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云南和海南两省不同地区恶性疟原虫裂殖子表面蛋白2基因型的研究 被引量:10
1
作者 诸欣平 周蕾 +2 位作者 张新梅 杨静 杨雅平 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期1-3,共3页
目的 分析云南和海南两省恶性疟原虫的基因型及其分布。方法采用套式PCR法特异扩增MSP2基因中间多态区 ,对恶性疟原虫群体进行基因分型。结果 检测云南省 31例和海南省 2 9例恶性疟原虫患者血清 ,其中分别有 14和 18种不同的MSP2等位... 目的 分析云南和海南两省恶性疟原虫的基因型及其分布。方法采用套式PCR法特异扩增MSP2基因中间多态区 ,对恶性疟原虫群体进行基因分型。结果 检测云南省 31例和海南省 2 9例恶性疟原虫患者血清 ,其中分别有 14和 18种不同的MSP2等位基因型 ,其等位基因株存在高度的多态性 ,基因片段大小及分布频率具有地区差异。海南省不同等位基因型虫株混合感染及多重感染现象比云南省严重。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖子表面蛋白2 基因分型 等位基因 云南 海南
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恶性疟原虫FCC-1/HN株裂殖子表面抗原2(MSA-2)基因在卡介苗BCG中的表达 被引量:7
2
作者 郑春福 吴少庭 +2 位作者 陈雅棠 高世同 林敏 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2002年第4期193-197,共5页
目的 :裂殖子表面抗原 2基因 (Merozoitesurfaceantigen 2 ,MSA2 )是恶性疟原虫的一种保护性抗原 ,为研究其重组BCG疫苗的保护作用 ,首先探讨携带有恶性疟原虫FCC 1 HN株MSA2基因的重组分枝杆菌-大肠杆菌穿梭质粒pBCG MSA2在卡介苗 (Bac... 目的 :裂殖子表面抗原 2基因 (Merozoitesurfaceantigen 2 ,MSA2 )是恶性疟原虫的一种保护性抗原 ,为研究其重组BCG疫苗的保护作用 ,首先探讨携带有恶性疟原虫FCC 1 HN株MSA2基因的重组分枝杆菌-大肠杆菌穿梭质粒pBCG MSA2在卡介苗 (BacillusCalmetteGuerin ,BCG)中的表达情况。方法 :采用电穿孔转化法将重组质粒pBCG MSA2导入BCG中 ,通过卡那霉素抗性筛选并经PCR鉴定的重组BCG培养于Middlebrook 7H9Broth (M7H9)培养基 ,并添加 10 %M7H9EnrichmentADC和 0 0 5 %Tween80 ,4周后于 4 5℃进行诱导表达 ,表达产物进行十二烷基磺酸钠 -聚丙烯酰胺凝胶电泳 (Sodiumdodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis,SDS PAGE)及免疫印迹 (Western blot)分析。结果 :SDS PAGE及Western blot分析结果均显示在约 31kDa的位置上可见明显的蛋白条带 ,并与MSA2基因编码序列推断的分子量相符。结论 :恶性疟原虫裂殖子表面抗原 2可在BCG中表达 。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 FCC-1/HN株 裂殖子 表面抗原2 MSA-2 基因 卡介苗BCG 表达 穿梭质粒
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云南省不同地理株恶性疟原虫的MSP-2基因多态性研究 被引量:5
3
作者 杨亚明 张国森 +2 位作者 刘慧 张再兴 高白荷 《中国热带医学》 CAS 2004年第6期911-912,906,共3页
目的 研究云南省不同地理株恶性疟原虫的裂殖子表面抗原蛋白基因 2 (MSP -2 )的多态性 ,探索其多态性的地域特征 ,为鉴定不同地理株恶性疟原虫提供重要的科学依据。 方法 使用随机扩增多态DNA -多聚酶链反应(RAPD -PCR)为主的分子生... 目的 研究云南省不同地理株恶性疟原虫的裂殖子表面抗原蛋白基因 2 (MSP -2 )的多态性 ,探索其多态性的地域特征 ,为鉴定不同地理株恶性疟原虫提供重要的科学依据。 方法 使用随机扩增多态DNA -多聚酶链反应(RAPD -PCR)为主的分子生物学方法。 结果 分析云南不同疟疾流行区的 169份样本 ,PCR扩增获得 6个不同大小的MSP -2基因片段 ,60 0bp片段占多 ,其频度为 3 4 8% ,5 40bp片段其次 ,占 2 8 3 % ;同时显示具有一定的地理分布差异。 结论 研究证实云南不同地区恶性疟原虫的MSP -2具有较为明显的地理多态性特征。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 MSP 地理株 基因多态性 疟疾 表面抗原 流行区 随机扩增多态DNA 蛋白基因 RAPD-PCR
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我国恶性疟原虫裂殖子表面蛋白MSP-2的抗原表位分析 被引量:6
4
作者 李明 陈白虹 +2 位作者 董文其 毕惠祥 王萍 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2000年第1期11-17,共7页
根据我国恶性疟原虫株MSP-2基因序列,检索我国虫株MSP-2是否具有国外已鉴定的MSP-2抗原表位。结果显示,我国虫株MSP-2具有已鉴定的FC-27等位基因型可变区抗原表位STNS和DTPTATE。同时应用计算机辅助抗原表位分析技术对MSP-2进行抗原表... 根据我国恶性疟原虫株MSP-2基因序列,检索我国虫株MSP-2是否具有国外已鉴定的MSP-2抗原表位。结果显示,我国虫株MSP-2具有已鉴定的FC-27等位基因型可变区抗原表位STNS和DTPTATE。同时应用计算机辅助抗原表位分析技术对MSP-2进行抗原表位分析预测,并以合成肽技术鉴定了预测表位的免疫原性。抗原指数分析表明,MSP-2分子亲水性指数和侧链易曲性指数最高的区域分别位于aa153~166和aa65~72,而aa53~60可能是我国虫株特异的抗原表位。用4个合成肽进行免疫学鉴定,证实预测的表位可以诱导抗肽抗体反应,免疫血清可识别重组MSP-2和恶性疟原虫全抗原中MSP-2抗原区带,且合成肽可与我国流行区高度免疫人群免疫血清反应。由于这些表位存在于我国海南、云南、安徽株MSP-2序列中,可以作为研制我国恶性疟重组多价表位疫苗的候选抗原表位。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 MSP-2 抗原表位 重组疫苗 疟疾
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恶性疟原虫海南、云南、安徽株裂殖子表面抗原MSA2基因的克隆和序列分析 被引量:2
5
作者 李明 谢毅 +2 位作者 李英杰 任大明 毕惠祥 《第一军医大学学报》 CSCD 1995年第2期94-98,共5页
应用PCR技术扩增并克隆了恶性疟原虫海南、云南、安徽三个地理株的MSA2基因,测定并分析了全基因序列。结果表明,海南、云南、安徽株MSA2基因序列完全相同,全长为795bp,编码264个氨基酸,与FCQ-27/PNG... 应用PCR技术扩增并克隆了恶性疟原虫海南、云南、安徽三个地理株的MSA2基因,测定并分析了全基因序列。结果表明,海南、云南、安徽株MSA2基因序列完全相同,全长为795bp,编码264个氨基酸,与FCQ-27/PNG株MSA2高度同源。对抗原表位进行多参数综合分析表明,我国虫株除具有国外已确定的抗原表位STNS、DTPTATE外,在第53—72位氢基酸间可能具有一个新的抗原表位。 展开更多
关键词 疟原虫 裂殖子 表面抗原 基因序列分析 MSA2
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海南省恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 2基因的分型研究及序列分析(英文) 被引量:5
6
作者 江钢锋 陈沛泉 王善青 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2002年第3期131-134,共4页
目的 对恶性疟原虫海南株的 MSP2基因进行分型和多态性分析。 方法 采用套式 PCR法特异扩增 MSP2基因的中间可变区 (第 3区 ) ,对 4 1株恶性疟原虫分离株进行基因分型 ,并对部分目的基因片段进行直接测序。 结果  4 1份血样中有 3... 目的 对恶性疟原虫海南株的 MSP2基因进行分型和多态性分析。 方法 采用套式 PCR法特异扩增 MSP2基因的中间可变区 (第 3区 ) ,对 4 1株恶性疟原虫分离株进行基因分型 ,并对部分目的基因片段进行直接测序。 结果  4 1份血样中有 39份共扩增得到 5 5个目的基因片段 ,以 3D7型为主 (2 8份血样 ,36个基因片段 ) ,两种等位基因家族混合感染的情况极少见。序列分析结果表明 ,海南省恶性疟原虫虫株的 MSP2中间重复序列区变异程度大。 结论 海南省恶性疟原虫的 MSP2以 3D7等位基因家族为主 。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖子表面蛋白2 基因分型 等位基因多态性 序列分析
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赤道几内亚比奥科岛恶性疟原虫MSP-1和MSP-2基因多态性研究 被引量:1
7
作者 陈江涛 李健 +8 位作者 潘雪峰 Urbano Monsuy Eyi Rocio Apicante Matesa Maximo Miko Ondo Obono Carlos Sala Ehapo 查广才 黄广 黄芝秀 林敏 《中国当代医药》 2017年第13期9-12,共4页
目的研究赤道几内亚比奥科岛(Bioko Island)恶性疟原虫分离株裂殖子表面蛋白1(PfMSP-1)基因和裂殖子表面蛋白2(PfMSP-2)基因分型。方法从比奥科岛采集疟疾患者血样181份,用显微镜法和荧光定量PCR鉴定虫种。采用巢式PCR分别扩增PfMSP-1和... 目的研究赤道几内亚比奥科岛(Bioko Island)恶性疟原虫分离株裂殖子表面蛋白1(PfMSP-1)基因和裂殖子表面蛋白2(PfMSP-2)基因分型。方法从比奥科岛采集疟疾患者血样181份,用显微镜法和荧光定量PCR鉴定虫种。采用巢式PCR分别扩增PfMSP-1和PfMSP-2中具有型特异性的片段,进行等位基因分型。结果 PfMSP-1基因分型:181份恶性疟患者血样中有178份扩增出PfMSP-1基因片段(98.34%),其中K1、MAD20和RO33基因型片段分别为171份(94.48%)、175份(96.69%)和126份(69.61%)。混合感染率为97.24%;PfMSP-2基因分型:181份血样中有173份PfMSP-2基因片段(95.58%),其中48份(26.52%)单独扩增到3D7型基因片段,4份(2.21%)单独扩增到FC27型基因片段,混合感染率为66.85%。结论赤道几内亚比奥科岛PfMSP-1和PfMSP-2等位基因型分布范围极广。混合感染是比奥科岛疟疾的主要类型。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖子表面蛋白1 裂殖子表面蛋白2 比奥科岛
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恶性疟原虫海南分离株裂殖子表面蛋白2真核表达重组质粒的构建(英文) 被引量:1
8
作者 赖秀球 朱家勇 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2003年第1期22-25,共4页
目的 构建恶性疟原虫海南分离株 ( FCC1/ HN)裂殖子表面蛋白 2 ( MSP2 )融合 HBs Ag基因片断真核表达质粒 p VX-ORF1- Pf MSP2 - HBS及重组真核表达质粒 p VXORF1- Pf MSP2 ,为疟疾核酸疫苗及蛋白疫苗的研制奠定基础。 方法  ( 1)采... 目的 构建恶性疟原虫海南分离株 ( FCC1/ HN)裂殖子表面蛋白 2 ( MSP2 )融合 HBs Ag基因片断真核表达质粒 p VX-ORF1- Pf MSP2 - HBS及重组真核表达质粒 p VXORF1- Pf MSP2 ,为疟疾核酸疫苗及蛋白疫苗的研制奠定基础。 方法  ( 1)采用 PCR技术对恶性疟原虫 FCC1/ HN株 MSP2 原核表达质粒 PET2 8α- MSP2 的 MSP2 基因进行扩增 ,扩增产物经纯化后用 Bam H 酶切 ;质粒 p VXORF1- Pv MSP1 .1 9- HBS用相同的酶酶切 ,经纯化后用 T4DNA连接酶将其与酶切后纯化的 MSP2 基因连接 ;( 2 )分别用Bam H +Xho 双酶切 PET2 8α- MSP2 质粒 DNA和 p VXORF1质粒 DNA,纯化后将目的基因片断用 T4DNA连接酶连接 ;将 ( 1)、( 2 )连接产物分别转化大肠杆菌 DH5α。于氨苄青霉素阳性 L B培养平板上筛选阳性克隆 ,酶切电泳鉴定。 结果 筛选出的重组子为编码 FCC1/ HN MSP2 基因片断的重组质粒 p VXORF1- Pf MSP2 - HBS及 p VXORF1- Pf MSP2 。 结论 编码 FCC1/ HN MSP2 基因片断真核表达质粒 p VXORF1- Pf MSP2 - HBS和 p VXORF1- Pf MSP2 的构建为疟疾核酸疫苗及蛋白疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖子表面蛋白2 MSP2 疟疾疫苗
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恶性疟原虫裂殖子表面蛋白2基因克隆及其在大肠杆菌中的表达
9
作者 陈志辉 管惟滨 +2 位作者 吴少廷 缪为民 焦炳华 《第二军医大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第4期322-325,共4页
目的:克隆恶性疟原虫裂殖子表面蛋白2全基因,并在大肠杆菌中进行表达。方法:采用PCR扩增恶性疟原虫FCC-1/HN株MSP2基因,克隆插入pUC19,并重组人表达质粒载体中,转化大肠杆菌,诱导重组质粒pBK-CMV/... 目的:克隆恶性疟原虫裂殖子表面蛋白2全基因,并在大肠杆菌中进行表达。方法:采用PCR扩增恶性疟原虫FCC-1/HN株MSP2基因,克隆插入pUC19,并重组人表达质粒载体中,转化大肠杆菌,诱导重组质粒pBK-CMV/msp2表达MSP2蛋白抗原,对表达产物进行SDS-PAGE,dot-ELISA和Wewtern blot鉴定。结果:PCR扩增出824bpDNA片段。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖子表面蛋白2 基因克隆 大肠杆菌
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恶性疟原虫裂殖子表面抗原2基因片段的克隆及表达
10
作者 郑春福 吴少庭 +2 位作者 陈雅棠 高世同 林敏 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2001年第4期248-250,共3页
目的 构建恶性疟原虫海南分离株 (FCC- 1/ HN)裂殖子表面抗原 2 (MSA2 )基因片段的重组真核表达质粒p BK/ MSA2。 方法 采用限制性内切酶法从重组的大肠杆菌 -分枝杆菌穿梭质粒 p BCG/ MSA2中分离出经过测序鉴定的 MSA2基因片段 ,将... 目的 构建恶性疟原虫海南分离株 (FCC- 1/ HN)裂殖子表面抗原 2 (MSA2 )基因片段的重组真核表达质粒p BK/ MSA2。 方法 采用限制性内切酶法从重组的大肠杆菌 -分枝杆菌穿梭质粒 p BCG/ MSA2中分离出经过测序鉴定的 MSA2基因片段 ,将其亚克隆入真核表达载体 p BK- CMV,构建重组真核表达质粒 p BK/ MSA2。经 IPTG诱导 ,重组质粒在大肠杆菌 DH5 α中进行表达 ,并进行十二烷基磺酸钠 -聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)及免疫印迹 (Western- blot)分析。 结果 从 p BCG/ MSA2中分离出 MSA2基因片段 ,成功构建 p BK/ MSA2重组质粒 ;SDS- PAGE及 Western- blot分析结果显示 ,特异性蛋白条带的分子质量约为 31ku。 结论 恶性疟原虫 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖子表面抗原2 克隆 基因片段
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恶性疟原虫MSA2编码基因分枝杆菌穿梭质粒的构建及序列测定
11
作者 吴少庭 高世同 +2 位作者 林敏 张仁利 梁驹卿 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2002年第1期18-20,共3页
目的 构建恶性疟原虫 FCC- 1/ HN株 MSA2编码基因分枝杆菌穿梭质粒重组子 p BCG5 .6 / MSA2 ,并进行序列测定。 方法 根据恶性疟原虫 MSA2编码基因的两侧序列设计引物 ,采用 PCR技术扩增出 MSA2编码基因全长片段 ,经低熔点琼脂糖挖... 目的 构建恶性疟原虫 FCC- 1/ HN株 MSA2编码基因分枝杆菌穿梭质粒重组子 p BCG5 .6 / MSA2 ,并进行序列测定。 方法 根据恶性疟原虫 MSA2编码基因的两侧序列设计引物 ,采用 PCR技术扩增出 MSA2编码基因全长片段 ,经低熔点琼脂糖挖块法回收纯化后 ,插入分枝杆菌穿梭质粒 p BCG5 .6 / MSA2 ,并转化大肠杆菌 DH5 α,快速酚法初筛阳性重组子 ,阳性克隆以 PCR法与限制性酶切分析鉴定后 ,双脱氧链终止法双向进行序列测定。 结果 从恶性疟原虫基因组中扩增出约 82 0 bp的基因片段 ,所构建 p BCG5 .6 / MSA2重组体阳性克隆经双酶切和 PCR鉴定与预期结果一致 ,测序结果确证了插入片段的正确性。 结论 成功构建了恶性疟原虫 MSA2编码基因分枝杆菌穿梭表达质粒 ,为恶性疟 BCG疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖子表面抗原-2编码基因 克隆 序列分析
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在大肠杆菌中表达恶性疟原虫裂殖子表面抗原及一些异常现象的探讨 被引量:1
12
作者 李明 毕惠祥 +2 位作者 谢毅 李英杰 任大明 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 1998年第3期154-160,共7页
将我国恶性疟原虫FCC-1/HN株MSA1第二区基因(MSA1R2)和MSA2全基因克隆入pWR450-I表达载体中,在大肠杆菌中表达了MSA1R2和MSA2与β-半乳糖苷酶的融合蛋白,分子量分别为72kD和94kD... 将我国恶性疟原虫FCC-1/HN株MSA1第二区基因(MSA1R2)和MSA2全基因克隆入pWR450-I表达载体中,在大肠杆菌中表达了MSA1R2和MSA2与β-半乳糖苷酶的融合蛋白,分子量分别为72kD和94kD,约占菌体蛋白总量的25—30%和5—8%。用兔抗恶性疟原虫血清进行Westernblot分析,诱导的pWR-MSA1R2和pWR-MSA2工程菌分别在72kD和94kD处出现与抗恶性疟抗体反应的特异染色区带,而未经诱导的工程菌和pWR450I转化菌则无反应。对MSA2-pWR工程菌在诱导后出现的工程菌生长缓慢、表达量低、表达产物分子量偏大等异常现象进行了分析。 展开更多
关键词 恶性 疟原虫 裂殖子 表面抗原 表达 大肠杆菌
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Limited genetic diversity among Plasmodium falciparium isolates using nested PCR in Jazan Area, Saudi Arabia
13
作者 Omima M.Eida Amany M.Eida 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2015年第5期407-411,共5页
Objective: To establish molecular characterization of Plasmodium falciparum field isolates in Jazan Area of Saudi Arabia measured with highly polymorphic genetic marker, i.e. the merozoite surface protein 2(MSP 2).Met... Objective: To establish molecular characterization of Plasmodium falciparum field isolates in Jazan Area of Saudi Arabia measured with highly polymorphic genetic marker, i.e. the merozoite surface protein 2(MSP 2).Methods: Blood samples were collected from 128 clinically suspected patients attending both Jazan and Sabia hospitals, Kingdom of Saudi Arabia. Both hospitals reflected urban and rural settings respectively. Analysis of central polymorphic region of MSP 2(3D7 and FC27 allelic families) was performed using nested PCR for malaria patients.Results: For MSP 2 allelic families of Plasmodium falciparum, 16 cases(53.3%) carried FC27 type and 14 cases(46.7%) carried 3D7 type, whereas no malaria cases harbored both allelic types. The present study showed that in urban area, 80% of FC27 fragments were 500 bp while in rural area it was 45.5%(P = 0.08). The FC27 400 bp allele was more prevalent in patients from rural than those from the urban area(P = 0.08). The most prevalent infecting 3D7 allele was the 3D7 300 bp in both areas. In the present study, there were no multiple infections.Conclusions: The limited genetic diversity which was observed in Jazan(considered as an endemic area) may be attributed to the small sample size or sustained malaria control program. 展开更多
关键词 PLASMODIUM FALCIPARUM PCR merozoite surface protein 2
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恶性疟原虫FCC-1/HN株裂殖子表面抗原2基因在M.smegmatis mc^2155中的表达 被引量:5
14
作者 郑春福 吴少庭 +3 位作者 陈雅棠 高世同 林敏 梁驹卿 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期531-534,共4页
目的 研究裂殖子表面抗原 2 (merozoitesurfaceantigen 2 ,MSA2 )基因重组BCG疫苗的保护作用。方法 采用电穿孔转化法将重组质粒pBCG/MSA2导入耻垢分枝杆菌 (M .smegmatis)mc2 1 55中 ,通过卡那霉素抗性筛选并经PCR鉴定的重组M .smegm... 目的 研究裂殖子表面抗原 2 (merozoitesurfaceantigen 2 ,MSA2 )基因重组BCG疫苗的保护作用。方法 采用电穿孔转化法将重组质粒pBCG/MSA2导入耻垢分枝杆菌 (M .smegmatis)mc2 1 55中 ,通过卡那霉素抗性筛选并经PCR鉴定的重组M .smegmatismc2 1 55培养于middlebrook 7H9broth (M7H9)培养基 ,并添加 1 0 %M7H9enrichmentADC和 0 .0 5%Tween80 ,4 8~ 72h后于 4 5℃进行 3 0min的诱导表达 ,表达产物进行十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)及Westernblot分析。结果 SDS PAGE及Westernblot分析结果均显示在相对分子质量 (Mr)约 3 1× 1 0 3的位置上可见明显的蛋白条带 ,并与MSA2基因编码序列推断的Mr 相符。结论 恶性疟原虫裂殖子表面抗原 2可在M .smegmatis中表达 。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 耻垢分枝杆菌 基因表达 裂殖子表面抗原2 穿梭质粒
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BCG/恶性疟MSP-2、CSP多价疫苗免疫小鼠应答类型研究 被引量:2
15
作者 张仁利 吴少庭 +4 位作者 高世同 林敏 郑春福 陈雅棠 李富荣 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期291-294,共4页
目的 探讨恶性疟原虫FCC 1/HN株裂殖子表面蛋白 2 (MSP 2 )和环子孢子蛋白 (CSP)与BCG多价疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答的特性及抗感染的保护性免疫机制。方法 将重组pBCG/MSP 2和pBCG/CSP多价疫苗经皮下注射BALB/c小鼠 ,小鼠经多... 目的 探讨恶性疟原虫FCC 1/HN株裂殖子表面蛋白 2 (MSP 2 )和环子孢子蛋白 (CSP)与BCG多价疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答的特性及抗感染的保护性免疫机制。方法 将重组pBCG/MSP 2和pBCG/CSP多价疫苗经皮下注射BALB/c小鼠 ,小鼠经多价疫苗免疫 8周后 ,用流式细胞仪分析脾脏T淋巴细胞的分化 ,并体外培养脾脏细胞 ,用夹心ELISA法测定IFN γ和IL 2的产生 ;用血清学方法测定免疫鼠IgG抗体的动态变化 ,在体外测定抗体介导的抑制实验。结果 与对照组相比 ,疫苗组CD4 + 和CD8+ T淋巴细胞有显著性的增高 ,体外培养的脾脏细胞IFN γ有高浓度的分泌。同时 ,免疫鼠血清对疟原虫抗原都表现了较高水平的IgG类抗体反应 ,抗体对原虫的增殖产生明显抑制。结论 恶性疟原虫FCC 1/HNpBCG/MSP 展开更多
关键词 恶生疟原虫 裂殖子表面蛋白-2 环子孢子蛋白 BCG多价疫苗 免疫应答 疟疾
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中缅边境恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1,2基因多态性研究 被引量:5
16
作者 张苍林 杨亚明 +3 位作者 叶润 聂仁华 刘慧 潘卫庆 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2015年第3期121-127,共7页
目的 对云南省及边境地区恶性疟原虫的裂殖子表面蛋白(merozoite surface protein,MSP)1,2基因进行分型研究,确定其等位基因的类型和分布特征,结合当地的恶性疟原虫株流行病学信息,为该地区疟疾的防治提供科学依据。 方法 从缅... 目的 对云南省及边境地区恶性疟原虫的裂殖子表面蛋白(merozoite surface protein,MSP)1,2基因进行分型研究,确定其等位基因的类型和分布特征,结合当地的恶性疟原虫株流行病学信息,为该地区疟疾的防治提供科学依据。 方法 从缅甸拉咱、那威和我国云南省西双版纳勐腊、德宏瑞丽、保山腾冲采集恶性疟患者血样。用巢式PCR(nest-PCR)扩增18S rRNA基因,确定感染疟原虫的种类。对检测为恶性疟原虫以及恶性疟原虫/间日疟原虫混合感染的样本,进行恶性疟原虫MSP-1、MSP-2基因的扩增并作测序、验证与序列分析。 结果 共采集89份恶性疟样本,经18S rRNA基因检测,确定间日疟9例,恶性疟78例和混合感染2例。在检测为恶性疟和混合感染的80份样本中,69例扩增出MSP-1基因片段,77例扩增出MSP-2基因片段。在MSP-1等位基因中,以MAD20型68.75%为主,RO33型23.75%和K1型20.00%次之。来源于勐腊的样本均未检出RO33型和K1型;MSP-2等位基因FC27型和3D7型的感染率均为91.25%,无明显的优势虫株;MSP-1和MSP-2基因多克隆样本所占百分比与多重性感染(multiplicity of infection,MOI)分别为22.50%、1.81和86.25%、3.51。MSP-1 和MSP-2等位基因目的片段多样性与其原虫密度之间存在相关性(Spearman’s r=0.496,P<0.05;Spearman’s r=0.240,P<0.05)。MSP-1和MSP-2等位基因测序结果表明,在FC27型基因序列3'端发现1个新的APK序列,在3D7基因型序列中检测到1个新的PAT重复序列和其它19个新的序列。 结论 云南省及边境地区恶性疟原虫分离株MSP-1等位基因存在MAD20型、K1型和RO33型3种类型,以MAD20型为优势虫株,勐腊样本未发现K1型和RO33型;MSP-2等位基因存在FC27型和3D7型2种类型,其优势均不明显。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖子表面蛋白1 裂殖子表面蛋白2 等位基因 序列分析
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武汉市输入性恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1、2基因分型研究 被引量:1
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作者 贾西帅 周水茂 +2 位作者 杨燕 徐明星 吴凯 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期434-438,444,共6页
目的了解武汉市输入性恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)裂殖子表面蛋白1(merozoite surface protein 1,MSP1)和MSP2的等位基因型特征。方法于2010-2015年采集武汉市从非洲疟疾流行区回国人员中恶性疟现症患者血样,收集患者流行病学资... 目的了解武汉市输入性恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)裂殖子表面蛋白1(merozoite surface protein 1,MSP1)和MSP2的等位基因型特征。方法于2010-2015年采集武汉市从非洲疟疾流行区回国人员中恶性疟现症患者血样,收集患者流行病学资料。提取患者血样中的恶性疟原虫DNA,采用巢式PCR分别扩增恶性疟原虫MSP1、MSP2基因型特异性片段,分析各等位基因型的构成比和不同感染来源地患者的基因型频数分布,分析重症患者不同基因型的相关性。不同基因型的重症患者比例差异采用χ~2检验。结果共采集输入性恶性疟患者血样175份,其中轻度症状患者血样137份,重症患者血样38份。巢式PCR结果显示,MSP1等位基因K1、RO33、MAD20型分别扩增出260~390、270和150 bp目的条带;MSP2等位基因3D7、FC27型分别扩增出200~330、330~500 bp目的条带。MSP1和MSP2基因均未检出的有9份。检出MSP1等位基因136份,检出率为77.7%,等位基因MAD20、K1、RO33、MAD20+K1、MAD20+RO33、K1+RO33、MAD20+K1+RO33型的构成比分别为5.1%(7/136)、37.5%(51/136)、20.6%(28/136)、5.9%(8/136)、4.4%(6/136)、16.9%(23/136)、9.5%(13/136)。检出MSP2等位基因143份,检出率为81.7%,FC27、3D7和FC27+3D7型的构成比为20.2%(29/143)、39.9%(57/143)、39.9%(57/143)。MAD20型和K1以南非最多,分别占10.5%(4/38)和34.2%(13/38);RO33型以东非最多,占2/7;FC27型东非和北非均未检出,南非占比最高,为18.4%(7/38);3D7型以东非最多,占4/7。MSP1基因MAD20、K1、RO33、MAD20+K1、MAD20+RO33、K1+RO33、MAD20+K1+RO33型的重症患者分别占1/7、19.6%(10/51)、32.1%(9/28)、1/8、4/6、13.0%(3/23)、46.2%(6/13),MAD20+RO33、MAD20+K1+RO33和RO33(P>0.05),与其他4种基因型间差异有统计学意义(P<0.05)。MSP2基因3D7、FC27、FC27+3D7型的重症患者比例分别为19.3%(11/57)、20.7%(6/29)、24.6%(14/57),各基因型间差异无统计学意义(P>0.05)。结论武汉市输入性恶性疟原虫MSP1存在MAD20、Kl和R033等3种单基因型以及4种多基因型,以K1型和R033型为优势基因型;MSP2存在FC27、3D7和FC27+3D7型,3D7型的比例大于FC27型。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖子表面蛋白1 裂殖子表面蛋白2 基因分型
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