PAK1和NF2/Merlin的拮抗作用驱动少突胶质细胞髓鞘膜扩张

在中枢神经系统中,少突胶质细胞(OL)髓鞘的形成依赖于肌动蛋白细胞骨架从聚合到解聚的转变。触发这种转变的分子机制尚未阐明。本研究确定P21活化激酶1(PAK1)是OL中肌动蛋白解聚的主要调节因子。我们的结果表明,PAK1以激酶抑制形式在OL中积累,从而触发肌动蛋白分解,进而导致髓鞘膜扩张。值得注意的是,PAK1结合伙伴的蛋白质组学分析使我们能够确定NF2/Merlin是其内源性抑制剂。本研究表明,OL中的Nf2敲低会导致PAK1活化、肌动蛋白聚合和OL髓鞘膜扩张减少。通过使用PAK1抑制剂治疗可以挽救这种影响。本研究还提供了证据表明,少突胶质细胞中特定的Pak1功能丧失会刺激体内髓鞘增厚。总体而言,我们的数据表明PAK1和NF2/Merlin对OL肌动蛋白细胞骨架的拮抗作用对于髓鞘的正常形成至关重要。这些发现对研究脱髓鞘疾病和神经发育障碍的机制和治疗有着重要意义。

铅暴露通过Merlin-mTOR信号通路促脑膜瘤细胞增殖及迁移侵袭

铅(Pb)毒性是影响全球数百万人的公共卫生问题,临床研究发现脑膜瘤的重要危险因素是铅暴露。同时在脑膜瘤患者体内常能发现由NF2基因编码的Merlin蛋白缺失。但是铅暴露如何调节脑膜瘤细胞的发生发展目前研究仍无定论。本研究旨在分析铅暴露对脑膜瘤细胞的增殖、细胞体积、迁移侵袭能力的影响以及其潜在分子机制。结果显示,醋酸铅可抑制脑膜瘤细胞IOMM-Lee的Merlin蛋白表达、促进细胞的增殖和迁移侵袭能力、mTOR分子磷酸化增加,而Merlin蛋白外源过表达则可逆转醋酸铅介导的细胞增殖迁移侵袭能力增加、 mTOR磷酸化分子增加。该结果提示,铅暴露可通过Merlin-mTOR信号通路促进脑膜瘤细胞IOMM-Lee的增殖和迁移侵袭。

卵巢早衰小鼠中血清Merlin蛋白变化及意义探讨

目的研究卵巢早衰小鼠血清Merlin蛋白水平变化及其与血清E2、FSH、LH的关系。方法120只6周龄KM雌性小鼠按随机原则分为三组即实验A组,实验B组和空白对照组。实验A组小鼠经腹腔注射环磷酰胺120 mg/kg,观察10 d,建POF模型;实验B组小鼠经灌胃给予雷公藤多甙片(Tripterygium wilfordii polyglycoside)0.6 mg/100g,1次/d,连续10 d,构建POF模型;空白对照组等剂量生理盐水灌胃,1次/d,共10 d。采血测血清E2、FSH、LH和Merlin蛋白浓度,比较各组建模前后及三组间建模后Merlin蛋白表达水平;同时分析建模后实验组血清Merlin蛋白水平与血清E2、FSH、LH水平的相关性。结果建模后三组间血清Merlin蛋白水平有明显差异(F=80.41,P<0.01),经组间两两比较,实验A组和实验B组小鼠血清的Merlin蛋白水平[(3.76±1.15)ng/mL;(3.85±1.31)ng/mL]与对照组有明显下降(t=11.18&10.78),差异有统计学意义(P<0.01)。实验A组和实验B组建模后Merlin蛋白水平分别较建模前差异均有统计学意义(t=12.53&11.14;P<0.01)。Pearson相关分析显示,建模后实验A组和实验B组血清Merlin蛋白水平与各自E2水平呈负相关(r=-0.812&-0.789),差异有统计学意义(P<0.01);与各自FSH和LH水平呈正相关(r=0.715&0.722;0.732&0.741),差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论Merlin蛋白可能参与了卵巢早衰的激素调控,且对卵泡生长发育产生了负性调控作用。

4.1蛋白家族成员merlin与ezrin在青海藏族胃癌中表达及对胃癌细胞功能的影响

目的研究4.1蛋白家族成员merlin和ezrin在青海藏族胃癌组织中突变与表达特点,同时研究二者对胃癌细胞增殖、黏附侵移能力的影响。方法用PCR及DNA测序检测merlin突变,免疫组化检测ezrin蛋白表达,用MTT方法检测胃癌细胞增殖与黏附侵移。结果青海藏族胃癌组织中检测到merlin蛋白基因NF2外显子17两个位点突变率较高,超过50%。而ezrin蛋白表达在青海藏族胃癌组织中比正常胃黏膜组织中为高(P<0.05),其表达水平与胃癌分化程度、淋巴结转移及组织学分型有关(P<0.05)。此外,MTT检测结果显示,FERM蛋白结构域、merlin-2对胃癌细胞增殖与细胞黏附侵染无明显影响,并且ezrin对胃癌细胞黏附侵移能力亦无明显影响,但对细胞增殖具有一定抑制能力。抑癌基因蛋白merlin-1不但抑制细胞增殖,而且也对细胞黏附侵移具有抑制作用,其中抑癌基因蛋白merlin-1对细胞增殖抑制能力比ezrin蛋白更加明显。结论 Merlin和ezrin蛋白表达与青海藏族胃癌易感性具有一定关系,且两种因子参与调节胃癌细胞增殖和细胞黏附能力。

Merlin蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:研究Merlin蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法:免疫组织化学法测定45例非小细胞肺癌组织、癌旁组织、正常组织的Merlin蛋白的表达,并对癌组织中的表达与其组织学分型、性别、P-TNM分期、分化程度及淋巴结转移情况等因素进行分析。结果:Merlin蛋白在正常组织及肺癌组织中阳性率分别为15.56%和73.33%,2组表达差异有统计学意义(P<0.05);Merlin蛋白在肺癌组织中的表达与患者组织学分型、性别、P-TNM分期、分化程度及淋巴结转移情况均无关(P>0.05)。结论:Merlin蛋白可能与非小细胞肺癌的发生相关。

ezrin和merlin基因在胰腺癌细胞中的表达及其意义

目的:研究ezrin和merlin基因在胰腺癌细胞中的表达情况及其对胰腺癌细胞生物学行为的影响。方法:应用RT-PCR与Western blotting检测ezrin和merlin基因在胰腺导管上皮细胞及胰腺癌细胞中的mRNA和蛋白表达水平;利用脂质体分别将ezrin和merlin基因转染入SW1990细胞株中,应用MTT实验、流式细胞术、迁移实验和细胞黏附实验观察转染基因对细胞增殖、迁移和黏附能力,细胞周期及凋亡的影响。结果:ezrin和merlin基因在8株细胞中均有不同程度的表达,其表达水平与胰腺癌细胞的分化程度无关。与对照组相比,转染ezrin和merlin基因的SW1990细胞增殖速度缓慢(P<0.01);细胞周期表现为G1期细胞增多,S期细胞减少(均P<0.05);细胞与基质的黏附能力明显下降(P<0.01);且转染merlin的SW1990细胞其迁移能力亦有明显降低(P<0.05),而转染ezrin的SW1990细胞其迁移能力无明显统计学意义的改变(P>0.05)。结论:ezrin和merlin蛋白在胰腺癌细胞增殖、进展过程中可能发挥着负性调节作用。

神经鞘瘤的schwannomin/merlin表达分析

目的 分析S/M蛋白在神经鞘瘤中的表达。方法 用免疫组织化学、蛋白印迹法观察36例神经鞘瘤中S/M的表达。结果 所有神经鞘瘤无Ⅱ型多发神经纤维瘤病（NF2）（A-19）免疫活性。28例（78％）S/M表达量下降（与正常比小于70％）,其中听神经瘤占81％（13/16）、非听神经瘤占75％（15/20）。13例（36％）（听神经瘤3例、非听神经瘤10例）中等度下降（与正常比下降35％～69％）;15 例（42％）（听神经瘤10例、其它5例）表达重度下降（与正常比小于35％）。结论 神经鞘瘤中S/M表达下降。

Merlin在大鼠脑的分布

目的 :对正常成年大鼠脑中NF2基因表达产物Merlin的分布进行了观察。 方法 :运用免疫组化ABC法。 结果 :①Merlin阳性免疫反应较强的脑区和核团有大脑皮质、杏仁核、丘脑前核群、丘脑内侧核群、丘脑板内核群、丘脑中线核群、脑干前庭内侧核以及小脑皮质颗粒层等。②中等阳性免疫反应的结构有海马结构、隔外侧核、隔内侧核、下丘脑室周核、下丘脑室旁核、蜗神经背侧核、蜗神经腹侧核、前庭内侧核等。③阳性免疫反应较弱的脑区和核团有尾壳核、屏状核、苍白球、下丘脑外侧前核、下丘脑背侧核、三叉神经脊束核、巨细胞网状核等。结论 :Merlin在大鼠脑中有广泛的表达 ,但在不同的脑区和核团其表达强度不同。

Merlin在舌鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨Merlin在舌鳞状细胞癌(TSCC)中的表达及临床意义。方法免疫组化检测45例TSCC患者癌组织与16例正常舌黏膜组织中Merlin的表达,并对癌组织中的表达与患者性别、年龄、TNM分期、淋巴结转移及分化程度等情况进行分析。结果 Merlin在TSCC与正常舌组织的阳性表达率分别为53.3%和87.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。TSCC中,Merlin蛋白的表达与患者的性别、年龄、TNM分期、淋巴结转移等均无关(P>0.05),但与病理分化程度相关,高分化舌癌的Merlin阳性率显著高于低分化舌癌(P<0.05)。结论 Merlin在TSCC的发生、发展过程中可能发挥着重要的作用。

NF2基因表达Merlin蛋白的作用机制

人类脑肿瘤中,2型神经纤维瘤病(Neurofibromatosis2,NF2)的肿瘤抑制蛋白Merlin普遍发生错误表达。突变基因位于人类染色体22q12,正常表达的蛋白质命名为Merlin或Schwannomin。Merlin与ERM蛋白家族有同源性,与埃兹蛋白(Ezrin)、根蛋白(Radixin)和膜突蛋白(Moesin)同属4.1蛋白超家族。目前研究相继发现多种能与Merlin发生相互作用的蛋白。本文旨在探讨这些蛋白在NF2发病中可能的作用机制。

NF2基因及其蛋白merlin的生物学研究进展

NF2基因是一种瘤抑制基因,其失活可导致蛋白质的变性并可诱导肿瘤的发生。其编码的merlin蛋白与细胞的运动和增殖有着较密切的关系,磷酸化使merlin蛋白丧失了抑制肿瘤生长的能力。通过对NF2及merlin蛋白的研究,为研制抗肿瘤药物或干预的靶点提供其理论基础。

Merlin蛋白结构及与其他分子的相互作用

NF2基因是一个重要的肿瘤抑制因子,其表达产物Merlin是至今被发现的第一种具有肿瘤抑制作用的蛋白质,通过与其他蛋白质直接或间接的相互作用,调控细胞运动和增殖等细胞活动。

MERLIN蛋白在马桑内酯致痫大鼠颞叶皮层及海马CA1区的表达

目的探讨MERLIN与颞叶癫痫海马硬化间的相互关系。方法采用马桑内酯慢性致痫大鼠模型,通过免疫组化方法观察MERLIN在点燃组、未点燃组及对照组中颞叶皮层及海马CA1区的表达。结果在点燃组颞叶皮层及海马CA1区神经元MERLIN的表达较未点燃组及对照组的表达有增多(P<0.05),而未点燃组与对照组之间在神经元表达上差异无统计学意义(P>0.05)。各组在上述部位胶质细胞的表达均较少。结论MERLIN在马桑内酯点燃大鼠模型颞叶皮层及海马CA1区神经元中的过度表达可能参与了神经元凋亡、海马硬化的过程。

散发神经鞘瘤的Schwannomin/Merlin表达分析

目的分析schwannomin merlin(S M)在神经鞘瘤中的表达。 方法用S M氨基端抗体NF2 (A - 19) ,通过免疫组织化学和Westernblotting分析S M在神经鞘瘤中的表达。 结果免疫组织化学发现所有神经鞘瘤无NF2(A - 19)免疫活性 (阳性细胞见于非肿瘤细胞 ) ,2 8例 (78% )S M表达下降 (与正常比小于 70 % ) ;81%听神经瘤 (13 16 )、75 %的非听神经瘤 (15 2 0 )表达下降 ;中等度下降 (35 %～ 6 9% ) 13例 (听神经瘤 3例 ,非听神经瘤 10例 ) ,表达重度下降 (<35 % ) 15例 (听神经瘤 10例 ,其它 5例 )。在听神经瘤中 ,S M表达重度下降肿瘤的生长指数显著高于S M表达中等度下降或正常者 (P <0 .0 5 )。 结论神经鞘瘤中S M表达下降。

低氧环境下merlin-1蛋白对胃癌细胞黏附能力及细胞骨架表达调节的影响

目的:研究低氧条件下,merlin-1蛋白对汉族、回族和藏族胃癌细胞增殖、黏附能力及细胞骨架表达的调节作用,同时比较常氧或低氧条件下,merlin-1蛋白的作用是否具有民族特异性.方法:用MTT方法检测常氧或低氧条件下,merlin对回族、藏族和汉族胃癌原代细胞增殖及黏附、侵移的影响;免疫荧光染色法检测常氧或低氧条件下merlin对汉族、回族和藏族胃癌细胞骨架、细胞形态及细胞表面微绒毛表达的影响.同时分析merlin在常氧或低氧条件下的影响作用是否具有民族特异性.结果:常氧或低氧条件下,merlin-1蛋白均对汉族(P常氧=0.00,P低氧=0.00)、回族(P常氧=0.00,P低氧=0.00)和藏族(P常氧=0.00,P低氧=0.00)胃癌细胞增殖均有明显的抑制作用,但merlin-1对不同民族胃癌细胞增殖的抑制作用无民族特异性(P常氧>0.05,P低氧>0.05).黏附能力检测结果显示,在常氧及低氧条件下merlin-1蛋白对汉族(P常氧=0.00,P低氧=0.00)、回族(P常氧=0.00,P低氧=0.00)和藏族(P常氧=0.00,P低氧=0.00)胃癌细胞黏附能力均有抑制作用,且抑制能力亦无民族特异性[P常氧=0.51(3 h)、0.07(48 h),P低氧=0.47(3 h)、0.17(48 h)].在对细胞骨架、细胞形态变化及细胞微绒毛表达实验中,观察到merlin-1在低氧条件下可加强细胞骨架表达.结论:低氧条件对merlin-1抑制回族、藏族和汉族胃癌细胞增殖能力无明显影响,且merlin-1蛋白对胃癌细胞的抑制能力无论在常氧或低氧条件下,均无民族特异性.merlin蛋白在低氧条件下对胃癌细胞骨架表达有促进作用.

外源性一氧化氮对merlin调节的胃癌细胞增殖的影响

目的通过研究胃癌中一氧化氮对扩散侵袭相关因子merlin的调节作用,进一步阐明肿瘤获得性表达一氧化氮后其恶性增殖的可能作用机制。方法外源性一氧化氮由硝普钠供给,利用MTT法检测细胞增殖,利用Lipofectamine 2000将merlin重组质粒转染入细胞,并用Western blot蛋白印迹法检测merlin重组质粒的转染效率,利用NP-40裂解液提取细胞总蛋白。结果与0.1μmol/L浓度组相比,1 mmol/L浓度组的NO对胃癌细胞增殖有明显抑制作用。与未转染组相比,转染merlin-1对胃癌细胞的增殖具有抑制作用(P<0.01)。merlin-1与NO对胃癌细胞增殖的交互作用无统计学意义(P>0.05)。结论一氧化氮和merlin-1对胃癌细胞的增殖均有抑制作用,但尚不能认为merlin-1与一氧化氮的交互作用对胃癌细胞增殖有影响。

merlin分子生物学特性及其与肿瘤关系的研究进展

ERM（ezrin／radixin／moesin／merlin）家族有4个成员，分别为埃兹蛋白（ezrin）、根蛋白（radixin）、膜突蛋白（moesin）及merlin。其中merlin是最后一个被发现的ERM成员。merlin是Ⅱ型神经纤维瘤病（neurofibromatosisⅡ，NF2）基因的编码蛋白，也是一种肿瘤抑制蛋白。NF2基因突变或表达缺失可能导致肿瘤发生，而merlin过度表达可能阻止癌细胞增殖和癌基因诱导的恶性转化。但近来也有研究提示，

类星体4C39.25的MERLIN图象:角秒尺度上的单边喷流

长时间以来被看作是典型致密双源之一的类星体４Ｃ３９．２５，其主要成分显示坦谱，且具有特殊的视超光速结构变化。根据在１８厘米波长新的ＶＬＢＩ及ＭＥＲＬＩＮ观测，可以认为该源是一个核－喷流类星体．喷流在毫角秒尺度上旋转了大约９０度，并是终向７９度的方向角延伸，喷流中包含了几个“节”及在其终点的一个热斑。预期在更高频率的亚毫角秒观测可以证实这样的结构，并对其核本身在１８厘米，甚至６厘米波长都几乎是不可见的作出解释．

NF2/Merlin在原发性肝癌中的表达及临床意义研究

目的研究NF2/Merlin在原发性肝癌中的表达及临床意义。方法免疫组织化学法测定94例肝细胞癌(HCC)和37例肝内胆管细胞癌(ICC)的Merlin表达,并对癌组织中的表达与其临床病理的关系进行分析。结果Merlin蛋白在癌组织中的表达高于癌旁组织。HCC中Merlin蛋白高表达率为20.2%,ICC中Merlin蛋白高表达率为45.9%。在HCC中,Merlin蛋白的表达高低与肿瘤的分期、HBV感染和肿瘤细胞的分化程度均无关,但在ICC中Merlin蛋白的表达高低与肿瘤细胞的分化程度相关。结论 NF2基因的表达可能与原发性肝癌的发生相关。