lncRNA HOTAIR靶向miR-122促进口腔鳞癌细胞的增殖及迁移

目的 探究长链RNA(lncRNA)同源盒基因转录反义(HOTAIR)对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移的影响及潜在的分子机制。方法 人舌癌细胞(CAL27)分为正常对照组、NC组(转染pcDNA空白质粒)、HOTAIR组(转染pcDNA-HOTAIR质粒)及HOTAIR+miR-122组(转染pcDNA-HOTAIR质粒+miR-122 mimic)。采用RT-PCR法检测细胞中HOTAIR和miR-122表达水平,采用CCK-8法检测细胞活力,通过划痕实验检测细胞迁移水平,采用双荧光素酶报告基因实验检测HOTAIR对miR-122基因表达的调控作用。结果 CAL27细胞转染pcDNA-HOTAIR质粒后,miR-122水平降低(P <0.05)。与NC组比较,HOTAIR组细胞活力及细胞划痕愈合率显著提高(P<0.05)。与HOTAIR组相比,HOTAIR+miR-122组细胞活力和细胞划痕愈合率明显降低(P <0.05)。双荧光素酶报告基因结果表明HOTAIR能够抑制miR-122基因表达。结论 过表达HOTAIR能够促进CAL27细胞增殖和迁移,其机制可能与HOTAIR靶向抑制miR-122基因表达有关。

miR-122在肝病中的研究进展

肝脏有着独特的再生功能,同时,肝脏在人体很多重要的需要相互协调、相互制约的生物学过程中都扮演着举足轻重的角色。越来越多的证据表明,miRNA参与调节肝脏的生长、再生和代谢。因此,肝内的miRNA网络的改变与包括肝炎、肝硬化、脂肪肝、肝癌等诸多肝脏疾病有关。其中,miR-122是肝脏miRNA中含量最丰富也是肝脏生物学和疾病的最关键因子。目前,miR-122已经被证实是丙型肝炎关键宿主因子和药物靶标。这对使用直接靶向药物治疗和干扰素治疗是个有力的补充。文章综述总结了目前所了解到的miR-122在肝脏生理学和疾病中所扮演的角色,其在丙肝和乙肝中的作用以及基于miRNA的治疗肝脏疾病的方法。

miR-122-5p靶向调控人骨髓间充质干细胞诱导成骨分化的分子机制研究

目的:研究miR-122-5p对人骨髓间充质干细胞hBMSCs细胞成骨分化诱导的作用分子机制。方法:运用茜素红S、碱性磷酸酶活性ALP染色试剂盒检测hBMSCs成骨分化的钙结节与成骨活性;使用双荧光素酶报告基因实验验证miR-122-5p与BRCC3之间的靶向关系;运用qRT-PCR分别检测Runx2、Osterix、wnt3a、β-catenin、GSK3-β、miR-122-5以及BRCC3基因的表达情况;Western印迹检测β-catenin蛋白的表达量。结果:过表达miR-122-5p对人骨髓间充质干细胞hBMSCs细胞成骨分化诱导21天后的钙结节与干细胞成骨活性均有明显促进作用,对成骨分化中wnt/β-catenin信号通路主要转录因子Runx2、Os‐terix及wnt3a、β-catenin、GSK3-β主要基因均激活作用,过表达BRCC3对干细胞成骨分化中wnt/β-catenin信号通路主要转录因子Runx2、Osterix及wnt3a、β-catenin、GSK3-β主要基因有抑制作用;并且通过双荧光素酶报告基因与回复性实验确定miR122-5p与BRCC3之间的靶向关系,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-122-5p靶向抑制BRCC3的表达诱导hBMSCs细胞通过wnt/β-catenin通路进行成骨分化诱导。

彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的诊断价值

目的 探讨彩色多普勒超声检查联合血清微小RNA(miRNA)-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的早期诊断价值以及与卵巢癌周围血管侵袭的相关性。方法 回顾性选取2019年5月至2021年12月沧州市中心医院收治的102例卵巢肿瘤患者为研究对象,所有患者均行彩色多普勒超声检查,采用实时定量聚合酶链反应测定血清中miR-122-5p和miR-106b的表达水平。以病理诊断结果作为金标准,将研究对象分为卵巢癌组(n=51)和良性卵巢肿瘤组(n=51);卵巢癌组又分为侵袭组(n=32)和非侵袭组(n=19)。比较卵巢癌组与良性卵巢肿瘤组的临床资料(年龄、体重指数、生育和绝经)、彩色多普勒超声图像特征(实性包块、伴腹水、乳头状结构≥4、肿瘤最大直径>10 cm)、彩色多普勒超声血流参数[搏动指数(PI)和血流阻力指数(RI)]、血清miR-122-5p、miR-106b水平。应用多因素Logistic回归模型探究相关变量对卵巢癌的独立预测作用。应用受试者工作特征(ROC)曲线评估彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的诊断价值。并比较侵袭组与非侵袭组彩色多普勒超声血流参数及血清miR-122-5p、miR-106b水平,采用Pearson相关性分析对彩色多普勒超声血流参数、miR-122-5p、miR-106b与卵巢癌周围血管侵袭的相关性进行分析。结果 卵巢癌组实性包块、伴腹水、乳头状结构≥4以及肿瘤最大直径>10 cm所占比例分别为80.39%、76.47%、74.51%、78.43%,均高于良性卵巢肿瘤组(9.80%、11.76%、29.41%、45.10%),PI、RI、血清miR-122-5p表达水平分别为0.94±0.27、0.48±0.11、1.01±0.27,均低于良性卵巢肿瘤组(1.47±0.32、0.71±0.19、1.42±0.30),miR-106b表达水平为4.57±1.13,高于良性卵巢肿瘤组(2.86±0.65),差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归模型分析显示,PI、RI、miR-122-5p、miR-106b是卵巢癌的独立预测因子,OR值分别为1.080、1.116、1.689、1.301(P<0.05)。ROC曲线分析显示,PI、RI、miR-122-5p和miR-106b以及联合诊断卵巢癌的曲线下面积(AUC)分别为0.869、0.874、0.859、0.898、0.969,其联合诊断的价值高于单独应用。侵袭组PI、RI和血清miR-122-5p表达水平均低于非侵袭组,血清miR-106b表达水平高于非侵袭组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,彩色多普勒超声血流参数PI、RI及血清miR-122-5p水平与卵巢癌周围血管侵袭呈负相关(r=-0.743、-0.696、-0.822,P<0.05),血清miR-106b水平与卵巢癌周围血管侵袭呈正相关(r=0.863,P<0.05)。结论 彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平可以提高卵巢癌的早期诊断价值,并且可根据这些指标评估卵巢癌周围血管侵袭程度,值得应用推广。

lncRNA SNHG7通过miR-122-5p/CCND1轴调节胃癌细胞的增殖、凋亡及肿瘤免疫逃逸

目的探讨长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因(lncRNA SNHG)7通过miR-122-5p/细胞周期蛋白(CCN)D1轴对胃癌细胞的增殖、凋亡及肿瘤免疫逃逸的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测体外培养的人胃癌细胞株NCI-N87、SNU-1、MKN-45和人胃癌组织源细胞、人胃黏膜上皮细胞中lncRNA SNHG7、miR-122-5p与CCND1表达。体外培养的人胃癌细胞MKN-45,随机分为对照组、lncRNA SNHG7 siRNA(si-lncRNA SNHG7)组、lncRNA SNHG7 siRNA阴性对照(si-NC)组、lncRNA SNHG7 siRNA(si-lncRNA SNHG7)+miR-122-5p inhibitor组,分组转染后,检测各组MKN-45细胞增殖、凋亡、活化CD8+T细胞杀伤率、miR-122-5p及CCND1、细胞增殖核抗原(PCNA)、凋亡蛋白〔B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3〕表达,并检测lncRNA SNHG7对MKN-45细胞miR-122-5p的靶向调节作用。结果与胃黏膜上皮细胞相比,胃癌组织源和MKN-45、SNU-1、NCI-N87细胞lncRNA SNHG7、CCND1 mRNA表达明显升高,miR-122-5p表达明显降低(P<0.05)。与对照组相比,si-lncRNA SNHG7组细胞活力、EdU阳性率、细胞CCND1、PCNA蛋白表达明显降低,凋亡率、活化CD8+T细胞对各组MKN-45细胞的杀伤率、miR-122-5p及Bax、caspase-3蛋白表达明显升高(均P<0.05);si-NC组细胞各指标均无显著差异(P>0.05);lncRNA SNHG7 siRNA和miR-122-5p inhibitor联合可逆转lncRNA SNHG7 siRNA对细胞各指标的作用。lncRNA SNHG7可靶向下调MKN-45细胞miR-122-5p表达。结论下调lncRNA SNHG7可通过上调miR-122-5p而降低CCND1表达,进而抑制胃癌细胞增殖,促进其凋亡,并减轻其免疫逃逸。

miR-122在PM_(2.5)诱导的肺损伤中的作用机制

目的探索PM_(2.5)引起的肺损伤的分子机制,以期为肺损伤的诊疗提供新的靶点。方法对PM_(2.5)诱导下肺损伤的多组学数据进行差异基因筛选及分子功能分析,确定肺损伤相关的分子靶标,构建PM_(2.5)诱导的SD大鼠肺损伤模型并进行初步验证。结果HE染色结果显示,暴露组的大鼠肺泡间隔增宽,肺泡腔增大,部分肺泡断裂、融合;Masson染色结果发现暴露组大鼠肺部呈现出少量纤维化。本次实验结果发现,在PM_(2.5)诱导条件下,miR-122表达显著上调,其靶基因胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1,IGF1R)表达显著下调。结论PM_(2.5)会导致大鼠的肺损伤,推测miR-122通过调控其靶基因IGF1R进而影响PI3K-AKT信号通路并引起细胞凋亡,加剧肺损伤。

UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究

目的探讨尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)/miR-122-5p/pcDNA-胞质多聚腺苷酸元件结合蛋白1(CPEB1)轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究。方法通过实时荧光反转录定量PCR(RT-qPCR)检测UCA1相关miRNA分子,并通过细胞转染获得miR-122-5p和CPEB1相关细胞株。通过双荧光素酶报告实验分别验证UCA1与miR-122-5p、CPEB1与miR-122-5p的结合。药物敏感性实验获得顺铂药物半抑制浓度(IC50);通过肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析CPEB1在肺腺癌中的表达情况以及与免疫细胞功能的关系。结果miR-122-5p在肺腺癌细胞中的表达水平明显升高,并通过双荧光素酶报告实验以验证UCA1与miR-122-5p结合,构建miR-122-5p抑制物和模拟物转染肺腺癌细胞株,发现miR-122-5p抑制后,顺铂IC50浓度下降,而miR-122-5p过表达后,顺铂IC50浓度升高。CPEB1在肺腺癌细胞中的表达水平明显降低,双荧光素酶报告实验证实CPEB1是与miR-122-5p结合,CPEB1过表达后,顺铂IC50浓度减低;对TCGA数据库分析显示肺腺癌组织CPEB1 mRNA明显低于癌旁组织,ROC曲线分析显示CPEB1表达水平能较好地用于诊断肺腺癌(AUC=0.849),进一步分析显示CPEB1表达水平与肺腺癌患者的细胞功能如T细胞、B细胞、CD8+T细胞、自然杀伤细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞、肥大细胞存在密切关联。结论UCA1与miR-122-5p存在结合位点,后者可影响肺腺癌的顺铂耐药,并与靶基因CPEB1结合;肺腺癌中CPEB1呈低表达,降低肺腺癌顺铂药物的敏感性。UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴有望为干预肺腺癌顺铂耐药的靶点。

miR-122在脏器缺血再灌注损伤中作用机制的研究进展

心、脑、肝、肾等脏器缺血再灌注损伤(IRI)是常见的临床现象,IRI易导致脏器功能障碍,甚至导致患者死亡。miR-122是最早发现的miRNA之一,是非编码RNA,参与调控蛋白质编码基因的表达,广泛参与了多个脏器的IRI,在机体各器官IRI的发生、发展及预后中均发挥着重要作用。本文就miR-122在脏器IRI中的作用及其机制作一综述。

体外药物性肝损伤模型中miR-122的作用及相关研究

目的研究体外药物性肝损伤肝细胞模型miR-122干预后肝损伤指标、肝细胞增殖以及IL-6水平的变化,探索miR-122在药物性肝损伤肝细胞的可能作用及机制。方法将肝细胞分为Ctrl组、APAP组、APAP+mimic-NC组、APAP+miR-122 mimic组、APAP+inhibitor-NC组、APAP+miR-122 inhibitor组6组,分别取各组细胞上清液,通过PCR法、免疫组化法等分别检测miR-122、AST、ALT、IL-6表达水平及细胞增殖水平。结果(1)miR-122水平比较:APAP+miR-122 mimic组miR-122表达水平最高,APAP+miR-122 inhibitor组miR-122表达水平最低,提示细胞转染成功,APAP组miR-122表达水平与APAP+mimic-NC组、APAP+inhibitor-NC组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)细胞增殖水平比较:Ctrl组细胞增殖水平最高,APAP+miR-122 inhibitor组细胞增殖水平最低,APAP组与APAP+mimic-NC组、APAP+inhibitor-NC组细胞增殖水平差异无统计学意义(P>0.05),与APAP+miR-122 mimic组细胞增殖水平差异有统计学意义(P<0.05)。(3)肝损伤指标比较:Ctrl组AST、ALT水平最低;APAP+miR-122 inhibitor组AST、ALT水平最高;APAP组与Ctrl组、APAP+miR-122 mimic组、APAP+miR-122 inhibitor组AST、ALT水平之间差异有统计学意义(P<0.05);与APAP+mimic-NC组、APAP+inhibitor-NC组AST、ALT水平之间差异无统计学意义(P>0.05)。(4)IL-6表达水平比较IHC结果显示:Ctrl组IL-6表达水平最低,APAP+miR-122 inhibitor组IL-6表达水平最高;APAP组与APAP+miR-122 mimic组、APAP+miR-122 inhibitor组之间IL-6表达水平差异有统计学意义(P<0.05),与APAP+mimic-NC组、APAP+inhibitor-NC组之间IL-6表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-122可能通过调控IL-6实现对DILI肝细胞的保护作用。

胎盘源性外泌体miR-122-5p改善妊娠糖尿病脐静脉内皮细胞功能损伤的机制研究

目的探讨胎盘源性外泌体(Exo)miR-122-5p改善妊娠糖尿病(GDM)小鼠脐静脉内皮细胞(MUVECs)功能损伤的机制。方法取妊娠小鼠腹腔注射0.25%链脲佐菌素溶液以诱导GDM模型(GDM组),对照组小鼠腹腔注射等体积0.9%氯化钠溶液,检测两组FPG和胰岛素水平验证模型。采用HE染色观察小鼠胎盘组织形态,qRT-PCR法检测miR-122-5p表达情况,Western blot法检测核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)炎症小体相关蛋白[包括NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白、半胱氨酸蛋白酶-1]表达。采用差速离心法获得胎盘源性Exo,并采用透射电子显微镜和纳米颗粒追踪分子对Exo表征进行鉴定;与MUVECs共培养后,采用免疫荧光法观察MUVECs对Exo的摄取。采用噻唑蓝法、流式细胞术、Transwell实验和血管形成实验检测MUVECs细胞活性、凋亡能力、迁移能力和成管能力。结果GDM组小鼠FPG水平明显高于对照组(P<0.001),胰岛素水平低于对照组(P<0.001),提示模型构建成功。与对照组相比,GDM组小鼠胎盘组织出现明显损伤,miR-122-5p表达水平降低,NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平均明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。MUVECs能对胎盘源性Exo进行摄取,且GDM小鼠胎盘Exo上调了MUVECs中miR-122-5p表达水平(P<0.001)。GDM小鼠胎盘Exo共培养的MUVECs较对照小鼠胎盘Exo共培养的MUVECs细胞活性增强,凋亡能力减弱,迁移能力和成管能力均增强,且NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平均明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。过表达miR-122-5p的MUVECs细胞活性增强,凋亡能力减弱,迁移能力和成管能力均增强,NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);抑制miR-122-5p表达后,MUVECs细胞活性减弱,凋亡能力增强,迁移能力和成管能力均减弱,NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平均明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论胎盘源性Exo的miR-122-5p对GDM MUVECs起到保护作用,且可能通过调控NLRP3炎症小体的活化来改善MUVECs的损伤。

乙型肝炎肝硬化患者血清miR-122水平与肝纤维化程度的关系

目的探讨乙型肝炎肝硬化患者血清miR-122水平与肝纤维化程度的关系。方法纳入2022年5月至2023年12月南京市高淳人民医院收治的乙型肝炎肝硬化患者98例,同时纳入健康者40名。检测所有研究对象血清中miR-122表达水平及肝脏生化指标。HBV-LC组中S0、S1、S2、S3、S4的患者分别为19、22、23、18、16例。比较不同分期患者的miR-122及肝脏生化指标水平差异,并比较血清miR-122水平与纤维化标志物间的相关性。logistic多元回归模型分析HBV-LC组患者肝纤维化的危险因素。结果HBV-LC组天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBil)、甲胎蛋白(AFP)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)水平及miR-122表达水平分别为(59.80±13.60)U/L、(67.89±14.94)U/L、(19.07±4.20)μmol/L、(13.06±3.88)ng/mL、(76.46±20.31)U/L、(4.03±1.38),均高于对照组的(23.23±5.17)U/L、(21.22±4.98)U/L、(11.33±3.05)μmol/L、(3.54±1.12)ng/mL、(29.81±7.28)U/L、(1.25±0.37),差异均有统计学意义(P<0.05)。随着肝纤维化分期的增加,HBV-LC组患者ALT、AST、TBil、AFP、GGT水平升高,miR-122表达水平降低(P<0.05)。HBV-LC组患者血清miR-122表达水平与AFP、AST、ALT、GGT、纤维化-4指数(FIB-4)、天冬氨酸氨基转移酶与血小板比值指数(APRI)、TBil和Forns指数均呈负相关(P<0.05)。logistic多元回归分析提示酗酒和血清miR-122表达水平较低是乙型肝炎肝硬化患者肝纤维化发生的危险因素(P<0.05)。miR-122表达水平诊断肝纤维化(S1~S4)的曲线下面积为0.939,灵敏度为94.7%,特异度为91.1%,显示出很高的诊断效能。结论乙型肝炎肝硬化患者血清miR-122水平随肝纤维化程度加重而降低,并与肝脏生化指标及纤维化标志物呈现出显著的相关性。酗酒以及低水平的血清miR-122表达是肝纤维化发展的危险因素。

血清HBV-DNA载量与老年慢性乙肝患者肝功能指标及血清miR-21、miR-122水平的关联性研究

目的:探究血清乙型肝炎病毒脱氧核糖酸(HBV-DNA)载量与老年慢性乙肝(CHB)患者肝功能指标及血清miR-21、miR-122的关联性。方法:选取某院2021年1月—2023年6月收治的120例老年CHB患者为研究对象,将其按照HBV-DNA载量分为低载量组(<105 copies/mL)(n=48)、中载量组(105~107 copies/mL)(n=42)及高载量组(>107 copies/mL)(n=30)。比较3组一般资料、血清肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)]及血清miR-21、miR-122水平。采用Pearson相关分析法分析老年CHB患者血清HBV-DNA载量与肝功能指标及血清miR-21、miR-122水平的相关性。结果:3组间性别、年龄、BMI、病程、吸烟史、饮酒史、高血压病史、糖尿病病史、冠心病病史等一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3组间血清ALT、AST、GGT、ALP及miR-21水平呈现低载量组﹤中载量组﹤高载量组,血清miR-122水平呈现低载量组>中载量组>高载量组,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关分析显示,老年CHB患者血清HBV-DNA载量与血清ALT、AST、GGT、ALP及miR-21水平呈正相关,与血清miR-122水平呈负相关(P均<0.001)。结论:血清HBV-DNA载量与老年CHB患者血清ALT、AST、GGT、ALP及miR-21水平均呈正相关,与血清miR-122水平呈负相关,检测血清miR-21、miR-122水平可为老年CHB的诊断及病情评估提供参考依据。

不同中医证型胃癌患者外周血miR-21、miR-122水平变化及临床意义

目的:观察探讨不同中医证型胃癌(GC)患者外周血miR-21、miR-122水平变化及临床意义。方法:选取2022年1月~2023年1月我院收治的100例GC患者为研究对象,根据其临床表现和体征进行中医证型分型,比较不同中医证型GC患者外周血miR-21、miR-122水平、毒副反应发生率及化疗半年后的存活情况。结果:100例GC患者中47例为脾胃湿热证,17例为脾胃虚寒证,15例为肝胃不和证,13例为瘀血内阻证,8例为痰浊凝滞证。不同中医证型GC患者外周血miR-21水平为脾胃湿热证>脾胃虚寒证>肝胃不和证>瘀血内阻证>痰浊凝滞证,miR-122水平为脾胃湿热证<脾胃虚寒证<肝胃不和证<瘀血内阻证<痰浊凝滞证,且两组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。脾胃湿热证患者胃肠道反应和骨髓抑制发生率明显高于痰浊凝滞证和瘀血内阻证(P<0.05),神经系统反应及肾损害发生率明显高于瘀血内阻证(P<0.05);脾胃虚寒证患者骨髓抑制发生率明显高于痰浊凝滞证和瘀血内阻证(P<0.05),神经系统反应发生率明显高于瘀血内阻证(P<0.05);肝胃不和证患者神经系统反应发生率明显高于瘀血内阻证(P<0.05)。不同中医证型GC患者化疗后随访6个月的生存率为脾胃湿热证<脾胃虚寒证<肝胃不和证<瘀血内阻证<痰浊凝滞证,但组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:不同中医证型GC患者外周血miR-21、miR-122表达存在差异,检测二者水平对评估患者病情进展及预后有一定价值。

miR-122-5p通过靶向Circ_MTM1在HBV相关肝纤维化中的分子机制研究

目的:研究微小核糖核酸microRNA-122-5p (miR-122-5p)对HBV感染相关肝纤维化的作用及分子机制。方法:分别用采用HBsAg、HBeAg酶联免疫吸附剂测定(ELISA)试剂盒和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HBV表面抗原(HBsAg)、抗原(HBeAg)水平以及HBV DNA、HBV共价闭合环状DNA (cccDNA)水平,并采用蛋白质印迹法(Western blot)检测相应蛋白水平。RT-qPCR检测人肝星状细胞(LX-2细胞)和HBV相关肝纤维化组织细胞中Circ_MTM1、miR-122-5p的表达情况。应用生物信息学软件StarBaseV3.0预测miR-122-5p的可能靶基因,并应用双荧光素酶检测方法判定miR-122-5p对其靶基因Circ_MTM1表达的调节作用。结果:miR-122-5p在HBV相关性肝纤维化组织和细胞中低表达,而Circ_MTM1在HBV相关性肝纤维化组织和细胞中高表达。miR-122-5p靶向下调Circ_MTM1的表达,通过下调Circ_MTM1可抑制HBV相关肝纤维化的进程。结论:miR-122-5p与Circ_MTM1在HBV相关肝纤维化中存在靶向关系,Circ_MTM1通过调控肝纤维化相关蛋白的水平在HBV相关肝纤维化进程中起到启动子作用。

miR-101、miR-122在妊娠期糖尿病患者血清和胎盘组织中表达及意义分析

分析妊娠期糖尿病血清、胎盘miR-101、miR-122表达特点与指导意义。方法:选取2022年10月~2023年09月孕产妇70例,其中妊娠期糖尿病35例设为A组,血糖正常孕妇35例设为B组,分析孕妇血清和胎盘miR-101与miR-122表达对孕妇血糖、胰岛素情况的影响。结果:A组血清、胎盘miR-101活性高于B组(P<0.05);A组血清、胎盘miR-122显著高表达(P<0.05);FBG与血清miR-101正相关,FIN、HOMA-IS与血清miR-101负相关(P<0.05);FBG、HOMA-IR与miR-122正相关,FIN与血清miR-101负相关(P<0.05)。结论:妊娠期糖尿病患者常见miR-101、miR-122激活,可能影响机体胰岛素分泌,根据miR-101、miR-122变化实施针对性管理,以促进疾病防控。

miR-122在前列腺癌中的表达水平与临床病理特征的相关性

目的探讨miR-122在前列腺癌中的表达水平与临床病理特征的相关性。方法检测168例进行前列腺检查的患者外周血miR-122与PCA3的表达水平,调查所有患者的一般资料、临床病理资料并进行相关性分析。结果病理诊断为前列腺癌68例(前列腺癌组,Ⅰ级38例、Ⅱ级22例、Ⅲ级8例),前列腺增生100例(前列腺增生组)。前列腺癌组的miR-122相对表达水平高于前列腺增生组(P<0.05),PCA3含量也高于前列腺增生组(P<0.05),且在不同病理分级患者中均有差异(P<0.05)。前列腺癌组的Pearson结果显示,临床分级、PCA3含量与miR-122相对表达水平存在正相关性(P<0.05);COX结果显示,临床分级、PCA3含量均为影响外周血miR-122相对表达水平的重要因素(P<0.05)。结论miR-122在前列腺癌中呈现高表达水平,与患者的病理分级、外周血PCA3含量存在相关性,可为前列腺癌的临床诊治提供较可靠的客观学依据。

miR-122对乙型肝炎病毒抗原表达的影响

目的:探讨miR-122对乙型肝炎病毒HBsAg、HBeAg表达的影响。方法:设计合成2条miR-122的反义寡核苷酸(anti-miR-122,LNA-antimiR-122)、hsa-miR-122以及阴性对照anti-GFP,脂质体介导转染HepG2.2.15细胞。取细胞转染24 h、48 h后的培养液,时间分辨荧光免疫法检测anti-miR-122组、LNA-antimiR-122组、hsa-miR-122组以及anti-GFP组HBsAg和HBeAg的表达,定量PCR检测各组HBV DNA的表达。转染48 h后,提取细胞内总RNA,Taqman技术实时荧光定量PCR检测各组miR-122的表达。结果:①转染48 h后anti-miR-122组、LNA-antimiR-122组miR-122表达明显受抑制,低于阴性对照组(P<0.001)。hsa-miR-122组miR-122水平较阴性对照组升高(P<0.001)。②hsa-miR-122组HBsAg、HBeAg表达均低于阴性对照组(P<0.001);anti-miR-122组、LNA-antimiR-122组HBsAg、HBeAg表达均高于阴性对照组(P<0.001)。③转染24 h与48 h后各组HBV DNA表达与阴性对照组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:miR-122可调节乙型肝炎病毒抗原表达。

miR-122靶向调控RhoA基因影响乙型肝炎病毒复制与表达的机制研究

目的探讨miR-122通过调控小G蛋白超家族成员RhoA基因对隐匿性乙型肝炎病毒(HBV)复制与表达的影响及其作用机制。方法实时荧光定量PCR测定HBV(+)与HBV(-)的肝癌患者组织、HepG2细胞与HepG2.2.15细胞中miR-122表达差异,实时荧光定量PCR和Western Blot检测HBV(+)与HBV(-)的肝癌患者组织、HepG2细胞与HepG2.2.15细胞中RhoA mRNA和RhoA蛋白的表达差异;按照实验分组将pEGFP-C1-miR-122与pcDNA3.0-V14RhoA转染至HepG2.2.15细胞,实时荧光定量PCR测定miR-122与RhoA mRNA表达,Western Blot检测RhoA蛋白表达;生物信息学方法预测miR-122与RhoA基因的靶向结合位点,构建野生型RhoA 3′非翻译区(3′UTR)和突变型RhoA 3′UTR双荧光素酶表达载体,检测细胞荧光素酶活性变化;酶联免疫吸附试验测定细胞培养上清液中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)与乙型肝炎e抗原(HBeAg)水平,实时荧光定量PCR检测细胞培养上清液中HBV DNA水平,Western Blot检测细胞内Rho相关蛋白激酶(ROCK)-1与ROCK-2相对表达水平。结果相较于HBV(-)肝癌患者组织,HBV(+)肝癌患者组织中miR-122表达下调,RhoA mRNA和RhoA蛋白相对表达水平上调(P<0.05);与HepG2细胞比较,HepG2.2.15细胞中miR-122表达也下调,RhoA mRNA和RhoA蛋白相对表达水平上调(P<0.05)。经预测发现RhoA mRNA 3′UTR与miR-122在特定区域存在碱基互补现象,miR-122 mimic和RhoA 3′UTR WT重组质粒共转染的细胞中相对荧光素酶活性降低(P<0.05)。此外,过表达miR-122的HepG2.2.15细胞中RhoA mRNA和RhoA蛋白相对表达水平下调(P<0.05)。与空白组比较,miR-122组HepG2.2.15细胞培养上清液HBsAg与HBeAg水平均降低,HBV DNA表达降低,ROCK-1与ROCK-2表达均上调(P<0.05);而V14RhoA组HBsAg与HBeAg水平则高于空白组,HBV DNA表达升高,ROCK-1与ROCK-2表达均上调(P<0.05)。结论miRNA-122可通过下调RhoA基因表达抑制HBV的复制和表达,其机制可能与抑制Rho/ROCK信号通路激活有关。

白花香莲解毒颗粒治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的临床疗效及对血浆外泌体miR-122表达的影响

目的:观察壮药白花香莲解毒颗粒治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的临床疗效及对血浆外泌体miR-122表达的影响。方法:将120例HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者随机分为两组,对照组60例给予恩替卡韦治疗,观察组60例给予恩替卡韦联合白花香莲解毒颗粒治疗,两组均治疗48周,同时选取健康体检者30例作为健康组。观察治疗前后两组临床疗效、乙肝两对半定量、血浆外泌体miR-122、乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)的水平、肝功能及不良反应事件发生情况。结果:治疗48周,观察组总有效率[90%(54/60)]明显高于对照组[71.67%(43/60)](P<0.05)。治疗12、24、48周时,两组HBeAg滴度、血清丙氨酸氨基转移酶水平逐渐下降,且观察组显著低于对照组(P<0.05);观察组血浆中miR-122相对表达量高于治疗前(P<0.05),对照组血浆中miR-122相对表达量与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗12、24、48周时,两组血清HBV-DNA水平逐渐下降(P<0.05);观察组治疗12、24周时HBV-DNA水平低于对照组(P<0.05),但治疗48周后,两组HBV-DNA水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:白花香莲解毒颗粒能够抑制HBV-DNA的复制及HBeAg分泌,改善肝功能,其疗效机制可能与调节血浆外泌体miR-122的表达有关。

血清miR-122与STEMI患者动脉粥样硬化疾病负担和长期临床结局的关系

目的 探讨ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者血清微小RNA(miRNA)-122与动脉粥样硬化疾病负担及长期临床结局的相关性。方法 前瞻性纳入2014年9月至2016年5月104例在该院接受经皮冠状动脉介入治疗的STEMI患者,使用SYNTAX评分和Gensini评分评估STEMI患者动脉粥样硬化疾病负担。同期纳入100例无已知心血管疾病的健康志愿者作为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-122表达水平。结果 STEMI组患者血清miR-122水平显著高于对照组(Z=-8.064,P<0.001)。血清miR-122水平≥2.25与多支血管疾病发生率升高有关(OR=2.04,95%CI:1.09~3.83,P=0.031)。STEMI患者血清miR-122水平与SYNTAX评分、Gensini评分呈正相关(r=0.447、0.402,均P<0.001)。多元线性回归分析显示,血清miR-122水平是影响SYNTAX评分(t=5.228,P<0.001)和Gensini评分(t=2.955,P=0.009)的独立临床因素。随访期间,有26例(25.0%)患者出现了新的临床事件,发生不良临床事件患者的血清miR-122水平高于未发生不良事件患者(Z=-2.837,P=0.005)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清miR-122水平预测患者不良临床结局的曲线下面积为0.755(95%CI:0.664~0.845)。多因素Logistic回归分析显示,血清miR-122水平≥2.25是STEMI患者不良临床结局的独立危险因素(P<0.05)。结论 STEMI患者血清miR-122水平升高与更高的动脉粥样硬化疾病负担及不良临床结局有关。