亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态与结直肠癌遗传易感性的相关性

目的:探讨亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)C677T多态与结直肠癌(CRC)遗传易感性的关系.方法:采用TaqMan方法检测CRC 449例与对照672例的MTHFR C677T的基因型分布及差异.以非条件Logistic回归法计算表示相对危险度的比值比(OR)及其95%可信区间(CI).OR值均经性别、年龄、吸烟、饮酒、体质量指数和一级亲属CRC家族史等因素校正.结果:CRC组677T等位基因频率显著低于对照组,其为CRC发生的保护因素(OR:0.70,95%CI:0.58-0.83,P<0.01).与CC纯合子相比,CT杂合子的CRC风险显著降低至0.73倍(95%CI:0.56-0.95,P<0.05),而TT纯合子的CRC风险进一步降至0.47倍(95%CI:0.33-0.68,P<0.01).在非饮酒人群中,C677T的CRC风险保护效应略有增强;而在饮酒人群中,CT和TT基因型携带者的CRC发病风险虽仍低于CC基因型携带者,但差异无统计学意义.在CRC人群中,荷大肿瘤(最大直径>4cm)者携带TT基因型的比例高于荷小肿瘤者(16.3% vs 8.3%,P<0.05);荷黏液腺癌者携带TT基因型的比例高于荷乳头状腺癌及管状腺癌者(22.2% vs 17.1%,10.3%,P=0.084).结论:MTHFR C677T降低CRC发病风险,饮酒可能削弱该多态的CRC风险保护效应.TT基因型可能与CRC肿瘤进展有关.

MTHFR C677T基因多态性与孤独症谱系障碍遗传易感性的Meta分析

目的采用Meta分析评价亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T基因多态性与儿童孤独症(ASD)遗传易感性之间的关系,为儿童ASD的遗传背景和防治策略提供循证医学证据。方法计算机检索Pub Med、Cochrane Library、CNKI、万方和中国生物医学数据库,搜集MTHFR C677T基因多态性与ASD谱系障碍遗传易感性的相关文献,以病例组和对照组MTHFR C677T基因型分布的OR值及其95%CI为效应指标。采用Stata12.0软件进行Meta分析,包括异质性检验、合并效应量、异质性挖掘以及发表偏倚评价。结果共有14篇文献纳入分析,Meta分析显示,MTHFR C677T基因多态性与ASD易感性在T等位基因、CTvsCC、TTvsCC、TT+CTvsCC和TT+CTvsCC模型中均存在统计学差异。亚组分析显示,TvsC、TTvsCC和TTvsCT+CC模型在非强制性补充叶酸国家中存在统计学差异;仅TTvsCC和CTvsCC模型在白种人群中存在统计学差异。累积Meta分析结果显示OR估计值及可信区间趋于稳定且有较好变化趋势。纳入研究结果稳定性较好,无发表偏倚。结论 MTHFR C677T基因多态性与ASD易感性之间存在明显关联,且T等位基因可能增加患ASD的风险。

亚甲基四氢叶酸还原酶A1298C基因多态性与肝细胞性肝癌遗传易感性的Meta分析

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahy drofolate reductase,MTHFR)A1298C基因多态性与肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)遗传易感性的关系。方法计算机检索PubMed、EMbase和中国学术期刊全文数据库等,收集有关MTHFR基因多态性与HCC遗传易感性的病例-对照研究资料,按照纳入标准选择文献,提取相关数据进行Meta分析。以病例组和对照组基因型分布的比值比(OR)为效应指标,对纳入文献进行异质性检验,应用Stata12.0软件对各研究原始数据进行Meta合并,计算合并效应量OR值及95%可信区间(95%CI)。结果共纳入6项病例-对照研究,病例组为1708例,对照组为2911名。等位基因比较模型(CvsA):OR(95%CI)=0.95(0.85～1.06),P=0.342;纯合子比较模型(CCvsAA):OR(95%CI)=0.55(0.38～0.79),P=0.001;隐性模型(CCvsAC/AA):OR(95%CI)=0.54(0.38～0.78),P=0.001。结论 MTHFRA1298C基因多态位点CC基因型能够降低HCC遗传易感性,为保护基因型。

MTHFR基因C677T位点多态性与风湿性疾病的相关性

目的:检测多种风湿性疾病患者亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T位点多态性,探讨其与血浆同型半胱氨酸(Hcy)、叶酸、V itB12及其疾病的关系。方法:测定54例系统性红斑狼疮(SLE)、48例类风湿关节炎(RA)、60例强直性脊柱炎(AS)、30例未分化脊柱关节病(uSpA)患者和62例正常对照者的Hcy、V itB12、叶酸的水平,采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术检测MTHFR基因677位的多态性。结果:(1)各疾病组CC基因型频率显著低于正常对照组,总的突变T等位基因频率显著高于对照组。(2)MTHFR基因677位C→T的突变使Hcy水平升高[CC型,(13.41±5.78)μmol.L-1;CT型,(16.81±4.22)μmol.L-1;TT型(20.88±6.60)μmol.L-1,P<0.001]。(3)TT基因型是高Hcy血症的易感基因,OR=84.46,P<0.05;同时还是SLE的易感基因,OR=7.56,P<0.05。结论:(1)SLE、RA、AS、uSpA 4种疾病患者普遍存在MTHFR基因C677T位突变和高Hcy血症。(2)TT型基因不仅是Hcy异常升高的易感基因,也是SLE的易感基因。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性的检测方法评价及人群调查

目的对实时荧光定量PCR方法（FQ—PCR）检测亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）进行方法学评价，同时进行大规模的人群MTHFRC677T基因多态性调查。方法RT—PCR方法检测结果与测序法比较来验证准确性。将同一份标本分20天检测20次，以cp值的变异来检测该方法的精密度。用FQ—PCR方法与聚合酶链反应一限制性酶片段长度多态性（PCR—RFLP）方法同时检测50例患者的MTHFRC677T基因型进行方法学比对。验证FQ—PCR方法的线性范围。以FQ—PCR方法对人群MTHFRC677T基因多态性进行大规模调查。结果FQ—PCR方法与测序法100％符合。批内、批间精密度的变异系数分别为1．38％、1．48％。FQ—PCR在6．2×10^2-6．2×10^4pg／la,1浓度范围内具有良好的线性。两种方法的比对结果没有统计学差异。人群调查发现MTHFRC677T基因型CC、C／T、TT频率在男女性别中分别为41．8％、30．9％、27．3％和38．3％、32．2％、29．5％，等位基因的频率分别为57．2％、42．8％和54．4％，45．6％。性别之间基因型频率和等位基因频率没有统计学差异。结论FQ—PCR方法可以替代测序法和PCR—RFLP方法，是一种快速、便捷、准确、稳定的检测MTHFR基因多态性的方法，适用于大规模的检测。

MTHFR基因(C677T)多态性与NTDs关系Meta分析

目的运用Meta分析方法综合评价亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性与神经管畸形的关系。方法检索PubMed、CNKI等多个中英文数据库的相关文献,收集所有关于MTHFR基因C677T多态性与神经管畸形关系的病例对照研究,提取所需数据应用SPSS 13.0和RevMan 5.0软件进行Meta分析。结果共有27篇符合条件的文献纳入分析,包括2 245例病例人群和3 678名对照人群;Meta分析表明,母亲携带CT基因型者子代发生神经管畸形(NTDs)的风险为母亲携带CC基因型者子代的1.41倍(OR=1.41,95%CI=1.16～1.71),其中国内母亲携带CT基因型者子代发生NTDs的风险为母亲携带CC基因型者子代的2.06倍(OR=2.06,95%CI=1.44～2.95);母亲携带TT基因型者子代发生NTDs的风险为母亲携带CC基因型者子代的1.97倍(OR=1.97,95%CI=1.49～2.61),其中国内和国外母亲携带TT基因型者子代发生NTDs的风险分别为母亲携带CC基因型者子代的3.12倍(OR=3.12,95%CI=1.50～6.51)和1.61倍(OR=1.61,95%CI=1.30～1.98)。结论 MTHFR C677T位点基因多态性与神经管畸形的易感性密切相关,但其病因关联性仍有待于在人群中进行大规模队列研究加以论证。

MTHFR基因C677T多态性与亚洲人群偏头痛易感性的meta分析

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性与亚洲人群偏头痛(包括先兆偏头痛和无先兆偏头痛)易感性之间的关系。方法全面检索PubMed、Embase、中国知网(CNKI)、万方、维普等数据库筛选关于C677T多态性与偏头痛易感性相关的病例-对照研究。采用Stata14.0软件进行meta分析,并进行偏头痛类型亚组分析。结果最终纳入文献11篇,包含试验组1341例和对照组1563例。meta分析结果显示,C677T各基因型与亚洲人群偏头痛易感性之间存在明显相关性(T vs.C,OR=1.67,95%CI:1.19~2.35,P<0.01;TT vs.CC,OR=2.31,95%CI:1.33~4.02,P<0.01;CT vs.CC,OR=1.56,95%CI:1.06~2.31,P=0.02;CT+TT vs.CC,OR=1.77,95%CI:1.16~2.72,P<0.01;TT vs.CT+CC,OR=1.92,95%CI:1.16~3.19,P<0.01),各基因型与先兆偏头痛易感性有关,与无先兆偏头痛的发病风险不存在关联。结论在亚洲人群中,MFTHR基因C667T多态性可能是偏头痛总体人群及先兆偏头痛人群发病的风险因素。

血清同型半胱氨酸及亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与2型糖尿病合并脑梗死的相关性研究

目的探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)水平与亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性对T2DM患者发生脑梗死的影响。方法对81例T2DM合并脑梗死(T2DM+脑梗死)组及325例单纯T2DM(T2DM)组血清Hcy、叶酸水平及MTHFR基因多态性等项目行统计学分析。结果 T2DM+脑梗死组与T2DM组MTHFR基因第677位T等位基因率及TT突变基因率分别为64.15%、60.15%和42.5%、34.5%(P>0.05)。TT型Hcy水平为(14.4±7.86)mmol/L,而CC型血清Hcy水平为(10.58±3.37)mmol/L,两基因型比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MTHFR基因多态性与T2DM患者发生脑梗死无相关性;MTHFR基因C677T突变基因型与高Hcy血症相关。

MTHFR 677C／T基因检测室问调查品制备及其应用研究

目的通过构建体外质粒DNA作为质控样本开展MTHFR677基因检测室间质量评价计划（简称室间质评），评估参评实验室检测能力及存在的问题，提高临床实验室MTHFR基因检测质量。方法利用基因工程技术体外构建含有MTHFR677位点野生型？上下游序列的重组质粒，并采用定点突变技术得到该位点的突变型（T），分别作为野生型和突变型样本，两者等比例混合后作为杂合突变型样本，并制备质控样本盘开展室间质量评价。2016年和2017年室间质评计划为一年两次，样本盘包含5支样本，覆盖MTHFR 677位点各种基因型别。要求参评实验室收到样本后在规定时间内检测样本并网上上报位点基因型检测结果。4次室间质评分别收到26份、28份、52份和56份有效汇报结果。依据回报结果计算各实验室成绩，使用Microsoft Excel软件进行统计分析，汇总各样本的总体符合率，并分析不同检测方法的符合率和检测错误类型。结果体外构建的重组质粒经Sanger测序验证分别含有MTHFR 677位点野生型？和突变型（T）序列，作为质控品在4次室间质评中并无出现检测失败的样本。2016年和2017年4次室间质评中成绩满分的实验室分别为96.15%（25/26），100%（28/28），96.15%（50/52）和98.21%（55/56）。4次室间质评中，样本检测的总体符合率分别为99.23%（129/130），100%（140/140），96.92%（252/260）和98.93%（277/280）。荧光分子杂交和芯片杂交法检测的样本符合率均为100%；荧光PCR法检测的样本符合率为97.5%（39/40），100%（45/45），94.29%（66/70）和100%（95/95）；Sanger测序法样本符合率为100%（20/20），100%（15/15），90%（36/40）和92.5%（37/40）。结论本研究所制备的质控样本能够有效监测试剂检测性能，具有良好的适用性。各实验室在MTHFR 677基因位点检测总体准确率很高，但个别实验室检测能力有待提高。临床实验室的质量控制对于保证检测结果准确性具有十分重要的作用。