Met-RANTES对内皮细胞与T细胞相互作用的影响

目的:探讨趋化因子拮抗剂Met-RANTES对内皮细胞与异体T细胞趋化、黏附作用的影响。方法:采用T细胞与血管内皮细胞混合培养的方法,观察使用趋化因子拮抗剂Met-RANTES干预前后内皮细胞趋化因子的表达,以及血管内皮细胞对T细胞趋化、黏附率的变化。结果:血管内皮细胞与T细胞混合培养可见内皮细胞表达RANTES、MCP-1及MIP-1α,RAN-TES的表达率增高。趋化因子拮抗剂Met-RANTES可以显著影响内皮细胞对T细胞的趋化和黏附。结论:趋化因子在淋巴细胞趋化及黏附内皮细胞的过程中发挥着重要作用,而趋化因子拮抗剂Met-RANTES可以显著影响内皮细胞与异体T细胞的趋化与黏附作用。

Met-RANTES干预实验性小鼠溃疡性结肠炎对MIP-3α及其受体CCR6的影响

目的:探讨MIP-3α及其受体CCR6在实验性小鼠溃疡性结肠炎(UC)发病中的作用,并分析Met-RANTES疗效机制.方法:用葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导建立结肠炎小鼠模型,观察Met-RANTES对小鼠结肠炎病活动指数(DAI)、大体形态评分(GMS)、结肠组织学病理评分(HPS)的影响;并通过RT-PCR检测其对小鼠结肠组织MIP-3α、CCR6mRNA的表达变化及Westernblot和免疫组织化学方法检测其小鼠结肠组织MIP-3α、CCR6的蛋白表达变化.结果:DAI、GMS和HPS在DSS模型组和生理盐水治疗组中高于空白对照组,MIP-3α和CCR6在小鼠溃疡性结肠炎中表达上调,在小鼠空白对照组中不表达或弱阳性表达,差异有统计学意义(P<0.01);与DSS模型组和生理盐水治疗组相比,Met-RANTES治疗组小鼠DAI、GMS和HPS降低,MIP-3α和CCR6表达下调(mRNA:0.21±0.08vs1.09±0.08,1.08±0.07;0.25±0.08vs1.11±0.07,1.05±0.08,P<0.01;蛋白:0.28±0.08vs0.98±0.07,1.05±0.06;0.25±0.07vs1.19±0.07,1.15±0.06,P<0.01);生理盐水治疗组小鼠DAI、GMS和HPS以及MIP-3α和CCR6表达与DSS模型组相比表达无明显差异(P>0.05).结论:MIP-3α与CCR6参与了小鼠UC的发生、发展;Met-RANTES能下调MIP-3α及CCR6的表达,并能减轻炎症损伤;针对MIP-3α或CCR6的靶向治疗可能是UC一种有效的治疗方法.

GPI锚固型Met-RANTES真核表达载体的构建和表达

目的:在仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中高效表达糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定修饰的Met-RANTES融合蛋白,以研制新型免疫抑制分子GPI锚固型Met-RANTES。方法:构建真核表达载体PEF/GPI-Met-RANTES,利用电转化法转染CHO-DHFR-细胞,氨甲喋呤(MTX)筛选抗性克隆。用流式细胞仪、细胞免疫荧光和免疫金标记电镜检测细胞膜上GPI锚固型Met-RANTES融合蛋白的表达情况。结果:构建了阅读框完整的GPI锚固型Met-RANTES嵌合分子,经测序是正确的,并在CHO-DHFR-细胞膜上稳定表达。结论:在CHO细胞表面高效表达GPI修饰的Met-RANTES融合蛋白,GPI锚固型Met-RANTES分子有可能作为新型的免疫抑制剂用于器官移植中,抑制移植排斥反应。

RANTES与Met-RANTES在器官移植中的研究进展

0 引言 自1954年第一例肾移植获得长期存活以来,器官移植已成为临床疾病治疗的重要手段,尽管HLA配型技术的应用和免疫抑制治疗取得了很大进展,但同种异体排斥反应的发生仍然是影响移植物功能和存活的最大障碍,RANTES作为一个促炎细胞因子,是形成浸润细胞募集和活化的原因,也是引起同种异体排斥反应发生的诱因之一,Met-RANTES是一个新发现的趋化性细胞因子受体拮抗剂,具有抗排斥反应的作用,因此逐渐受到人们的关注。

大鼠小肠移植早期应用趋化因子受体拮抗剂抑制移植物急性排斥反应

目的探讨趋化因子受体拮抗剂(MetRANTES)在小肠移植早期应用对排斥反应的免疫抑制作用及其与他克莫司的协同效应。方法SD大鼠为供者,Wistar大鼠为受者,建立异基因节段性异位小肠移植模型。移植后将大鼠分为4组,每组24只。第1组为对照组,移植前后不作任何处理;第2组为MetRANTES组,小肠移植后(0～7d)腹腔注射MetRANTES200μg/d;第3组为小剂量他克莫司(FK506)组,小肠移植后(0～7d)腹腔注射FK5060.5mg·kg-1·d-1;第4组为MetRANTES联合FK506组,2种药物的应用方法与第2、3组相同。观察移植大鼠的一般状况和存活时间以及免疫细胞浸润情况,并于移植术后3、5、7d分别取各组大鼠移植肠标本(n=6)进行组织病理学检查,采用免疫荧光染色和激光扫描共聚焦显微镜技术对移植肠RANTES和CD4+、CD8+、CD25+T淋巴细胞的表达进行连续定量测定。结果第1～4组大鼠平均存活时间分别为(7.37±1.19)d、(22.32±8.60)d、(23.64±6.58)d和(30.55±4.18)d,第2、3、4组大鼠与第1组相比,存活时间明显延长(P<0.01);第4组大鼠存活时间更长,与第2、3组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。第1组全部死于急性排斥反应及感染,组织病理学检查显示移植后第3、5、7d分别符合轻、中、重度排斥反应。第2、3、4组病理学检查无明显排斥反应征象。第1组大鼠的移植肠RANTES表达在术后各时段均显著高于其他3组(P<0.01),其动态变化与急性排斥反应的进程呈正相关;第2组和第4组大鼠移植肠RANTES、CD4+、CD8+和CD25+T细胞的表达均明显低于第1组(P<0.01)。结论MetRANTES能明显抑制小肠移植急性排斥反应,有效保护移植肠功能,显著延长移植物的存活时间,并可增强小剂量他克莫司的免疫抑制作用。