蒙成药孟根乌苏-18味丸的急性毒性和长期毒性研究

目的:观察孟根乌苏-18味丸的急性毒性和长期毒性反应,为临床安全用药提供参考依据。方法:以最大允许浓度(0.4 g·m L-1)在6 h内灌胃给予小鼠孟根乌苏-18味丸混悬液两次(0.2 m L/10 g),观察14天,考察其急性毒性反应;大鼠每天分别灌胃给予孟根乌苏-18味丸高、中、低剂量(3.67 g·kg-1、1.84 g·kg-1、0.92 g·kg-1)1次,连续给药180天,停药观察60天。结果:孟根乌苏-18味丸最大耐受量>16 g·kg-1(相当临床用量的436.36倍)。给药180天后,与对照组相比,孟根乌苏-18味丸高剂量组ALB、UREA、AST、TBIL、CHOL有显著性或非常显著性差异(P<0.05或P<0.01),中剂量ALB、UREA有显著性差异(P<0.05),低剂量组无显著性差异;高剂量组出现蛋白管型伴近曲小管上皮细胞不同程度变性坏死。停药60天后,与对照组比较,各组动物的一般状况、体质量、血液学指标、血清生化学指标、脏器系数等无显著性差异,高剂量组肾脏器质性病变出现了恢复趋势。结论:孟根乌苏-18味丸大鼠灌胃给药的基本安全剂量为0.92 g·kg-1(相当于临床拟用剂量的25倍)。

蒙药孟根乌苏(水银)炮制品、孟根乌苏(水银)-18味丸与硫化汞、氯化汞、氯化亚汞急性毒性的比较研究

目的:对比研究孟根乌苏(水银)炮制品、孟根乌苏(水银)-18味丸与硫化汞、氯化汞、氯化亚汞对大鼠单次给药后的急性毒性。方法:将Wistar雄性大鼠,根据体重随机分为正常对照组、孟根乌苏(水银)炮制品低、高剂量组(0.033,0.33 g·kg-1·d-1)、孟根乌苏-18味丸低、高剂量组(0.29,2.9 g·kg-1·d-1)、孟根乌苏-18味丸简化方组(0.26 g·kg-1·d-1)、硫化汞组(17.39 mg·kg-1·d-1)、氯化汞组(4.06 mg·kg-1·d-1)、氯化亚汞组(35.3 mg·kg-1·d-1)共9组,每组6只。各组大鼠适应1周后,灌胃给药1次,24 h后取材,分别检测肝肾功能,肝肾组织形态学变化;并用电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES)和电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)法测肾汞蓄积量;原位末端标记(TUNEL)法测肾细胞凋亡;免疫组化法测肾Ⅲ型胶原蛋白表达;实时荧光定量PCR(Real-Time-PCR)法检测肾脏MT-1、MT-2基因表达的变化。结果:各组大鼠血清ALT、AST检测结果与正常对照组相比无统计学意义(P>0.05)。氯化亚汞组大鼠血清CREA和UREA均明显高于正常对照组和孟根乌苏炮制品低剂量组(P<0.01)。肝脏和肾脏病理检查结果表明,孟根乌苏炮制品和孟根乌苏-18味丸低剂量组肝细胞肿胀变性程度较轻,肾小球病变不明显,孟根乌苏炮制品和孟根乌苏-18味丸高剂量组以及硫化汞组大鼠肝脏、肾脏均出现了一定的病理变化,而氯化汞、氯化亚汞组大鼠肝肾病理变化更显著。与正常对照组和孟根乌苏炮制品低剂量组相比,氯化汞和氯化亚汞组大鼠肾汞蓄积量显著升高(P<0.01);硫化汞、氯化汞、氯化亚汞组大鼠肾细胞凋亡率和Ⅲ型胶原蛋白表达显著升高(P<0.01);氯化汞、氯化亚汞组大鼠肾组织中MT-1和MT-2 m RNA表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:大鼠单次给药后,临床常用量的孟根乌苏炮制品和孟根乌苏-18味丸毒性要远远小于氯化汞、氯化亚汞。

蒙药孟根乌苏(水银)-18味丸对大鼠肾脏毒性初步研究

目的观察孟根乌苏(水银)-18味丸对大鼠肾脏功能的影响,探讨其肾毒性。方法将Wistar雄性大鼠根据体质量随机分为8组:正常对照组,孟根乌苏-18味丸低、中、高剂量组,孟根乌苏炮制品组,硫化汞组,氯化汞组,氯化亚汞组,每组10只。各组大鼠给予相应药物灌胃,连续15 d。分别检测大鼠血清尿素(UREA)、肌酐(CREA)水平,观察肾组织形态学变化,并用电感耦合等离子体发射光谱仪和电感耦合等离子体质谱法检测肾汞蓄积量,原位末端标记法检测肾细胞凋亡,免疫组化检测肾Ⅲ型胶原蛋白表达,实时荧光定量PCR检测肾脏金属硫蛋白(MT)-1、MT-2基因表达。结果氯化汞、氯化亚汞大鼠肾脏指数比正常对照组和孟根乌苏炮制品组显著升高(P<0.01);各组大鼠血清CREA和UREA含量无显著差异。肾脏病理观查结果表明,孟根乌苏-18味丸低剂量组(临床常用剂量)大鼠肾脏出现一定的病理损伤,表现为肾小球轻度肥大、肾小管上皮中度肿胀变性,孟根乌苏-18味丸中、高剂量组肾脏也出现一定损伤,硫化汞组、氯化汞组、氯化亚汞组大鼠肾病理变化更显著。与正常对照组和孟根乌苏炮制品组比较,氯化汞组和氯化亚汞组大鼠肾汞蓄积量显著升高(P<0.01),氯化汞组、氯化亚汞组大鼠肾细胞凋亡率显著升高(P<0.01),硫化汞组、氯化汞组、氯化亚汞组大鼠肾脏Ⅲ型胶原蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。与正常对照组比较,氯化亚汞组大鼠肾组织中MT-1 m RNA表达显著升高(P<0.05),氯化汞组、氯化亚汞组大鼠肾组织中MT-2 m RNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01);与孟根乌苏炮制品组比较,氯化亚汞组大鼠肾组织中MT-1 m RNA表达显著升高(P<0.05)。结论临床常用剂量孟根乌苏-18味丸在15 d用药过程中未对大鼠肾脏功能造成明显的损伤。

蒙药孟根乌苏-18味丸、孟根乌苏炮制品的肝肾毒性作用研究

目的:对比研究孟根乌苏(水银)-18味丸、孟根乌苏(水银)炮制品与硫化汞、氯化汞、氯化亚汞的肝肾毒性作用。方法:将Wistar雄性大鼠,根据体重随机分为正常对照组、孟根乌苏-18味丸低、高剂量组(0.29,2.9 g·kg^(-1)·d^(-1))、孟根乌苏-18味丸简化方组(0.26 g·kg^(-1)·d^(-1))、孟根乌苏炮制品低、高剂量组(0.033,0.33 g·kg^(-1)·d^(-1))、硫化汞组(17.39 mg·kg^(-1)·d^(-1))、氯化汞组(4.06 mg·kg^(-1)·d^(-1))、氯化亚汞组(35.3 mg·kg^(-1)·d^(-1)),共9组,每组6只。各组大鼠适应7天后,灌胃给药7天后分别检测肝肾功能,肝肾组织形态学变化,并用电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES)和电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)法测肾汞蓄积量,原位末端标记(TUNEL)法测肾细胞凋亡,免疫组化法测肾Ⅲ型胶原蛋白表达,实时荧光定量PCR(Real-Time-PCR)法检测肾脏MT-1、MT-2基因表达的变化。结果:在实验过程中,氯化亚汞组4只大鼠死亡,因此未对实验数据进行统计。大鼠连续7天给药后,药物对各组大鼠肝、肾功能并无影响。肝脏和肾脏病理检查结果表明,孟根乌苏-18味丸和孟根乌苏炮制品低剂量组肝细胞肿胀变性程度较轻,肾小球轻度肥大,肾小管上皮轻度肿胀变性,孟根乌苏-18味丸和孟根乌苏炮制品高剂量组以及硫化汞组大鼠肝脏、肾脏均出现了一定的病理变化,而氯化汞、氯化亚汞组大鼠肝肾病理变化更显著。与正常对照组和孟根乌苏炮制品低剂量组相比,氯化汞组大鼠肾汞蓄积量显著升高(P<0.01);硫化汞、氯化汞组大鼠肾细胞凋亡率和Ⅲ型胶原蛋白表达显著升高(P<0.01);与正常对照组比较,氯化汞组大鼠肾组织中MT-1和MT-2 m RNA表达显著升高(P<0.01,P<0.05);氯化汞组大鼠肾组织中MT-1表达显著高于孟根乌苏炮制品低剂量组(P<0.01)。结论:临床常用量的孟根乌苏-18味丸和孟根乌苏炮制品肝肾毒性要远低于氯化亚汞、氯化汞。

蒙药孟根乌苏(水银)-18味丸对大鼠肾脏毒性及其机制探讨

目的:观察孟根乌苏(水银)-18味丸对大鼠肾脏毒性及探讨毒性机制。方法:Wistar雄性大鼠,根据体质量随机分成10组,每组20只,即正常对照组,孟根乌苏炮制品低、中、高剂量组(0.033、0.167、0.330g·kg-1·d-1),孟根乌苏-18味丸简化方组(0.26g·kg-1·d-1),孟根乌苏-18味丸低、中、高剂量组(0.29、1.47、2.90g·kg-1·d-1),硫化汞组(17.39mg·kg-1·d-1)、氯化汞组(4.06mg·kg-1·d-1)。大鼠分别于连续给药30d和停药15d后,计算肾脏指数,检测血清尿素(UREA)、肌酐(CREA),用电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES)和电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)法测肾汞蓄积量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肾脏组织还原型谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)含量,分光光度法检测丙二醛(MDA)含量。结果:连续给药30d,与正常对照组比较,孟根乌苏炮制品和孟根乌苏-18味丸高剂量组,氯化汞组大鼠CREA、UREA含量显著升高(P<0.01,P<0.05);氯化汞组大鼠肾汞蓄积量显著升高(P<0.01);孟根乌苏炮制品和孟根乌苏-18味丸中剂量和高剂量组,硫化汞、氯化汞组大鼠肾脏GSH显著降低(P<0.01,P<0.05);孟根乌苏炮制品和孟根乌苏-18味丸高剂量组,氯化汞组大鼠肾脏NO显著升高(P<0.05)。停药15d,孟根乌苏炮制品和孟根乌苏-18味丸高剂量组,氯化汞组大鼠肾功能恢复正常;孟根乌苏-18味丸各剂量组大鼠肾脏病理变化有所恢复;氯化汞组大鼠肾汞蓄积量仍显著升高(P<0.01);硫化汞、氯化汞组大鼠肾脏GSH仍显著降低(P<0.01),氯化汞组大鼠肾脏NO仍显著升高(P<0.05)。结论:大鼠连续给药孟根乌苏(水银)-18味丸30d造成肾组织损伤,其机制与氧化损伤有关,停药后肾组织损伤可逐步恢复。

2种蒙药中硫磺的拉曼光谱测定分析

目的：建立蒙药孟根乌苏-18和嘎日迪-15中硫磺的拉曼光谱检测方法。方法：利用便携式拉曼光谱仪测量纯硫磺固体粉末和孟根乌苏-18及嘎日迪-15样品的拉曼特征峰,并对2种蒙药样品中的特征峰位进行了归属和指认。二极管激光波长：785 nm;光谱范围：68∽2 700 cm-1;光谱分辨率：小于3 cm-1;会聚透镜焦距：6.8 mm;聚焦后的光斑尺寸：10μm;激光功率：30 m W;积分时间：5 s。结果：硫磺的拉曼特征峰主要位于84、153、219、247、436、472 cm-1处。拉曼光谱能较好地检测出蒙药孟根乌苏-18中含有的硫磺,同时以蒙药嘎日迪-15为样品基质,对硫磺进行了半定量分析,定量范围在10%∽100%之间。结论：拉曼光谱技术可以对蒙药中的硫磺进行快速鉴别和半定量分析。