甜瓜抗枯萎病资源筛选及抗病生理指标相关性分析

为明确黑龙江地区甜瓜枯萎病生理小种,探究枯萎病胁迫下甜瓜生理指标变化,完善甜瓜枯萎病抗病评价体系,利用表型鉴定结合分子标记辅助选择(MAS,marker-assisted selection)对24份甜瓜资源进行抗病筛选。结果表明,黑龙江省尖孢镰刀菌甜瓜专化型Fm-1为1号生理小种。分子标记辅助选择共筛选出抗病资源15份,感病资源9份,具有较高的筛选效率。其中野生型资源1314抗性最强,发病率仅为10%;栽培种22-152的感病程度最高。利用筛选的两个抗性极端材料在幼苗期接种病原菌并于根部取样,测定抗病生理指标并进行相关性分析。结果表明,枯萎病胁迫下的抗病和感病材料生理指标响应差异显著,过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性与发病率呈极显著负相关;丙二醛含量和相对电导率与发病率呈极显著正相关。综上,利用功能性分子标记可在早期实现精准筛选甜瓜抗枯萎病品种,相对电导率和CAT及PAL活性可作为抗枯萎病评价的首选指标。

植源生根活力素调控甜瓜品质及预防枯萎病研究

为探究生物源肥料植源生根活力素不同用量的肥效,特开展其对甜瓜植株生长、产量、品质和枯萎病预防效果的影响试验,评价其在设施农业甜瓜上的应用效果。试验结果表明,冲施植源生根活力素对甜瓜株高、茎粗、叶片数均有促进作用,与对照相比,每次每667 m^(2)随水冲施植源生根活力素5 L,甜瓜单瓜质量可增加15.57%,产量增加462 kg/667 m^(2),甜瓜可溶性固形物含量可提高35.10%,可溶性糖含量可提高31.47%,可溶性蛋白含量可提高23.53%,维生素C含量可提高23.77%,对甜瓜枯萎病防治效果可达77.15%。每667 m^(2)每次冲施生物肥料植源生根活力素5 L,每间隔10 d冲施1次,连续冲施3次效果最佳,可有效抑制甜瓜枯萎病,提升甜瓜果实品质及产量。

甜瓜多种真菌病害拮抗细菌NBmelon-1的鉴定及其促生和生防效果

从甜瓜根部分离纯化获得一株多粘类芽孢杆菌NBmelon-1,探究其对甜瓜及甜瓜病害的影响。采用平板对峙法对拮抗菌株筛选鉴定,发现对甜瓜多种真菌病害的病原菌均有抑制作用,例如尖孢镰刀菌甜瓜专化型(Fusarium oxysporum)、黑点根腐病菌(Monosporascus cannonballus)、蔓枯病菌(Didymalla bryoniae)、层生镰刀菌(F.proliferatum)、亚洲镰刀菌(F.asiaticum)和链格孢(Alternaria alternata)等;采用苗期灌根的方法,发现NBmelon-1对甜瓜幼苗的生长具有促生作用,甜瓜幼苗的茎粗、叶片大小、鲜质量与对照相比均有显著提高;盆栽实验表明,其对甜瓜枯萎病具有良好的生防潜力,相对防治效果为52.76%,可很好地防治甜瓜枯萎病。

瓜类枯萎病研究进展

为了更好地认识并防治瓜类枯萎病,从瓜类枯萎病病原菌、病菌致病机理、瓜类抗枯萎病分子标记、枯萎病防治方法4个方面综述了瓜类枯萎病研究进展,其中致病机理包括毒素作用、机械堵塞作用、多因素共同作用,防治技术包括农业防治、化学防治、生物防治等,并浅谈了抗枯萎病分子标记的研究进展;最后进行了展望,即未来需加大分子标记研究,持续加强生物防治研究。

甜瓜抗病基因聚合体的分子标记辅助选择

【目的】为快速筛选出聚合抗白粉病、抗枯萎病基因的甜瓜材料。【方法】以抗白粉病基因(Pm-2、Pm-6)和抗枯萎病基因(Fom-1)的甜瓜材料与优质、高产甜瓜材料进行复合杂交,采用早代抗病性鉴定及分子标记抗病基因检测的方法。【结果】筛选出聚合Pm-2、Pm-6和Fom-1基因的材料2个(21T41、21T53),聚合Pm-6、Fom-1基因的材料2个(21T33、21T50),聚合Pm-2、Fom-1基因的材料1个(21T9)。【结论】旨在为解决本地主要病害,培育多抗、优质、高产新品种奠定基础。

一株甜瓜枯萎病拮抗菌的筛选、鉴定及生防效果

为获得对甜瓜病原菌具有生防潜力的菌株,采用稀释涂平板和分子鉴定的方法,从连续多年种植甜瓜大棚的土壤中分离获得菌株Bc1-20,鉴定为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。为筛选到对甜瓜多种病害的病原菌具有拮抗作用和对甜瓜具有促生作用的菌株,采用平板对峙法、苗期灌根和盆栽接种试验。结果表明,Bc1-20对甜瓜多种真菌病害的病原菌均有抑制作用,例如,尖孢镰刀菌甜瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.melonis)、黑点根腐病菌(Monosporascus cannonballus)、蔓枯病菌(Stagonosporopsis cucurbitacearum)、腐皮镰刀菌(F.solani)和亚洲镰刀菌(F.asiaticum);Bc1-20处理甜瓜幼苗的茎粗、茎长、鲜质量、子叶长宽及最大真叶的长和宽方面都极显著高于空白对照,表明铜绿假单胞菌Bc1-20对甜瓜幼苗有促生作用;Bc1-20处理的甜瓜幼苗枯萎病的病情指数为40.80,空白对照组的病情指数为85.65,Bc1-20处理的相对防治效果为52.34%。综上,铜绿假单胞菌Bc1-20具有生防潜力,可很好地防治甜瓜枯萎病。

甜瓜枯萎病拮抗菌的筛选及鉴定

【目的】筛选对甜瓜枯萎病菌有较强拮抗活性的菌株,并对拮抗菌株进行分类鉴定,为丰富热带地区甜瓜枯萎病生防菌资源库及田间应用提供参考。【方法】以前期筛选获得的82株菌株为试验材料,通过平板对峙、继代培养、发芽率及盆栽试验筛选出对甜瓜枯萎病菌有较强拮抗活性的菌株,并通过形态特征、生理生化特征及16S r DNA序列分析对筛选获得的菌株进行分类鉴定。【结果】筛选出一株对甜瓜枯萎病菌有较强拮抗活性的放线菌菌株D2,其对枯萎病的防治效果达73.53%。D2菌株可形成气生菌丝和孢子丝,孢子丝呈螺旋形,孢子卵呈圆形,且与利迪链霉菌(Streptomyces lydicus)聚于同一分支中,其同源性达99.6%;综合D2菌株的形态特征及生理生化特性,可鉴定其为利迪链霉菌(S.lydicus)。【结论】D2菌株对甜瓜枯萎病有较好的防治效果,具有开发成生物农药或生物肥料的潜力。

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B6对甜瓜枯萎病的生防作用

通过室内抑菌试验和温室盆栽试验,对枯草芽孢杆菌B6及其代谢产物对甜瓜枯萎病菌的抑菌活性和生防机理进行了研究。结果表明,B6代谢产物对甜瓜枯萎病菌孢子萌发和菌丝生长具有较强的抑制作用,代谢产物处理甜瓜后病情指数由37.65降低至11.29,甜瓜幼苗体内与抗性反应相关的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、β-1,3-葡聚糖酶活性有明显增加,表明B6代谢产物处理甜瓜根系过程中可能激发木质素、植保素等抗性物质的参与。经稳定性试验结果显示B6菌株产生的代谢物质具较强的热稳定性、对紫外线有较强的耐性、pH值在2～8时生物活性强。

嫁接西瓜植株的生理特性及其抗枯萎病能力

以能抗瓜类枯萎病的黑籽南瓜、西葫芦和瓠瓜为砧木嫁接西瓜 ,嫁接后的西瓜植株表现光合作用速率和根系吸收面积增加 ;叶片中束缚水 /自由水比值增加 ,水势降低 ,根系和叶片中的过氧化物酶 (POD)、根系中苯丙氨酸解氨酶 (PAL)

西瓜、黄瓜、甜瓜等瓜类枯萎病研究进展

对瓜类枯萎病及其发病规律、抗病机理、分子标记在抗病育种中的应用和抗源新材料创造等方面的研究进行了综述和评价,介绍了国内外瓜类抗枯萎病育种取得的最新进展,并对瓜类抗枯萎病育种进行了讨论和展望。

厚皮甜瓜嫁接育苗栽培的防病增产效果

温室采用黑籽南瓜嫁接伽师厚皮甜瓜防治甜瓜枯萎病 ,田间防效在 95.4 %以上。无土育苗条件下 ,胚轴斜插接法和生长点插接法防效达 10 0 % ,生长点劈接法和胚轴靠接法防效分别为 97.1%和 95.4 % ,比有土育苗的各种嫁接方法的防效都好。嫁接甜瓜比自根苗甜瓜增产75.9%～ 112 .3% ,增产效果主要表现在后期产量上。

伽师甜瓜嫁接栽培的防病增产效果研究

以黑籽南瓜为砧木,伽师甜瓜为接穗,采用不同的嫁接方法和育苗方法,研究了嫁接对伽师甜瓜幼苗和植株生物学特性及枯萎病抗性、产量、品质的影响。结果表明,4种嫁接方法都有较强的亲和性,在无土育苗条件下,嫁接苗成活率均在77.7%以上,显著高于有土育苗的成活率(68.1%)。各嫁接伽师瓜幼苗根系比自根苗根系发达,嫁接苗的各项生长指标均显著高于自根苗,尤其是伽师瓜嫁接苗的叶绿素含量、光合速率及地上干样质量均显著高于自根苗。嫁接苗田间防效达到95.4%以上,无土育苗嫁接效果比有土育苗好,嫁接伽师甜瓜比自根伽师甜瓜增产75.9%～112.3%,增产效果主要表现在后期产量上。

甜瓜抗枯萎病基因同源序列克隆与序列分析

目的:克隆甜瓜抗枯萎病基因同源序列并对其序列分析。方法:根据已发表的甜瓜抗枯萎病基因Fom-2设计引物,从高抗枯萎病甜瓜品种‘日本安农二号’基因组中扩增Fom-2同源序列R-Fom-2。结果:该基因长3307bp,包含一个完整的开放阅读框,编码1073个氨基酸,推测蛋白质分子量123.57kDa,等电点7.06。属于nonTIR-NBS-LRR类抗病基因,在LRR区存在一个可能的CC结构域。但在nonTIR类抗病蛋白中,CC结构域一般位于kin-1a前。氨基酸同源性分析显示,R-Fom-2同Fom-2全长序列具有96%的同源性,对不同甜瓜品种Fom-2的LRR区分析比较,同源性在91%以上。且LRR区的差异主要集中在β-strand/β-turn区域。结论:序列分析揭示Fom-2家族是一个活跃的基因,LRR区可能对Fom-2家族的功能起着重要作用,为进一步研究R-Fom-2基因的结构与生物学功能奠定了基础。

厚皮甜瓜嫁接防治枯萎病试验研究

利用嫁接防治枯萎病在西瓜生产中已普及,但在甜瓜上应用较少。本试验以10种砧木为试材,拟为甜瓜嫁接栽培筛选适宜的砧木。嫁接防病试验结果表明,采用地方瓜种1笋瓜和日本新土佐南瓜等10种砧木嫁接海蜜3号甜瓜,可显著提高甜瓜的抗枯萎病能力,除菜瓜和永康组合有少许发病株外,地方瓜种1和新土佐组合防病效果均达100%,而对照海蜜3号自根嫁接植株的病株率为8.5%;亲和性,新土佐组合好于自根嫁接的对照,地方瓜种1组合总体上逊于对照;667m2产量新土佐超过对照116kg,地方瓜种1超过对照142kg;地方瓜种1组合与对照果肉质地、颜色相近,可溶性固形物含量高于对照,新土佐组合果实质地软,口感较淡,可溶性固形物含量略低于对照。地方瓜种1和日本新土佐可作为海蜜3号甜瓜的砧木在生产上应用。

嫁接栽培伽师甜瓜的抗枯萎病能力

以黑籽南瓜为砧木,伽师甜瓜为接穗,采用不同的嫁接方法和育苗方法,研究了嫁接对伽师甜瓜幼苗和植株生物学特性及对枯萎病抗性、产量、品质的影响。结果表明,4种嫁接方法都有较强的亲和性,在无土育苗条件下,嫁接苗成活率均在95%以上,田间防效达到95.4%以上,无土育苗嫁接比有土育苗嫁接效果好。嫁接伽师甜瓜比自根伽师甜瓜增产75.9%～112.3%,增产效果主要表现在后期产量上。

甜瓜枯萎病拮抗细菌的筛选及大田防效试验

此试验旨在从环境中分离甜瓜枯萎病的拮抗细菌,并通过适当的复配进行大田试验,以期为该病的生物防治提供参考。从大棚甜瓜根际土壤中分离得到116株细菌,利用平板对峙法、管碟法筛选出13株对甜瓜枯萎病病原菌具有较好拮抗作用的细菌,其中以F-1和D-3的拮抗作用最强。经形态特征和生理生化鉴定,菌株F-1和D-3均属于芽孢杆菌属。大田试验结果表明,F-1和D-3发酵液对甜瓜枯萎病的防效分别达到85.7%和81.6%,F-1和D-3混合发酵液对甜瓜枯萎病的防效达到91.8%,均极显著地高于农药组的防效(64.6%),显示出良好的防治潜力。

甜瓜品种抗枯萎病的苗期鉴定

研究了甜瓜枯萎病病菌(Fusarium oxysporum f. sp. melonis)孢子不同接种浓度(1×105、1×106、1×107个.mL-1)和接种苗龄(子叶期、2 叶1心期、4叶1心期)对甜瓜枯萎病发生的影响。结果表明,采用1×106个.mL-1孢子液浓度,在2叶1心期进行接种鉴定效果较好,最佳的病害调查时间为接种后第10天。采用此方法对18个甜瓜品种进行枯萎病鉴定,结果表明新金雪莲、长香玉、玉姑、春辉、蜜绿5个品种高抗甜瓜枯萎病。

甜瓜枯萎病拮抗内生细菌筛选研究

从长势健壮的黄瓜、南瓜和甜瓜苗的根部及茎部分离获得294株内生细菌,与枯萎尖孢镰孢菌进行对峙培养,获得具有抑菌活性细菌18株,占总菌株数的6.1%。再利用生长速率法、孢子萌发法对其进行体外生物活性检测,结果表明,H-2、H-4、H-6、N-7、T-16、T-18等6个菌株的发酵滤液对枯萎镰孢菌的拮抗作用较强,但H-1与H-4对种子萌芽有强烈的抑制作用。H-5、H-6和N8等菌株对甜瓜幼苗具有促生作用,对甜瓜枯萎病的防效分别为75.6%、60.1%和66.7%。H-5菌株对甜瓜枯萎病可能具有潜在的生防功能。

大蒜轮作与瓜类枯萎病发病的关系

2000～2001年在嘉兴的试验研究表明大蒜与瓜类轮作辅以休闲明显地减轻了瓜类枯萎病的危害,发病率由瓜类连作时的50%下降到10%。土壤中(干土)病原菌孢子的存活量也由瓜类连作时的14.1×104cfu/g降低到1.2×104cfu/g。同时室内抑菌试验表明,大蒜能够明显抑制病原菌菌丝的生长,5种浓度3种浸提时间的大蒜浸提液中以浸提时间为1d浓度在25g/L的浸提液对菌丝生长的抑制效果最好,达72%;浸提7d浓度为1.56g/L的浸提液抑菌效果仅为20%。因此为减轻瓜类枯萎病的损失,提倡瓜类与大蒜作物轮作并适时休闲。

硒砂瓜枯萎病生防细菌的筛选与初步鉴定

采用稀释分离平板法,从硒砂瓜连作地生长健康西瓜根际土壤中分离出7株细菌。通过对峙培养法初筛、发酵液验证筛选出3株硒砂西瓜枯萎病拮抗细菌,分别为BF202、BF206和BF207。形态特征观察和生理生化鉴定结果表明,3菌株均为芽孢菌属。3株拮抗菌的获得不仅为开发出安全、高效的生物农药提供菌种参考,而且为深入研究硒砂西瓜枯萎病高效拮抗菌的拮抗机制提供了试验基础。