miR-210-5p对小鼠脂肪干细胞成骨分化的影响及作用机制分析

[目的]观察miR-210-5p在小鼠脂肪干细胞增殖和成骨分化中的作用并探讨其作用机制.[方法]将小鼠脂肪干细胞分空白对照组、miR-210-5p模拟物阴性对照组、miR-210-5p模拟物组、miR-210-5p抑制物阴性对照组和miR-210-5p抑制物组,采用CCK-8细胞计数法检测细胞增殖能力,茜素红染色观察钙盐矿化结节形成能力,用实时荧光定量PCR检测miR-210-5p水平及成骨分化标志物BMP2、Smad1、Smad5和Runx2 mRNA表达水平,进而用蛋白免疫印迹法检测BMP2、Smad1、Smad5和Runx2蛋白表达水平.[结果] miR-210-5p模拟物组细胞增殖活力显著升高(P<0.01),矿化结节显著增加,BMP2、Smad1、Smad5和Runx2 mRNA和蛋白表达水平显著上调(P<0.01);miR-210-5p抑制物组细胞增殖活力显著降低(P<0.01),矿化结节显著降低,BMP2、Smad1、Smad5和Runx2 mRNA和蛋白表达水平显著下调(P<0.01).[结论] miR-210-5p可能通过调控BMP2/Smad信号通路促进小鼠脂肪干细胞增殖和成骨分化.

绞股蓝总苷通过miR-210/ISCU途径调节线粒体能量代谢对ApoE^(-/-)AS小鼠的影响及机制

目的 探讨绞股蓝总苷通过影响miR-210/铁硫簇组装蛋白(ISCU)途径,调控线粒体能量代谢,改善动脉粥样硬化模型小鼠主动脉脂质沉积的作用机制。方法 30只健康ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组、绞股蓝总苷组和辛伐他汀组,每组10只。10只C57BL/6J小鼠作为正常组。模型组、绞股蓝总苷组和辛伐他汀组采用高脂饲料喂养12 w。绞股蓝总苷组和辛伐他汀组分别采用绞股蓝总苷[2.973 g/(kg·d)]和辛伐他汀[2.275 g/(kg·d)]灌胃4 w,模型组、正常组灌胃给予等量生理盐水。造模结束后,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察动脉粥样硬化斑块形成;采用紫外吸收法检测主动脉线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ;实时荧光定量-聚合酶链反应(PCR)检测主动脉miR-210、ISCU及线粒体DNA(mtDNA) mRNA表达;采用Wes全自动Western印迹定量分析系统检测线粒体能量代谢相关蛋白ISCU、mtDNA表达。结果 与正常组比较,模型组miR-210表达、TC、TG、LDL-C水平显著升高,呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ水平、HDL-C、ISCU mRNA及蛋白表达、mtDNA mRNA水平显著下降(P<0.05,P<0.01),主动脉管腔见较大粥样斑块。与模型组相比,绞股蓝总苷组及辛伐他汀组TG、TC、LDL-C水平显著降低(P<0.01,P<0.05),绞股蓝总苷组和辛伐他汀组主动脉管腔中粥样斑块面积明显减小,辛伐他汀组线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ水平显著升高(P<0.01,P<0.05),绞股蓝总苷组线粒体呼吸链复合体酶Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ含量显著增加,miR-210表达水平显著降低(P<0.01,P<0.05),绞股蓝总苷组ISCU mRNA和蛋白表达及mt DNA mRNA水平显著升高(P<0.05),辛伐他汀组ISCU mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。结论 绞股蓝总苷可能通过miR-210/ISCU途径,调控线粒体能力代谢,缓解动脉粥样硬化斑块形成,进而防治动脉粥样硬化。

化瘀消癥颗粒对miR-210过表达与低氧状态下滋养细胞血管生成、侵袭的影响

【目的】观察化瘀消癥颗粒对miR-210过表达与低氧状态下滋养细胞血管生成、侵袭的影响。【方法】体外培养HTR-8/SVneo细胞,通过转染建立miR-210过表达模型,以CoCl2法建立化学低氧模型,将实验分为空白组、miR-210过表达组、miR-210过表达阴性组、miR-210过表达+中药组、低氧+中药组及中药组,采用Western Blot法检测各组HTR-8/SVneo细胞中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管生成因子(VEGF)、侵袭相关因子[基质金属蛋白酶9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)]蛋白的表达。【结果】与空白组比较,miR-210过表达组中HIF-1α、VEGF、MMP-9、TIMP-1蛋白表达水平及MMP-9/TIMP-1比值升高(P<0.05);与miR-210过表达组比较,miR-210过表达阴性组、miR-210过表达+中药组、低氧+中药组、中药组中HIF-1α、VEGF、MMP-9、TIMP-1蛋白表达水平及MMP-9/TIMP-1比值均下降(P<0.05),中药组下降作用尤其明显;与miR-210过表达+中药组比较,低氧+中药组、中药组中HIF-1α、VEGF、MMP-9、TIMP-1蛋白表达水平及MMP-9/TIMP-1比值下降(P<0.05);与低氧+中药组比较,中药组上述各指标均下降(P<0.05)。【结论】化瘀消癥颗粒对miR-210过表达及低氧状态下滋养细胞所增强的血管生成、侵袭能力具有负调控作用,这可能是其治疗输卵管妊娠的作用机制之一。

基于miR-210表达探讨电针对脑梗死大鼠氧化应激反应的影响

目的探讨电针治疗对脑梗死大鼠氧化应激的影响及其可能机制。方法将70只SD大鼠随机分为假手术组、模型1次组、模型3次组、模型7次组、电针1次组、电针3次组、电针7次组,每组10只。除假手术组外,其余组大鼠均采用改良的Longa线栓法构建可逆性脑梗死模型。模型构建后,电针1次组、电针3次组、电针7次组大鼠分别进行1次、3次、7次电针治疗,对应模型组大鼠在背部非穴位进行电针刺激,均1次/d。各组大鼠末次治疗次日进行神经功能评分;TTC染色观察脑梗死情况,计算脑梗死面积;RT-qPCR检测血清与缺血半暗带区miR-210表达情况,Western blot法检测缺血半暗带区缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达情况,试剂盒检测血清与缺血半暗带区超氧化物歧化酶(SOD)活力与丙二醛(MDA)含量。结果模型各组大鼠出现明显梗死区域,神经功能评分降低;电针各组大鼠神经功能评分和脑梗死面积均明显低于同时间点模型各组(P均<0.05),且随着电针治疗次数增加,神经功能和脑梗死面积改善率不断提高。与假手术组比较,模型各组血清与缺血半暗带区miR-210 mRNA相对表达量、SOD活力均明显降低(P均<0.05),缺血半暗带区HIF-1α蛋白相对表达量和血清与缺血半暗带区MDA含量均明显升高(P均<0.05);与同时间点模型各组比较,电针各组血清与缺血半暗带区miR-210 mRNA相对表达量、SOD活力均明显升高(P均<0.05),缺血半暗带区HIF-1α蛋白相对表达量和血清与缺血半暗带区MDA含量均明显降低(P均<0.05)。结论电针治疗能够明显改善脑梗死诱发的神经功能损伤,其机制可能与上调miR-210表达,靶向抑制HIF-1α蛋白表达,从而抑制氧化应激反应有关。

孕妇外周血miR-152 miR-210与子痫前期病情程度及妊娠结局的相关性研究

目的:探究孕妇外周血微小RNA-152(miR-152)、miR-210与子痫前期(PE)病情程度及妊娠结局的相关性。方法:选取2018年7月至2022年5月我院200例PE患者,根据病情严重程度分为轻度组(轻度PE患者,n=114)和重度组(重度PE患者,n=86),另选同期、同年龄段健康孕妇作为对照组(n=100)。比较三组血压[收缩压(SBP)、舒张压(DBP)]、24h尿蛋白定量(24h Upro)、钙离子(Ca^(+))、外周血miR-152、miR-210水平,分析外周血miR-152、miR-210水平与PE病情程度、血压、24h Upro及Ca^(+)相关性。PE患者随访至妊娠结束,比较不同妊娠结局PE患者临床资料、外周血miR-152、miR-210水平,通过Lasso回归和Logistic回归分析预测因素与不良妊娠结局的关联性,通过受试者工作特征曲线(ROC)、临床决策曲线(DCA)评价外周血miR-152、miR-210对预测PE患者发生不良妊娠结局的价值及临床效用。结果:重度组、轻度组、对照组SBP、DBP、24h Upro、外周血miR-152、miR-210水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);外周血miR-152、miR-210水平与PE病情程度、血压、24h Upro呈正相关(P<0.05),与Ca^(+)水平呈负相关(P<0.05);发生不良妊娠结局年龄、流产史、病情程度、SBP、DBP、24h Upro、Ca^(+)、外周血miR-152、miR-210水平与未发生不良妊娠结局患者比较,差异有统计学意义(P<0.05);Lasso回归选出5个预测变量为病情程度、SBP、24h Upro、外周血miR-152、miR-210水平;Logistic回归显示,外周血miR-152、miR-210水平是PE患者发生不良妊娠结局的独立危险因素(P<0.05);ROC、DCA结果显示,外周血miR-152、miR-210联合预测PE患者发生不良妊娠结局具有良好的预测价值和临床效用。结论:外周血miR-152、miR-210在PE患者中表达上调,且与病情程度、妊娠结局显著相关,其联合预测患者发生不良妊娠结局具有一定参考价值和临床效用。

miR-210通过Wnt/β-catenin促进结直肠癌对顺铂的药物敏感性研究

目的 探讨miR-210对结直肠癌细胞增殖及顺铂(DDP)药物敏感性及其机制影响。方法 RT-qPCR检测人正常结肠上皮细胞(HCoEpiC)、结直肠癌细胞(HCT-116、HT-29、SW620)及顺铂耐药细胞株(HCT-116/DDP)中miR-210的表达;使用CCK-8和Annexin V-FITC/PI法检测miR-210过表达或干扰后,HCT-116细胞增殖及凋亡情况。将HCT-116/DDP细胞随机分成Control组、miR-210 mimics组、miR-210 inhibitor组,在DDP(80μmol/L)或对照作用24 h后,CCK-8检测HCT-116/DDP细胞活力;Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡,Western blot检测细胞凋亡相关指标(Bad、Bcl-2、Cleaved Caspase-3)、耐药相关指标(ABCG2、MRP2、P-gp)及Wnt/β-Catenin通路中重要蛋白的表达。结果 与HCoEpiC细胞相比,结直肠癌细胞(HCT-116、HT-29、SW620)中miR-210的表达显著降低,而HCT-116/DDP细胞中miR-210的表达比HCT-116细胞中进一步降低。miR-210 mimics能够显著抑制结直肠癌细胞及其顺铂耐药株的细胞活力,促进细胞凋亡,而inhibitor作用相反。在HCT-116/DDP细胞中,与DDP组比较,DDP+mimics联合组能够显著抑制细胞活力,促进细胞凋亡,促进Bad、Cleaved Caspase-3的表达,抑制Bcl-2的表达,抑制耐药相关蛋白(p-gp、MRP2、ABCG2)的表达,抑制Wnt3a、β-Catenin的表达;miR-210 inhibitor则得到相反的结果。结论 miR-210可能通过调控Wnt/β-catenin通路,影响耐药相关蛋白(p-gp、ABCG2、MRP2)的表达,最终促进HCT-116/DDP耐药细胞对顺铂的药物敏感性。

芪苈强心胶囊与托拉塞米对慢性充血性心力衰竭病人心室重塑及血清miR-210-3p、miR-423-5p的影响

目的:探讨芪苈强心胶囊与托拉塞米对慢性充血性心力衰竭心室重塑及血清miR-210-3p、miR-423-5p的影响。方法:选取2020年12月—2022年12月我院收治的慢性充血性心力衰竭病人100例,采用随机数字表法分为两组,各50例。对照组给予托拉塞米治疗,观察组采用芪苈强心胶囊与托拉塞米联合治疗。比较两组临床疗效及治疗前后心室重塑指标[室间隔厚度(IVST)、左室后壁厚度(LVPWT)、左室质量指数(LVMI)]、心功能指标[左室收缩末期容积(LVESV)、左室舒张末期容积(LVEDV)、左室射血分数(LVEF)]、血清miR-210-3p、血清miR-423-5p水平变化。结果:观察组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(96.0%与76.0%,P<0.05)。治疗前两组IVST、LVPWT、LVMI、LVESV、LVEDV、LVEF、血清miR-210-3p、血清miR-423-5p水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组IVST、LVPWT、LVESV、LVEDV、miR-210-3p、miR-423-5p均低于对照组,LVMI、LVEF高于对照组(P<0.05)。结论:芪苈强心胶囊与托拉塞米治疗慢性充血性心力衰竭能够抑制心室重塑,改善心功能水平,调节血清miR-210-3p、miR-423-5p水平。

miR-210过表达对急性脑梗死大鼠脑损伤的影响及其机制

目的 探究miR-210在急性脑梗死(ACI)中的作用和分子调控机制。方法 采用改良线栓法制造大脑中动脉栓塞构建ACI模型大鼠,将ACI大鼠分为模型组、agomir-NC组和agomir-210组,另设置健康SD大鼠为假手术组。造模完成后72 h,采用Zea-Longa评分对大鼠进行神经功能评估,TTC染色检测脑梗死面积,HE染色检测脑基底动脉损伤,TUNEL染色检测脑基底动脉血管内皮细胞凋亡,ELISA法检测血清中MDA、SOD、GSH-Px和ROS水平。将人脑微细血管内皮细胞HBMEC-D3细胞分为常氧组、缺氧组、mimic-NC组(缺氧培养)和miR-210 mimic组(缺氧培养),采用CCK-8检测HBMEC-D3细胞增殖,流式细胞术检测HBMEC-D3细胞凋亡,DCFH-DA探针法检测HBMEC-D3细胞内ROS含量。采用RT-PCR检测大鼠脑组织和HBMECD3细胞中miR-210表达水平,Western blot检测大鼠脑组织和HBMEC-D3细胞中凋亡相关蛋白(Bax、cleaved Caspase-3和Bcl-2)和STAT3/PI3K/AKT信号通路相关蛋白(p-STAT3、STAT3、p-PI3K、PI3K、p-AKT和AKT)表达水平。结果 与假手术组比较,模型组大鼠脑血管病变严重,神经功能评分、脑梗死面积比和细胞凋亡率均升高(P<0.05)。与agomir-NC组比较,agomir-210组大鼠脑血管壁内皮状态正常,miR-210、SOD、GSH-Px、Bcl-2、p-STAT3/STAT3、p-AKT/AKT和p-PI3K/PI3K水平均升高(P<0.05),神经功能评分、脑梗死面积比和细胞凋亡率均降低(P<0.05),MDA、ROS、Bax和cleaved Caspase-3表达量均降低(P<0.05)。与常氧组比较,缺氧组细胞增殖水平以及miR-210、Bcl-2、p-STAT3/STAT3、p-AKT/AKT和p-PI3K/PI3K水平均降低(P<0.05),细胞凋亡率以及ROS、Bax和cleaved Caspase-3表达量升高(P<0.05)。与mimic-NC组比较,miR-210 mimic组细胞增殖水平以及miR-210、Bcl-2、p-STAT3/STAT3、p-AKT/AKT和p-PI3K/PI3K水平均升高(P<0.05),细胞凋亡率以及ROS、Bax和cleaved Caspase-3表达量降低(P<0.05)。结论 过表达miR-210可以抑制ACI大鼠脑损伤,其机制可能与抑制血管内皮细胞凋亡和ROS生成,以及促进STAT3/PI3K/AKT信号通路激活有关。

miR-210通过NF-κB信号通路对胃癌细胞的增殖、凋亡、侵袭及转移的影响

目的 研究miR-210通过核转录因子(NF-κB)信号通路对胃癌细胞的增殖、凋亡、侵袭和转移的影响。方法 使用qRT-PCR检测并比较正常胃黏膜上皮细胞和MGC803胃癌细胞中miR-210的表达水平,根据不同的处理方式,将胃癌细胞分为空白对照组、阴性对照组(miR-210 inhibitor control)及实验组(miR-210 inhibitor),使用qRT-PCR检测各组细胞中miR-210水平,比较转染后各组细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移情况,比较各组细胞中人核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化-人核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)、NF-κB、磷酸化核转录因子(p-NF-κB)蛋白水平。结果 与正常胃黏膜上皮细胞相比,MGC803胃癌细胞中miR-210水平升高(P<0.05);与空白对照组和阴性对照组细胞相比,实验组细胞中miR-210表达水平、细胞增殖能力、侵袭和迁移能力均降低,细胞凋亡率升高(P<0.05),实验组细胞中IκBα、p-IκBα、NF-κB和p-NF-κB蛋白水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MGC803胃癌细胞内miR-210的表达明显升高,miR-210可通过抑制NF-κB信号通路抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移,并促进胃癌细胞凋亡。

缺氧环境下miR-210调控HDAC2对肝癌VEC细胞血管通透性、血管形成及放疗耐药性的影响

目的探究缺氧环境下miR-210调控组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)对肝癌VEC细胞血管通透性、血管形成及放疗耐药性的影响。方法分别在缺氧环境和正常环境下培养VEC细胞,以RT-qPCR和Western blotting检测两种培养环境下VEC细胞miR-210和HDAC2表达。其中在缺氧环境下培养VEC细胞并随机分为对照组、阴性对照组、miR-210 inhibitor组、HDAC2敲低组、miR-210 inhibitor+HDAC2过表达组,采用MTT法和Edu染色检测缺氧环境下各组VEC细胞增殖;Transwell小室法、小管形成实验分别检测各组VEC细胞血管通透性和血管形成;Western blotting和ELISA检测各组VEC细胞血管VEGF表达释放;MTT法测定各组细胞活力并检测其放疗耐药指数。结果与正常环境下培养的VEC细胞相比,缺氧环境下VEC细胞miR-210表达、HDAC2 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05)。与对照组相比,miR-210 inhibitor组、HDAC2敲低组细胞HDAC2 mRNA及蛋白表达、细胞活力、增殖率、通透性强度、成管长度、VEGF蛋白表达、细胞培养基中VEGF水平、放疗耐药指数降低(P<0.05),阴性对照组细胞各指标差异无统计学意义(P>0.05);与miR-210 inhibitor组相比,miR-210 inhibitor+HDAC2过表达组细胞HDAC2 mRNA及蛋白表达、细胞活力、增殖率、通透性强度、成管长度、VEGF蛋白表达、细胞培养基中VEGF水平、放疗耐药指数升高(P<0.05)。结论缺氧环境下下调miR-210可通过降低HDAC2表达而抑制肝癌VEC细胞增殖、血管通透性、血管形成及放疗耐药性。

急性脑梗死患者血清miR-210和miR-940水平及其临床意义

目的探讨急性脑梗死患者血清微小RNA(miR)-210和miR-940的表达水平及其临床意义。方法选取绵阳市中心医院2021年9月—2022年9月收治的80例急性脑梗死患者作为本研究的研究组,依据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分标准分为重型患者(15例)、中型患者(35例)、轻型患者(30例),并以同期体检正常的50例健康人员作为对照组,收集各组一般资料,采用qRT-PCR法检测各组血清miR-210和miR-940水平;ROC曲线分析血清miR-210和miR-940水平对急性脑梗死的诊断价值;Pearson法分析急性脑梗死患者血清中miR-210和miR-940水平的相关性;Logistics回归分析影响NIHSS评分升高的因素。结果在糖尿病、收缩压及舒张压的比较中,对照组及研究组具有统计学差异(P<0.05),但在年龄、性别、总胆固醇、甘油三酯以及吸烟史、饮酒史的比较中均无统计学差异(P>0.05);与对照组相比,研究组患者血清中miR-210和miR-940水平显著下降(P<0.05);与轻度急性脑梗死患者相比,重度、中度患者血清中miR-210、miR-940水平显著下降;与中度急性脑梗死患者相比,重度患者血清中miR-210、miR-940水平显著下降(P<0.05);Pearson法分析显示miR-210和miR-940水平呈正相关。血清miR-210与miR-940水平以及二者联合诊断急性脑梗死患者的敏感度分别为88.75%、82.50%、80.00%,特异度分别为68.00%、80.00%、92.00%,曲线下面积分别为0.830、0.881、0.926。Logistics回归分析显示血清miR-210、miR-940水平为NIHSS评分升高的独立危险因素(P<0.05)。结论急性脑梗死患者血清中miR-210、miR-940水平显著下降,与患者病情程度有关,二者表达呈正相关,对急性脑梗死具有一定的诊断价值,二者联合诊断效能更佳。

非心源性脑梗死患者miR-124、miR-210表达与颈动脉狭窄的关系

目的 探讨非心源性脑梗死患者miR-124、miR-210表达与颈动脉狭窄的关系。方法选取2021年1月至2022年12月成都医学院第二附属医院·核工业四一六医院收治的124例非心源性脑梗死患者,根据是否存在颈动脉狭窄分为狭窄组(n=64)和无狭窄组(n=60),检测比较两组血清miR-124、miR-210、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、同型半胱氨酸(Hcy)表达水平;并根据颈动脉狭窄程度分级将狭窄组分为轻、中、重度狭窄组,比较不同狭窄程度间血清miR-124、miR-210、hs-CRP、Hcy水平差异,并分析血清miR-124、miR-210与hs-CRP、Hcy及狭窄程度的相关性。结果 狭窄组血清miR-124、miR-210表达水平均低于无狭窄组,hs-CRP、Hcy水平高于无狭窄组,差异有统计学意义(P<0.05)。重度狭窄组患者的血清miR-124、miR-210表达水平均低于轻度和中度狭窄组,差异有统计学意义(P<0.05);hs-CRP、Hcy水平:重度狭窄组>中度狭窄组>轻度狭窄组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-124、miR-210与hs-CRP、Hcy水平、颈动脉狭窄程度均呈负相关(P<0.05)。结论 miR-124、miR-210可能参与颈动脉狭窄的形成,其表达水平检测或可作为评估非心源性脑梗死颈动脉狭窄程度的辅助性指标。

彩色多普勒超声与miR-19a和miR-210在颈动脉狭窄中的应用价值

目的:分析彩色多普勒超声与微小核糖核酸(miRNA)-19a(miR-19a和miR-210)在颈动脉狭窄中的应用价值。方法:选取2020年10月至2022年10月在沧州市人民医院诊治的102例颈动脉狭窄患者纳入病例组,另选取同期在医院体检需行彩色多普勒超声检查的102名健康体检者纳入健康对照组。病例组均在入院1周内行彩色多普勒超声检查和数字减影血管造影(DSA)检查,两组均行血清指标检测。比较两组miR-19a、miR-210,以及病例组不同狭窄程度miR-19a、miR-210,分析彩色多普勒超声与miR-19a、miR-210及其联合对颈动脉狭窄的诊断价值。结果:病例组102例患者经彩色多普查超声颈总动脉检测,正常15例,轻度狭窄15例,中度狭窄21例,重度狭窄33例,完全闭塞18例。病例组miR-19a明显高于健康对照组,miR-210明显较低于对照组,差异有统计学意义(t=10.755、-5.903,P<0.05)。病例组不同狭窄程度miR-19a比较:轻度狭窄<中度狭窄<重度狭窄<完全闭塞,miR-210比较:轻度狭窄>中度狭窄>重度狭窄>完全闭塞,差异均有统计学意义(F=160.399、147.462,P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,彩色多普勒超声、miR-19a及miR-210联合诊断颈动脉狭窄的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.892、0.842、0.729和0.978,联合诊断的灵敏度为97.1%,特异度为95.1%。结论:彩色多普勒超声与miR-19a、miR-210联合对颈动脉狭窄具有较高的诊断价值。

苦豆碱通过调控miR-210对脂多糖致心肌细胞凋亡及炎性因子表达的影响

目的:探讨苦豆碱对脂多糖(LPS)致心肌细胞凋亡和炎症反应的影响。方法:将大鼠心肌H9c2细胞分为NC组(不作任何处理)、LPS组、LPS+苦豆碱低剂量组、LPS+苦豆碱中剂量组、LPS+苦豆碱高剂量组、LPS+miR-NC组、LPS+miR-210组、LPS+苦豆碱中剂量组+anti-miR-NC组、LPS+苦豆碱中剂量组+anti-miR-210组。通过细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、流式细胞术、蛋白免疫印迹法检测细胞增殖、凋亡及其相关蛋白表达情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测miR-210表达水平。结果:不同浓度苦豆碱处理后,LPS处理的心肌细胞活性及Ki-67、Bcl-2、miR-210蛋白表达水平增加,细胞凋亡率及p21、Bax蛋白表达水平降低,IL-1β、TNF-α水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。过表达miR-210后LPS处理的心肌细胞活性、Ki-67、Bcl-2表达水平增加,细胞凋亡率及p21、Bax表达水平降低,IL-1β、TNF-α水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。干扰miR-210表达能逆转苦豆碱对LPS诱导的H9c2细胞增殖、凋亡及炎性因子的影响。结论:苦豆碱可通过上调miR-210抑制LPS致心肌细胞凋亡和炎症反应。

miR-210、SIRT3在妊娠期高血压疾病孕妇胎盘组织中的表达及临床意义

目的 探讨miR-210、SIRT3在妊娠期高血压疾病孕妇胎盘组织中的表达及临床意义。方法 选取梅州市人民医院2023年1月至6月收治的45例妊娠期高血压疾病患者,按照疾病类型分为妊娠高血压组(15例)、子痫前期组(15例)、重度子痫前期组(15例),另选取同期15例单胎健康孕妇为对照组,采集各组胎盘组织,检测并分析miR-210、SIRT3-mRNA表达情况。结果 四组miR-210、SIRT3-mRNA水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。重度子痫前期组miR-210水平高于其他三组,SIRT3-mRNA低于其他三组(P <0.05);子痫前期组miR-210水平高于妊娠高血压组、对照组,SIRT3-mRNA水平低于妊娠高血压组、对照组(P <0.05);妊娠高血压组miR-210水平高于对照组,SIRT3-mRNA水平低于对照组(P <0.05)。结论 重度子痫前期患者miR210表达水平较高,而SIRT3表达水平较低,且随着病情加重,有明显变化趋势。

淋巴瘤患者血浆中miR-21、miR-155、miR-210的表达及临床意义

本研究旨在检测淋巴瘤患者血浆中miR-21、miR-155、miR-210的表达,分析其与临床特征的相关性并探讨其在淋巴瘤诊断、评价疗效及预后方面的作用。运用RT-PCR方法检测淋巴瘤患者(55例)、淋巴结炎性肿大患者(10例)和正常对照(27名)血浆中miR-21、miR-155、miR-210的表达。结果表明,淋巴瘤患者血浆中miR-21、miR-155、miR-210的表达量均明显高于正常对照及淋巴结炎性肿大患者(P<0.05),淋巴结炎性肿大患者血浆中miR-21、miR-210的表达量与正常对照无显著差异。淋巴瘤患者血浆中miR-21的表达随血清乳酸脱氢酶水平增高而增高。初治淋巴瘤患者血浆中miR-21、miR-210的表达量明显高于6个疗程以上患者的表达量(P<0.05)。miR-21、miR-155、miR-210用于淋巴瘤的诊断准确度分别可达56.4%、65.3%、47.6%,三者联合诊断率可达82.7%。结论:淋巴瘤血浆中miR-21、miR-155、miR-210的表达量增高,检测三者在血浆中的表达量有助于临床淋巴瘤的诊断及疗效、预后的判断。

急性脑梗死患者血清miR-151a-3p和miR-210的表达及其与炎性因子的关系

目的分析急性脑梗死(ACI)患者血清miR-151a-3p和miR-210的表达及其与炎性因子的关系,并分析其临床意义。方法选择2015年3月—2018年2月在新疆医科大学附属中医医院诊治的ACI患者160例作为观察组,患者脑梗死体积<5 cm^3者79例为轻度组,5～15 cm^3者35例为中度组,> 15 cm^3者46例为重度组。另选同期在医院接受体检的健康志愿者160例作为健康对照组。对比观察组与健康对照组、不同梗死体积患者血清miR-151a-3p、miR-210以及白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10 (IL-10)和白介素-17 (IL-17)水平,采用Pearson法分析miR-151a-3p和miR-210的表达与炎性因子的关系,并用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-151a-3p和miR-210对ACI的诊断价值。结果观察组血清miR-151a-3p、IL-1β、TNF-α、IL-10及IL-17水平均明显高于健康对照组,miR-210水平明显低于健康对照组(t=4. 339、6. 240、46. 930、30. 605、56. 776、17. 789,均P=0. 000)。重度组和中度组miR-151a-3p、IL-1β、TNF-α、IL-10及IL-17水平均明显高于轻度组,且重度组又高于中度组,而miR-210水平明显低于轻度组,且重度组又低于中度组(F=3. 068、3. 147、5. 048、9. 784、7. 239、5. 213,P=0. 002、0. 003、0. 000、0. 000、0. 000、0. 000)。Pearson相关性分析发现,miR-151a-3p与IL-1β、TNF-α、IL-10及IL-17呈正相关(r=0. 571、0. 597、0.627、0. 582,P均<0. 01),miR-210与IL-1β、TNF-α、IL-10及IL-17呈负相关(r=-0. 640、-0. 614、-0. 665、-0. 597,P均<0. 01)。根据ROC曲线分析,miR-210联合miR-151a-3p诊断ACI的曲线下面积为0. 826,灵敏度为0. 805,特异度为0. 782,约登指数为0. 587。结论ACI患者的血清miR-151a-3p表达较高,miR-210表达较低,二者与炎性因子的关系密切,可将其纳入到监测ACI患者的指标体系中,且联合检测ACI的价值较好。

下调miR-210的表达对U87细胞增殖、侵袭及凋亡的影响

目的:探讨miR-210在胶质瘤组织中的表达及下调miR-210对U87细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。方法:选取64例择期行手术治疗的胶质瘤患者的胶质瘤组织和30例因脑外伤行内减压术患者的正常脑组织。培养人脑胶质瘤U87细胞,根据转染物不同将细胞分为反义miR-210组、阴性对照组和空白对照组,利用实时荧光定量PCR技术检测不同脑组织及细胞中miR-210及HIF-1α基因表达,MTT比色法检测细胞增殖情况,Transwell法检测细胞迁移及侵袭能力,利用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白表达。结果:胶质瘤组织中miR-210和HIF-1αmRNA的表达均高于正常脑组织(P<0.05);胶质瘤组织中miR-210和HIF-1αmRNA相对表达量均与肿瘤直径和病理分级有关(P<0.05);反义miR-210组细胞中miR-210和HIF-1αmRNA的表达均低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。与阴性对照组和空白对照组相比,反义miR-210组细胞在48、72和96 h时光密度值降低,迁移细胞数和侵袭细胞数减少,细胞凋亡率升高(P<0.05)。反义miR-210组细胞中Bcl-2蛋白相对表达量低于阴性对照组和空白对照组,而Bax、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白相对表达量则升高(P<0.05)。结论:miR-210在胶质瘤组织中呈高表达,下调miR-210表达可抑制细胞增殖、迁移及侵袭能力,促进细胞凋亡发生。

miR-210对血管内皮细胞VEGF-Notch信号通路的调控

目的:观察过表达miR-210对血管内皮细胞中血管内皮生长因子(VEGF)-Notch信号通路相关分子表达的影响,探讨miR-210调控血管新生的分子机制。方法:采用常规方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVE-12)。通过转染LV-miR-210-GFP重组慢病毒载体上调内皮细胞miR-210表达,实验分为miR-210过表达组(LV-miR-210-GFP)和对照组(LV-GFP)。采用real-time PCR检测miR-210的表达变化,流式细胞术检测ephrin-A3的表达,采用real-time PCR、Western blotting、免疫荧光细胞化学染色法分别检测VEGF-Notch信号通路相关分子VEGF、VEGF 2(VEGFR 2)、Notch1的mRNA和蛋白表达水平。结果:Real-time PCR结果显示,与对照组相比,miR-210过表达组miR-210表达水平上调了(32.10±1.26)倍;流式细胞术结果显示,miR-210过表达组阳性细胞率[(73.22±1.45)%]较对照组[(12.52±0.67)%]明显增加(P<0.05)。Real-time PCR结果显示,miR-210过表达组VEGF、VEGFR2、Notch1 mRNA分别较对照组上调了(7.40±0.67)、(2.50±0.10)、(9.70±0.72)倍,P<0.05;免疫荧光结果显示,miR-210过表达组VEGF和VEGFR2红色荧光信号均显著强于对照组(P<0.05)。Western blotting结果显示,miR-210过表达组血管内皮细胞中Notch1的蛋白表达量(4.22±0.60)较对照组明显升高(P<0.05)。结论:miR-210过表达可显著上调VEGF-Notch信号通路分子的表达水平。

miR-210在化疗耐药与化疗敏感卵巢浆液性癌组织中的检测及意义

目的检测化疗耐药与化疗敏感卵巢浆液性癌组织中miR.210差异表达情况,探讨其参与卵巢浆液性癌耐药形成的分子机制。方法选取化疗耐药与化疗敏感卵巢浆液性癌组织标本各20例,利用实时PCR方法验证化疗耐药与化疗敏感卵巢癌组织中miR.210的差异表达情况;应用生物信息学软件预测miR.210潜在靶基因;分析miR.210在卵巢浆液性癌组织中的表达水平与卵巢浆液性癌患者绝经前后、手术病理分期、组织学分级和有无淋巴结转移的关系;采用受试者工作特征曲线分析miR.210对化疗耐药与化疗敏感卵巢浆液性癌患者的诊断意义,并计算灵敏度、特异度、误诊率、漏诊率、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比和阴性似然比。结果实时PCR方法显示,miR.210在卵巢浆液性癌化疗耐药组织中表达水平显著高于化疗敏感组织(P<0.05)。生物信息学分析软件预测miR.210潜在靶基因为HOXA9、FGFRL1、EFNA3、VEGF、E2F3。miR.210的表达与卵巢浆液性癌及其中化疗耐药和化疗敏感卵巢浆液性癌患者绝经前后、手术病理分期、组织学分级和有无淋巴结转移均无明显相关性(均P>0.05)。miR.210的表达对诊断卵巢浆液性癌化疗耐药有中等准确性(Az=0.855),最优截断点为1.043。在最优截断点的灵敏度和特异度分别为95.0%和60.0%,误诊率和漏诊率分别为40%和5%,阳性预测值和阴性预测值分别为70.4%和92.3%,阳性似然比和阴性似然比分别为2.375和0.083。结论miR.210与卵巢浆液性癌化疗耐药有关,其可能通过靶基因HOXA9、FGFRL1等参与卵巢癌的耐药形成。miR.210的异常表达对卵巢癌化疗耐药仅有中度诊断意义。