系统性红斑狼疮并发股骨头坏死危险因素列线图预测模型的建立和验证

背景:股骨头坏死是系统性红斑狼疮患者常见的并发症,若能早期对其发生风险进行预测与验证,将有助于避免或延缓股骨头坏死的发展。目的:分析系统性红斑狼疮患者并发股骨头坏死的危险因素,构建系统性红斑狼疮患者并发股骨头坏死的列线图预测模型并进行验证。方法:回顾性分析2013年1月至2022年12月首次就诊于河南中医药大学第一附属医院的914例系统性红斑狼疮患者的病历资料,根据是否发生股骨头坏死分为发生股骨头坏死组(n=100)和未发生股骨头坏死组(n=814)。采用单因素、LASSO回归和多因素Logistic回归分析筛选和确定系统性红斑狼疮并发股骨头坏死的危险因素。同时将数据集按照7∶3的比例随机分为训练集和测试集,并基于多因素Logistic回归分析结果,构建系统性红斑狼疮并发股骨头坏死的列线图预测模型。同时,使用受试者工作特征曲线、Hosmer-Lemeshow校准曲线和决策曲线对列线图的性能进行评估。结果与结论:①股骨头坏死组与未发生股骨头坏死组患者在系统性红斑狼疮病程、系统性红斑狼疮疾病活动度评分、狼疮性肾炎、呼吸系统受累、胃肠道受累、干燥综合征、骨质疏松、抗核糖核蛋白抗体阳性、补体C3降低、环磷酰胺、吗替麦考酚酯、生物抑制剂、糖皮质激素最大日剂量、糖皮质激素冲击治疗方面差异有显著性意义(P<0.05);②采用LASSO回归分析方法筛选出10个与系统性红斑狼疮并发股骨头坏死风险相关的预测变量,将其纳入多因素Logistic回归分析,结果显示系统性红斑狼疮病程、呼吸系统受累、干燥综合征、骨质疏松、抗核糖核蛋白抗体阳性、环磷酰胺、吗替麦考酚酯、生物抑制剂、糖皮质激素最大日剂量是系统性红斑狼疮患者发生股骨头坏死的独立危险因素(P<0.05);③训练集中预测发生风险的受试者工作特征曲线下面积为0.802(95%CI=0.742-0.862),测试集预测发生股骨头坏死风险受试者工作特征曲线下面积为0.811(95%CI=0.745-0.876);Hosmer-Lemeshow校准曲线拟合度较好(训练集,P=0.447;验证集,P=0.870);决策曲线显示使用列线图预测模型预测系统性红斑狼疮患者发生股骨头坏死的风险是有益的;④月经异常为女性系统性红斑狼疮患者并发股骨头坏死的危险因素之一;⑤此次研究结果提示,系统性红斑狼疮并发股骨头坏死的危险因素是多因素的,同时建立了一个包含9个危险因素的列线图预测模型,可将其用于预测系统性红斑狼疮患者发生股骨头坏死的风险;此外,首次报道了月经异常为女性系统性红斑狼疮并发股骨头坏死的危险因素之一。

自噬相关基因在小鼠月经样模型子宫内膜崩解过程中的动态表达

目的探究小鼠子宫内膜崩解过程中自噬相关基因表达的动态变化。方法建立小鼠月经样模型,孕酮撤退后0 h、8 h、16 h和24 h分别处死小鼠取其双侧子宫组织,通过苏木素伊红(HE)染色观察小鼠子宫组织的形态特征变化,采用蛋白质印迹(WB)检测小鼠子宫内膜崩解过程中LC3B和p62蛋白的表达动态变化,实时定量PCR(RT-qPCR)检测小鼠子宫内膜崩解过程中Lc3b、p62、Beclin1、Atg3、Atg5和Atg7的mRNA水平变化。结果孕酮撤退后0 h、8 h、16 h和24 h子宫大体颜色逐渐由浅粉色变为深红色,子宫内膜崩解坏死区域逐渐扩大,24 h时蜕膜化的子宫内膜完全崩解坏死。WB结果显示:孕酮撤退后16 h时,p62的蛋白表达水平较0 h和8 h时显著升高(P<0.05),24 h时p62的蛋白表达水平较其他时间点显著升高(P<0.01);LC3B-Ⅰ蛋白在孕酮撤退后0 h到8 h无显著变化(P>0.05),8 h到24 h其表达量显著降低(P<0.05);孕酮撤退后子宫内膜崩解过程中LC3B-Ⅱ的蛋白表达水平无显著变化(P>0.05)。RT-qPCR结果显示:p62 mRNA水平在孕酮撤退后0 h到16 h无显著变化(P>0.05),而24 h时p62 mRNA水平较8 h和16 h显著降低(P<0.05);Lc3b mRNA水平在孕酮撤退后16 h时较0 h和8 h显著上调(P<0.01),而24 h时Lc3b mRNA水平显著低于撤退后16 h(P<0.01);Beclin1 mRNA水平在孕酮撤退后8 h、16 h和24 h的表达较0 h均显著下降(P<0.05),且撤退24 h后Beclin1 mRNA水平相较8 h和16 h显著降低(P<0.01);Atg3、Atg5和Atg7的mRNA水平孕在酮撤退后0 h到16 h无显著变化(P>0.05),而24 h时的mRNA水平显著低于其他时间点(P<0.05)。结论孕酮撤退后,子宫内膜崩解过程中自噬水平下降,提示自噬参与负调控子宫内膜崩解过程。

孕酮回植时间对小鼠月经样模型中子宫内膜基质细胞凋亡的影响

目的:探讨在小鼠月经样模型中孕酮回植对子宫内膜基质细胞凋亡的影响。方法:在月经模型小鼠月经发生关键时期的前后,即孕酮撤退后的12h和16h回植孕酮,24h收集小鼠子宫角,TUNEL法原位检测小鼠子宫内膜基质细胞的凋亡;Western Blotting法检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达。结果:孕酮撤退后12h回植孕酮,小鼠子宫内膜中发生凋亡的基质细胞数远低于16h回植组和对照组;而16h回植孕酮则子宫内膜基质细胞的凋亡仅仅稍低于对照组。凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,12h回植组明显高于16h回植组和对照组(P<0.01),而后两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。凋亡促进蛋白Bax和Caspase-3的表达,12h回植组均低于16h回植组和对照组(P均<0.01),而后两组之间比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论:在月经发生关键时期之前,即孕酮撤退后12h回植孕酮可能通过上调Bcl-2/Bax比例而阻断Caspase-3的蛋白表达,从而有效抑制小鼠子宫内膜基质细胞的凋亡,阻断月经发生的进程,而16h回植则不能阻断小鼠月经的发生。

因月经异常停用国产皮下埋植剂的影响因素分析

本文采用国家“八·五”科技攻关项目“国产皮下埋植避孕方法多中心研究 (扩大应用 )”资料 ,分析中国妇女使用国产皮下埋植剂后因月经异常停用的影响因素。月经异常是皮下埋植剂最主要的停用原因 ,二年末因月经异常的累积停用率 I 型和 II 型分别为8.96 %和 7.84%。采用 COX多元逐步回归分析因月经异常停用的影响因素。结果表明 :文化程度高、产次低者因闭经停用的风险率较高 ,农民较其它职业者因闭经停用的风险率低 ,I型埋植剂因闭经停用的风险率高于 II型 ;文化程度高、体重轻、埋植时不哺乳、产次低、末次避孕方法使用 IUD或屏障法者因“其它”月经异常 (指除闭经以外的其它月经异常 )停用的风险率较高。农民较其它职业者因“其它”月经异常停用的风险率低 ;不同地区的妇女因月经异常停用的风险率不同。本研究结果提示 :应在手术前有针对性地做好咨询服务工作 。

HIF1A与VEGF在小鼠月经样模型的表达与共定位

目的在小鼠月经模型基础上,研究低氧诱导因子(HIF1A)与血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及mRNA的表达与定位,探索HIF1A与VEGF在月经发生中可能的调控机制。方法建立小鼠月经样模型,假孕小鼠通过花生油子宫腔注射的方法诱导小鼠子宫内膜发生蜕膜化,切除卵巢致孕酮(P4)撤退以模拟月经的发生。在P4撤退后0、8、12、16、24h分别收集小鼠子宫;利用免疫组化与Western blot方法检测HIF1A、VEGF的定位与表达量,利用Real-time PCR检测二者mRNA相对表达量;分析HIF1A与VEGF的表达变化趋势与相关性。结果 P4撤退后,小鼠子宫内膜发生崩解出血,模拟月经发生。免疫组化结果显示,HIF1A蛋白在P4撤退后12、16h,内膜基质蜕膜细胞核中的表达量逐渐升高;HIF1A表达区域与VEGF表达的区域均集中在子宫内膜蜕膜化区域外周,即崩解组织与基底层交界区域。Western blot蛋白定量结果显示,细胞核中HIF1A蛋白表达量在P4撤退后8、12、16h显著增高,VEGF在细胞质中的表达量在P4撤退后0、8、12h较高。HIF1A与VEGF mRNA的表达变化趋势非常相似,即P4撤退后,逐渐升高,在12h达到峰值,随后逐渐下降。结论结果提示月经发生子宫内膜崩解中,HIF1A转录因子功能激活并调节VEGF mRNA的表达。

小鼠药理性月经模型中孕酮撤退激活NF-κB状态研究

目的:研究在小鼠药理性月经样模型中,阻断孕酮作用后子宫内膜组织崩解过程中核转录因子NF-κB激活状态。方法:切除卵巢后小鼠在诱导蜕膜化之后给予米非司酮处理模拟月经样出血,取部分子宫组织采用免疫组织化学、蛋白质印迹方法检测米非司酮处理(即孕酮撤退)后不同时期NF-κB激活及NF-κB上游信号分子的表达。结果:免疫组化结果显示,阻断孕酮作用后NF-κBp65显著入核,p50入核不明显。蛋白印迹实验显示,p50和p65蛋白发生了核浆转移,在孕酮撤退12h后核蛋白中表达量最高。NF-κB诱导性激酶、磷酸化IKK-β、磷酸化IκB-α在阻断孕酮作用后的各个时期都有表达,且各时相表达均有差异。结论:孕酮撤退可能通过NF-κB诱导性激酶、磷酸化IKK-β,继而磷酸化IκB-α通路激活NF-κB。

运动性动情周期紊乱动物模型的建立

运动性动情周期紊乱动物模型是研究运动性月经失调等病理过程所必需的模型。研究以多指标综合评定为基础,在造模过程中,各项监测指标的变化特点和规律基本符合过度训练的诊断标准。结果表明,模型具有较高的可信度和准确性。

肿瘤坏死因子在小鼠药理性孕酮撤退月经样模型中的定位和表达

目的在药理性撤退小鼠月经样模型中,观察孕酮撤退后,肿瘤坏死因子(TNF-α)的定位和表达情况。方法卵巢切除的小鼠在诱导蜕膜化之后给予米非司酮即通过拮抗孕酮受体的方法(药理性撤退),导致孕酮撤退,并用免疫组化的方法观察米非司酮处理的不同时相,TNF-α在小鼠子宫内膜的定位;用实时PCR的方法观察TNF-α表达情况。结果免疫组化结果显示米非司酮处理后0～8 h,TNF-α主要存在于腔周围的血管内皮细胞;12～16 h,主要存在于内流的白细胞;24～48 h,主要存在于崩解组织边缘的间质细胞区域和修复好腺上皮细胞周围的间质细胞。实时PCR结果显示TNF-αmRNA在孕酮撤退后24 h内都有表达,并且TNF-α表达量逐渐增高,在12 h、16 h达到峰值。结论在此小鼠月经样模型中,米非司酮处理即孕酮撤退后TNF-α在此模型子宫中定位呈区域性分布,并诱导TNF-α表达升高,可能参与了子宫内膜的崩解。

基于心理模型的生理期APP优化设计探索

文章采用半结构化访谈与问卷调研相结合的研究方法,收集整理女性用户使用生理期APP的实际体验反馈,提炼女性用户对于生理期APP界面视觉美学和行为操作模式的偏好,同时分析了建立用户心理模型对于优化生理期APP的优势,最终结合前期调研结果提出部分基于心理模型的优化设计策略。本文研究旨在为生理期APP的优化提供设计思路,进而优化用户体验。

低氧和低氧诱导因子在月经样小鼠模型中对子宫内膜崩解的作用

目的探究低氧和低氧诱导因子(HIF1A)在小鼠子宫内膜崩解过程中的表达及作用。方法构建药理性小鼠月经样模型。根据月经样小鼠给药处理方式不同分为4组:(1)PW^(-)CoCl_(2)^(-)组(n=5):孕酮(P_(4))维持,不添加二氯化钴(CoCl_(2));(2)PW^(-)CoCl_(2)^(+)组(n=6):P_(4)维持,CoCl_(2)给药;(3)PW^(+)CoCl_(2)^(-)组(n=5):P_(4)撤退,不添加CoCl_(2);(4)PW^(+)CoCl_(2)^(+)组(n=6):P4撤退,CoCl_(2)给药。P4撤退后0 h、8 h、12 h、16 h、24 h处死小鼠并收集子宫组织,通过低氧探针和免疫组化检测P4撤退后不同时间点小鼠子宫低氧定位和HIF1A蛋白的表达情况;P4撤退后24 h,观察各组小鼠的子宫大体,HE染色法观察各组小鼠子宫组织形态,免疫组化染色法观察PW^(+)CoCl_(2)^(-)组和PW^(+)CoCl_(2)^(+)组小鼠子宫低氧定位和HIF1A蛋白的表达情况;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测P_(4)撤退后24 h子宫组织细胞质和细胞核中HIF1A的表达情况。结果免疫组化染色显示,小鼠子宫组织在P4撤退后低氧持续时间为0~24 h,P4撤退12 h和16 h时小鼠子宫低氧探针染色面积占比和HIF1A表达水平均显著高于P4撤退0 h时(P<0.05),低氧探针和HIF1A表达位置有很强的相关性。子宫大体和组织形态学观察显示,P4撤退后24 h,PW^(-)CoCl_(2)^(-)组和PW^(-)CoCl_(2)^(+)组小鼠子宫内膜保持完整,PW^(+)CoCl_(2)^(-)组和PW^(+)CoCl_(2)^(+)组子宫崩解出血。免疫组化染色结果显示,PW^(+)CoCl_(2)^(+)组子宫内膜的低氧染色面积占比和HIF1A核染色细胞百分比均显著高于PW^(+)CoCl_(2)^(-)组(P<0.05)。Western blot结果显示,P4撤退后24 h,PW^(-)CoCl_(2)^(-)组子宫组织细胞质HIF1A表达较高,在细胞核中几乎检测不到;与PW^(-)CoCl_(2)^(-)组相比,PW^(-)CoCl_(2)^(+)组细胞质HIF1A的表达显著降低而在细胞核中显著升高(P<0.05),PW^(+)CoCl_(2)^(-)组细胞质HIF1A的表达无显著变化而在细胞核中显著升高(P<0.05),PW^(+)CoCl_(2)^(+)组细胞质、细胞核HIF1A的表达均显著升高(P<0.05)。结论月经期间P4撤退导致子宫内膜崩解。低氧和HIF1A与月经期间子宫内膜崩解有关,但不是必需因素。

PGE_2及其受体在小鼠月经模型中子宫内膜崩解期的含量与表达研究

目的探讨前列腺素E2(PGE2)及其前列腺素E2受体(PTGER2)在小鼠月经模型中的含量和表达变化。方法选取40只小鼠,建立小鼠月经模型,用ELISA方法检测孕酮撤退后0～24h小鼠子宫组织匀浆中PGE2的含量;用实时定量PCR、免疫组化和Western blot方法检测子宫内膜崩解期Ptger2mRNA和蛋白质在子宫组织中的表达与定位。结果 PGE2的含量在孕酮撤退崩解期子宫组织中呈现逐渐升高的趋势,16h达到最大(P<0.01);PTGER2蛋白质在孕酮撤退的0～24h定位于整个蜕膜化区域且未呈现区域性的变化;Ptger2mRNA在孕酮撤退后0～16h,无显著变化(P>0.05),在孕酮撤退后24h其表达较0～16h显著升高(P<0.01),但PTGER2蛋白质在孕酮撤退后0～24h的表达无显著变化(P>0.05)。结论提示PGE2对子宫内膜的崩解剥脱作用可能通过PGE2含量的增加,而不是通过其受体PTGER2表达的增加来实现。

女性中医健康状态辨识模型研究

目的:挖掘分析女性中医健康状态的特征,初步构建有生理周期女性的中医健康状态辨识模型。方法:对《中医妇科常见病诊疗指南》中月经相关疾病的疾病诊断和辨证内容进行文本挖掘分析,提取与脏腑病位、气血阴阳盈亏、病邪性质相关的症状,通过计算症状与健康状态的权重值,形成女性疾病问卷和证素辨证问卷;通过计算月经周期阶段推算内在气血阴阳消长状态;借助体质问卷进行体质辨识。通过上述四类辨识方法,形成女性中医健康状态的综合辨识。结果:通过疾病辨识模型区分已病和未病或欲病状态;通过证素辨证模型了解女性脏腑病位、气血阴阳盈亏与病邪性质;再通过辨识内在气血阴阳状态,结合体质结果,初步构建女性中医健康状态辨识模型。结论:模型辨识结果能够多维度的反映女性综合健康状态,可对女性中医健康状态进行精细化分类,既可以了解既往较稳定的健康状态又可了解未来健康趋势,从而有助于后续个性化健康干预方案的制定。

基于microRNA表达量及判别分析的外周血与月经血鉴别

目的根据2种血液类体液(外周血和月经血)和3种非血液类体液(唾液、精液、阴道分泌液)中多种微RNA(microRNA,miRNA)差异表达的特征构建判别分析模型,形成外周血与月经血的鉴别方案。方法从文献中筛选出6种miRNA(miR-451a、miR-144-3p、miR-144-5p、miR-214-3p、miR-203-3p和miR-205-5p),收集5种法医学常见体液样本(外周血、月经血、唾液、精液和阴道分泌液),并将样本划分为训练集及测试集,采用SYBR Green荧光实时定量PCR技术检测,基于训练集的表达量数据构建判别分析模型,另外采用测试集的表达量数据检验该模型的准确度。结果成功构建了可同时区分血液与非血液类样本以及区分外周血与月经血样本的判别分析统计模型,模型的鉴别准确率达99%以上。结论本研究为外周血和月经血样本的法医学体液鉴别提供了科学准确的鉴别策略,有望在法医学实践中应用。

人工流产术后月经不调的风险预测可视化模型构建与验证

目的探讨人工流产术后月经不调的影响因素,并建立风险预测可视化模型。方法回顾性分析2016年8月至2022年1月于我院行人工流产术的2448例患者的临床资料,按照随机2∶1的比例分为建模组(n=1632)与验证组(n=816);同时,根据术后是否出现月经不调情况将建模组患者进一步分为两个亚组:月经不调组(n=49)与非不调组(n=1583)。比较各组患者的临床资料,采用多因素Logistic回归分析法分析人工流产术后月经不调的影响因素,并基于此构建风险预测可视化模型;采用Bootstrap法验证该模型,绘制校正曲线、受试者工作特征(ROC)曲线、决策曲线(DCA)对模型的预测效能和临床净获益值进行评估。结果建模组的临床资料与验证组比较均无显著性差异(P>0.05)。月经不调组人工流产次数≥3次、术后负性情绪、术后宫腔异常、术后生殖器官炎症、术后性激素异常占比均显著高于非不调组(P<0.05),术后半个月子宫内膜厚度显著低于非不调组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,人工流产次数≥3次、术后半个月子宫内膜厚度≤3 mm、术后负性情绪、术后宫腔异常、术后生殖器官炎症、术后性激素异常均是人工流产术后月经不调的危险因素(OR分别为2.547、1.846、1.970、4.802、3.951、3.717,P<0.05)。基于多因素Logistic回归分析结果建立的人工流产术后月经不调风险预测列线图模型,经Bootstrap法验证显示,建模组和验证组一致性指数分别为0.813和0.801,校正曲线与理想曲线均贴合度较好;ROC曲线结果显示,建模组曲线下面积为0.832,灵敏度、特异度分别为85.71%、83.33%,验证组曲线下面积为0.824,灵敏度、特异度分别为82.61%、82.68%;DCA曲线结果显示,当阈值概率为3%~100%时,列线图模型可获得较高的净获益值。结论人工流产次数较多、术后半个月子宫内膜厚度偏薄以及术后负性情绪、宫腔异常、生殖器官炎症、性激素异常均是人工流产术后月经不调的影响因素,基于此构建的列线图模型可有效筛选人工流产术后出现月经不调的高风险人群,对指导临床早期制定对应措施具有积极意义。

益母草碱对小鼠生理性月经样模型崩解期的作用

目的：研究益母草碱对小鼠生理性月经样模型的作用。方法：建立小鼠生理性月经样模型,将人工蜕膜化的假孕小鼠双侧卵巢切除,引发孕酮（P4）撤退,随后蜕膜化子宫内膜发生崩解坏死,模型小鼠出现月经样出血。在P4撤退前至撤退后24h,给予模型小鼠益母草碱,观察P4撤退后小鼠阴道出血状态,子宫大体形态以及组织形态学变化。结果：模型小鼠均在P4撤退后12~24h观察到阴道出血。与空白对照组相比,P4撤退后24h益母草碱药物处理组小鼠子宫颜色较深,子宫充血较显著。小鼠子宫腔上皮下的血管显著扩张,特别是腔上皮下血管扩张与红细胞渗出严重,且范围较对照组更广。通过统计学分析证实,益母草碱组充血面积高于对照组（P=0.011）。结论：提示益母草碱可导致小鼠子宫内血管扩张与红细胞渗出,其中的药理作用和分子机制有待进一步研究。

缺血再灌注对小鼠蜕膜化子宫内膜的作用

目的以小鼠月经样模型为基础,探索缺血再灌注在月经发生中的作用。方法假孕NIH小鼠子宫诱导蜕膜化,完成蜕膜化后将小鼠分为对照组(n=8)、假手术组(n=8)与缺血再灌注组(n=10)。对照组小鼠无操作,假手术组仅实行开腹手术,而缺血再灌注组小鼠开腹后对单侧子宫角进行血管夹持手术阻断血流,30min后恢复血流,造成单侧子宫角内发生缺血再灌注,另一侧子宫角无操作。手术后观察阴道出血状况,且术后6h与24h取材进行大体观察与组织形态学观察,统计子宫内膜崩解的小鼠数量。结果处理后24h,对照组小鼠子宫内膜全部保持完好,无一例(0/8)发生内膜崩解;假手术组仅一例(1/8)发生内膜崩解;缺血再灌注组大部分小鼠(8/10)双侧子宫角的子宫内膜均发生崩解并伴随阴道出血现象。结论缺血再灌注能够直接导致绝大部分小鼠蜕膜化子宫内膜发生完全崩解。

补肾解郁方治疗肾虚肝郁女性卵巢储备功能下降26例临床观察

[目的]观察补肾解郁方治疗肾虚肝郁女性卵巢储备功能下降疗效。[方法]使用前瞻性设计方法,26例门诊患者补肾解郁方(熟地黄10g,山茱萸6g,女贞子10g,墨旱莲、菟丝子15g,茯苓12g,紫石英15g,鹿角胶(烊化)10g,柴胡9g,白芍、香附、牛膝10g),1剂/d,水煎400m L,早晚口服;经期停用,连续治疗3个月为1疗程。观测临床症状、月经周期、FSH、LH、E2、FSH/LH、不良反应。连续治疗2疗程,判定疗效。[结果]痊愈6例,显效11例,有效7例,无效2例,总有效率92.30%(24/26)。妊娠5例。FSH、LH/FSH均有改善(P<0.01),LH、E2无明显改善(P>0.05)。[结论]补肾解郁方治疗肾虚肝郁女性卵巢储备功能下降,疗效满意,无严重不良反应,值得推广。

锰对女工生殖机能的影响

本文研究了锰对女工生殖机能的影响。作业场所空气中MnO_2的浓度为0.18～7.32mg/m^3。接触锰女工性欲减退者占7.35%,月经异常发生率为40.2%,子代先天畸形发生率为13.85‰,显著高于对照组(P<0,05)。为控制混杂因素的作用,对月经异常进行了条件Logistic回归分析。并对研究结果进行了讨论。