25 mg/L TPG孵育黑色素瘤细胞48 h后,细胞凋亡率增高,Caspase-3、Bax、Fas、FasL mRNA和蛋白表达也明显升高,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平下降,Bcl-2/Bax比值显著降低(均P<0.05)。结论 TPG可诱导黑色素瘤肿瘤细胞凋亡,其机制与上调Caspase-3、Fas和FasL表达水平,下调Bcl-2,降低Bcl-2/Bax比值密切相关。 展开更多
关键词 赤芍总苷 黑色素瘤细胞株A375 凋亡
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C57BL/6小鼠黑色素瘤B16细胞株在ICR小鼠肿瘤模型的建立 被引量:7
5
作者 李桂圆 陈龙邦 +1 位作者 臧静 张群 《医学研究生学报》 CAS 2003年第4期262-265,共4页
目的 : 在白色ICR小鼠建立B16细胞株黑色素瘤模型 ,以便于接种、测量和观察 ,既能降低研究成本 ,又能满足不同实验目的要求。 方法 :将B16细胞株黑色素瘤对数生长期细胞接种于ICR小鼠足垫、皮下、腹腔和尾静脉等部位 ,建立移植瘤模型... 目的 : 在白色ICR小鼠建立B16细胞株黑色素瘤模型 ,以便于接种、测量和观察 ,既能降低研究成本 ,又能满足不同实验目的要求。 方法 :将B16细胞株黑色素瘤对数生长期细胞接种于ICR小鼠足垫、皮下、腹腔和尾静脉等部位 ,建立移植瘤模型和肺部转移瘤模型。观察小鼠成瘤特点 ,并作病理和免疫组化染色检查 ,分析接种细胞数与肿瘤生成的关系以及肿瘤生长对小鼠生活状态和生存时间的影响。 结果 :6天后白色小鼠浅表部位和深部脏器 (解剖后 )可陆续观察到芝麻样或点线状到结节状、菜花状黑色瘤组织 ,直到发展至溃烂和 (或 )小鼠死亡。成瘤率与接种细胞数成正比 ,在接种细胞数 >1× 10 6 后成瘤率为 10 0 %。 结论 :B16细胞株黑色素瘤在ICR小鼠具有成瘤率高、观察和测量方便、费用低等优点 。 展开更多
关键词 肿瘤模型 B16细胞株黑色素细胞 ICR小鼠
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慢病毒介导shRNA沉默巢蛋白表达对人黑色素瘤细胞转移特性的影响 被引量:3
6
作者 杨旭辉 夏添 +3 位作者 余伟华 卢晓芳 项鹏 何峰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期7-13,共7页
目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,有效沉默黑色素瘤细胞株UACC903巢蛋白(nestin)的表达,研究其对黑色素瘤细胞转移能力的影响。方法以人nestin mRNA编码序列作为干扰靶点,以慢病毒基因PLL3.7作为质粒载体,构建靶向人nestin的shRNA表达... 目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,有效沉默黑色素瘤细胞株UACC903巢蛋白(nestin)的表达,研究其对黑色素瘤细胞转移能力的影响。方法以人nestin mRNA编码序列作为干扰靶点,以慢病毒基因PLL3.7作为质粒载体,构建靶向人nestin的shRNA表达质粒,另构建不针对任何已知mRNA的阴性对照shRNA表达质粒,分别感染UACC903细胞并流式分选获得高纯度的nestin干扰或对照组细胞。应用RT-PCR、免疫荧光及Western blotting检测不同组别nestin表达的变化。分别用Transwell侵袭试验检测跨膜细胞的数量评估各组黑色素瘤细胞的侵袭能力,划痕法检测迁移能力改变。光镜观察各组细胞形态变化,免疫荧光检测E-cadherin、N-cadherin和β-catenin在不同组别的表达变化。结果成功构建nestin shRNA慢病毒载体nestin-RNAi-LV。RT-PCR及免疫荧光结果显示干扰组UACC903细胞nestin mRNA及蛋白表达水平较对照组显著降低。nestin下调的UACC903细胞黏附、侵袭及迁移能力下降(P<0.05)。结论慢病毒介导的shRNA能有效地静默食管癌细胞nestin基因的表达,能抑制黑色素瘤细胞UACC903迁移。 展开更多
关键词 RNA干扰 人黑色素瘤 巢蛋白 迁移
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大蒜生理活性物质对胃癌细胞和黑色素瘤细胞抑制作用的研究 被引量:4
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作者 王霞 苟萍 +2 位作者 孙桂琳 孙素荣 索菲娅 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期557-561,共5页
目的:研究大蒜生理活性物质对人胃癌细胞MGC-9和小鼠黑色素瘤细胞B16细胞增殖及细胞周期的影响。方法:用倒置显微镜观察细胞形态,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测B16细胞周期分布的影响。结果:经大蒜素及其前体物... 目的:研究大蒜生理活性物质对人胃癌细胞MGC-9和小鼠黑色素瘤细胞B16细胞增殖及细胞周期的影响。方法:用倒置显微镜观察细胞形态,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测B16细胞周期分布的影响。结果:经大蒜素及其前体物质蒜氨酸、蒜氨酸酶和蒜氨酸+蒜氨酸酶处理后,MGC-9和B16细胞不同程度变圆,体积缩小,脱壁细胞增多;除蒜氨酸酶外,蒜氨酸、大蒜素和蒜氨酸+蒜氨酸酶都能诱导MGC-9和B16产生时间和剂量依赖性的增殖抑制作用,其中蒜氨酸+蒜氨酸酶的作用尤为显著。大蒜素和蒜氨酸+蒜氨酸酶阻滞B16细胞于G0/G1期。结论:本文由大蒜提取物处理后结果与已发表的临床研究相一致。 展开更多
关键词 大蒜 大蒜素 蒜氨酸 蒜氨酸酶 人胃癌细胞MGC-9 小鼠黑色素瘤细胞B16 细胞增殖 细胞周期
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阿维A抑制鼠黑素瘤B16细胞的增殖作用 被引量:4
8
作者 丁政云 杨阳 +2 位作者 汪甦 刘艳 李娟 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期83-85,共3页
目的:探讨阿维A(acitretin)、顺铂及两者联合应用对鼠黑素瘤B16细胞株(简称B16细胞)的作用。方法:分别采用阿维A(浓度为0.1、1.0、10.0、100.0μmol/L)、顺铂((浓度为2、4、8 mg/L)及两药联合处理B16细胞,对照组B16细胞培养不加上述药... 目的:探讨阿维A(acitretin)、顺铂及两者联合应用对鼠黑素瘤B16细胞株(简称B16细胞)的作用。方法:分别采用阿维A(浓度为0.1、1.0、10.0、100.0μmol/L)、顺铂((浓度为2、4、8 mg/L)及两药联合处理B16细胞,对照组B16细胞培养不加上述药物。在显微镜下观察细胞形态变化,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,应用两药相互作用指数(CDI)分析阿维A与顺铂的作用。结果:不同浓度阿维A对B16细胞增殖均具有抑制作用,与对照组相比,吸光度(A)值均有不同程度下降(P<0.01);对照组细胞贴壁生长良好,用药组细胞皱缩、破裂;两药CDI均>0.85,即阿维A和顺铂联合应用对B16细胞的增殖抑制具有相互协同作用。结论:阿维A对B16细胞的增殖有抑制作用,与顺铂联合应用相互间可增强诱导B16细胞的凋亡作用。 展开更多
关键词 阿维A 黑素瘤 B16细胞 顺铂
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银杏叶多糖对人恶性黑色素瘤细胞增殖的影响 被引量:15
9
作者 张丽娇 佟巨慧 +2 位作者 高立宏 费瑞 杨阳 《长春师范学院学报(自然科学版)》 2008年第6期57-58,共2页
研究了银杏叶多糖(PGBL)对人恶性黑色素瘤(A375)细胞增殖的影响。采用50μg.ml-1、100μg.ml-1和200μg.ml-1浓度的PGBL作用于A375细胞,MTT法检测细胞生长和增殖情况。结果表明,不同浓度的PGBL都可抑制A375细胞的增殖,且呈浓度、时间依... 研究了银杏叶多糖(PGBL)对人恶性黑色素瘤(A375)细胞增殖的影响。采用50μg.ml-1、100μg.ml-1和200μg.ml-1浓度的PGBL作用于A375细胞,MTT法检测细胞生长和增殖情况。结果表明,不同浓度的PGBL都可抑制A375细胞的增殖,且呈浓度、时间依赖性。证明PGBL对恶性黑色素瘤有一定的防治作用。 展开更多
关键词 银杏叶多糖 人恶性黑色素瘤细胞 抗肿瘤
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蛇毒金属蛋白酶抑制剂对小鼠黑色素转移瘤血管生成拟态形成的影响 被引量:3
10
作者 徐剑文 林建银 +3 位作者 林旭 黄清玲 赵蓉 齐元麟 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期466-468,共3页
目的:研究蛇毒金属蛋白酶抑制剂BJ46a对血管生成拟态形成的影响。方法:将BJ46a基因转染B16细胞,建立稳定转染的B16/pcDNA3.1HisC-BJ46a细胞株,通过C57BL/6小鼠实验性肺转移模型,模拟肿瘤细胞降解局部细胞外基质、进而侵袭转移... 目的:研究蛇毒金属蛋白酶抑制剂BJ46a对血管生成拟态形成的影响。方法:将BJ46a基因转染B16细胞,建立稳定转染的B16/pcDNA3.1HisC-BJ46a细胞株,通过C57BL/6小鼠实验性肺转移模型,模拟肿瘤细胞降解局部细胞外基质、进而侵袭转移过程,应用光镜和超薄切片透射电镜技术观察BJ46a基因转染对血管生成拟态形成的影响。结果:小鼠黑色素瘤内存在血管生成拟态,稳定转染的B16/pcDNA3.1HisC—BJ46a细胞株抑制其肿瘤血管生成拟态的形成。结论:BJ46a通过抑制血管生成拟态形成,从而抑制肿瘤的侵袭转移。 展开更多
关键词 蛇毒金属蛋白酶抑制剂 血管生成拟态 超微结构 小鼠黑色素瘤 B16细胞 侵袭和转移
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全反式维甲酸对恶性黑素瘤A375细胞增殖及Fas蛋白表达的影响 被引量:2
11
作者 周勇 杨洁 +1 位作者 赵华 李恒进 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期464-466,共3页
目的观察全反式维甲酸(ATRA)对体外培养恶性黑素瘤A375细胞增殖的抑制作用并探讨其作用机制。方法设置溶剂对照及ATRA不同浓度组,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测ATRA不同浓度、作用不同时间各组细胞存活和生长情况,分析量效、时效关系;W... 目的观察全反式维甲酸(ATRA)对体外培养恶性黑素瘤A375细胞增殖的抑制作用并探讨其作用机制。方法设置溶剂对照及ATRA不同浓度组,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测ATRA不同浓度、作用不同时间各组细胞存活和生长情况,分析量效、时效关系;Western blot检测10μmol/L ATRA作用不同时间Fas蛋白的表达。结果 ATRA在0.01~0.1μmol/L浓度对A375细胞增殖抑制作用不明显;在1~100μmol/L浓度有抑制作用;药物作用72 h时各浓度组的细胞抑制率均达到高峰,以100μmol/L浓度组抑制率最高;10μmol/LATRA可上调A375细胞Fas蛋白的表达。结论 ATRA对A375细胞增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖关系。ATRA可能通过Fas信号转导途径诱导A375细胞凋亡。 展开更多
关键词 黑色素瘤 A375细胞 全反式维甲酸
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8株人黑色素瘤细胞系的建立及其生物学特性研究 被引量:3
12
作者 祝和成 吴尚辉 +4 位作者 黄柏英 顾焕华 罗学滨 彭聪 祝斌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期276-280,共5页
目的 :从人黑色素瘤组织建立一系列黑色素瘤细胞系 ,命名为黑色素瘤细胞系 1- 8号 (HME1- 8) ,并研究鉴定其体外细胞生物学与免疫学特性。方法 :取黑色素瘤组织进行组织块培养法 ,待长满 90 %汇合面后消化传代培养 ,并进行形态学、生长... 目的 :从人黑色素瘤组织建立一系列黑色素瘤细胞系 ,命名为黑色素瘤细胞系 1- 8号 (HME1- 8) ,并研究鉴定其体外细胞生物学与免疫学特性。方法 :取黑色素瘤组织进行组织块培养法 ,待长满 90 %汇合面后消化传代培养 ,并进行形态学、生长动力学、免疫学及致瘤性等生物学特性研究。结果 :该系列黑色素瘤细胞系已在体外培养生存 1- 2年 ,传 6 0 - 10 0余代 ,其生物学特性显示 :①这些细胞系体外生长的倍增时间为 34. 2 - 5 9. 5h ;②软琼脂集落形成率平均值在 8. 6 % - 2 6 . 2 %之间 ;③接种至裸鼠后具有较高的致瘤性 ;④染色体核型分析为非整倍体 ,众数为 6 4 - 117条 ;⑤透射电镜下可观察到细胞含丰富的核糖体及黑色素颗粒 ;⑥免疫组化分析显示细胞浆内含大量阳性棕色黑色素颗粒 ;⑦肿瘤抗原检测显示 8株黑色素瘤细胞系的Melan -A抗原阳性率为 75 % ,MAGE - 1阳性率为5 0 % ,MAGE - 2阳性率为 37 .5 % ,MAGE - 3阳性率为 6 2 .5 %。结论 :8株黑色素瘤细胞系经体外长期培养后已永生化 ,形成了连续传代细胞系 ,具有明显的黑色素瘤细胞恶性表型特征。 展开更多
关键词 黑色素瘤 细胞培养 细胞系 抗原 肿瘤 人类
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黄芩苷对人黑色素瘤A375细胞增殖的影响 被引量:7
13
作者 匡菊香 雷沛鸿 石江 《中华中医药学刊》 CAS 2008年第11期2510-2512,共3页
目的:探讨黄芩苷对人黑色素瘤A375细胞株体外增殖的抑制作用。方法:选用人黑色素瘤A375细胞进行体外培养,以不同浓度的黄芩苷分别处理黑色素瘤A375细胞,连续6天使用倒置显微镜进行观察,计数,绘制生长曲线;以不同浓度(0.1~50μmol/L)的... 目的:探讨黄芩苷对人黑色素瘤A375细胞株体外增殖的抑制作用。方法:选用人黑色素瘤A375细胞进行体外培养,以不同浓度的黄芩苷分别处理黑色素瘤A375细胞,连续6天使用倒置显微镜进行观察,计数,绘制生长曲线;以不同浓度(0.1~50μmol/L)的黄芩苷分别处理黑色素瘤A375细胞细胞24、48、72h后,用MTT法检测细胞生长抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:生长曲线及MTT法显示黄芩苷对黑色素瘤A375细胞有抑制作用,并呈剂量和时间依赖性;流式细胞仪检测到细胞在黄芩苷作用后,细胞凋亡率增加。结论:黄芩苷对人黑色素瘤A375细胞具有明显抑制作用,细胞凋亡可能是其机制之一。 展开更多
关键词 黄芩苷 黑色素瘤A375细胞 MTT
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黑色素瘤细胞系HME1的建立及其生物学特性分析 被引量:1
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作者 吴尚辉 黄柏英 +3 位作者 顾焕华 彭聪 罗学滨 祝和成 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期181-183,共3页
目的 :建立一株黑色素瘤细胞系 ,并分析其体外生物学特性。方法 :取黑色素瘤活检组织进行组织块法原代培养 ,待长满 90 %后 ,消化传代培养并进行生长动力学、形态学及致瘤性等生物学特性鉴定。结果 :该细胞系已在体外培养生存 1 8个多... 目的 :建立一株黑色素瘤细胞系 ,并分析其体外生物学特性。方法 :取黑色素瘤活检组织进行组织块法原代培养 ,待长满 90 %后 ,消化传代培养并进行生长动力学、形态学及致瘤性等生物学特性鉴定。结果 :该细胞系已在体外培养生存 1 8个多月 ,传 90余代。其生物学特性如下 :该细胞系接种至裸鼠后可致瘤 ,其移植瘤细胞形态与原实体瘤相似 ;检测第 2 0代细胞生长曲线 ,其倍增时间为 5 6 .9h ;第 2 0代细胞软琼脂集落形成率平均为 1 9.1 % ;染色体核型分析为非整倍体 ,众数为 92条 ;透射电镜下可观察到细胞表面有丰富的微绒毛、核糖体及黑色素颗粒 ;SP免疫组化分析显示 ,细胞有HMB 4 5表达。结论 :该黑色素瘤细胞经体外培养后已永生化 ,形成了连续传代细胞系 。 展开更多
关键词 黑色素瘤 HME1细胞系 生物学特性 细胞培养 免疫组织化学
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三氧化二砷抑制恶性黑色素瘤B_(16)细胞核酸合成的研究 被引量:2
15
作者 王丽 陈治文 夏俊 《蚌埠医学院学报》 CAS 2005年第4期288-290,共3页
目的:研究不同浓度的三氧化二砷(As2O3)对恶性黑色素瘤B16细胞核酸合成抑制及诱导B16细胞凋亡的作用,探讨砷及其化合物治疗恶性黑色素瘤的作用机制,为其治疗恶性黑色素瘤提供新的理论和实验依据。方法:采用3HTdR和3HUdR掺入肿瘤细胞DNA... 目的:研究不同浓度的三氧化二砷(As2O3)对恶性黑色素瘤B16细胞核酸合成抑制及诱导B16细胞凋亡的作用,探讨砷及其化合物治疗恶性黑色素瘤的作用机制,为其治疗恶性黑色素瘤提供新的理论和实验依据。方法:采用3HTdR和3HUdR掺入肿瘤细胞DNA和RNA的方法,观察不同浓度的As2O3对恶性黑色素瘤B16细胞核酸生物合成的抑制作用;用流式细胞术(FCM)检测As2O3诱导B16细胞的凋亡及细胞毒作用。结果:As2O3对恶性黑色素瘤B16细胞核酸合成抑制和诱导凋亡及细胞毒作用有显著的浓度和时间依赖关系(P<0.01)。结论:As2O3对恶性黑色素瘤B16细胞核酸合成的抑制作用和诱导凋亡及细胞毒作用随药物浓度的增加和作用时间的延长而增强。 展开更多
关键词 黑色素瘤 三氧化二砷 黑色素瘤细胞株B16 核酸合成 凋亡
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人脉络膜黑色素瘤细胞株OCM-1的三维培养及血管生成拟态机制的研究 被引量:1
16
作者 高文 陈陆霞 何彦津 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第9期828-831,共4页
目的通过体外三维培养人脉络膜黑色素瘤细胞株OCM-1,观察其生成血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)时,PI3K、Eph A2蛋白的表达,探讨VM发生的可能机制。方法体外三维培养OCM-1细胞,于三维培养7 d进行过碘酸-雪夫反应(periodic acid s... 目的通过体外三维培养人脉络膜黑色素瘤细胞株OCM-1,观察其生成血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)时,PI3K、Eph A2蛋白的表达,探讨VM发生的可能机制。方法体外三维培养OCM-1细胞,于三维培养7 d进行过碘酸-雪夫反应(periodic acid schiff reaction,PAS)染色,观察PAS阳性的环状结构的形成(即其形成VM的能力),于1 d、4 d、7 d进行PI3 K和Eph A2免疫组织化学染色并观察其结果。结果OCM-1细胞三维培养4 d,细胞大部分呈多角形,胞浆较丰富,核圆形,可见核仁,少部分肿瘤细胞长梭形,可见3~5个长梭形细胞彼此连接围成半环状结构。7 d后,肿瘤细胞几乎均变成长梭形,沿着胶原支架生长,细胞伸出长的突起,彼此之间相互接触围成环状结构。PAS染色可见瘤细胞大多呈弥散排列,肿瘤细胞模仿机体血管生成而形成瘤细胞条索并围成管道,一层细胞外基质(PAS阳性物质)围成环状结构。与培养1 d的细胞相比,培养4 d和7 d的PI3K和Eph A2蛋白表达量均明显增加(均为P<0.05),并随着时间的推移增加(7 d>4 d>1 d,P<0.05)。结论Eph A2和PI3 K可能在三维培养人脉络膜黑色素瘤细胞株OCM-1的VM形成过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 人脉络膜黑色素瘤细胞 血管生成拟态 三维培养 内皮细胞受体蛋白酪氨酸激酶2 磷脂酰肌醇-3-激酶
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B16黑色素瘤动物模型制备方法探讨 被引量:3
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作者 张燕 郭伶俐 +3 位作者 赵发 任鹏涛 田青 蔡建辉 《现代中西医结合杂志》 CAS 2009年第34期4206-4207,共2页
目的利用C57BL/6小鼠制备黑色素瘤动物模型,选择合适的造模条件。方法将黑色素瘤细胞株B16制备成1×108L-1、1×109L-1、5×109L-1、1×1010L-1浓度的细胞悬液,分别注射于小鼠背部,观察小鼠的出瘤时间、生存期及小鼠生... 目的利用C57BL/6小鼠制备黑色素瘤动物模型,选择合适的造模条件。方法将黑色素瘤细胞株B16制备成1×108L-1、1×109L-1、5×109L-1、1×1010L-1浓度的细胞悬液,分别注射于小鼠背部,观察小鼠的出瘤时间、生存期及小鼠生活习性的改变。结果小鼠出瘤率为100%。浓度越高出瘤时间、生存期越短,生活习性改变越明显。结论选择背部为注射部位较方便,细胞浓度为1×109L-1制备的动物模型,出瘤时间、生存时间更适于实际工作。 展开更多
关键词 B16细胞株 黑色素细胞瘤 动物模型 C57BL/6小鼠
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NF-κB抑制剂PDTC对人黑素瘤A375细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 江从军 周艳梅 +1 位作者 张汝芝 柴继侠 《齐齐哈尔医学院学报》 2012年第18期2445-2446,共2页
目的研究核转录因子-κB(NF-κB)特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲盐酸(PDTC)对人黑素瘤A375细胞的生长抑制作用。方法不同浓度的PDTC作用于A375细胞不同时间后,MTT法测定其对A375细胞增殖的抑制率,免疫细胞化学方法检测PDTC作用下A375... 目的研究核转录因子-κB(NF-κB)特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲盐酸(PDTC)对人黑素瘤A375细胞的生长抑制作用。方法不同浓度的PDTC作用于A375细胞不同时间后,MTT法测定其对A375细胞增殖的抑制率,免疫细胞化学方法检测PDTC作用下A375细胞增生细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果经PDTC处理的实验组,肿瘤细胞增殖活性明显受到抑制(P<0.05,P<0.01),呈时间和剂量依赖性;与对照组相比,PDTC作用后A375细胞PCNA表达降低(P<0.01),且呈明显的剂量依赖关系。结论 PDTC具有显著抑制人黑素瘤A375细胞生长及PCNA表达的作用,是一种有潜力的抑制黑素瘤增殖的药物。 展开更多
关键词 黑素瘤细胞A375 吡咯烷二硫代氨基甲盐酸 核转录因子-ΚB 增殖 增生细胞核抗原
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氨氯地平抑制小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16体内转移的作用及相关机制研究 被引量:1
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作者 张旭 艾志国 扶玲 《中国医院用药评价与分析》 2015年第1期31-34,共4页
目的:研究不同剂量氨氯地平抑制小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16转移的作用,并探讨其作用机制。方法:选取64只C57BL/6J小鼠,将黑色素瘤髙转移细胞株B16接种在小鼠腹股沟皮下(2×106个/只)。将接种后的小鼠以随机数字表法分为对照组和... 目的:研究不同剂量氨氯地平抑制小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16转移的作用,并探讨其作用机制。方法:选取64只C57BL/6J小鼠,将黑色素瘤髙转移细胞株B16接种在小鼠腹股沟皮下(2×106个/只)。将接种后的小鼠以随机数字表法分为对照组和氨氯地平高、中、低剂量治疗组,对照组小鼠仅给予0.9%氯化钠注射液;治疗组小鼠给予不同剂量的氨氯地平治疗,分别为1 mg/kg(低剂量组)、3 mg/kg(中剂量组)和10 mg/kg(高剂量组)。观察各组小鼠肿瘤生长情况及身体情况;观察各组小鼠肿瘤肺转移情况,计算肺转移的结节及肿瘤抑瘤率;采用免疫组织化学法检测各组小鼠肿瘤组织中白细胞介素8(IL-8)蛋白表达水平;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组小鼠肿瘤组织中IL-8的信使核糖核酸(mRNA)表达水平。结果:氨氯地平对小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16的自发性肺转移有显著的抑制作用;治疗组小鼠肿瘤组织中IL-8蛋白表达均明显减弱,且随氨氯地平剂量的增加而减弱;治疗组小鼠肿瘤组织中IL-8的mRNA的表达明显低于对照组,且IL-8的mRNA的表达随氨氯地平剂量的增加而减弱。结论:氨氯地平对小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16有一定的抑瘤和抑制肺转移作用,其作用可能与影响IL-8的表达有关。 展开更多
关键词 钙阻断剂 氨氯地平 小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16 肿瘤转移 IL-8
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三氧化二砷对恶性黑色素瘤A_(375)细胞株凋亡的诱导作用 被引量:5
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作者 马佳 陈素莲 陈治文 《蚌埠医学院学报》 CAS 2004年第6期485-486,共2页
目的 :研究三氧化二砷 (As2 O3 )对人恶性黑色素瘤A3 75细胞株凋亡的诱导作用。方法 :采用流式细胞术 (FCM )检测不同浓度的三氧化二砷诱导A3 75细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率。结果 :As2 O3 浓度分别为 5 μmol/L、10 μmol/L、2 0 μm... 目的 :研究三氧化二砷 (As2 O3 )对人恶性黑色素瘤A3 75细胞株凋亡的诱导作用。方法 :采用流式细胞术 (FCM )检测不同浓度的三氧化二砷诱导A3 75细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率。结果 :As2 O3 浓度分别为 5 μmol/L、10 μmol/L、2 0 μmol/L时 ,A3 75细胞的早期凋亡率分别为 9.75 %、5 0 .9%和 4 3.7% ,晚期凋亡率分别为 2 .10 %、4 .6 1%和 11.2 % ,总凋亡率分别为11.85 %、5 5 .5 1%和 5 4 .9%。结论 :As2 O3 可诱导A3 75细胞早期凋亡和晚期凋亡 ,10 μmol/L和 2 0 μmol/L的As2 O3 可明显增加A3 展开更多
关键词 黑色素瘤 三氧化二砷 A375细胞株 凋亡
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