脑膜炎球菌多糖疫苗培养基的标准化研究

目的用干粉原料完全替代以消化液为主要原料的培养基配方,实现脑膜炎球菌多糖疫苗培养基的标准化生产。方法用筛选改良的酪蛋白酸水解物干粉替代50%盐酸酪蛋白水解液,以改良酵母浸出粉替代酵母透析液和酵母浸出粉,适当调整培养基配方,改进并稳定培养基制备工艺,确定适宜质量指标,并对各项质量指标数据进行分析。结果改进后的脑膜炎球菌多糖疫苗干粉培养基有效地降低了批间差异,各项质量指标均符合脑膜炎球菌培养要求,培养基的各项质量指标更加稳定可控,在生产中得到了良好、稳定的生长结果。结论用干粉原料完全替代脑膜炎球菌多糖疫苗培养基中的消化液和酵母透析液是成功的,同时改良的干粉培养基进一步明确了配方标准,使原料准备、制备工艺、质量指标控制更加标准化,有效提高了培养基质量,有利于规模化生产,促进了脑膜炎球菌多糖疫苗生产用培养基的标准化工作。

培养基质量对脑膜炎奈瑟菌培养结果的影响

通过对A群C群流脑多糖疫苗生产用培养基质量指标与培养脑膜炎奈瑟菌菌数之间的关系进行分析,发现不同型别的脑膜炎奈瑟菌在相同的培养基和培养条件下具有不同的培养结果,对培养基总氮含量、氨氮含量、氯化钠含量进行检测分析,在一定范围内并未发现与培养菌数之间明显的关系,但这些质量指标作为培养基制备过程的质量控制,保证不同批次培养基始终保持相对稳定、可控的质量,具有十分重要的意义。

N,N'-羰基二咪唑作为A群脑膜炎球菌荚膜多糖活化剂制备多糖蛋白结合物

用N,N'-羰基二咪唑(CDI)作多A群脑膜炎球菌荚膜多糖(Men Aps)的活化剂进行初步研究,以期开发一种新的多糖活化剂用于多糖蛋白结合物的制备。用A群脑膜炎球菌荚膜多糖作为原料,在水溶液条件下以CDI作为多糖活化剂进行活化;经活化的A群脑膜炎球菌荚膜多糖再与1,6-己二酰肼(ADH)衍生,得MenAps-ADH衍生物;衍生物与破伤风类毒素(TT)共价结合,形成MenAps-TT结合物;检测衍生物和结合物的关键控制指标,并与《中国药典》三部(2015版)进行比较。当多糖∶CDI的质量比为1∶1.5,1∶2时,获得的衍生物的衍化率分别为1.23%和1.76%;结合物的多糖含量、蛋白含量、游离多糖含量、游离蛋白含量均达到《中国药典》三部(2015版)的要求,Men Aps-TT结合物免疫的小鼠血清阳转率达到100%,几何平均抗体滴度(GMT)高,并与阴性对照组相比P=0.00423(P<0.01)有显著差异。N,N'-羰基二咪唑(CDI)可在水相条件下活化多糖,并获得免疫原性良好的多糖蛋白结合物。